月季花药培养知识点整理
课件5：3.2 月季的花药培养
3.接种和培养
(1)在 无菌条件下,从灭菌后的花蕾中取花药接种到培 养基上,在25 ℃下培养,此时不需要光照。此时可进行 转移培养,即将愈伤组织及时转移到分化培养基上,以便 进一步分化出再生植株。
(2)一般经过20~30 d培养后,会发现花药开裂,长出愈伤组 织或者胚状体。
(3)在花药培养中,特别是通过愈伤组织形成的花粉植株, 常常会出现 染色体倍性 的变化,主要是营养细胞的 细胞核和生殖细胞的细胞核融合造成的,因此还需要对 培养出来的植株作进一步的鉴定和筛选。
④ 单核居中 期和单核靠边期两个时期。
4.双核期的双核包括花粉管细胞核和⑤ 生殖细胞核,
进而形成两个细胞,一个是营养细胞,一个是 ⑥生殖细胞 。 5.花粉粒形成精子还要经过⑦ 一次有丝分裂 过程
。
二、产生花粉植株的两种途径
一种是花粉通过⑧ 胚状体 阶段发育为植株,一种是花 粉在诱导培养基上先形成⑨ 愈伤组织 ,再将其诱导 分化成植株。
【答案】(1)这两条途径取决于培养基中激素的种类及 其浓度配比。(2)影响花药培养的主要因素:材料的选择 和培养基的组成等。(3)①花期:初花期的花蕾营养状态 及生理状态会比较好,比后期的更容易产生花粉植株,能 提高花粉的诱导成功率。一般,月季的花药培养时间选 在五月初到五月中旬,即月季的初花期。②合适的花粉 发育时期:选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功 率的重要因素。一般来说,在单核期,细胞核由中央移向 细胞一侧的时期,花药培养成功率最高。 为了挑选到单 核期的花药,通常选择完全未开放的花蕾。
4.据报道,花粉是一种很好的保健品,可以美容抗衰老,能 够增强体质,增强精神,还可以快速地消除身体疲劳。它 既可以外用也可以内服,是强身健体、美容养颜的佳品
。花粉产自各种植物的花朵。下图表示花粉的形成过 程,据图回答下列问题。
月季的花药培养99173
（3）胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤 组织的细胞排列疏松无规则，是一种高度
液泡化 的薄壁细胞，胚状体与 正常受精卵（或受精发卵） 育形成的胚有类似的结构，即具有胚芽、胚轴和胚根。
（4）无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素， 请说明下列各项需要消毒，还是需要灭菌。
一花粉通过胚状体阶段发育为植株， 二是通过愈伤组织阶段发育为植株
胚状体:结构及其发育过程与种子胚相似，所以把胚状体到丛芽 的过程称为分化，而把从愈伤组织到从芽过程称为再分化。
这两条途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培 养基中激素的种类及其浓度配比
植物组织培养技术与花药培养技术比较：
再分化
脱分化
体细胞或组织
花瓣松动会给材料消毒带来困难: 原因是外界微生物容易侵入到花药中。
2、培养基的组成 （二）其它因素： 植株生长条件、材料低温预处理、
接种密度等
四. 实验操作
1 .材料的选取 2 .材料的消毒 3 .接种和培养 4.鉴定和筛选
1 .材料的选取
材料： 单核期的花药 检测方法： 常用： 醋酸洋红法
焙花青-铬矾法
为什么我们是对花蕾消毒而不是对花药消毒？
用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外 面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状 态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。
3 接种和培养
剥离花药： 去除萼片和花瓣，尽量不损伤花药， 彻底去除花丝
接种花药： 每瓶7～10个
培养花药： 温度：25度 不需要光照 20～30天
