【检验医学】酶法测定血清肌酐
酶法肌酐参考范围
酶法肌酐参考范围
酶法肌酐参考范围是指在正常生理状态下，人体内肌肉代谢产生的肌酐浓度的正常范围。
肌酐是一种由肌肉代谢产生的代谢产物，主要通过肾脏排泄出体外。
因此，肌酐水平可以反映肾脏功能的好坏。
酶法肌酐参考范围通常是在临床实验室中进行测定的。
常用的测定方法是酶法测定法。
该方法是利用肌酐酶催化肌酐与ATP反应生成肌酸和ADP，同时释放出一定量的磷酸根离子。
通过测定磷酸根离子的含量，可以计算出肌酐的浓度。
在成年人中，男性的肌酐参考范围通常为0.6-1.2 mg/dL，女性的肌酐参考范围通常为0.5-1.1 mg/dL。
这些参考范围可能会因不同的实验室、不同的测定方法和不同的年龄段而有所不同。
此外，肌酐水平还受到肌肉量、肾脏功能、饮食、药物等因素的影响。
当肌酐水平高于正常范围时，可能表明肾脏功能受损。
这可能是由于肾脏疾病、肌肉疾病、脱水、药物等因素引起的。
如果肌酐水平持续升高，可能需要进一步的检查和治疗。
总之，酶法肌酐参考范围是临床实验室中常用的指标之一，可以反映
肾脏功能的好坏。
了解肌酐参考范围的意义和影响因素，有助于更好地理解肾脏疾病的诊断和治疗。
肌氨酸氧化酶法检测血清中肌酐含量的方法学评价
肌氨酸氧化酶法检测血清中肌酐含量的方法学评价关键词：肌酐；酶学测定；苦味酸法；血清［摘要］目的：评价肌氨酸氧化酶法(简称酶法)检测血清中肌酐含量的准确度、特异性和精确度。
方法：在设制好参数的前提下，取样本，于日立7170全自动生化分析仪上，进行重复、回收、干扰等一系列试验，同时用苦味酸法(Jaffe 法)进行相同实验，对比其结果。
结果：酶法测定肌酐的批内变异系数(CV)为0.67%，批间CV为0.83%，线性范围0 μmol/L～8 840 μmol/L，胆红素(≥165.5 μmol/L)和溶血(Hb<1 g/L )干扰接近零，回收率为101.7%。
准确度、精确度和特异性均较Jaffe法高。
结论:酶法抗黄疸干扰力强，操作简单、准确、重复性好，可作为常规测定方法。
［关键词］肌酐；酶学测定；苦味酸法；血清To Evaluate the Enzymatic Method for Assaying Creatinine in Serum Abstract：Objective To evaluate the precise、accurate and specific of enzymatic method for assaying creatinine in serum. Methods Both Enzymatic method and Jaffe’s method were used in HITACHI7170A automatic analyzr. After the pare meter of it was build them compared those results. Results The method affords a simple. Rapid and sensitive assay with good precision， extended linearity much better in clinical needs. Conclusion The method is easily automated and is suitable for routine work in clinical laboratories.Key words:Creatinine;Enzymatic assay;Jaffe’s assay;Serum肌酐是肌酸代谢的最终产物，它是由磷酸肌酸通过脱磷酸基并闭合成环而形成的内脱水物。
肌酐测定标准操作程序 (肌氨酸氧化酶法)
肌酐测定标准操作程序1. 摘要肌酐试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清或尿液中肌酐的含量。
2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清尿液中肌酐的浓度。
3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定CREA 浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的肌酐（CREA ）试剂盒采用的是肌氨酸氧化酶法。
5. 原理上海科华生物工程股份有限公司的肌酐 (肌氨酸氧化酶法)试剂盒的测定原理如下：O H N N O H O H HCHO O O H O H O H 2222222224---42+−−−→−-+-+++−−−−→−+++−−−−→−+−−−−→−+醌亚胺间甲苯胺磺丙基乙基氨基安替比林甘氨酸肌氨酸尿素肌氨酸肌酸肌酸肌酐过氧化物酶肌氨酸氧化酶肌酸脒基水解酶肌酐氨基水解酶 肌酐在肌酐氨基水解酶的作用下水解成肌酸，肌酸在肌酸脒基水解酶的作用下生成肌氨酸和尿素，其中产物肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下生成甘氨酸、过氧化氢和甲醛。
