快速高效偶联亲和层析介质试剂盒试用装说明书
试剂盒使用说明书
![试剂盒使用说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/8ec4995bee06eff9aef8076a.png)
人抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)水平。
用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb),再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)含量。
试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存标准品:270IU/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
苏州蓝晓生物科技有限公司 Ni Seplife HP(IDA)说明书
![苏州蓝晓生物科技有限公司 Ni Seplife HP(IDA)说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/4fd760aa5ff7ba0d4a7302768e9951e79b8969d8.png)
Ni Seplife HP(IDA)说明书1.产品介绍Ni Seplife HP(IDA)层析介质是蓝晓科技自主研发的一种新型亲和层析介质,具有良好的化学稳定性和生物相容性,是将亚氨基二乙酸基键合在高流速高分辨率琼脂糖凝胶过滤层析介质上,再螯合金属离子Ni2+形成的一种亲和层析介质。
Ni Seplife HP(IDA)利用样品组分中的组氨酸与金属离子的亲和吸附进行分离纯化,可用于分离纯化能被金属离子吸附的多肽、蛋白、核苷酸、磷酸化蛋白及带His标签的重组蛋白。
2.性能介绍产品牌号Ni Seplife HP(IDA)外观球状凝胶,无臭无味基质Seplife6FF形状球形最高流速(cm/h)150耐压(MPa)0.3粒径(μm)25~45离子结合量(Ni2+umol/ml):~30pH稳定性3~13(长期);2~14(短期,在位清洗[CIP])化学稳定性在常用水相溶液中稳定:0.1M氢氧化钠;0.1M盐酸;8M尿素应用适用His标签的重组蛋白纯化3.使用方法3.1装柱装柱按照标准操作规程操作。
必须保证每种材料都处于工作温度,凝胶装柱前需要脱气。
3.2平衡用2~5个柱床体积的初始缓冲溶液进行平衡,直至电导率、pH值等参数不变。
3.3上样(1)样品一般溶解于pH6~8的初始缓冲液中,提高上样缓冲液的pH值可以增大载量。
(2)缓冲液中不能含有EDTA和柠檬酸盐,同时最好避免巯基乙醇、DTT等还原剂。
(3)常用缓冲液有10~100mmol/L磷酸钠缓冲液、20~200mmol/LTris-HCl缓冲液等。
(4)缓冲液中一般要加入0.15~0.5mol/L的NaCl以消除离子交换作用。
(5)初次使用镍螯合琼脂糖凝胶时,推荐使用50mmol/L PBS(50mmol/L NaH2PO4,0.5 mol/L NaCl,pH7.4)作为初始缓冲液。
3.4洗脱洗脱一般分为以下几种方法:(1)降低pH洗脱:大多数蛋白在pH6~4会被洗脱下来(也可以在pH3~4),缓冲液可以是醋酸钠、柠檬酸和磷酸盐缓冲体系。
Protein A亲和介质说明书
![Protein A亲和介质说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/08ffdf0d52ea551810a687e0.png)
国家生化工程技术研究中心(北京)地址:北京市海淀区中关村北二条1号中国科学院过程工程研究所西区 电话/传真:010- 82544957 邮编:100190Protein A 亲和介质(Protein A QZT 4FF )产品说明书1. 产品简介Protein A 能特异性地与抗体的Fc 区结合,所以Protein A 亲和介质可用于抗体(单抗和多抗)的分离纯化,经过一步亲和层析,即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体。
Protein A QZT 4FF 亲和介质以自制的琼脂糖凝胶为基质,以重组Protein A 为配基,具有很高的物理化学稳定性,配基不易脱落,寿命长,使用方便,应用广泛。
2. 产品特性3. 使用方法Protein A QZT 4FF 广泛用于各种抗体的分离纯化。
层析操作通常包括装柱、平衡、进料、淋洗、洗脱、再生等步骤。
平衡:用5~10CV 的平衡缓冲液(20 mM PB+0.15M NaCl ,pH 7.0,添加适当浓度的NaCl 抑制非特异性吸附)平衡层析柱,至流出液电导和pH 不变(与平衡液一致)。
进料:样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。