成根，但分化出了芽，其原因可能是______________。 培养基中生长素类物质和细胞分裂素类物质用量比值偏低
月季花药培养
4、鉴定和筛选
在花药培养中，尤其是经过愈伤组织形成旳花 粉植株，经常会出现染色体倍性旳变化（主要 原因是营养核和生殖核融合造成旳）
5、植物组织培养技术与花药培养技术旳异同点：
项目
相同点
不同点
植物组织 培养技术
花药培养 技术
• 离体旳植物组 外植体为体细胞，染色体数
织经脱分化形
无需加倍。
成愈伤组织，
③从花蕾来看，应该选择（完全未开放、略微开放、完全盛开） 旳花蕾。 〖思索5〗为何选择合适旳花粉发育期是诱导花药培养成功旳 主要原因？
这是因为并不是任何时期旳花粉都能够经过培养产生愈伤组 织或胚状体，在花粉发育旳过程中，只有某一种时期对离体刺激 敏感。
2、培养基旳构成：
花药培养所采用旳培养基各成份中植物生长调整 剂旳水平和配比起决定作用。 ⑴诱导愈伤组织或胚状体产生旳培养基：广泛使用 2， 4-D、IAA； ⑵诱导分化旳培养基常除去2，4-D而以IBA代之。
3、其他原因：
亲本植株旳生长条件、材料旳低温预处理、接种 密度、培养旳环境条件等对诱导旳成功率都有一定旳 影响。
为何花瓣松动会给材料旳消毒带来困难？
花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材 料旳消毒带来困难。
月季花药培养时旳花粉粒最佳是（ C ） A、四分体时期 B、单核居中期 C、单核靠边期 D、二核或三核花粉粒
4、花旳作用 被子植物旳有性生殖是在花里进行旳，雌蕊 和雄蕊是进行有性生殖旳主要部分
二、被子植物花粉粒旳形成 1、雄蕊旳构造
花丝 雄蕊：
花药：囊状构造，内有诸多花粉粒
2、花药旳构造
花药
药隔：花药中部，由薄壁细胞构成， 内有维管束
花粉粒
花粉囊（4或2） 囊壁
月季的花药培养
月季的花药培养目标导航 1.知道花粉是单倍体的生殖细胞，说出被子植物花粉发育的过程。
2.理解产生花粉植株的两种途径；知道选取适宜的材料和培养基组成是花粉植株诱导成功的关键。
一、月季花药培养的基础知识1．被子植物的花粉发育过程(1)被子植物的花粉是在花药中由花粉母细胞经过____________形成的，是________的生殖细胞。
(2)发育历程：被子植物花粉的发育要经历______________、________和________等阶段。
提醒(1)花粉萌发进行受精作用时，每个花粉粒可释放出两个________，从而完成被子植物的________。
(2)被子植物的花粉发育要经过小孢子四分体时期、单核期、双核期三个阶段，其中单核期又分单核居中期和单核靠边期两个时期，双核期包括花粉管细胞核和生殖细胞核两个核。
(3)被子植物花粉发育过程中的“四分体”是指由一个花粉母细胞经过减数分裂产生的连在一起的4个__________(4个小孢子)；而减数分裂中的“四分体”是指在联会状态下的一对同源染色体，因为含有四条染色单体，所以叫做“四分体”。
2．产生花粉植株的两种途径(1)通过花药培养产生花粉植株的两种途径一种是花粉通过________阶段发育成植株；另一种是花粉在诱导培养基上先形成____________，再将其诱导分化成植株。
⎦⎥⎥⎤花药中的花粉――→脱分化胚状体――→分化丛芽花药中的花粉――→脱分化愈伤组织――→再分化丛芽――→诱导生根―→移栽 通过花药培养产生花粉植株的两种途径并没有绝对的界限，主要取决于培养基中________________________。
(2)单倍体育种的过程①在花药培养的基础上，用____________继续处理单倍体幼苗，染色体加倍，重新恢复为二倍数。
因为它们的二倍数染色体是由单倍数染色体本身加倍而来的，所以都是纯系，不会发生性状分离。
详见下图：②单倍体育种的优点后代都是________，自交产生的后代不会发生性状分离；明显地缩短了________；另外为新品种的培育开辟了新途径。