最后过氧化氢在过氧化物酶的催化下与色原底物4-氨基安替比林和N-乙基-N-磺丙基-间甲苯胺反应生成红色化合物醌亚胺.由于醌亚胺在波长546nm 处有最大吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 546nm 处吸光度的变化值与样本中肌酐的含量成正比.6. 仪器日立7600自动生化分析仪7. 试剂7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2 试剂瓶内主要成分：肌酸脒基水解酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶、ESPMT 、肌酐胺基水解酶、4-氨基安替比林7.3试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。
试剂不可冰冻。
7.4试剂准备：试剂为即用式。
8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。
血清肌酐(Crea)测定酶法标准操作程序SOP文件
10.2.3抗坏血酸浓度低于300mg/dl,葡萄糖的浓度低于2000mg/dl,尿胆远的浓度低于40mg/dl时不会干扰试验。
11危急值>352mol/L
12临床意义
在肌代谢中，内源性肌酐来源于肌酸及肌酸磷酸盐，在肾脏功能正常时，肌酐通过肾小球滤过。在急性/慢性肾性疾病的诊断、治疗以及对肾透析的监测时，肌酐的测定很有意义。尿液中的肌酐浓度可以作为一些分解物（白蛋白、－淀粉酶）排泄的参考物。
女性：29-226mg/dl(2550-20000umol/l)
8性能指标
本法线性范围为血液：0.03-30mg/dl；尿液：0.3-400mg/dl，不准确度： ±15%，不精密度CV=2.3%,灵敏度为血液：0.03mg/dl；尿液：0.3mg/dl。
9注意事项
9.1由于敞开口的试剂R1会吸收CO2,致使定标不稳定。一次建议使用试剂罩隔离绝大部分试剂和空气的接触。减少吸收CO2。
12.1肾病初期血肌酐通常不变，只有肾功能严重损伤时，血清肌酐才增加，故对晚期肾病患者临床意义较大。其值增高2.5～5倍，提示尿毒症可能，增高10倍常见于尿毒症。与血尿素氮同时测定，
若二者均增高，示肾严重损害,若尿素氮高而肌酐不高,则常为肾外因素,如胃肠出血,尿路梗阻、高蛋白饮食等。
12.2肾衰晚期和进行性肌萎缩时,其值降低,故宜动态观察,方能对预后作出评估。
C由质控结果决定
4.3质控物
来源：Precinorm (罗氏正常值质控)
Precipath (罗氏病理值质控)
其它适合的质控品
Hale Waihona Puke ABCD医院生化实验室文件编号：
肌酐酶法测定的两点法分析
肌酐酶法测定的两点法分析摘要：目的：肌酐酶酶测定的两点分析。
方法：通过两种试剂进行比较。
反应温度为37℃，波长为500～520 纳米(主)/650 纳米(次)；标准为15毫升；样品也为15 毫升；试剂Ⅰ：200 毫升，孵育时间为300秒；试剂Ⅱ：50 毫升，第一点读数时间为120秒，第二点读数时间为300秒。
结果：酶法具有去除肌酸的干扰能力，有线性范围宽，精度高等特点。
结论：两点法对肌酐酶法测点有良好的作用。
关键字：肌酐酶法两点法对于酶法测定肌酐，目前已报告的有四种方式，其中三种均为紫外测定，一种为比色测定。
然而，在相比之下比色测定在除去肌酸的干扰能力、线性范围、精度等具有更高的优越性；市场上出售的商品试剂盒大多采用此法。
但fossati 原法的反应时间比较长，且要做一血清空白以除去血清中肌酸的干扰，这样不适合进行自动分析。
自动分析的一般反应时间为十分钟，为了除去肌酸的干扰必须采用两步法，反应时间要求在五分钟内达到。
根据实验。
必须将几种工具酶的用量增加到fossati原法的五到十倍。
然而，在实验过程中发现几种工具酶的水解速率均比较缓慢，反应的线性时间比较长；所以，将其改成两点法或是速率法测定，会取得很好的实验结果。
这也体现出两点法的优势。
1原理第一步反应：排除肌酸干扰第二步反应：测定肌酐2材料与方法2.1仪器：自动分析仪HITACHI7170，Beckman Synchron △CX5和Ciba Coring Express Plus。
分光光度计Beckman DU-640。
2.2原料试剂：原料试剂采用的工具酶比较多，如：肌酐酰氨基水解酶，肌酸脒基水解酶，肌氨酸氧化酶，棘根过氧化物酶，抗坏血酸氧化酶，这些工具酶均为Boehringer Mannheim公司产品。
3，5-二氯-2-羟-苯磺酸(DHBA)，4-氨基安替比林(4-AAP)和肌酐，均选用适量的剂量。
2.3应用试剂：试剂Ⅰ：每升磷酸盐缓冲液(150 Mmol/L,pH为7.5)中含CRTase 20 kU,SO 6 kU，POD 1 kU,ASO 1 kU,DHBA 3 Mmol,K4Fe(CN)6 20 Mmol,和4-AAP 4 Mmol。
肌酐酶法测定的两点法分析
肌酐酶法测定的两点法分析摘要：目的：肌酐酶酶测定的两点分析。
方法：通过两种试剂进行比较。
反应温度为37℃，波长为500～520 纳米(主)/650 纳米(次)；标准为15毫升；样品也为15 毫升；试剂Ⅰ：200 毫升，孵育时间为300秒；试剂Ⅱ：50 毫升，第一点读数时间为120秒，第二点读数时间为300秒。
结果：酶法具有去除肌酸的干扰能力，有线性范围宽，精度高等特点。
结论：两点法对肌酐酶法测点有良好的作用。
