降钙素原测定操作流程
降钙素操作规程
降钙素测定操作规程2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml,不抗凝,置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
也可采集血浆标本,用肝或EDTA抗凝。
2 检验申请单独检验项目申请:降钙素测定(缩写CT);组合项目申请:肿瘤标志物检查。
临床医生根据需要提出检验申请。
2.1..1 标本采集与处理2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足:少于0.3ml的全血标本,或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在60min内将标本离心分离出血浆, 避免溶血。
离心必须达到4000rpm×15min,离心后的血清中不能含有颗粒物或微量纤维蛋白。
2.2.2标本保存时间:室温(15~25℃)下可稳定8h,普通冰箱中(2~8℃)稳定2d,在-20℃最多可保存4周。
避免反复冻融。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,置4~8℃冰箱内保存7d。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动。
3 方法原理降钙素测定采用双位点加心化学发光免疫分析法,其检测原理来如下:第一步:将标本与包被着抗降钙素的超顺磁性磁珠以及降钙素-碱性磷酸酶标记物添加到反应管中,经过孵化,标本中的降钙素和包被在磁珠上的降钙素抗体结合,同时抗降钙素体与样本中同一另降钙素一位点结合。
在反应管内孵化完成后,磁场吸住磁珠,洗去未结合的物质。
第二步:将化学发光物添加到反应管内,发光底物(AMPPD)被碱性磷酸酶所分解,脱去一个磷酸基,生成一个不稳定的中间产物,该中间产物通过分子内电子转移产生间氧苯甲酸甲酯阴离子,处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子从激发态返回基态时,产生化学发光,再通过光电倍增管对反应中所产生的光子数进行测量。
降钙素原SOP
降钙素原SOP降钙素原( PCT )SOP(荧光免疫层析法)一、目的规范实验室人员的操作,以保证临床检验结果的准确性。
二、预期用途适用于体外定量检测人全血、血浆、血清中降钙素原(PCT )的浓度。
三、检验原理本试剂采用免疫荧光双抗体夹心法定量检测人全血、血浆、血清中的降钙素原(PCT );浓度。
将待测样本加入缓冲液中混匀,样本中的降钙素原抗原和缓冲液中的荧光标记降钙素原单克隆抗体结合形成反应复合物。
将混合样本滴加至测试卡的加样孔中,在层析作用下,反应复合物沿着确酸纤维膜向前移动,被固定在硝酸纤维膜检测线上包被的降钙素原单克隆抗体所铺获。
样本中的降钙素原越多,检测线上积聚的复合物越多,荧光抗体信号强度反应了被捕获的降钙素原数量。
经广州万乎生物技术股份有限公司生产的适用仪器,可检测出样本中降钙素原的浓度。
检测仪默认的降钙素原检测结果以ng/mL 为单位。
四、主要组成成分试剂由测试卡、缓冲液、ID芯片和使用说明书组成。
其中:1、测试卡由试纸条、塑料盒组成。
试纸条上的主要成分有:硝酸纤维素膜、吸水纸,PVC板及其他试纸条支持物;硝酸纤维素膜包被有降钙素原单克隆抗体和兔lgG.2、缓冲液含有荧光标记降钙素原单克隆抗体和荧光标记抗免IgG五、储存条件及有效期测试卡和缓冲液4℃~30℃保存,有效期24个月。
测试卡铝箔袋开封后,应在1小时内尽快使用。
生产日期、失效日期:见标签。
六、适用仪器广州万孚生物技术股份有限公司生产的免疫荧光检测仪( FS-112, FS-113)、干式荧光免疫分析仪( FS-205, FS-301).七、样本要求1、全血、血浆、血清样本均可用于测试。
2、全血的收集:采用抗凝管(建议使用EDTA-Na, EDIA-K,商品化真空抗凝管)采血,采血后提匀备用。
样本采集后应尽快进行测试,若采血后不能在2 个小时内测试的,应放在2℃---8℃保存,不得超过2天。
3、血清、血浆的收集:取血后应尽快以200opm的离心速度离心10分钟后分离血清、血浆,以免溶血。
降钙素原的测定及临床意义
研究展望
进一步研究PCT的生物学特性 ,深入了解其在感染性疾病中 的作用机制,为临床诊断和治
疗提供更多依据。
探索更快速、简便、准确的 PCT测定方法,提高检测的灵 敏度和特异性,为临床提供更
好的服务。
开展大规模的临床研究,进一 步验证PCT在感染性疾病诊断、 治疗和预后评估中的价值,为 临床实践提供更可靠的依据。
PCT的测定方法包括放射免 疫分析法、化学发光法和免 疫荧光法等,其中化学发光 法具有较高的灵敏度和特异 性,是临床上常用的方法。
PCT在感染性疾病中升高, 其水平与感染的严重程度呈 正相关,可用于感染性疾病 的早期诊断、病情监测和预 后评估。
PCT还可用于抗生素治疗效 果的评估,对于指导抗生素 使用和缩短疗程具有重要意 义。