月季的花药培养
有区别。单倍体性细胞发育成的单倍体植株表现 为高度不育，植物的体细胞克隆的植株可育。
(三)影响花药培养的因素 P39
1.影响花粉植株成功与否和成功率的主要因素：
和
等。
材料的选择 培养基的组成
2.材料的选择:
将细胞核染成 红 色和 蓝黑 色。
2.在使用焙花青－铬钒溶液时，需要首先将花药用
处理20min。该试剂的配制方法
是卡将诺氏固定液
按体积比为
的比例
混合无均水匀酒。精和冰醋酸
3:1
（二）材料的消毒
花蕾 (70% 酒精 )大约
30s (无菌吸水纸 )吸干水 分
( 无菌水 )冲 洗
(无菌水 )清 洗 (质量分数为 )2～ 40m.1i%n的氯化汞
愈伤组织必须从培养基中获得( )(
)和
小分子有机物等营养物质。 (２)要促进花粉细胞的分裂分化,培养基中应有( 生长素 )
(细胞分裂素)两种激素。愈伤组织分化是指愈伤组织
形成芽和根，由芽发育成叶茎。这一过程必须给予
光照，其原因是( )利用光能制造有机物促进 试管苗生长发育。叶
(３)试管苗的细胞核中有( )条脱氧核苷酸链。
花的结构:
植物的花药培养在育种上有什么意义？
明显缩短育种年 限,为新品种的 培育开辟了新途 径。
花粉粒(1N)
单倍体植株(1N)
二倍体纯合子植株 (2N)
一、基础知识：
花丝
雄蕊
花药：囊状结构,内有很多花粉
P37
（一）被子植物的花粉发育 1.被子植物的花粉是在 花药
中由
花粉母
课件15：3.2 月季的花药培养
一、基础知识
（一）被子植物的花粉发育 花丝
1.雄蕊 花药：囊状结构，内有很多花粉
2.花粉: 由花粉母细胞（小孢子母细胞）历经减数分裂、有丝分裂 而形成，是单倍体的生殖细胞。
3.花粉发育阶段：
小孢子四 分体时期
单核期 双核期
4.被子植物花粉的发育过程
减数分裂
小孢子 母细胞
4个 小孢子
培养基的组成
在1000mL MS 培养基配方中添加
2.4—D
0.4 mg
KL
0.2 mg
IAA
4 mg
调节PH至5.8
亲本生长条件、材料低 温处理、接种密度等
生长旺盛植株花药较易形成花 粉植株；栽培条件的好坏也影 响花粉植株的诱导率。
主要影响因素：材料的选择 培养基的组成
（一）材料的选取
二、实验操作
体细胞胚（胚状体）。 来源：直接由器官产生；由单个细胞产生； 由愈伤组织产生。
特别提醒：
两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及
其浓度配比。
（三）影响花药培养的因素
1.材料的选择
花期：初花期。
花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般月季的花药培养 时间选在五月初到五月中旬，即月季的初花期。
特点：细胞质浓厚
1个小孢子 （单核居中期）
精子 精子
营养 细胞
有丝分裂 生殖 细胞
花粉管 细胞核
生殖 细胞核
有丝分裂
（二）产生花粉植株的两种途径
① 花药中 的花粉
② 花药中
脱分化 脱分化
胚状 体
愈伤
分化 再分化
丛芽
诱导 生根
移 栽
的花粉
月季花药培养知识点整理
一．被子植物花粉发育过程
．被子植物地花粉是在 中由 经过 分裂形成地.所以，花
粉是 地生殖细胞.文档来自于网络搜索．结合教材内容填下列示意图：
[[
.植物体细胞发育而来地胚状体又叫 ，花粉发育而来地胚状体叫 ，
可发育为 植物，要使其成为纯合地正常植株，可用 处理发育中
地幼苗.文档来自于网络搜索三．影响花药培养地因素
．影响花粉植株成功与否和成功率地主要因素： 和 等.
文档来自于网络搜索．材料地选择：
①从花药来看，应当选择（初花期、盛花期、晚花期）地花药；
②从花粉来看，应当选择（四分体期、单核期、双核期、萌发期）地花粉，因为单核期以
前地花药 ，选择单核期以后地花药接种， .
文档来自于网络搜索③从花蕾来看，应当选择（完全未开放、略微开放、完全盛开）地花蕾.