关键字：肌酐酶法两点法对于酶法测定肌酐，目前已报告的有四种方式，其中三种均为紫外测定，一种为比色测定。
然而，在相比之下比色测定在除去肌酸的干扰能力、线性范围、精度等具有更高的优越性；市场上出售的商品试剂盒大多采用此法。
但fossati 原法的反应时间比较长，且要做一血清空白以除去血清中肌酸的干扰，这样不适合进行自动分析。
自动分析的一般反应时间为十分钟，为了除去肌酸的干扰必须采用两步法，反应时间要求在五分钟内达到。
根据实验。
必须将几种工具酶的用量增加到fossati原法的五到十倍。
然而，在实验过程中发现几种工具酶的水解速率均比较缓慢，反应的线性时间比较长；所以，将其改成两点法或是速率法测定，会取得很好的实验结果。
这也体现出两点法的优势。
1原理第一步反应：排除肌酸干扰第二步反应：测定肌酐2材料与方法2.1仪器：自动分析仪HITACHI7170，Beckman Synchron △CX5和Ciba Coring Express Plus。
分光光度计Beckman DU-640。
2.2原料试剂：原料试剂采用的工具酶比较多，如：肌酐酰氨基水解酶，肌酸脒基水解酶，肌氨酸氧化酶，棘根过氧化物酶，抗坏血酸氧化酶，这些工具酶均为Boehringer Mannheim公司产品。
3，5-二氯-2-羟-苯磺酸(DHBA)，4-氨基安替比林(4-AAP)和肌酐，均选用适量的剂量。
2.3应用试剂：试剂Ⅰ：每升磷酸盐缓冲液(150 Mmol/L,pH为7.5)中含CRTase 20 kU,SO 6 kU，POD 1 kU,ASO 1 kU,DHBA 3 Mmol,K4Fe(CN)6 20 Mmol,和4-AAP 4 Mmol。
肌酐生化方法学
肌酐生化方法学
肌酐（Creatinine）是一种由肌肉代谢产生的废物，通常通过肾脏排出体外。
肌酐生化方法学是用于测定血清或血浆中肌酐浓度的实验方法。
1. 碱性苦味酸法：这是最常用的肌酐测定方法之一。
在碱性条件下，肌酐与苦味酸反应生成红色化合物，通过比色法或分光光度法测定其吸光度，进而计算肌酐浓度。
2. 酶法：利用肌酐酶将肌酐转化为氨和肌酸，然后通过测定氨或肌酸的生成量来计算肌酐浓度。
酶法具有较好的特异性和准确性。
3. 干化学法：使用纸片或试纸等干式试剂，通过颜色变化或比色法来测定肌酐浓度。
这种方法通常用于快速检测，但准确性可能稍低。
4. 高效液相色谱法（HPLC）：这是一种分离和分析化合物的技术，可以用于肌酐的定量测定。
HPLC 法具有高分辨率和准确性，但设备和操作相对复杂。
5. 质谱法：利用质谱仪对肌酐进行分析，通过检测肌酐的特定离子或碎片来确定其浓度。
质谱法具有高灵敏度和准确性，但设备昂贵。
在选择肌酐生化方法时，需要考虑实验要求、设备条件和准确性等因素。
不同方法可能在灵敏度、特异性、操作简便性和成本等方面有所差异，因此应根据具体情况进行选择。
无论使用哪种方法，都应遵循标准操作程序，并进行质量控制以确保结果的准确性和可靠性。
【word】酶法与Jaffe’s速率法测定血清肌酐的方法学评价
酶法与Jaffe’s速率法测定血清肌酐的方法学评价954?国际检验医学杂志2007年1O月第28卷第1O期lntJ1.abMed,Octo~r2007,V o1.28,No.10酶法与JaffeS速率法测定血清肌酐的方法学评价薛邦禄徐维家林韶华【摘要】目的通过对酶法和JaffeS速率法测定血清肌酐的结果进行方法学比较,寻找一种简便,特异,准确的检测肌酐的方法.方法使用酶法(肌氨酸氧化酶法)和JaffeS速率法(Fixed)在0一lympusAU2700全自动生化分析仪上测定血清肌酐,并对测定结果进行方法学评价,包括精密度实验,回收实验,干扰实验,对比实验.结果精密度实验显示,酶法和Jaffes 速率法批内变异系数分别为1.69和2.77,批间变异系数分别为2.37和3.14.对比实验结果显示,两种方法有良好的相关性,且无显着性差异(P)0.05),相关系数r=0.9873.回收试验显示,JaffeS速率法的回收率分别为95.7,102.1和106.8,平均回收率为i01.5;酶法的回收率分别为96.4,97.9和103.4,平均回收率为99.2.干扰试验结果显示,JaffeS速率法特异性不强,容易受到许多非特异性物质的干扰,尤其是临床黄疸患者的血清肌酐测得值偏差较大,而酶法从方法学上克服了肌酐测定中干扰物的影响.溶血及黄疸标本对酶法几乎无干扰,Jaffes速率法出现负干扰.结论酶法在重复性和抗干扰能力方面优于JaffeS速率法,酶法是目前测定血清肌酐的最好方法.【关键词】肌酐;酶法;JaffeS速率法中图分类号:R457.4文献标识码:B文章编号:1673-4130(2007)1O一954一O2肌酐(creatinine)是肌酸代谢的最终产物,血清中肌酐来源于肌肉中的肌酸和磷酸肌酸,由磷酸肌酸通过脱磷酸基并闭合成环而形成的内脱水物.肌酐是肌肉组织代谢产生的废物,通常情况下人体内形成的肌酐量是恒定的.游离肌酐在人体代谢中不能被重复利用,并主要通过肾小球滤过后随尿液排出.肌酐测定方法可分为化学法和酶法两大类.化学法有多种,但大都以Jaffe氏建立的碱性苦味酸法为基础.酶法测定肌酐有4种途径,其中3种为紫外线测定,1种为比色测定,相比之下,比色法具有灵敏度高,线性范围宽,试剂稳定性强等优越性.目前,我国l临床实验室测定血清肌酐主要采用JaffeS速率法和酶法.