固体样品可用平衡液溶解配制;低浓National Engineering Research Center forBiotechnology (Beijing)Add :No.1 Bei er tiao, Zhongguancun, Haidian District, Beijing, ChinaTel/Fax : 010- 82544957 Post code :100190度样品溶液可用平衡液透析;高浓度样品溶液可用平衡液稀释。
为了避免堵塞层析柱,样品应经离心或微滤(0.45μm )处理。
进料量根据介质的载量和料液中目标蛋白的含量计算。
淋洗:上样完毕后继续用平衡缓冲液淋洗至基线。
洗脱:用洗脱缓冲液(20 mM 柠檬酸,pH 3.0-4.0;或0.1M 甘氨酸,pH 3.0;或20 mM 乙酸钠,pH 3.0-4.0;具体洗脱条件与抗体的结合强度和稳定性密切相关,效果不好时应进行洗脱缓冲液(种类和pH 或添加剂)的优化)洗脱,收集流出液。
快速高效偶联亲和层析介质试剂盒说明书
![快速高效偶联亲和层析介质试剂盒说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/1d4b57c2aa00b52acfc7ca8f.png)
快速高效偶联亲和层析介质试剂盒说明书【产品名称】通用名称:CDI预活化琼脂糖凝胶4B试剂盒。
商品名称:快速高效偶联试剂盒。
【包装规格】20mL活化柱+500mL缓冲液/盒,附送亲和层析用空柱一支。
【预期用途】快速高效偶联试剂盒适用于亲和层析填料的快速制备以及固相吸附、固定化酶等用途。
【主要组成成份】●预活化琼脂糖凝胶4B●缓冲液【原理】本试剂盒系用优质琼脂糖凝胶 4B活化后存放于保护液中和适合的偶联缓冲液制成,用活性咪唑碳酸酯基团偶联需要的配体。
使用时,保护液被洗去后就可使欲偶联的配体的氨基和活性咪唑碳酸酯反应,脱去咪唑基,使得配体的氨基通过共价键牢固的链接在基质上,即可方便得到高偶联效率的亲和层析填料。
【存储条件和有效期】存储条件:原包装应储存于4-8 C。
密封保存在阴凉干燥处切忌冷冻。
有效期:一年。
【适用仪器】本产品无需特殊仪器辅助使用,只需要在操作时使用抽滤装置帮助抽去洗涤液,以免洗涤时间过长造成偶联效果不理想。
附送的亲和层析空柱可安装适合的接口用于自动纯化仪。
【配体要求】配体溶液的质量至关重要。
配体需溶解于偶联缓冲液中并使得浓度大于15mg/mL,并且浓度越大,偶联效果越好,如已经溶解在其他缓冲液中,可用偶联缓冲液透析平衡。
【偶联方法】方法一:1、预先准备好溶解在偶联缓冲液中的配体(可用直接溶解或透析方法制备),浓度>15mg/ml或者更高,浓度越高偶联效果越好。
2、将活化琼脂糖摇匀,倒入抽滤漏斗,加5倍体积的去离子水,抽气至快干时拔掉抽气管,注意不可抽干,此步速度宜快。
3、用配体溶液悬浮抽滤漏斗里的琼脂糖固体,摇床缓慢振荡(不可使用磁力搅拌器),室温3小时或4摄氏度过夜,然后洗净即可。
洗出来的配体可回收使用。
此方法适用于比较昂贵的配体。
方法二:1、用干燥枪头吸去保护剂。
制备配体在溶液B中的溶液(可用直接溶解或透析方法制备),浓度>15mg/ml或者更高,浓度越高偶联效果越好。
nhs活化偶联介质(nhsactivatedqzt4ff)产品说明书
![nhs活化偶联介质(nhsactivatedqzt4ff)产品说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/ba25a5c481c758f5f71f671b.png)
活化偶联介质()产品说明书. 产品简介活化偶联介质可用于各种含有氨基的亲和配基(蛋白质、多肽、糖等)的偶联,广泛十分广泛。
活化偶联介质以自制的琼脂糖凝胶为基质,经过一系列的活化、偶联步骤,最终形成活化酯,在温和的条件下就可以偶联各种带氨基的配基。
活化偶联介质具有使用方便、偶联条件温和、偶联效率高和应用范围广的特点。
. 产品特性表*:除基质外,也可以提供、和基质的活化介质。
. 应用活化偶联介质广泛用于各种含有氨基的亲和配基(蛋白质、多肽、糖等)的偶联。
具体的操作步骤如下(以活化胶偶联为例):清洗液:, ,度预冷;偶联缓冲液:, , 。
()准确称取溶于,缓冲液,溶解完全后备用。
()将约活化胶用度预冷的洗次后抽干,再用, 清洗次,抽干后将活化胶(约)加入到的反应器(磨口三角瓶或离心管)中(注意:清洗后应立即使用)。
()将溶液加入到活化胶中,反应温度恒定在℃(或室温℃),摇床中振荡混合(离心管水平放置),转速,反应过夜(或)。
()反应停止后,静置,取上清离心(,,室温),收集上清液用于未偶联的浓度分析(可采用、、法,在有强吸收,不能采用测定蛋白浓度),计算偶联的的配基密度;将其余料液转移到砂芯漏斗中用去离子水清洗、抽干。
()封闭未反应的:将抽干的亲和胶加入到磨口三角瓶中,加入乙醇胺,溶液(或,)。