四．实验设计
.材料地选择
选择花药时一般通过 确定花粉发育时期，此时需要对花粉细胞核进行染色，最常用
地染色剂是 和 ，它们分别可以将细胞核染成 色和 色.文档来自于网络搜索.材料地消毒
量不损伤花药，否则 还要彻底除去花丝，因
为 .文档来自于网络搜索（）接种花药：剥取地花药要立刻接种到 上.每个培养瓶接种 个花药.
文档来自于网络搜索（）培养：花药培养利用地培养基是 培养基，为 ，温度为 ℃，幼苗形成
之前（需要、不需要）光照.文档来自于网络搜索（）培养－后，花药开裂，长出 或释放出 .前者还要转移到 上进行分化培养成再生植株；后者要尽快 并转移到新地培养基上.文档来自于网络搜
索
（）通过愈伤组织形成地植株，常常会出现地变化，因而需要鉴定和筛选.。
月季的花药培养li
4个小孢子
减数分裂
有丝分裂
4个花粉管细胞核
4个生殖细胞核
有丝分裂
8个精子
1花粉母细胞
③
②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个花粉管细胞核和两个精子。不是所有植物都形成三核花粉粒
2N
N
N
N
（二）产生花粉植株的两种途径
①
②
移栽
花药中的花粉
2 在剥离花药时，要尽量 （否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底 ，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。
一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。
通过镜检来确定是否处于适宜的发育期。
月季花药培养时的花粉粒最好是（ ） A、四分体时期 B、二核或三核花粉粒 C、单核期
C
（二）材料的消毒
无菌水冲洗3～5次 花药的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态
花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒
无菌水清洗
4
放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2～4分钟 （质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）
P：
×
♂
♀
AABB
aabb
花粉：（配子）
AB
Ab
aB
ab
↓
花的结构
花托
花萼
花瓣
雄蕊
花药
花丝
雌蕊
柱头
花柱
子房
一、基础知识
花丝 花药：囊状结构，内有很多花粉 （一）被子植物的花粉发育 1 雄蕊 2 花粉的概念:由花粉母细胞经过减数分裂形成的单倍体的生殖细胞.
月季花药培养知识点
《月季的花药培养》1．生殖细胞和体细胞一样，在离体条件下，也具有全能性。
2．填写下列月季育种流程图：1．被子植物的花粉是在花药中由花粉母细胞经过减数分裂形成的。
2．3．被子植物的花粉的发育要经历四分体时期，单核期和双核期等阶段。
在正常情况下，一个小孢子母细胞可以产生8个精子；在一枚花药中可以产生很多个花粉。
1．产生花粉植株（单倍体植株）的途径：花粉通过胚状体阶段发育为植株，二是通过愈伤组织阶段发育为植株。
这两条途径取决于培养基中激素的种类及其浓度的配比。
2．填写培育花粉植株的途径图解：3．胚状体的结构及其发育过程与种子胚相似，所以把胚状体到丛芽的过程称为分化，而把从愈伤组织到从芽的过程称为再分化。
1．影响花粉植株的主要因素：材料的选择和培养基的组成等。
2．材料的选择：从花药来看，应当选择初花期的花药；从花粉来看，应当选择单核期的花粉；从花蕾来看，应当选择完全未开放的花蕾。
3．影响花粉诱导成功率的因素还有哪些？植物种类、亲本生长条件、材料的低温处理、接种密度、培养基组成、培养条件等。
【思考】花瓣松动会给材料消毒带来困难，原因是外界微生物容易侵入到花药中。
二、实验操作1．选择花药时一般通过镜检确定花粉发育时期，对花粉细胞核进行染色最常用的染色剂有醋酸洋红溶液和焙花青－铬钒溶液，它们分别可以将细胞核染成红色和蓝黑色。
2．在使用焙花青－铬钒溶液时，需要首先将花药用卡诺氏固定液处理20m in。
该试剂的配制方法是将无水酒精和冰醋酸按体积比为3：1的比例混合均匀。