其中,JaffeS速率法测定血清肌酐易受内源性物质的影响,但由于试剂价格较低,国内仍在使用.酶法是近几年推出的一种新方法,本组对JaffeS速率法和酶法测定血清肌酐进行方法学比较,酶法相比JaffeS速率法具有线性范围宽, 抗干扰能力强,没有试剂毒性等优点,特别适合于自动分析. 资料与方法1.试剂:酶法试剂:肌氨酸氧化酶一PAP肌酐试剂盒,由上海科华东菱诊断用品有限公司提供.Jaffes速率法试剂:试剂盒由伊利康生物技术有限公司提供.2.标准液:上海科华一东菱诊断用品有限公司生产浓度为265mol/L肌酐标准液.伊利康生物技术有限公司生产浓度为442”mol/I肌酐标准液.3.标本:血清标本:来源于大连市中心医院临床患者.血红蛋白液:临床收集正常新鲜EDTA—Kz抗凝血,生理盐水洗涤红细胞,离心,弃上清,加蒸馏水溶血测定血红蛋白含量(配制成0.25,0.50,0.75,1.00g/L).质控血清:由日本Olympus公司提供.4.仪器:OlympusAU2700全自动生化分析仪.作者单位116033大连市中心医院检验科(薛邦禄,徐维家); 116013大连市中山区妇幼保健所(林韶华)经验交流?5.测定参数:(1)酶法:主波546nm,副波700nm,温度37C,双试剂,样本为试剂1:试剂2—4:120:40(td),测光点为9点和27点,终点法(End).(2)JaffeS速率法:主波520 nm,副波660nm,温度37.C,双试剂,样本为试剂1:试剂2—15:120:30(I),测光点为14点和21点,速率法(Fixed).结果1.精密度试验:用酶法和JaffeS速率法对质控血清分别进行批内和批间精密度试验.酶法:批内2O例,批间2O例,平均值分别为103.3~mol/I和105.5~mol/I,CV值分别为1.69%和2.37.JaffeS速率法:批内2O例,批间2O例,平均值分别为l14.7tLmol/L和111.8tLmol/L,CV值分别为2.77和3.14%.2.对比试验:随机收集4O例临床患者血清标本(包括溶血,黄疸,脂血等).在OlympusAU27OO全自动生化分析仪上用酶法和JaffeS速率法分别测定血清肌酐,并计算相关系数, 结果如下:相关系数r一0.9873,查Rs界值表P%0.05,说明此两种方法有相关性.查t值表P>O.05,说明此两种方法无显着差异.3.回收试验:取1m1混合血清(取自临床体检样本),加入一定浓度的肌酐标准液0.05ml(66,133,265tLmol/L),分别进行回收试验.其结果分别为:(1)酶法:96.4,97.9,103.4;(2)JaffeS速率法:95.7,102.1,106.8.平均回收率分别为99.2和101.5.4.干扰试验:等体积的混合血清加入等体积的蒸馏水和血红蛋白液(O.25,0.50,0.75,1.O0g/L).测定结果表明,酶法几乎无干扰;Jaffes速率法,血红蛋白在0.25g/L以上时有明显负干扰.随机选取1O份黄疸血清用两种方法分别测定肌酐,结果显示胆红素对JaffeS速率法有明显的负干扰.讨论肌酐别名肌乙酸内酰胺,是生物体肌肉组织中储能物质肌国际检验医学杂志2007年lO月第28卷第lO期IntJLabMed,October2007,V o1.28,No.10酸(creatine)的代谢终产物.一般来说,机体每20g肌肉,每日代谢产生1mg肌酐,肌酐主要通过尿液排出体外.当人体肾功能低下或衰竭时,血液中便积累了远高于正常浓度的肌酐(15mg/L),尿素(200mg/L)等代谢废物,在疾病终末期,就会产生尿毒症的一系列症状.目前血清肌酐临床检测方法主要有JaffeS速率法和酶法,而国内大多数实验室仍采用JaffeS速率法来测定血清肌酐.经典的Jaffe方法测定血清肌酐的主要缺点是特异性差,反应受许多非特异性”色源”物质(如丙酮酸钠等)的干扰,其误差可达到2O_2].Jocelyn根据Jaffe方法符合一级动力学机制建立的JaffeS速率法测定血清肌酐比经典的Jaffe方法是一大进步.JaffeS速率法在一定程度上改进了Jaffe方法的非特异性,减少了非肌酐色源干扰,并适用于自动生化分析仪. 但由于JaffeS速率法也是一种非特异性反应,易受假肌酐化合物干扰,尽管在测定中采用速率带标准的方法来测定,但测定结果与其他项目相比在准确性方面有一定的差异.同时,碱性苦味酸是一种强腐蚀剂,对全自动生化分析仪有很大的腐蚀性作用.另外,苦味酸色素对比色杯的污染是长期使用全自动生化分析仪的一个主要问题,清洗液效力低,温度不够就不能有效地去除肌酐与碱性苦味酸化合物污染,不仅对测定结果有影响,还大大地缩短了自动分析仪的使用寿命_3].近年来,多采用抗干扰能力较强的”两点法”来测定血清肌酐(亦属于JaffeS速率法),它巧妙地利用真假肌酐二者反应时间差来消除快,慢反应中假肌酐的干扰,使特异性提高,但仍然不能全面地消除非肌酐色素的干扰,尤其是胆红素对血清肌酐测定的负干扰].目前多数学者认为胆红素干扰肌酐测定机制可能为:在955?500~520nrn处胆红素有较强吸收,并且在NaOH的作用下,胆红素转变为620nlTl处有较强吸收的胆绿素而使原吸收减弱,这样就掩饰了肌酐与苦味酸的显色反应,使肌酐测定值偏低.本研究结果显示,JaffeS速率法与酶法相比,其明显劣势表现在抗干扰能力方面,Jaffes速率法血红蛋白在0.25g/L以上时即有明显的负干扰,胆红素也有不同程度的负干扰.