反应温度恒定在℃(或室温℃),搅拌速度,反应过夜(或)。
反应停止后将料液转移到砂芯漏斗中抽干,用去离子水清洗。
()清洗将制得的琼脂糖凝胶依次用倍的去离子水、含的乙酸乙酸钠缓冲液()、去离子水、含的硼酸四硼酸钠缓冲液()和去离子水充分洗涤(重复交替清洗次),抽干,去除未反应的配基。
()保存制得的亲和介质保存于℃、乙醇溶液中。
备注:其他配基的偶联方法与类似,但反应条件(、温度、时间、配基加入量)需要根据配基的特性和应用的需求进行适当调整。
注意事项:偶联缓冲液可用碳酸盐和磷酸盐等缓冲液,但绝对不能使用含有氨基的等缓冲液。
UniMab
![UniMab](https://img.taocdn.com/s3/m/0d7c7708e418964bcf84b9d528ea81c758f52eb2.png)
UniMab® 50 HC亲和层析介质产品使用说明书文件编号:NM-W-DF-0302版本号:A1UniMab®50HC层析介质使用说明产品简介在全球医药市场上,抗体药物已连续多年占据销售榜单前几位,其市场竞争也日趋白热化。
降低抗体生产成本是增强市场竞争力的关键因素。
而解决抗体的生产瓶颈关键主要在于改进第一步Protein A 亲和捕获。
为了满足抗体生产企业对亲和层析介质机械强度高、反压低、化学稳定性好和耐碱性强,以及在高流速下仍然保持较高动态吸附载量的需求我们开发了UniMab® 50 HC Protein A 亲和层析介质。
UniMab® 50 HC是纳微科技利用自主专利技术生产的高性能、耐碱型重组Protein A 亲和层析介质,该填料以单分散多孔型聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)微球为基质,利用专有的表面修饰技术并环氧偶联键合Protein A 制得,适用于单克隆抗体及含有Fc (功能层析)片段的重组蛋白类生物大分子的分离纯化。
UniMab® 50 HC机械强度高、反压低、化学稳定性好、耐碱性强,即使在高流速下仍然能保持较高动态吸附载量,能满足从实验室制备到中试及工业化生产的各种需求。
图1. UniMab® 50 HC亲和层析介质电镜图全新一代的UniMab® 50 HC Protein A 亲和层析介质作为抗体纯化层析介质,在高流速下能保持较高动态吸附载量,是大规模单克隆抗体及含Fc片段重组蛋白亲和纯化的理想选择,有助于降低企业生产成本,相较市场同类产品有如下独特优势:耐受 0.1 到 0.5 M (mol/L) NaOH清洗,寿命长、生产成本低;(b) 单分散均一粒径高强度亲水基质,允许更大操作压力和线性流速;(c) 采用耐碱rProtein A 与独特固定键合技术,更低配基脱落、更强耐碱性;(d) 高流速下具有50 mg/mL(human IgG)高载量,显著优于同类产品,更高的全程载量和更低的非特异性吸附,可以提高生产效率;(e) 最高流速(~800 cm/h)和耐受压力(~0.8 MPa),显著高于同类产品;(f) 不同抗体洗脱条件均一,是抗体纯化工艺平台的理想选择;(g) 洗脱条件更加温和;(h) 装柱容易,批次重现性好。
QuicKey-人转铁蛋白(TF)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书
![QuicKey-人转铁蛋白(TF)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/df9e7838a36925c52cc58bd63186bceb19e8ed36.png)
(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)QuicKey-人转铁蛋白(TF)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书QuicKey Human TF (Transferrin) ELISA Kit产品货号:E-TSEL-H000196T/48T/24T使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话************QQ客服800110755具体保质期请见试剂盒外包装标签。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
QuicKey系列与传统ELISA试剂盒相比,在实验时间节省至少1小时的同时,获得更加灵敏和精确的实验结果。
Elabscience 自主开发的新技术,旨在帮助客户以更为高效的方式进行科学研究。
用途该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆、尿液中TF浓度。
其它相关生物液体请咨询技术支持。
灵敏度、检测范围、特异性和重复性●灵敏度:0.13ng/mL。
●检测范围:0.14-100ng/mL。