3．填写下列流程图：1．剥取花药：要在无菌条件下剥取花药，一注意不要损伤花药，原因是受伤部位容易产生愈伤组织；二要彻底除去花丝，原因是花丝不利于愈伤组织或胚状体的形成。
2．接种花药：剥取的花药接种到MS培养基上，每个培养瓶接种7～10个花药。
3培养花药：幼苗形成之前不需要（需要、不需要）光照。
培养20－30d 后，花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。
【高中生物】高中生物知识点：月季的花药培养
【高中生物】高中生物知识点：月季的花药培养月季的花药培养：1.被子植物的花粉发育（1）被子植物的雄蕊通常包含花丝、花药两部分。
花药为囊状结构，内部含有许多花粉。
（2）花粉是一种单倍体生殖细胞。
被子植物的花粉发育经历了小包子四分体期、单核期和双核期。
2、产生划分植株的两种途径：一种是花粉通过胚状体阶段发育为植株，另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。
这两条途径之间没有绝对界限，这主要取决于培养基中激素的类型及其浓度比。
3、影响花药培养的因素：（1）材料选择：一般来说，在单核期（通常是完全未开放的花蕾）和细胞核从细胞中心向一侧移动的阶段，花药成功率最高。
（2）培养基的选择。
（3）此外，亲本的生长条件、材料的低温预处理和接种密度对诱导成功率有一定影响。
4、材料选取方法：醋酸洋红法和焙花青-铬矾法5.步骤：材料的选取→材料的消毒→接种和培养→结果分析与评价知识电话：1、材料的选择要是选择单核期以前的花药接种，质地幼嫩，极易破碎；选择单核期以后的花药接种，花瓣已有些松动，又给材料的消毒带来困难，通常不选择盛开或略微开放的花。
2.选择玫瑰花粉的最佳时期是完全未开放的花蕾。
材料的选择是影响花粉植株培养成功的主要因素之一。
不同植株的诱导成功率和同一植株不同的生理条件是不同的。
3、选择花药时，确定花药发育时期最常用的方法是醋酸洋红法。
某些植物的花粉不易着色需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。
4.材料的消毒过程：花蕾用体积分数为70％的酒精浸泡30s→无菌水冲洗→吸干表面的水分，放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中2～4min→无菌水再冲洗3～5次。
5.接种和培养期间的注意事项在无菌条件下剥离花药时要尽量不损伤花药（否则接种后容易从受伤部位产生愈伤组织），同时还要彻底除去花丝。
因为花丝的存在不利于愈伤组织或胚状体的形成。
3.2月季的花药培养
（二）材料的消毒
选取花蕾
初步消毒
（70%酒精）
无菌水再冲洗
无菌水清洗
彻底消毒
（氯化汞）
（三）接种和培养
1、剥离花药 ① 尽量不损伤花药（否则接种后，容易从受伤
部位产生二倍体的愈伤组织）， ② 彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于
愈伤组织或胚状体的形成。 2、接种花药 3、培养 ①培养条件：25℃，幼小植株形成后才需要光照 ②过程：
先脱分化培养，当花药裂开长出愈伤组织后及 时转移到分化培养基上。
在花药培养中，特别是通过愈伤组织 形成的花粉植株，常常会出现染色体倍性 的变化。
（主要原因是营养核和生殖核融合造成的）
直接由器官产生 由单个细胞产生
由愈伤组织产生
人工种子
又称人造种子、合成种子或无性种子， 就是将组织培养所产生的体细胞胚、不定 芽、顶芽、腋芽或小鳞茎等繁殖体，包裹 在能提供营养的胶囊（人造胚乳）里，再 在外面包上一层具有保护功能和防止机械 损伤的外膜（人造种皮），造成一种类似 种子的结构，能在一定的条件下萌发生长， 形成完整植株。
4个生殖细胞核
有分
8个精子
（二）产生花粉植株的两种途径
①
花药中 的花粉
脱分化
胚状体
分化
丛芽
②
花药中 的花粉
脱分化
再分化
愈伤组织
丛芽
诱导
移栽
生根
体细胞胚（胚状体）： 在组织培养过程中，某些体细胞在
形态上转变为与合子发育成的胚非常相 似的结构，发育过程亦与合子胚类似， 被称为体细胞胚（胚状体）。
胚状体
（三）影响花药培养的因素