酶法从方法学上克服了肌酐测定中干扰物的影响,准确度高,且精密度试验优于JaffeS速率法,对仪器及比色杯无腐蚀性和污染性,与Jaffes速率法相关性良好.两种方法回收试验均符合方法学评价要求,无差异.但酶法试剂价格昂贵,不利于中小型医院开展.总之,JaffeS速率法虽经不断改良,但其抗干扰能力无法与酶法相提并论.酶法测定血清肌酐是目前国内临床比较客观,准确的一种方法,特别适合自动化分析.参考文献[1]朱鸿,孙国华,孙树馨,等.利用酶法检测肌酐的方法学评价[J].大连医科大学,2002,24(1):5051.[2]居漪,曾芝如.酶法和Jaffe速率法测定血清肌酐方法学比较[J]. 上海医学检验杂志,2002,17(1):24—25.[3]金哗,苏建荣.酶法与Jaffe反应速率法测定肌酐的比较及干扰分析[J].首都医科大学,2002,23(4):344—345.[4]韩志钧,黄志锋,卢业成,等主编.临床化学常用项目自动分析法[M].第3版.沈阳:辽宁科技出版社,1995.[5]石凌波,林龙顺.常见肌酐测定方法中存在的干扰[J].中华检验医学杂志,2001,24(2):102104.(收稿日期:2006—1l一04)(上接第953页)下细胞释放的一氧化氮量是很少的,但是有免疫调节,神经传递,血压生理调控和血小板凝集的抑制等生理功能.在病理情况下巨噬细胞和多形核细胞能产生大量的诱导型一氧化氮合酶和超氧化物阴离子自由基,从而合成大量的NO和Hz0z.过量的NO和H0对心血管系统,免疫系统,呼吸系统,神经系统,消化系统等均有损伤作用,引起多器官组织损伤.结果表明,INF-a和IL一6两种促炎细胞因子明显升高,提示炎症反应参与了创伤性休克的发病过程.NO活性升高,提示NO作为活性很强的自由基的氧化还原反应参与了创伤性休克的发展过程,可能是引起大顽固性休克低血压的主要原因.内毒素,细胞因子,NO协同作用,使休克向不可逆转化.综上所述,NO,INF-a,I1一6参与了创伤性休克的发生,发展过程,动态检测外周血NO,TNF-a,IL-6含量对评价创伤性休克的病情,预后和治疗有指导意义.参考文献[1]GiannoudisPV,HildebrandF,PapeHC.Inflammatoryserum markersinpatientswithmultipletrauma.CantheypredictOut—come[J]?JBoneJointSurgBr,2004,86(3):313—323.r2]Schroder0,IaunRA,HeldB,eta1.Associationofinterleukin一10promoterpolymorphismwiththeincidenceofmultipleorgan dysfunctionfollowingmajortrauma:resultsofaprospectivepilot study[J].Shock,2004,21(4):306—310.[3]RussellDH,Barretojc,KlemmK,eta1.Hemorrhagicshockin—creasesgutmacromolecularpermeabilityintherat[J].Shock, 1995,4(1):5O一55.[4]BoneHO,FischerSR,SchenartsPJ,eta1.Continuousinfusion ofpyridoxalatedhemoglobinp0ly0xyethykneconjugateinhyper—dynamicsepticsheep[J].Shock,1998,10(1):69—76.(收稿日期:2007—03—04)。
肌酐测定实验报告
一、实验目的本次实验旨在通过肌酐测定，了解肌酐在人体内的代谢过程，评估肾功能状况，并探讨影响肌酐水平的相关因素。
二、实验原理肌酐是人体肌肉组织代谢过程中产生的一种非蛋白含氮物质，主要由外源性肌酸代谢而来。
正常情况下，肌酐在体内保持相对稳定水平，主要通过肾脏排泄。
因此，肌酐测定可以反映肾脏的滤过功能，是评估肾功能的重要指标。
三、实验材料1. 样本：新鲜尿液、血液2. 试剂：肌酐酶、肌酸酶、肌氨酸氧化酶、尿素、甘氨酸、甲醛等3. 仪器：肌酐测定仪、离心机、水浴箱等四、实验方法1. 血清肌酐测定（1）取血清样本，按照试剂盒说明书进行肌酐酶催化反应，生成肌酸。
（2）加入肌酸酶，将肌酸水解产生肌氨酸和尿素。
（3）肌氨酸在肌氨酸氧化酶作用下氧化生成甘氨酸、甲醛等产物。
（4）通过测定产物浓度，计算血清肌酐含量。
2. 尿肌酐测定（1）取尿液样本，按照试剂盒说明书进行尿肌酐测定。
（2）通过测定尿液中肌酐浓度，评估肾功能状况。
五、实验结果1. 血清肌酐测定结果本次实验血清肌酐浓度为XX μmol/L，与正常值范围XX-XX μmol/L相符。
2. 尿肌酐测定结果本次实验尿肌酐浓度为XX μmol/L，与正常值范围XX-XX μmol/L相符。
六、讨论与分析1. 肌酐测定结果分析本次实验血清肌酐和尿肌酐测定结果均在正常范围内，说明受试者肾功能正常。
2. 影响肌酐水平的相关因素（1）蛋白质摄入：蛋白质摄入过多或过少均可影响肌酐水平。
高蛋白饮食可导致血清肌酐升高，低蛋白饮食则可能导致血清肌酐降低。
（2）肌肉含量：肌肉含量与肌酐生成密切相关。
肌肉含量增加，肌酐生成量也随之增加。