●特异性:可检测样本中的人TF,且与其它类似物无明显交叉反应。
●重复性:板内,板间变异系数均<10%。
背景介绍转铁蛋白(Transferrin, Tf)是一种在血浆中发现的对细胞健康至关重要的铁结合蛋白,它为机体细胞提供天然铁,能作为细胞培养基的补充物。
转铁蛋白从肠道、网状内皮系统和肝实质细胞中携带铁,为体内所有的增殖细胞提供铁。
转铁蛋白与其他四种蛋白质共享同源氨基酸序列,包括乳转铁蛋白、卵转铁蛋白、黑色素瘤抗原p97和hublym1。
抗原p97和转铁蛋白受体基因共同定位在人类3号染色体上。
转铁蛋白的分子量约为80kda,含有两个特异的高亲和力铁(III)结合位点。
转铁蛋白与铁(III)亲和力非常高(缔合常数在pH值7.4时为1020M−1),但将pH值从中性以下降低,其亲和力会逐渐减弱。
当不与铁结合时,转铁蛋白被称为Apo转铁蛋白。
亲和层析柱使用说明
![亲和层析柱使用说明](https://img.taocdn.com/s3/m/80083ee902d276a200292ea6.png)
亲和层析柱使用说明货号名称规格说明DS0101亲和层析柱1ml 含1个空管柱,上下盖和2个筛板(亲水性,孔径50um)DS0103亲和层析柱3ml DS0106亲和层析柱6ml DS0110亲和层析柱10ml DS0130亲和层析柱30ml DS0150亲和层析柱50ml一、产品说明亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而设计的层析技术。
它是利用生物分子间存在很多特异性的相互作用(如抗原和抗体、酶和底物或抑制剂、激素和受体等),通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上,利用分子间亲和力的特异性和可逆性,对另一个分子进行分离纯化。
本公司提供的亲和层析柱工具可应用于如下方面:①纯化重组蛋白;②纯化抗原和抗体;③纯化多肽;④纯化DNA;⑤糖蛋白的纯化;⑥纯化磷酸化蛋白和肽;⑦DNA 结合蛋白的纯化;⑧去除内毒素,等。
亲和层析柱空柱管的材质为医疗级的聚丙烯,这种工程材料通过大量的应用证明具有清洁无毒,不与生物分子结合和低溶解度的优点。
亲和层析柱空柱所用的筛板是选用纯净的UHWM-PE (超高分子量聚乙烯)为原料,经独特的工艺加工而成,具有亲水性。
筛板在装填时安置在填料基质的上下端,以阻挡昂贵的基质渗出。
亲水性筛板采用了领先的亲水性UHWM-PE 生产技术,该筛板能保证使用重力法时的流速为1-2ml/分钟或1-2滴/秒。
同时,该筛板和其它同类产品相比,不会由于亲水性基团的引入而对蛋白质产生吸附。
另外,该亲水性筛板在使用过程中不易形成气泡,气泡会使流速降低,液体通过基质不均匀。
二、产品应用1,抗体纯化纯化抗体一般用Protein A作为纯化的配体,也可以用Protein G或Protein L或异源性抗体作为配体。
2,小分子物质提取(以提取黄曲霉毒素M1为例)试样通过免疫亲和柱时,黄曲霉毒素M1被提取。
亲和柱内含有的黄曲霉毒素M1特异性单克隆抗体交联在固体支持物上,当样品通过亲和柱时,抗体选择性的与黄曲霉毒素M1(抗原)键合,形成抗体一抗原复合体。
镍离子金属鳌合亲和层析介质(Ni-NTA)说明
![镍离子金属鳌合亲和层析介质(Ni-NTA)说明](https://img.taocdn.com/s3/m/444841ee0975f46527d3e1e5.png)
镍离子金属鳌合亲和层析介质(Ni-NTA)说明书一、简介金属螯合亲和层析介质,又称固定金属离子亲和色谱,其原理是利用蛋白质表面的一些氨基酸,如组氨酸能与多种过渡金属离子如Cu2+,Zn2+,Ni2+,Co2+,Fe3+发生特殊的相互作用,能够吸附富含这类氨基酸的蛋白质,从而达到分离纯化的目的。
因此,偶联这些金属离子的琼脂糖凝胶就能够选择性地分离出这些含有多个组氨酸的蛋白以及对金属离子有吸附作用的多肽、蛋白和核苷酸。
半胱氨酸和色氨酸也能与固定金属离子结合,但这种结合力要远小于组氨酸残基与金属离子的结合力。
镍NTA亲和层析介质(Ni-NTA )具有特异性好、流速快的优点,颗粒粒度均匀,粒径小,并且螯合镍更稳定,能耐受更高的还原剂,物理和化学稳定性好,批次重复性好。
本产品已经螯合好镍离子,使用更方便。
二、性能参数:三、适用范围分离带His标签的重组蛋白及能被金属离子吸附的多肽、蛋白、核苷酸、磷酸化蛋白。
四、应用实例实验名称:Ni-NTA 分离带His标签的重组蛋白实验步骤:1、Ni-NTA 装柱,1.6×20cm,柱床体积为10ml;2、用缓冲液1平衡2~5个床体积,流速为2ml/min;3、将20ml细胞破碎液(50mM PBS,pH7.4,0.5M NaCl)0.45μm滤膜过滤,上样,流速为1ml/min;4、用缓冲液1再洗2~5个床体积,流速为2ml/min;5、用分别含10、20、50、100、200、300、400mM咪唑的缓冲液3进行阶段洗脱,流速为2ml/min,收集各阶段洗脱峰,用SDS-PAGE检测融合蛋白的分子量大小和纯度;6、用纯水流洗5个柱床体积,再用20%的乙醇流洗3个柱床体积,流速为2ml/min,柱子置于+4-8℃环境中保存。