降钙素原的测定及临床意义
汇报人: 2024-01-11
目录
• 引言 • 降钙素原的测定方法 • 降钙素原的临床意义 • 降钙素原与其他生物标志物的
比较 • 降钙素原测定的临床应用前景 • 结论
01
引言
目的和背景
降钙素原(PCT)是一种蛋白质,在 感染和炎症反应时水平会升高,对感 染性疾病的诊断和监测具有重要意义 。
优点
灵敏度高、特异性强、操作简便。
缺点
放射性核素对人体和环境存在一定危害,且仪器设备较为 昂贵。
化学发光法
原理
01
利用化学反应产生的光子进行检测,通过测量发光强度对被测
物进行定量分析。
优点
02
灵敏度高、线性范围宽、操作简便。
缺点
03
某些化学发光试剂稳定性较差,且仪器设备成本较高。
电化学发光法
原理
随着医学技术的不断发展,PCT的测 定已成为临床实验室的重要检测项目 之一。
降钙素原(电化学发光法)
降钙素原(电化学发光法)
降钙素原(Procalcitonin,PCT)是一种蛋白质前体,它的水平在体内受到炎症和感染等因素的刺激时会显著增加。
降钙素原常用于临床上作为感染和炎症的生物标志物,用于帮助医生评估感染的严重程度、预测感染的病情发展、指导抗生素治疗以及监测治疗效果等。
电化学发光法(Electrochemiluminescence,ECL)是一种灵敏度高、特异性好、操作简便的生化分析技术,常用于检测血清中的生物标志物。
在临床实验室中,常用的降钙素原检测方法之一就是采用电化学发光法。
具体而言,电化学发光法通过利用电化学反应产生的化学能转化为光能的过程,检测样品中的降钙素原水平。
这种方法具有灵敏度高、检测范围广、操作简便等优点,因此在临床诊断中得到了广泛应用,特别是在感染性疾病的早期诊断和监测中具有重要意义。
降钙素(PCT)定量检测标准操作规程
降钙素(PCT)定量检测标准操作规程降钙素原(PCT)定量测定(量子点免疫荧光层析法) 【检验原理】采用双抗夹心法原理,以两株高特异性、高敏感性PCT 单克隆抗体,其中PCT单克隆抗体固定在结合垫上,为量子点标记抗体,用于检测抗原:PCT单克隆抗体I包被在层析膜上形成检测线(T线),用于捕获抗体。
为监控试纸是否有效,设置控制线(C线),为包被有兔抗IgG抗体。
应用抗原抗体反应和荧光量子点免疫层析技术,检测人血中PCT的含量。
测试时,若样本中含有PCT,PCT首先与结合垫中标记有量子点的PCT单克隆抗体合,然后与硝酸纤维素膜T线处包被的PCT单克隆抗体I结合形成夹心”结构,T线处荧光显色强度与PCT含量呈正比,根据荧光强度定量测定PCT浓度。
原理:PCT与检测板上的捕获抗体和量子点标记抗体的结合产生颜色变化,显色的强度变化与PCT浓度有相关性,测量系统运用光电扫描标记物和P口结合区,获得光电信号,然后对光电信号的强弱进行测量处理,定量地分析出PC浓度。
【样本要求】1.用于人血清、血浆、静脉全血或末梢血样本,其他体波和样本可能得不到准确结果。
2.应在无菌情况下采集静脉血。
检测时,未经枸橼酸钠或肝素抗凝的血样须析出血清,经拘櫞酸钠或肝素抗凝的血样,可选用血浆、静脉全血或末梢血。
建议优先选用人血清检测,不建议使用EDTA作为抗凝剂3.临床血液样本采集后,在室温条件下,须在2小时内完成检测,血清样本于2-8℃保存,可保存2h;静脉全血样本和末梢血样本2-8℃保存,可保存2h;避免反复冻融样本、加热灭活样本; 溶血样本应弃用【拉验方法】在使用此试剂前必须仔细阅读试剂的说明书,需严格按照试剂说明书执行有关操作,否则无法保证可靠的结果。
1、准备检测前将检测卡、样本恢复至室温(15-30℃),并编号,建议将铝箔袋在恢复室温后再拆封,并在一小时内尽量使用,防止检测卡受潮2、质控确认质控二维码卡质控SD芯片与检测卡的批号相匹配,进行质控操作(详见仪器使用说明书)3、加样样本为血清、血浆,吸取100μ血清或血浆样本,垂直滴加至检测卡加样处,开始计时。
降钙素原的检测方法是什么
降钙素原的检测方法是什么降钙素原是蛋白质的一种,当人体受到细菌、病毒的感染的时候会引起降钙素原的升高,这也代表着人体的免疫力下降了以及肾脏功能也会产生衰竭的现象。
当降钙素原过高时可能会使人体有休克的现象,也会使得人体中的器官功能紊乱,产生一些全身性的疾病反应,面对降钙素原,检测是很重要的一个方面,下面就来介绍一下其检测方法。
★检测方法:★1.放射免疫学分析法利用人工合成的多克隆抗体特异地识别和连接合成氨基酸降钙素原。
该方法能检测正常人的血清PCT,可靠敏感度为4pm/mL,检测的是游离PCT、结合型PCT和降钙素基因相关肽前体的混合物,而不能区分上述三种物质。
该法检测耗时长(19~22h),而且有放射性元素的污染使用受到限制。
★2.双抗夹心免疫化学发光法(ILMA)运用双单克隆抗体,其中一个抗体为降钙素抗体,另一个为抗钙素抗体,分别结合到PCT分子的降钙素和抗钙素部位,可排除交叉反应。
其中一个抗体是光标记的,另一个未标记的抗体固定在试管的内壁,反应过程中两个抗体与PCT分子结合而形成三明治复合体,发光部位于反应管的表面。