1、材料的选择（内因）
高二生物月季的花药培养知识点
高二生物月季的花药培养知识点高二生物月季的花药培养知识点要点1 植物的花药培养的育种意义育种工作者采用花药培养的方法，使花粉粒发育为单倍体植株，再经过人工诱导使染色体数目加倍，重新恢复到正常植株的染色体数目。
这样的植株不仅能够正常生殖，而且每对染色体上的成对的基因都是纯合的，自交产生的后代不会产生性状分离。
单倍体育种不仅缩短了育种周期，也为新品种的培育开辟了新途径。
要点2 被子植物的花粉发育(1)被子植物的雄蕊通常包含花丝、花药两部分。
花药为囊状结构，内部含有许多花粉。
花粉是由花粉母细胞经过减数分裂而形成的。
(2)被子植物花粉的发育要经历四分体时期、单核期和双核期等阶段。
①在四分体时期，4个单倍体细胞连在一起。
②进入单核期时，四分体的4个单倍体细胞彼此分离，形成4个具有单细胞核的花粉粒。
这时的细胞含浓厚的原生质，核位于细胞的中央(单核居中期)。
随着细胞不断长大，细胞核由中央移向细胞一侧(单核靠边期)。
③进入双核期时，靠近细胞一侧的细胞核，分裂成1 个生殖细胞核和1个花粉管细胞核，进而形成两个细胞，一个是营养细胞，一个是生殖细胞。
生殖细胞将再分裂一次，形成两个精子。
要点3 产生花粉植株的两种途径通过花药培养产生花粉植株(即单倍体植株)一般有两种途径：一种是花粉通过胚状体阶段分化发育成为植株;另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，将其诱导再分化成植株。
这两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。
要点4 影响花药培养的因素(1)不同植物的诱导成功率很不相同。
(2)就同一植物来说，亲本植株的生理状况对诱导成功率也有直接影响。
(3)花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。
选择合适的'花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素。
花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。
一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。
为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。
月季的花药培养图文详解
褐变是月季花药培养中常见的问题之一，主要是由于多酚氧化酶的活性引起的。为了防止褐变，可以 在培养基中加入适量的抗氧化剂或抑制剂，如维生素C、柠檬酸等。此外，保持适宜的温度和湿度也 能减少褐变的发生。
05
月季花药培养的应用与前景
在月季育种中的应用
创造新种质
通过花药培养，可以获得单倍体植株，进而通过染色体加倍技术 获得纯合二倍体，为月季育种提供新的种质资源。
克服远缘杂交不亲和性
利用花药培养技术，可以克服不同种、属间杂交的不亲和性，实现 远缘杂交育种。
缩短育种周期
通过花药培养获得单倍体植株后，经染色体加倍可迅速获得纯合品 系，大大缩短了育种周期。
在月季快繁中的应用
快速繁殖
利用花药培养技术，可以在短时间内 获得大量遗传背景一致的植株，实现 月季的快速繁殖。
月季花药培养的原理
月季花药培养是植物组织培养的一种，其原理是利用月季花 药中的花粉粒作为外植体，通过诱导其脱分化形成愈伤组织 ，再经过再分化形成完整植株。
在月季花药培养中，需要选择适宜的培养基和激素配比，以 诱导花粉粒的脱分化和再分化。同时，还需要控制培养条件 ，如温度、光照、湿度等，以保证培养的成功。
月季花药培养的重要性
01
02
03
获得纯合基因型
通过花药培养可以获得纯 合的基因型，为月季育种 提供重要的遗传材料。
加速育种进程
花药培养可以大大缩短育 种周期，提高育种效率。
创制新种质
通过花药培养可以创制新 的种质资源，丰富月季的 基因库，为月季育种提供 更多的选择。
02
月季花药培养的基本原理
植物组织培养概述
植物组织培养是一种利用植物细胞的全能性，通过无菌操作分离植物体的一部分 （如茎尖、根尖、花药、叶片、嫩芽、幼胚等），接种到培养基上，在人工控制 的条件下进行培养，使其长成完整的植株或生产具有经济价值的其他产品的技术 。