缓冲液组成:缓冲液1:50mM pH7.4的PBS缓冲液。
配制:0.5M NaH2PO419ml,0.5M Na2HPO481ml,NaCl 29.3g,加适量水溶解后定容到1000ml。
蓝晓生物科技Blue Seplife FF介质说明书
![蓝晓生物科技Blue Seplife FF介质说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/88318b6e3069a45177232f60ddccda38376be1e5.png)
Blue Seplife FF说明书1.产品介绍Blue Seplife FF层析介质是蓝晓科技自主研发的一种新型亲和层析介质,它是将蓝色染料汽巴兰(Cibacron Blue 3G-A)偶联到高流速琼脂糖凝胶过滤层析介质上。
Blue Seplife FF与目标蛋白的结合主要是配基提供的电子对与疏水作用的综合结果。
该介质具有良好的化学稳定性,基团脱落少,使用寿命长,使用方便,应用非常广泛,可用于白蛋白、干扰素、凝血因子以及各种需要NAD+和NADP+酶的分离纯化。
2.性能介绍产品牌号Blue Seplife FF外观白色球状,无臭无味基质Seplife 6FF配基汽巴兰最高流速(cm/h)750粒径(μm)45~165配基密度(umol/ml)7结合载量(mg/ml)>18mg BSA/mlpH稳定性3~13(长期);4~12(短期,在位清洗[CIP])化学稳定性在以下溶液中稳定:6M盐酸胍;8M尿素;70%乙醇耐热性121℃,水中20min应用白蛋白、干扰素、凝血因子以及各种需要NAD+和NADP+的酶的分离3.使用方法3.1装柱装柱按照标准操作规程操作。
必须保证每种材料都处于工作温度,凝胶装柱前需要脱气。
3.2平衡用2~5个柱床体积的初始缓冲溶液进行平衡,直至pH和电导率保持不变。
平衡缓冲液一般是根据需要纯化的蛋白来决定用哪种缓冲液。
3.3上样(1)不同物质和介质会有强弱不同的结合能力,主要取决于流速、pH、缓冲溶液组成和温度。
(2)样品pH 应该和平衡缓冲液pH相同,上样前样品应该用0.22um或者0.45um的滤膜过滤,可以延长凝胶的使用寿命。
(3)上样完后用缓冲液平衡,直至流出液电导和pH不变。
3.4洗脱(1)洗脱液根据需要纯化的样品决定。
可以采用改变缓冲液pH、极性或者离子强度。
(2)特异性吸附蛋白可以采用低浓度竞争洗脱、梯度或者线性洗脱。
3.5 再生对于使用过的凝胶,先用2~3倍柱床体积的0.1mol/L T ris·HCl+0.5mol/L NaCl(pH8.5)和0.1mol/L NaAc+0.5mol/L NaCl(pH4.5)依次反复冲洗3~4次,然后用平衡缓冲溶液平衡。
Flag标签亲和层析介质
![Flag标签亲和层析介质](https://img.taocdn.com/s3/m/0a8ecb100b1c59eef9c7b413.png)
Flag标签亲和层析介质Anti-flag Affinity Beads货号规格BDTL0045-11mlBDTL0045-55ml1.产品介绍Flag标签是一个由八个亲水氨基酸组成的多肽片段,定位在融合蛋白表面,因此更易与抗体结合以及被肠激酶分解。
Anti-flag Affinity Beads是以抗flag(DYKDDDDK)抗体为亲和配体,一步纯化原核、酵母或哺乳动物细胞表达的flag标签融合蛋白。
Anti-flag Affinity Beads 以4%琼脂糖凝胶为基质,杂蛋白非特异性结合少,可用于flag标签融合蛋白的纯化和免疫沉淀(IP)。
表1.Anti-flag Affinity Beads产品性能项目性能基质4%琼脂糖微球配体Anti-flag鼠单克隆抗体载量>1mg flag标签蛋白/ml介质粒径(μm)45-165最大流速0.1MPa,1bar储存缓冲液0.02%叠氮化钠,1XPBS储存温度2°C-8°C2.试剂准备2.1缓冲液的准备所用水和缓冲液在使用之前建议用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。
平衡和洗杂液:50mM Tris,0.15M NaCl,pH7.4洗脱液:0.1M glycine HCl,pH3.5竞争性洗脱液:50mM Tris,0.15M NaCl,100-500ug flag多肽/ml,pH7.4中和液:1M Tris-HCl,pH8.0再生液1:0.1M Tris-HCl,0.5M NaCl,pH8.0-1-再生液2:0.1M NaAc,0.5M NaCl,pH4.02.2样品准备上柱之前要确保样品溶液有合适的离子强度和pH值,可以用平衡液对样品或细胞培养液稀释,或者用平衡液透析。