该法操作简便,特异性强,敏感性高,测定的低限值为0.1ng/mL,2h可以出结果。
★3.胶体金比色法(B.R.A.H.M.SPCT-Q-半定量快速实验)采用胶体金技术,包括胶体金标记的抗抗钙素的单克隆抗体和用作包被的抗降钙素多克隆抗体,当标本(血清或血浆)加人标本孔,金标单克隆抗体与标本中的PCT结合,形成金标记的抗原抗体复合物。
该复合物在反应膜上移动,与固定在膜上的抗降钙素抗体结合形成更大的复合物。
当PCT浓度超过0.5ng/mL,该复合物显示红色,红色的深浅与PCT的浓度成正比,与标准比色板比较即可得出PCT的浓度范围。
结果分为四级:正常<0.5ng/mL;轻度升高>0.5ng/mL;明显升高>2ng/mL;显著升高>10ng/mL。
降钙素原的测定及临床意义
汇报人: 日期:
目录
• 降钙素原测定方法 • 降钙素原的临床意义 • 降钙素原测定的临床应用 • 降钙素原测定的局限性及未来发展 • 临床案例分析
ห้องสมุดไป่ตู้1
降钙素原测定方法
免疫学测定法
01
02
03
放射免疫分析法
利用放射性核素标记抗体 ,检测血清中降钙素原的 浓度。
酶联免疫吸附法
PCT水平的变化与病情严重程度相关,可以作为评估病情严重程度及预后的指标之一。例如,在脓毒症、败血症等严重感染 时,PCT水平会明显升高,提示预后不良;而在轻症感染时,PCT水平通常不升高或仅轻度升高,提示预后较好。
04
降钙素原测定的局限性及未来发 展
局限性
技术限制
降钙素原的测定技术仍存在一些挑战。目前,大部分检测 方法仍需要使用专业的仪器设备和专业的技术人员,这限 制了其在临床的广泛应用。
详细描述
对于重症肺炎患者,降钙素原测定可帮助医生判断病情的严重程度 和感染类型,从而指导抗生素的选择和治疗方案的制定。
参考价值
降钙素原测定对于重症肺炎患者的诊断和治疗具有重要的参考价值 。
案例二
01
总结词
降钙素原测定可反映自身免疫性疾病患者的炎症水平,并指导治疗反应
的评估。
02 03
详细描述
在自身免疫性疾病如类风湿性关节炎、红斑狼疮等患者中,降钙素原测 定可帮助医生了解疾病的活动度和炎症水平,评估治疗效果和调整治疗 方案。
酶促化学发光法
利用酶促反应将降钙素原转化为 具有发光特性的产物,通过发光 强度计算降钙素原浓度。
电化学发光法
直接电化学发光法
利用直接电化学发光技术,将特异性 抗体与降钙素原的结合反应转化为光 信号,通过发光强度计算降钙素原浓 度。
降钙素原SOP
降钙素原( PCT )SOP(荧光免疫层析法)一、目的规范实验室人员的操作,以保证临床检验结果的准确性。
二、预期用途适用于体外定量检测人全血、血浆、血清中降钙素原(PCT )的浓度。
三、检验原理本试剂采用免疫荧光双抗体夹心法定量检测人全血、血浆、血清中的降钙素原(PCT );浓度。
将待测样本加入缓冲液中混匀,样本中的降钙素原抗原和缓冲液中的荧光标记降钙素原单克隆抗体结合形成反应复合物。
将混合样本滴加至测试卡的加样孔中,在层析作用下,反应复合物沿着确酸纤维膜向前移动,被固定在硝酸纤维膜检测线上包被的降钙素原单克隆抗体所铺获。
样本中的降钙素原越多,检测线上积聚的复合物越多,荧光抗体信号强度反应了被捕获的降钙素原数量。
经广州万乎生物技术股份有限公司生产的适用仪器,可检测出样本中降钙素原的浓度。
检测仪默认的降钙素原检测结果以ng/mL 为单位。
四、主要组成成分试剂由测试卡、缓冲液、ID芯片和使用说明书组成。
其中:1、测试卡由试纸条、塑料盒组成。
试纸条上的主要成分有:硝酸纤维素膜、吸水纸,PVC板及其他试纸条支持物;硝酸纤维素膜包被有降钙素原单克隆抗体和兔lgG.2、缓冲液含有荧光标记降钙素原单克隆抗体和荧光标记抗免IgG五、储存条件及有效期测试卡和缓冲液4℃~30℃保存,有效期24个月。
测试卡铝箔袋开封后,应在1小时内尽快使用。
生产日期、失效日期:见标签。
六、适用仪器广州万孚生物技术股份有限公司生产的免疫荧光检测仪( FS-112, FS-113)、干式荧光免疫分析仪( FS-205, FS-301).七、样本要求1、全血、血浆、血清样本均可用于测试。
2、全血的收集:采用抗凝管(建议使用EDTA-Na, EDIA-K,商品化真空抗凝管)采血,采血后提匀备用。
样本采集后应尽快进行测试,若采血后不能在2个小时内测试的,应放在2℃---8℃保存,不得超过2天。
3、血清、血浆的收集:取血后应尽快以200opm的离心速度离心10分钟后分离血清、血浆,以免溶血。
降钙素原作业指导书
检验科免疫室
分析项目作业指导书降钙素原(PCT)第页,共页
版本:A/0
生效日期:2008-02-01 46
<2 ng/mL 88 18 106
≥2 ng/mL 7 99 106
共计95 117 212
根据以上数据,临床敏感性为85%,临床特异性为93%,阳性预期值为93%,阴性预期值为82%。
临床分类
Elecsy
BRAHMS PCT
SIRS 脓毒血症共计
<2 ng/mL 88 55 143
≥2 ng/mL 7 16 23
共计95 71 166