（3）肾功能：肾功能受损会导致肌酐排泄受阻，引起血清肌酐升高。
3. 肌酐测定的临床意义肌酐测定是评估肾功能的重要指标。
通过肌酐测定，可以早期发现肾功能异常，为临床诊断和治疗提供依据。
七、结论本次实验通过肌酐测定，成功评估了受试者的肾功能状况。
实验结果表明，受试者肾功能正常。
肌酐氧化酶法
肌酐氧化酶法（Creatinine Clearance Method）是一种用于测量肾小球滤过率（GFR）的方法，通常用于评估肾脏功能。
该方法基于以下原理：肾小球滤过率是指单位时间内肾小球滤出液中通过的血浆成分的体积。
肌酐是一种由肌肉代谢产生的废物，通过肾脏排泄。
因此，测量尿液中的肌酐浓度可以作为评估肾小球滤过率的指标。
执行肌酐氧化酶法时，需要进行如下步骤：
1.收集尿液样本：收集一个24小时的尿液样本，以获取准确的尿液肌酐浓度。
2.测量血清肌酐浓度：采集血液样本，测量血清中的肌酐浓度。
这可以通过血液化验来完
成。
3.计算肌酐清除率：使用以下公式计算肌酐清除率（Creatinine Clearance）：
肌酐清除率= (尿液中的肌酐浓度×尿液总量) ÷血清中的肌酐浓度
这个结果表示单位时间内肾小球滤过的血浆体积。
肌酐氧化酶法是一种相对简单和常用的方法，但也有一些限制。
例如，它在某些特殊情况下（如儿童、孕妇和重病患者）可能不准确。
此外，肌酐浓度还会受到其他因素（如肌肉量和蛋白质摄入）的影响，因此在解读结果时需要考虑这些因素。
请注意，为了准确评估肾功能和诊断肾疾病，医生通常会综合使用多种检查方法和指标。
因此，在具体场景下，应该根据医生的建议和专业意见来选择和使用适当的方法。
肌酐肌氨氧化酶法
肌酐肌氨氧化酶法
血清肌酐 (Creatinine) 和肌氨氧化酶(Creatine kinase, CK ) 是医院常用的生化
检查指标，分别用来测定肌肉损伤和肾脏功能情况。
通常两者一起被用来诊断和监测肌肉
疾病和肾脏病变。
此外，它们也被用于评估膳食补充剂是否用于维持肌肉或肾脏功能，如
补钙。
血清肌酐测定和肌氨氧化酶法 (CK 法) 都是所谓的" 化学" 检查方法。
它们都是用
单波光度法来测定血液样本中的含量，并与标准浓度对比，以便确定病人的血液及各种肌
肉组织的病变。
血清肌酐测定需要用比色盘。
它测量血清中不同分子量的肌酐，或称作" 化学肌酐"，以及肌酐原子浓度（总肌酐）。
肌酐原子浓度测定是根据血液中的比色反应来测定的。
这
个反应是在比色带的反应槽中由一种无色的物质经受到白光照射出现指定颜色变化而改变的。
肌氨氧化酶法 (CK 法) 是一种通过测量血清中 CK 水平的变化来确定肌肉损伤的方法。
它采用了一个叫做" 滴定" 的技术，使用特殊的液体滴定试剂来测量 CK 水平。
它主
要用于检测各类肌肉病变，如肌肉炎或肌肉对药物或外伤的反应。
血清肌酐测定和肌氨氧化酶法 (CK 法) 都是用现代医院常用的测定肌肉损伤的关键
方法，能够有效的诊断和监测肌肉病变和肾脏病变。
但它们也有一定的局限性，必须由医
生结合实际情况，对检测结果进行准确的判断，以便有效诊断和治疗。
血清肌酐测定
血清肌酐测定肾脏是人体内的重要器官之一，负责排除废物和保持体内平衡。
肌酐是一种由肌肉代谢产生的废物，其浓度在血液中是相对稳定的，因此被广泛用作评估肾功能的指标之一。
血清肌酐测定是一项常见的临床检验，本文将对其进行介绍与解读。
一、血清肌酐的意义血清肌酐是评估肾脏功能的重要指标之一，其测定结果反映了肾小球滤过功能的改变。
正常情况下，肾小球对血液中的肌酐进行滤过，并将其排出体外。
当肾小球滤过功能受损时，肌酐在血液中的浓度会升高，从而提醒医生出现可能的肾功能问题。
二、血清肌酐测定的方法血清肌酐的测定通常通过化学发光或酶促动力学法进行。
其中，化学发光法是一种灵敏度高、特异性好的测定方法。
该方法基于酶促反应原理，通过测量产生的发光信号来计算血清中的肌酐浓度。
三、血清肌酐的参考范围血清肌酐的正常范围在成年人中相对稳定，通常为0.5-1.2毫克/分升。
然而，这个范围可能会因性别、年龄、肌肉量和身体状况等因素而有所不同。
因此，在进行肾功能评估时，医生通常会根据个体情况对正常范围进行细致的调整。
四、血清肌酐的临床应用血清肌酐测定在临床应用中具有广泛的价值。
首先，它可用于发现和监测慢性肾病。
在慢性肾脏疾病的早期阶段，肌酐的增加可能是唯一的迹象，因此及早进行血清肌酐测定能够帮助发现问题并采取相应措施。
其次，血清肌酐也可以用于监测肾脏移植术后的肾功能恢复情况。
此外，血清肌酐还可以评估药物对肾脏的影响、筛查肾功能异常等。
五、血清肌酐的临床意义除了用作评估肾功能外，血清肌酐测定的结果还可以提供其他重要的临床信息。
例如，在急性肾损伤的诊断中，血清肌酐的急剧上升往往是一个敏感的指示器。
此外，血清肌酐的变化也可用于监测肾病治疗效果和调整药物剂量。
六、注意事项在进行血清肌酐测定前，需要注意以下几点。
首先，应将一天中的不同时刻作为参考，因为血清肌酐的浓度可能会有轻微的波动。
其次，应注意个体差异性，例如老年人肌酐的正常浓度可能相对较高。
酶联法测定肌酐实验报告
一、实验目的1. 了解肌酐在人体中的生理作用和临床意义；2. 掌握酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定肌酐的原理和方法；3. 熟悉实验操作步骤，提高实验技能。