月季的花药培养
讨论1：为什么花瓣松动会给材
料的消毒带来困难？ 为什么花瓣松动会给材料
的消毒带来困难？
花瓣松动后，微生物就可
能侵入到花药，给材料的消毒 带来困难。
讨论2：植物组织培养技术与花药培养技术的比较
相同之处是：培养基配制方法、无菌技术及接 种操作等基本相同。 不同之处在于：花药培养的选材非常重要，需 事先摸索时期适宜的花蕾；花药裂开后释放出的 愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基；花药培 养对培养基配方的要求更为严格。这些都使花药 培养的难度大为增加。
无菌水清洗3-5次
0.1％的氯化汞 溶液 2-4 min
（三）接种和培养
消毒后的花蕾，要在无菌条件下除去萼片 和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。
在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则 接种后，容易从受伤部位产生的愈伤组织）， 同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花 药不利于愈伤组织或胚状体的形成。
2、培养基的组成(主要影响因素）
花药培养所采用的培养基各成分中激素的种类和 浓度配比起决定作用。 ⑴诱导愈伤组织或胚状体产生的培养基：广泛使 用2，4-D、IAA和KT； ⑵诱导分化的培养基常除去2，4-D而以IBA或6-BA 等代之。 3、其他因素： 亲本植株的生长条件、材料的低温预处理、接种 密度、培养的环境条件等对诱导的成功率都有一定的 影响。
小孢子母细胞 （2n）
减数分裂
4×2个精子 (n)
有丝分裂
小孢子四分 体时期（n） 单核居中期（n）
4个生殖 细胞（n）
4个营养 细胞（n）
4个生殖细胞 核（n）
有丝分裂
4个花粉管细胞 核（n）
单核靠边期（n）
双核期
㈡产生花粉植株的两种途径
花粉 花粉
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课题2月季花药培养
一．被子植物花粉发育过程
1．被子植物的花粉是在中由经过分裂形成的。
所以，花粉是的生殖细胞。
2．结合教材内容填下列示意图：
[思考1]被子植物的花粉的发育要经历时期，期和期等阶段。
[思考2]正常情况下，一个小孢子母细胞可产生个精子；一枚花药中可产生个花粉。
二．产生花粉植株的两条途径
1．产生花粉植株（即单倍体植株）的两种途径：一是花粉通过阶段发育为植株，二是通过阶段发育为植株。
这两种途径的区别主要取决于培养基中的种类及其的配比。
2．填写培育花粉植株的途径图解：
3．胚状体的结构及其发育过程与种子相似，所以把胚状体到从芽的过程称为，而把从愈伤组织到从芽的过程称为。
4.植物体细胞发育而来的胚状体又叫，花粉发育而来的胚状体
叫，可发育为植物，要使其成为纯合的正常植株，可用
处理发育中的幼苗。
三．影响花药培养的因素
1．影响花粉植株成功与否和成功率的主要因素：和等。
2．材料的选择：
①从花药来看，应当选择（初花期、盛花期、晚花期）的花药；
②从花粉来看，应当选择（四分体期、单核期、双核期、萌发期）的花粉，因为单核期以前的花药，选择单核期以后的花药接种，。
③从花蕾来看，应当选择（完全未开放、略微开放、完全盛开）的花蕾。
四．实验设计
1.材料的选择
选择花药时一般通过确定花粉发育时期，此时需要对花粉细胞核进行染色，最常用的染色剂是和，它们分别可以将细胞核染成色和色。
2.材料的消毒
3.接种和培养
（1）剥取花药：消毒后的花蕾，要在条件下除去花萼、花瓣。
在剥离花药时，要尽量不损伤花药，否则还要彻底除去花丝，因为。
（2）接种花药：剥取的花药要立刻接种到上。
每个培养瓶接种个花药。
（3）培养：花药培养利用的培养基是培养基，pH为，温度为℃，幼苗形成之前（需要、不需要）光照。
（4）培养20－30d后，花药开裂，长出或释放出。
前者还要转移到上进行分化培养成再生植株；后者要尽快并转移到新的培养基上。
（5）通过愈伤组织形成的植株，常常会出现的变化，因而需要鉴定和筛选。