根据以上数据,临床敏感性为23%,临床特异性为93%,阳性预期值为70%,阴性预期值为62%。
9.分析性能
检测范围:0.02-100 ng/mL
精密度
根据NCCLS(全国临床实验室规范化操作委员会)制订的改良试验计划(EP5-A),应用Elecsys试剂盒、人血液标本和质控液验证ElecsysTOTAL P1NP试剂盒检测重复性。
每日测6 次共10 日(n=60);在E170 分析仪上的组间精密度(n=21),得结果如下:
10.干扰因素
检测结果不受黄疸(胆红素<428μmol/L或<25 mg/dl), 溶血(血红蛋白<0.559mmol/L或< .900g/dl), 脂血(脂肪乳剂< 1500mg/dl)和生物素<123nmol/L或<30ng/ml的影响。
回收率标准:回收率在初始值的±15%之内。
对于接受高剂量生物素治疗的患者(> 5mg/天),必须在末次生物素治疗8小时后采集样本。
浓度达150IU/ml的类风湿。
降钙素的测定原理
降钙素的测定原理
降钙素(calcitonin)是一种由甲状腺C细胞分泌的多肽激素,它对骨骼中的钙和磷代谢有调节作用。
降钙素的测定原理主要是通过测量降钙素的浓度来评估体内降钙素的水平。
测定降钙素的常用方法是免疫测定法,主要有放射免疫分析法(RIA)、酶联免疫分析法(ELISA)等。
典型的测定原理如下:
1. 免疫反应:首先,一定量的抗降钙素抗体被固定在试验板上。
然后,待测样品与标记有酶的降钙素结合,形成抗原-抗体复合物。
2. 清洗:通过多次洗涤,去除未结合的物质。
3. 反应:加入底物(一种可以被酶催化反应的物质),使其与标记物酶结合。
4. 反应停止:加入停止液停止底物的反应,使其转化为可测量的产物。
5. 检测:测量底物的反应产物的光学密度或荧光强度。
根据标准曲线,可以计算出待测样品中降钙素的浓度。
测定降钙素的原理基于特异性抗体与降钙素的结合,从而检测降钙素的含量。
此外,测定中的清洗步骤可以去除未结合的物质,提高测定的准确性和灵敏度。
需要注意的是,降钙素的浓度受很多因素的影响,包括甲状腺C细胞的分泌能力、甲状腺疾病、营养状态、药物使用等。
因此,降钙素的测定结果需要结合具体的临床情况进行综合解读。
128降钙素生物活性测定-中国药品检验标准操作规范2010年版
降钙素生物活性测定1 实验材料用具1.1 天平精度0.01mg 供试品称量用精度1mg 试剂称量用精度0.1g 大鼠称重用1.2 实验用具注射器(1ml,精度0.01ml)、吸管、移液管、带塞玻璃小瓶、带塞小离心管、烧杯、玻璃棒、量筒、容量瓶、脱脂棉、毛细管、记时器、离心机、分光光度计。
1.3 试剂氯化钠、牛血清白蛋白、浓盐酸、醋酸钠、血钙测定试剂盒。
2 溶液配制2.1 溶剂的配制2.1.1 牛血清白蛋白灭活称取牛血清白蛋白0.2g,加水20ml,混匀,置56℃水浴中保温1h,取出放至室温,于-10~-20℃温度下冻存。
2.1.2 上述溶液实验前取出,于36℃±0.5℃水浴中将其融化。
2.1.3 称取2g醋酸钠置200ml容量瓶中,加入适量水使溶解,加入上述融化的牛血清白蛋白溶液,加入浓盐酸约3.5ml,再加水至总量近200ml,用盐酸或氢化钠溶液调节pH值至3.5~4.5,最后加水至200ml。
2.2 标准品溶液2.2.1 取降钙素标准品,放置至室温。
2.2.2 割开安瓿(注意勿使内容物损失)立即用准确定量溶剂将降钙素标准品全部内容物洗出,按标示效价计算使成1.0IU/ml降钙素标准液,亦可精密加入适量溶剂使溶解,混合均匀,精密吸取适量,用溶剂配制成1.0IU/ml的标准品溶液。
2.3 标准品稀释2.3.1 根据动物品系,来源,季节按中国药典附录降钙素生物检定法要求,选择标准品高、低(d S2、d S1)2组剂量及其浓度之比值(r)剂距(r一般为3:1)。
2.3.2 计算2组剂量稀释液浓度及大鼠皮下注射所需总毫升数。
2.3.3 一般高浓度稀释液可配成每毫升中含0.1IU(随季节、动物品系和来源不同),低浓度稀释液可配成每毫升中含0.033IU,高、低两浓度比值r=3:1,给药量按100g体重计算,腹部皮下注射0.5ml/100g。
高浓度稀释液d S2=0.1IU/ml×0.5ml/100g鼠×5.鼠/组=0.25IU/组,即0.1IU/ml高浓度稀释液2.5ml(按大鼠体重100g计算)低浓度稀释液d S1=0.033IU/ml×0.5ml/100g鼠×5.鼠/组=0.0825IU/组,即0.033IU/ml高浓度稀释液2.5ml(按大鼠体重100g计算)2.3.4 精密量取1.0IU/ml标准品溶液稀适量,置50ml烧杯中,加入溶剂释液成标准品d S2稀释液(如0.1IU/ml)。
降钙素原的测定及临床意义
降钙素原的测定及临床意 义
contents
目录
• 引言 • 降钙素原的生物特性 • 降钙素原的测定方法 • 降钙素原水平与临床疾病 • 降钙素原测定的临床意义 • 研究展望与局限性
01
引言
目的和背景
降钙素原(PCT)是一种无激素活性 的糖蛋白,是降钙素(CT)的前体。