二、实验原理肌酐是人体内代谢产物，主要由肌肉组织产生，经肾脏排出。
血液中肌酐浓度可反映肾脏功能。
酶联免疫吸附测定法（ELISA）是一种常用的免疫学检测方法，通过抗原抗体特异性结合，利用酶催化底物产生颜色反应，从而实现对特定抗原或抗体的定量检测。
本实验采用双抗体夹心法测定肌酐。
首先，将纯化的人肌酐抗体包被在微孔板上，制成固相抗体。
然后，向微孔中加入待测样本，肌酐与固相抗体结合。
接着，加入HRP标记的肌酐抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。
经过彻底洗涤后，加入底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅与样本中的肌酐浓度呈正相关。
通过测定吸光度（OD值），利用标准曲线计算样本中肌酐浓度。
三、实验材料1. 试剂：肌酐ELISA试剂盒、TMB底物、洗涤液、盐酸；2. 仪器：酶标仪、微量移液器、微量离心机、加样器、吸管、离心管、移液管、培养箱、磁力搅拌器等；3. 样本：待测血清或血浆。
四、实验步骤1. 标准品制备：根据试剂盒说明书，将标准品稀释成不同浓度，分别加入微孔板中；2. 样本处理：取待测血清或血浆，按照试剂盒说明书进行稀释和加样；3. 抗体加样：向所有微孔中加入一定量的纯化人肌酐抗体；4. 标本孵育：将微孔板放入培养箱中，孵育一段时间；5. 洗涤：将微孔板放入洗涤液中，进行充分洗涤；6. 酶标抗体加样：向所有微孔中加入一定量的HRP标记的肌酐抗体；7. 标本孵育：将微孔板放入培养箱中，孵育一段时间；8. 洗涤：将微孔板放入洗涤液中，进行充分洗涤；9. 底物加样：向所有微孔中加入一定量的TMB底物；10. 酶标反应：将微孔板放入培养箱中，孵育一段时间；11. 终止反应：向所有微孔中加入一定量的盐酸终止反应；12. 测定吸光度：将微孔板放入酶标仪中，测定450nm波长下的吸光度（OD值）；13. 结果计算：根据标准曲线和样本OD值，计算样本中肌酐浓度。
酶法肌酐抗肌酸高的原因
酶法肌酐抗肌酸高的原因
肌酐是一种由肌肉代谢产生的废物，通过肾脏排泄体外。
在健康人群中，肌酐的水平通常稳定，但当肌酐水平升高时，可能提示肾功能异常。
酶法肌酐是一种测量肌酐水平的常用方法，它利用酶反应将肌酐转化为肌酸，并通过测量生成的肌酸的量来确定肌酐的水平。
肌酐抗肌酸高可能有以下几个原因：
1. 肾功能受损：肾脏是肌酐排泄的主要器官，当肾功能受损时，肌酐无法有效地排泄体外，导致肌酐水平升高。
肾功能受损可能由多种原因引起，包括慢性肾病、急性肾损伤等。
2. 肌肉破坏：肌酐主要由肌肉代谢产生，当肌肉受到损伤或分解时，会释放更多的肌酐进入血液循环，导致肌酐水平升高。
这种情况常见于剧烈运动、创伤或肌肉疾病。
3. 药物影响：某些药物可以干扰肌酐的测量，导致肌酐抗肌酸高。
例如，一些非甾体抗炎药、抗生素和造影剂等药物可能干扰肌酐的代谢和排泄，导致误高的肌酐水平。
需要注意的是，肌酐抗肌酸高并不能确定具体原因，进一步的检查和评估通常需要进行，例如肾功能相关指标的测定、尿液分析、影像学检查等，以确定肌酐升高的具体原因。
如果出现肌酐抗肌酸高的情况，建议及时就医并咨询医生进一步评估和处理。
酶法、苦味酸法及干化学法测定血清肌酐的方法学分析
酶 法 、 昧酸 法及 干化 学 法测 定血 清肌 酐 的方 法 学分 析 苦
孔凡 斌
资 料 与 方 法 仪器 ： 湿 化 学 分 析 仪 ： Ｌ Ｍ Ｕ ① ＯＹ ＰＳ
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公 式 方 法 ： 过 仔 细 的 计 算 ， 临 床 使 通 经 用 没 有任 何 不 良反 应 结 果 ： 基 层 医 院 使 液体 疗 法 简便 易行 ， 量 准确 ， 全有 效 。 补 安 关键 词 基 层 医 院 配 制 １２张 液 体 ／ 简 易方 法
ｄ ｉ １ ． ９ ９ ｊ ｉ ｎ １ ０ —６ ４ ． ０ ０ ｏ：０ ３ ６／．ｓ ． ０７ ｓ １ｘ ２ １．
利用酶法检测肌酐的方法学评价
利用酶法检测肌酐的方法学评价朱鸿;孙国华;孙树馨;乔维洲【期刊名称】《大连医科大学学报》【年(卷),期】2002(024)001【摘要】目的: 通过对动力学Jaffe's法和酶法测定血清肌酐的方法学比较,建立实用的肌酐酶法测定方法.方法:肌氨酸氧化酶法(以下简称酶法)测定血清肌酐.结果:重复性实验,酶法和动力学Jaffe's法批内变异系数分别为1.0%和1.39%,批间变异系数分别为1.17%和2.51%.相关性实验结果显示两种方法有良好的相关性,且无显著性差异(P＞0.05),相关系数γ=0.9 940.回收实验、动力学Jaffe's法的回收率分别为113.2%和98.1%,平均回收率为105.7%;酶法的回收率分别为94.0%和97.4%,平均回收率为95.7%.干扰实验结果显示,溶血及黄疸标本对酶法几乎无干扰,动力学Jaffe's法出现负干扰.结论: 酶法在重复性和抗干扰能力方面优于动力学Jaffe's 法.【总页数】2页(P50-51)【作者】朱鸿;孙国华;孙树馨;乔维洲【作者单位】大连医科大学第一临床学院检验科,辽宁,大连,116011;大连医科大学第一临床学院检验科,辽宁,大连,116011;大连医科大学第一临床学院检验科,辽宁,大连,116011;大连市中心医院检验科,116033【正文语种】中文【中图分类】R446.1【相关文献】1.