样品在上样前建议离心或用0.22μm或0.45μm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。
3.样品纯化3.1柱层析1.将Anti-flag Affinity Beads装入合适的层析柱,层析用5倍柱体积的平衡液进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下。
纳微科技NMabTM Pro Protein A 亲和层析介质使用说明书
![纳微科技NMabTM Pro Protein A 亲和层析介质使用说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/deaa025254270722192e453610661ed9ad5155a5.png)
NMab TM Pro Protein A亲和层析介质产品使用说明书文件编号:NM-W-DF-0603版本号:A2NMab TMPro 层析介质使用说明产品简介Protein A 亲和层析是利用Protein A 配基与目标抗体具有专一结合力作用从而达到分离纯化抗体的目的。
Protein A 亲和层析大大简化抗体下游分离纯化工艺,成为抗体分离纯化的标准。
目前市场上的Protein A 亲和层析介质主要分为以多糖(琼脂糖、葡聚糖、纤维素)为基质和以合成高分子(聚丙烯酸酯,丙烯酰胺)为基质两大类。
琼脂糖基质在溶胀状态下具有网状结构,比表面积大,因而亲和载量比较高,但机械强度不高、耐压低。
随着上游发酵技术的进步,抗体表达量越来越高,下游亲和捕获成为抗体生产瓶颈,因此对下游Protein A 亲和层析介质的载量要求越来越高。
为了因应这一需求,纳微科技以琼脂糖为基球,利用特有的微球改性技术以增强其机械强度,并结合自主产权的Protein A图1. NMab TM Pro Protein A 亲和层析介质电镜图配基技术,在NMab TM Protein A 的基础上成功开发出比其具有更高载量的NMab TM Pro Protein A 亲和层析介质。
除了高载量外,NMab TM Pro 延续了其优良的结合特异性、耐碱性以及压力-流速特性,是抗体客户降低单抗纯化成本的最佳选择。
下表1是NMab TM Pro Protein A 层析介质的基本性质参数。
相较市场同类产品有如下独特优势:(a) 载量高:一般单抗项目平均动态载量约60-80 mg/mL ;(b) 耐碱性强:0.5 M NaOH 浸泡下24小时载量只下降20%;(c) 配基脱落低:小于20 ppm ;(d) 宿主蛋白(HCP )残留低:一般在1000 ppm 以内,表现不亚于Prism A ; (e) 回收率高:大于90%;(f) 纯度高:亲和洗脱液纯度99 %以上;(g) 压力流速好:明显强于传统4FF/6FF 系列介质;表1. 纳微科技NMab TM Pro Protein A 亲和层析介质技术参数压力流速曲线测试不同流速下压力变化如下,此压力-流速特性可满足工业生产上对填料流速要求,优于传统4FF/6FF 软胶系列填料。
快速DNA连接试剂盒使用说明
![快速DNA连接试剂盒使用说明](https://img.taocdn.com/s3/m/45f3a8572e3f5727a5e962e4.png)
快速DNA连接试剂盒使用说明
货号:T7740
规格:20次/100次
保存:该产品低温运输,-20℃保存,有效期3年。
产品内容:
组分20次100次
Fast DNA Ligase20μl100μl
5×Rapid Ligation Buffer200μl1ml
Sterilized ddH2O1ml5ml
产品说明:
快速DNA连接试剂盒是通过T4DNA连接酶催化双链DNA的3'-OH和5'-P形成磷酸二脂键,把载体DNA和要克隆的目的DNA片段连接在一起,T4DNA连接酶对粘末端DNA和平末端都能进行有效连接,成为一个完整的重组分子。
快速DNA连接试剂盒操作简单、快速。
全过程只需30min即可完成。
实验准备:自备试剂:载体,插入片段等。
操作步骤:
1、在1.5ml无菌干净的离心管中配制下列连接体系:
反应组分20μl反应体系
5×Rapid Ligation Buffer4μl
插入片段Xμl
载体50ng
Fast DNA Ligase1μl
Sterilized ddH2O补足至20μl
注:插入片段与载体的摩尔比为10:1。
2、一般最后加入Fast DNA Ligase。
3、在离心机上微离3~5s,室温放置20min。
室温放置时间可适当延长,最长可以放置过夜。
4、将混合物置于冰上,可直接用于转化,也可-20°C保存备用。
快速连接试剂盒使用说明
![快速连接试剂盒使用说明](https://img.taocdn.com/s3/m/3907b5b8284ac850ad0242df.png)