PCT在体内由甲状腺C细胞分泌,其 水平受到炎性因子、细菌内毒素等影 响。
基因检测法
聚合酶链式反应(PCR)
通过特异性引物扩增抗原基因片段,并对扩增产物进行检测,从而测定样品中抗 原的含量。
基因芯片法
将抗原基因探针固定在芯片上,与样品中的特异性抗体进行杂交反应,通过检测 杂交信号的强度,测定样品中抗原的含量。
其他测定方法
1 2
细胞学检测法
通过观察细胞病变或细胞增殖程度等生物学指 标,间接判断抗原的存在与否。
通过动态监测PCT水平,可以评估抗生素的治疗效果。如果在使用抗生素后PCT水平持续下降,说明治疗有效;如果PCT水平 不降反升,提示需要调整治疗方案。
06
研究展望与局限性
研究展望
检测技术
降钙素原的检测技术仍在不断发 展,未来可能将出现更加灵敏、 特异性和便捷的检测方法。
临床应用
降钙素原的测定在临床应用上仍 有很大的拓展空间,特别是在感 染性疾病、肿瘤、内分泌和心血 管等领域。
降钙素原(PCT)是一种敏感的感染指标,对 于感染性疾病的诊断具有重要意义。
在细菌感染中,PCT水平明显升高,而在病毒 感染中则无明显变化,这有助于区分病毒感染 和细菌感染。
通过动态监测PCT水平,可以帮助判断感染的 严重程度及变化趋势,为早期诊断和及时治疗 提供指导。
甲状腺降钙素检测操作规程
甲状腺降钙素检测操作规程甲状腺降钙素检测操作规程一、实验室前期准备工作1. 仪器准备:确保甲状腺降钙素检测所需的仪器设备处于良好的工作状态,包括酶标仪、洗板机等。
2. 试剂准备:准备好所需的试剂,包括甲状腺降钙素试剂、稀释液、酶标板涂板、洗涤缓冲液等。
3. 样品准备:收集待检测样品,如血清、尿液等,并按照规定的方法处理好,将其分装到标有编号的离心管中,并进行冷冻保存。
4. 所需文献准备:阅读相关的文献资料,了解甲状腺降钙素检测的原理和步骤,以便在实验过程中能进行正确操作。
二、甲状腺降钙素检测操作步骤1. 样品稀释:根据实验要求,将收集到的待检测样品进行适当的稀释,以便能得到合适浓度的样品。
2. 样品处理:取稀释后的样品,按照实验要求进行处理,如加入酶标试剂和稀释液等,并根据指定的时间和温度进行反应。
3. 洗板:使用洗板机对酶标板进行洗涤,以去除未反应的物质,保证检测准确性。
4. 标准曲线绘制:使用已知浓度的标准品,按照要求进行稀释,并将其加入酶标板相应的孔中,然后使用酶标仪测定吸光度。
5. 数据处理:根据吸光度测定结果,使用标准曲线对待检测样品的浓度进行计算。
6. 结果分析:根据计算结果,对待检测样品的甲状腺降钙素水平进行评估,与正常范围进行比较,给出分析结果。
7. 数据记录和报告:将实验结果记录在实验记录表中,并根据要求进行结果报告。
三、实验室安全注意事项1. 遵循实验室的安全规范,佩戴实验服、手套和防护眼镜等个人防护装备。
2. 注意试剂的保存和使用,避免因试剂质量问题对实验结果造成干扰。
3. 在操作过程中,避免发生样品交叉污染,可使用一次性试剂盒和试剂枪等。
4. 严格遵守实验操作方法,保持操作环境的清洁,避免实验误差。
5. 在进行实验操作时,严禁实验室内食物和饮料的摄入。
6. 实验结束后,及时清洗和消毒实验台和仪器设备,并将实验废弃物妥善处理。
以上即为甲状腺降钙素检测的操作规程,希望对您有所帮助。
降钙素原检测作业指导书
Elecsys 检测池洗液(CleanCell M),货号04880293190
Elecsys PC/CC杯,货号03023141001
Elecsys 清洗液(ProbeWash M),货号03005712190
Elecsys 反应杯/加针头/废物袋(CUP/TIP),货号12102137001
2.标本要求
血清:用标准试管或内有分离胶的试管收集。
血浆:用肝素锂和EDTA-K3。
样品最多可以冻融5次没有副作用。在15–25°C可保存8小时;在-20°C可保存3个月34。在使用原始试管处理标本时,应遵循试管生产商所提供的指导。如标本中有沉淀出现,必须先作离心处理再进行分析。已经加热失活的标本无法分析。使用叠氮化物作为稳定剂的标本或质控液无法分析。检测前,请确保患者标本、校准液及质控液放置在20–25°C的环境中。由于蒸发因素的影响,标本、校准液及质控液在放入分析仪后请在2小时内完成测定。
1.分析原理
双抗体夹心法,总检测时间:18分钟
1)第一次孵育:30μl样本、生物素化的单克隆PCT抗体以及钌复合物标记a的单克隆PCT抗体一起孵育,形成抗原抗体夹心复合物。
2)第二次孵育:添加包被链霉素的磁珠微粒进行孵育,复合体与磁珠通过生物素和链霉素的作用结合。
3)将反应液吸入测量池中,通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电压,使复合体化学发光,并通过光电倍增器测量发光强度。Elecsys软件自动通过校准曲线计算得到检测结果。
7.计算方法
分析仪自动计算得出每份标本的测定浓度(单位g/mL)。
8.参考范围
降钙素原(PCT)标准操作流程