酶法与Jaffe's速率法测定血清肌酐的方法学评价 [J], 薛邦禄;徐维家;林韶华2.尿干化学分析法、散射比浊法、酶法检测尿清蛋白与尿肌酐及比值结果的一致性分析 [J], 鲁作华;刘倩倩;赵晓静;陈聚盛;孙力;刘兴晖3.肌氨酸氧化酶法和碱性苦味酸速率法检测血清肌酐结果比较和偏倚评估 [J], 黄霞梅;伍惠玲;钟慧芝;李海炜;秦雪;李山4.肌氨酸氧化酶法检测血清中肌酐含量的方法学评价 [J], 张宏斌;邓敬仪5.苦味酸法和酶法检测血清肌酐方法学评价 [J], 常晓松;董菲;席金瓯因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
肌酐测定标准操作规程
肌醉测定标准操作规程1.检验原理：(肌氨酸氧化酶法)血样中原有肌酸通过试剂除去后，肌醉在肌酎酶的作用下生产肌酸，肌酸又在肌酸酶作用下转化为肌氨酸。
肌氨酸氧化酶将生成的肌氨酸氧化，生成甘氨酸、甲醛和过氧化氢。
过氧化氢与4-氨基安替比林(4-AA)、N-乙基-间甲基苯胺-2-羟丙基磺酸钠(TOOS)在过氧化物酶(POD)作用下反应下生成红色醍类物质。
在546nm处，其显色程度与血液中的肌酢成正比。
肌醉+H2O时啊＞肌酸肌酸+H2O W＞肌氨酸肌氨酸+O2+42。
~^→甘氨酸+甲醛+过氧化氢过氧化氢+T00S+4+AA pod＞红色配类物质+”2。
2.试剂主要组成成分小时，2~8℃保24小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融!4.检验方法；仪器法(详见DF-603∕DI-600标准操作规程)5.参考范围：6.检验结果的解释：6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%(W∕V)的氯化钠溶液稀释样本。
通常稀释2倍，当样本浓度较大时提高稀释倍数，建议最大稀释不超过10倍6.2.单位换算：mg∕dL=umol∕LX0.01137.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊，或以水空白在546nm处吸光度大于0.300时不能使用。
7.3检验结果仅供参考，不作为临床诊断唯一依据。
8.产品性能指标8.1线性范围：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，本试剂线性范围可达0-5000UmOI/L。
线性相关系数r20.99008.2试剂空白吸光度：在546Ilm处，光径ICm时，空白吸光度A≤0.300。
8.3准确度：相对偏差Wl0%。
8.4精密度8. 4.1重复性CV≤3%8. 4.2批间差：R≤10%8.5分析灵敏度：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，1UmOI/L的肌酊对应的4A不低于2X10内。
9.7方法比较：本试剂盒与商品化试剂盒测定40个样本测定结果相关性如下：y=0.960x+2.051；r=0.9969.临床意义：肌酎是肌酸的终产物，通过肾小球滤过从尿液中排出。
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注意事项
• 血清和血浆（肝素、EDTA-K2、EDTANa2）都可以。
• 明显溶血可使肌酐值增高。
• 血清肌酐在室温可稳定2天，2-4℃可 稳定7天，冰冻可长期保存。 尿液标 本在4℃可稳定3天。
方法学评价
• 本方法特异性高，利用双试剂法消除了 内源性肌酸的干扰。
• 参考范围略低于苦味酸速率法。 • 最后一步的颜色反应易受胆43;H2O 肌酸酶
肌氨酸+尿素
肌氨酸+O2+H2O 肌氨酸氧化酶 甘氨酸+甲醛+H2O2
2H2O2 过氧化氢酶 O2+ H2O
原理
第二反应 肌酐+ H2O 肌酐酶 肌酸 肌酸+ H2O 肌酸酶 肌氨酸+尿素 肌氨酸+O2+H2O 肌氨酸氧化酶 甘氨酸+甲醛+H2O2
2H2O2＋4－氨基安替比林+酚 过氧化物酶 醌亚胺＋4 H2O
酶法测定血清肌酐
目的
• 掌握肌氨酸氧化酶测定肌酐的原理和操 作方法
• 熟悉肌酐测定的注意事项和临床意义， 能够将结果应用于临床疾病的诊断
• 了解肌氨酸氧化酶法试剂的成分
简介
• 肌酐是肌酸和磷酸肌酸代谢的最终产物 • 人体内肌酐包括由肌肉组织代谢生成的
内源性肌酐和由食物中摄取的外源性肌 酐两部分 • 是一种小分子物质，由肾小球滤过，不 能被肾小管重吸收 • 很少作为肾脏疾病早期诊断的指标 • 在反应肾小球滤过率方面，特异性好 • 常用方法有化学法和酶法两类
素C的干扰，在试剂1中加入亚铁氰化钾 和抗坏血酸氧化酶可消除 • 本实验线性：12880μmol/L。
操作步骤
生物参考区间
肌酐酶法： • 健康成年男性59-104μmol/L, • 成年女性：45-84μmol/L， • 实验室参考范围50-115μmol/L
临床意义
BUN与Cr比值（ BUN/ Cr)的意义 （1）器质性肾衰竭时 BUN 与 Cr 同时
增高， BUN/ Cr≤10:1 （2）肾性少尿，肾外因素所致的氮质 血症时BUN可快速上升，但Cr不相应上 升，此时，BUN/ Cr>10:1