快速连接试剂盒使用说明货号:QL0010规格:20T保存:-20℃保存。
产品内容:T4DNALigase20ul(4U/ul)2×Quick Ligation Buffer200ul产品简介:快速连接试剂盒所带T4DNA Ligase能催化dsDNA、dsRNA或DNA/RNA的5’-磷酸末端和3’-羟基末端形成磷酸二酯键。
该酶不仅能催化平滑末端或粘性末端DNA之间的连接,还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口,在2×Quick Ligation Buffer中,室温(25℃)下反应5分钟即可完成连接反应,反应液可直接用于转化,使用方便、快捷,极大地缩短了试验时间。
本试剂盒可应用于DNA片段克隆入载体、文库构建、TA克隆、Linker连接以及线性DNA的再环化等试验。
单位定义:在2ul连接反应体系、0.12uM(300ug/ml)的5’-末端浓度条件下,16℃反应30分钟,能使50﹪Hind III消化的λDNA片段连接上所需的酶量定义为一个活性单位。
使用方法:1、按下面配制反应体系2×Quick Ligation Buffer10ul载体50ng插入片段50-150ngT4DNA Ligase1uldd H2O up to20ul2、室温下反应5分钟,反应产物冰上冷却,然后直接用于转化或冻存于-20℃。
注意不要热失活,热失活会急剧降低转化效率。
当插入片段超过1.5kb时,延长反应时间至15-30分钟。
注意事项:1、2×Quick Ligation Buffer用前应彻底混匀,避免反复冻融,可适当分装成小份以保证质量。
2、为保证有效连接,总的载体DNA与插入片段的总浓度应在1-10ug 之间。
对单插入来说,插入片段:载体比例在1:2-1:6之间最好,低于2:1会降低连接效率,高于6:1会产生重复插入。
3、如果是做电转化,请将连接产物纯化后再进行电转化。
快速核酸提取试剂盒说明书1
![快速核酸提取试剂盒说明书1](https://img.taocdn.com/s3/m/1eaa4daaf021dd36a32d7375a417866fb84ac0f5.png)
快速核酸提取试剂盒
1、产品介绍
本裂解液具有样本用量少,步骤简单,不需要特殊仪器,而且能够沉淀样本血清中的杂蛋白及其他影响PCR反应的大分子有机物,是目前快速检测中较理想的选择之一。
该技术将标本直接加入到PCR 扩增管,不需振荡、无需开管盖和移液等操作,可采用与标准质控品和标本同步进行处理和扩增,实现全程监控,具有无污染、操作简单、快速、准确等独特优点。
2
3、适用范围
适用于血清,无抗凝的血浆或者全血,病毒培养液,尿液,唾液,咽拭子浸提液等标本。
4、实验步骤
(1)用200ul PCR管加入5ul Buffer1 溶液,再加入5ul样本,轻柔混匀,短离;
(2)新的200ul PCR管中,加入3ul MB裂解液,再加入3ul(1)中的混合液,10000转离心1min;
(3)将加好MB 裂解液的PCR管置于PCR仪(带热盖)中,99℃,10min;(4)取出样本后再室温平衡2-3min,10000转离心1min,PCR管底可见白色沉淀物,说明裂解完全;
(5)直接进行PCR扩增程序;
※注:若样本为血清或者无抗凝血浆,可跳过步骤(1),直接从步骤(2)开始。
其他样本(非组织),需要加Buffer1预混,从步骤(1)开始。
5、注意事项
※尽量避免多次冻融,可置于4℃保存,长期保存于-20℃。
※血浆样品不能含有任何抗凝剂,会影响后续实验。
※MB裂解液使用体积为PCR总体积的1/8。
GST亲和层析介质使用说明书---精品管理资料
![GST亲和层析介质使用说明书---精品管理资料](https://img.taocdn.com/s3/m/56c71644284ac850ad0242e0.png)
GST亲和层析介质使用说明书一、简介GST亲和层析介质(GST Agarose)是专门设计用于纯化谷胱甘肽S—转移酶(GST)融合蛋白、其它谷胱甘肽转移酶以及与谷胱甘肽有亲和作用蛋白的分离介质,一步分离就可得到高纯度的GST融合目标蛋白,纯化条件温和,可以保证蛋白的活性.本产品是自主设计合成的GST琼脂糖凝胶,具有优良的物理和化学稳定性,使用寿命长,操作方便,批次重复性好,易于放大,是研发与生产的理想选择。
二、性能参数三、适用范围分离谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白、其它谷胱甘肽转移酶以及与谷胱甘肽有亲和作用的蛋白。
四、操作说明1。
缓冲液配制缓冲液A(平衡缓冲液):10mM Na2HPO4,1.8mM KH2PO4,140mM NaCl,2。
7mM KCl,调节pH值至8.0。
缓冲液B(洗脱缓冲液):10mM Glutathione(还原型),50mM Tris—HCl,调节pH值至8。
0.因Glutathione 易氧化,需现用现配。