VIDAS BRAHMS PCT“降钙素原”操作流程一、基本参数检测原理:夹心法+全自动荧光定量检测样本要求:血清或血浆(肝素抗凝)检测范围:0.05-200 ng/ml检测时间:20分钟曲线校正时间:28天二、操作流程1.打开试剂盒,取出PCT MLE卡进行标准曲线条码扫描①仪器操作屏幕,按Master Lot Menu②放入MLE卡(A、B仓均可)③按Read Master Lot,再按MLE卡实际放入的检测仓(A或B仓),仪器自动扫描检测④扫描完成后,仪器自动打印报告单2.标准曲线再校正①从试剂盒取出校正液S1、S2,质控液C1、C2,分别准确加入2ml蒸馏水或去离子水,加盖静置5-10分钟,再混匀备用。
②仪器操作屏幕,按Status Screen选项,选择检测仓位A或B③输入位置1,依次按Assay →Select Assay→选择PCT④,输入号码1(即S1),回车(自动转入下一位置);同样选择按输入号码1(即S1),回车⑤按照④的操作方法,输入S2两次;再按,同上输入C1、C2各一次。
校正及质控总共6条测试,依次为S1、S1、S2、S2、C1、C2。
⑥完成所有输入,请按退出键退出,检查输入是否正确。
⑦在相对应的仓位放入所需试剂、SPR管,并依次在1-6号位加入标准液、质控液⑧按start,仪器开始自动检测。
完成后自动打印报告单,并与读取MLE卡后打印单上信息进行核对,S1、S2、C1、C2是否在规定范围内,如在范围内即可开始病人标本检测⑨已稀释校正液、质控液保存:写明稀释日期并置于冰箱冷冻室(0 ~ -20℃),下次使用时再复溶,可反复冻溶5次3. 病人标本测定(常规操作)①仪器屏幕操作,按Status Screen选项,选择检测仓位A或B②输入位置1,依次按Assay →Select Assay→选择PCT③按Sample ID,输入标本号(此步可省略),然后回车自动转入下一位置④重覆步骤3,直至所有样本已输入⑤按退出键,检查输入是否正确,然后放入试剂即SPR管,并依次加入样本⑥按start,仪器开始自动检测,20分钟检测完成后自动打印报告单⑦取出检测完成的试剂条及SPR管,弃于“生物危害垃圾箱”4.病人标本快速测定①放入试条和SPR,加入病人血清或肝素抗凝血浆②操作屏幕按START SECTION③按A or B or A11,仪器自动开始检测,完成后自动打印报告单④取出检测完成的试剂条及SPR管,弃于“生物危害垃圾箱”,再进行其他标本的检测。
降钙素原的检测方法是什么
降钙素原的检测方法是什么降钙素原是蛋白质的一种,当人体受到细菌、病毒的感染的时候会引起降钙素原的升高,这也代表着人体的免疫力下降了以及肾脏功能也会产生衰竭的现象。
当降钙素原过高时可能会使人体有休克的现象,也会使得人体中的器官功能紊乱,产生一些全身性的疾病反应,面对降钙素原,检测是很重要的一个方面,下面就来介绍一下其检测方法。
★检测方法:★1.放射免疫学分析法利用人工合成的多克隆抗体特异地识别和连接合成氨基酸降钙素原。
该方法能检测正常人的血清PCT,可靠敏感度为4pm/mL,检测的是游离PCT、结合型PCT和降钙素基因相关肽前体的混合物,而不能区分上述三种物质。
该法检测耗时长(19~22h),而且有放射性元素的污染使用受到限制。
★2.双抗夹心免疫化学发光法(ILMA)运用双单克隆抗体,其中一个抗体为降钙素抗体,另一个为抗钙素抗体,分别结合到PCT分子的降钙素和抗钙素部位,可排除交叉反应。
其中一个抗体是光标记的,另一个未标记的抗体固定在试管的内壁,反应过程中两个抗体与PCT分子结合而形成三明治复合体,发光部位于反应管的表面。
该法操作简便,特异性强,敏感性高,测定的低限值为0.1ng/mL,2h可以出结果。
★3.胶体金比色法(B.R.A.H.M.SPCT-Q-半定量快速实验)采用胶体金技术,包括胶体金标记的抗抗钙素的单克隆抗体和用作包被的抗降钙素多克隆抗体,当标本(血清或血浆)加人标本孔,金标单克隆抗体与标本中的PCT结合,形成金标记的抗原抗体复合物。
该复合物在反应膜上移动,与固定在膜上的抗降钙素抗体结合形成更大的复合物。
当PCT浓度超过0.5ng/mL,该复合物显示红色,红色的深浅与PCT的浓度成正比,与标准比色板比较即可得出PCT的浓度范围。
结果分为四级:正常<0.5ng/mL;轻度升高>0.5ng/mL;明显升高>2ng/mL;显著升高>10ng/mL。
降钙素原检测SOP
1 目的依据标准化的降钙素原检测操作程序。
保证试验结果的准确性准确性,重复性,可比性。
2 适用范围实验室3 原理本试剂盒采用双抗体夹心法测定标本中人降钙素原(PCT)水平。
用纯化的人降钙素原(PCT)抗体包被反应板,加入待测标本孵育后,再加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的PCT抗体。
如果标本中含有PCT,则能与包被在反应板上的PCT抗体结合,并与HRP 标记的PCT抗体形成复合物,经洗涤后加入TMB底物,TMB在HRP酶的催化下产生蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。
酶标仪在450nm波长下测定的吸光度(OD值)与标本中PCT含量呈线性关系。
通过绘制标准曲线可以计算出标本中PCT的含量。
4 标本采集要求a)受检者的准备检查对象生活饮食处于日常状态。
b)采集部位静脉采血c)抗凝剂惰性分离胶促凝d)要求①样本量1—2ml。
②样本应在采集后2小时内处理。
③溶血样本不能使用。
5 试剂:6 定标和质控6.1定标6.1.1每开启一批新的试剂,需在输入批数据进行校准,之后每隔28天需再进行一次校准,试剂盒中提供有两种校准品用来进行校准。
该操作能提供仪器特定的校准曲线,并能弥补试剂盒在有效期内分析信号可能出现的微小差异。
校准品,S1及S2,在同一次运行中必须重复测定两次(见用户手册)。
校准值必须在设定的RFV(“相对荧光度值”)范围内。
如果不在该范围内,使用S1和S2重新校准。
6. 2步骤6. 2.1.从冷藏处取出需要的试剂。
6.2.2.每份待测的样品、对照品或校准品都分别使用一条“PCT”SPR。
确保取出需要的SPR后重新仔细密封储物袋.6.2.3.仪器通过代码“PCT”来确认该项测试。
校准品需分别为“S1”和“S2”并且需要重复测定两次。
如果对照品需要检测,则将其分别标为“C1”和“C2”并各测定一次。
6.2.4.采用漩涡振荡混合器混合校准品和/或对照品。
6.2.5.该项测试,校准品、对照品和样品的上样量均为200µL。
降钙素原测定操作流程
降钙素原测定操作流程降钙素原测定操作流程首先接到医生的医嘱后,要两人核对;核对的内容有:电子医嘱本、采血执行单、检验的项目是否一致;两人核对:一床、张红梅、住院号:432056、采血项目:降钙素原然后评估病历内容:患者的床号、姓名、年龄、性别。
评估病历---- 朱:耳鼻喉科一床张红梅住院号:432056 入院时间:2010.07.28 入院诊断:慢性扁桃体炎患者昨天入院,各项化验以回报,血糖7.23 遵医嘱复查血糖评估患者:先向患者进行自我介绍、对患者进行反核对,并解释静脉抽血的目的;评估患者的意识状态,自理能力、合作程度,并询问是否进食;评估患者采血局部皮肤组织情况和血管情况。
评估患者----朱:一床吗,您好!请问您叫什么?张:李晓梅我是您的责任护士,我叫朱丽娜朱:昨天您晚上休息的好吗?李:恩休息的很好,这里很安静。
朱:恩,好的。
您的各项化验已经汇报,血糖稍微有点高,遵医嘱给您复查一下好吗,所以我们要抽个血。
朱:您别紧张,抽血的时候稍微有点疼,您别躲,以免一次穿刺不成功。
朱:来我看一下(拿起病人前臂,用手捋一下)。
咱们抽这里吧,好吗?朱:您早晨没有吃饭喝水吧?朱:那好,您稍等一下我去准备用物,稍后给您抽血。
患者精神好、神志清楚、可与我很好的配合回到治疗室护士按要求着装六部洗手法洗手并擦干,戴口罩治疗室光线明亮、宽敞、清洁;操作台整洁准备用物清洁的治疗盘一个、安尔典一瓶、据采血量选择合适的注射器一个、根据项目选择适合的采血管一只、根采血器一个、清洁消毒后的止血带一根、棉签若干包、一次性垫巾、试管架一个、采血执行单。
清洁的治疗车一台、上置消毒洗手液一瓶、锐器盒一个、擦车用的含氯消毒液毛巾一条、医用垃圾桶一个、止血带浸泡桶、生活垃圾桶一个,两人核对采血执行单及条码、采血管。
检查并放到指定位置快速手消检查有效期至2012.5.5在有效期内可以使用安尔典有效期至2011.5.5 打开时间2010.07.29 8AM 在有效期内可以使用采血针有效期至2011.6.5 封口完好可以使用采血管有效期至2012.5.5 无裂痕封口完好可以使用注射器有效期至2012.5.5 无潮湿破损漏气可以使用棉签有效期至2012.5.5 无漏气可以使用并逐一检查携用物至患者床旁,向患者解释采血的方法、采血的量,并核对患者的姓名、床号,并帮助患者摆好舒适的体位李晓梅您好,我来给您抽血了您躺舒服了,(被子整理一下)协助患者暴露需采血的肢体、选择合适的静脉(朱)肘下垫一次性垫巾(朱)距穿刺点6-10cm处扎止血带,嘱患者握拳选择血管,送止血带(朱)常规皮肤消毒一次,消毒面积:直径为5cm安装针孔采血装置(朱)扎止血带、常规消毒皮肤第二次,直径为5cm左手夹一棉签,嘱患者握拳,再次核对患者床号、姓名(朱)左手绷紧皮肤。
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降钙素原测定操作流程
降钙素原测定操作流程
首先接到医生的医嘱后,要两人核对;
核对的内容有:电子医嘱本、采血执行单、检验的项目是否一致;两人核对:一床、张红梅、住院号:432056、采血项目:降钙素原然后评估病历内容:患者的床号、姓名、年龄、性别。
评估病历---- 朱:耳鼻喉科一床张红梅住院号:432056 入院时间:2010.07.28 入院诊断:慢性扁桃体炎患者昨天入院,各项化验以回报,血糖7.23 遵医嘱复查血糖
评估患者:先向患者进行自我介绍、对患者进行反核对,并解释静脉抽血的目的;评估患者的意识状态,自理能力、合作程度,并询问是否进食;评估患者采血局部皮肤组织情况和血管情况。
评估患者----
朱:一床吗,您好!
请问您叫什么?
张:李晓梅
我是您的责任护士,我叫朱丽娜
朱:昨天您晚上休息的好吗?
李:恩休息的很好,这里很安静。
朱:恩,好的。
您的各项化验已经汇报,血糖稍微有点高,遵医嘱给您复查一下好吗,所以我们要抽个血。
朱:您别紧张,抽血的时候稍微有点疼,您别躲,以免一次穿刺不成功。
朱:来我看一下(拿起病人前臂,用手捋一下)。
咱们抽这里吧,好吗?
朱:您早晨没有吃饭喝水吧?
朱:那好,您稍等一下我去准备用物,稍后给您抽血。
患者精神好、神志清楚、可与我很好的配合
回到治疗室护士按要求着装六部洗手法洗手并擦干,戴口罩
治疗室光线明亮、宽敞、清洁;操作台整洁
准备用物
清洁的治疗盘一个、安尔典一瓶、据采血量选择合适的注射器一个、根据项目选择适合的采血管一只、根采血器一个、清洁消毒后的止血带一根、棉签若干包、一次性垫巾、试管架一个、采血执行单。
清洁的治疗车一台、上置消毒洗手液一瓶、锐器盒一个、擦车用的含氯消毒液毛巾一条、医用垃圾桶一个、止血带浸泡桶、生活垃圾桶一个,两人核对采血执行单及条码、采血管。
检查并放到指定位置
快速手消检查有效期至2012.5.5在有效期内可以使用
安尔典有效期至2011.5.5 打开时间2010.07.29 8AM 在有效期内可
以使用
采血针有效期至2011.6.5 封口完好可以使用
采血管有效期至2012.5.5 无裂痕封口完好可以使用
注射器有效期至2012.5.5 无潮湿破损漏气可以使用
棉签有效期至2012.5.5 无漏气可以使用并逐一检查
携用物至患者床旁,向患者解释采血的方法、采血的量,并核对患者的姓名、床号,并帮助患者摆好舒适的体位
李晓梅您好,我来给您抽血了
您躺舒服了,(被子整理一下)
协助患者暴露需采血的肢体、选择合适的静脉(朱)
肘下垫一次性垫巾(朱)
距穿刺点6-10cm处扎止血带,嘱患者握拳选择血管,送止血带(朱)常规皮肤消毒一次,消毒面积:直径为5cm
安装针孔采血装置(朱)
扎止血带、常规消毒皮肤第二次,直径为5cm
左手夹一棉签,嘱患者握拳,再次核对患者床号、姓名(朱)
左手绷紧皮肤。
右手持针进针,进针的角度为20°(朱)
固定穿刺针、插入采血管,采血至采血量(朱)
松止血带,嘱患者松拳,用棉签按压穿刺点,迅速拔针(朱)
协助患者摆好舒适的体位(朱)
向患者解释采血后的注意事项(朱)
朱:一床李红梅您好已经给您抽完血了您没有不舒服吧?
李:恩没有
您这样坐着可以吗?一会儿躺下来休息会儿吧(整理用物)
我和您说针眼要按压三分钟,不可以环揉以免造成皮下血肿。
今晚您就不要洗澡了,抽血的胳膊不要提过重的物品,晚上还是以清淡可口的饮食为主。
化验结果将于近日四点回报后,医生会及时的向您告知化验结果。
感谢您的配合。
请您好好休息,呼叫器已经放在您的床边,又不舒服请您及时按下我们会及时看您。
给患者舒适卧位
进行手部消毒,操作后再次核对患者床号姓名(朱)并在采血执行单上签字
回到治疗室,将血标本及时送检,整理用物,垃圾分类处理,清洁治疗车,洗手,摘口罩,记录。
备注
宽松衣服→第一次扎止血带、手捋一下血管、送止血带→常规消毒5CM →准备采血针→第二次扎止血带→常规消毒→左手小拇指持一棉签→进针→抽血→抽够血量→拔出采血管(对光看一下)→拔针→嘱患者按压棉球,按压针眼,但不要环揉,以免造成皮下血肿→将所有用物按垃圾处理分类放置。