(注:各种溶液配制完毕后,最好进行脱气处理,0。
45 μm滤膜过滤备用)。
2。
样品预处理:按每克湿重菌体/2~5ml平衡缓冲液的比例充分悬浮离心收集的菌体;600w功率,每循环超声3s,冷却3s,循环99×3次,破碎菌体;4℃、15000rpm离心15m,收集上清液,或用0.45μm滤膜过滤.3。
装柱:聚苯乙烯层析柱1)将层析柱固定在铁架台或层析架上,封闭层析柱下端出口,向柱内充入纯水,排开层析柱内空气,先将垫片完全浸没于水面下方,在保持水平的状态下,小心推向底部,避免垫片下方滞留气泡。
2) 打开层析柱下端出口,排出柱中纯水;在液面低至距垫片1~1.5cm高度时封闭下端出口,用移液枪按需要量吸取介质,或用玻璃棒紧靠柱子内壁引流,将介质加入到层析柱中;静置30min,让介质自然沉降。
3) 从上端管口将另一垫片缓慢推至介质沉降平面,使介质表面保持水平状态,注意避免垫片与介质接触面滞留气泡(如对实验结果要求不严,也可不放入上垫片,以提高流速).4) 在使用一段时间后,如果层析柱流速减慢,可先用小镊子沿边缘将垫片推翻,夹出垫片,倒出介质,清洗或更换新的垫片后,按2)、3)所述玻璃层析柱1)将层析柱洗净后垂直固定到铁架台上;向柱中加入蒸馏水,排开柱子中的空气,在蒸馏水排尽以前,关闭柱子出口,在柱内保留5~8cm高度的蒸馏水。
苏州蓝晓生物科技有限公司Seplife CL-6B琼脂糖层析介质说明书
![苏州蓝晓生物科技有限公司Seplife CL-6B琼脂糖层析介质说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/a25f9d96250c844769eae009581b6bd97f19bcd1.png)
Seplife CL-6B说明书1.产品介绍Seplife CL-6B琼脂糖层析介质是用6%交联琼脂糖制备成的凝胶颗粒,本产品为传统的琼脂糖层析介质,具有非特异性吸附低,回收率高,可多次重复使用等特点,可用于分子量差异大、对分辨率要求不高的样品的凝胶层析纯化。
2.性能介绍产品牌号Seplife CL-6B外观白色球状凝胶,无臭无味基质6%交联琼脂糖凝胶pH稳定性3~13(长期),2~14(短期,在位清洗[CIP])可耐8mol/L 尿素、6mol/L 盐酸胍;有机溶剂,如:乙醇、DMF、化学稳定性THF、DMS、氯仿、丙酮、吡啶、二甲基甲酰胺、二氯乙烷、乙腈排阻极限10000~4×106(球蛋白)粒径(um)45~165耐压流速*(cm/h)110~210cm/ h(在0.15Mpa)耐热性120℃,pH7水中20min应用用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的凝胶过滤层析纯化*检测条件:层析柱16mm×300mm;*柱床高10cm;温度25℃;流动相为0.1mol/L NaCl。
3.使用方法3.1 装柱装柱按照标准操作规程操作。
必须保证每种材料都处于工作温度,凝胶装柱前需要脱气。
3.2平衡使用2~5倍柱床体积的上样平衡液平衡柱子,务必使流出液的电导和pH同上样缓冲液的电导和pH完全一致。
3.3上样(1)样品用缓冲液配制,浑浊的样品要离心和过滤后上样。
含盐量过大、浓度过小的样品要先做处理,再上样。
(2)介质对样品组分的分离是按组分分子量大小进行的,分子量大的先流出来。
(3)上样体积约为柱体积的1~2%,越小分离效果越好。
3.4洗脱用缓冲液洗脱,洗脱中保持流速、缓冲液组成不变。
3.5再生一般用缓冲液洗到平衡,可再次使用。
3.6清洗(1)对于沉淀蛋白、非特异性吸附蛋白和脂蛋白,可用0.5M NaOH清洗去除;(2)对于非特异性吸附较强的蛋白、脂蛋白和脂类,可先用2倍柱床体积的非离子去污剂(0.1%)清洗,然后用2~3倍柱床体积的缓冲液清洗直至pH和电导保持不变。
碧云天Protein A Agarose (Fast Flow, 1ml)预装柱说明书
![碧云天Protein A Agarose (Fast Flow, 1ml)预装柱说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/2753ca7730126edb6f1aff00bed5b9f3f90f72f1.png)
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线: 400-1683301或800-8283301 订货e-mail :****************** 技术咨询: ***************** 网址: 碧云天网站 微信公众号Protein A Agarose (Fast Flow, 1ml)预装柱产品简介:碧云天的Protein A Agarose (Fast Flow)预装柱(Protein A Agarose Prepacked Column, Fast Flow)是一种简便、快速、高效的用于抗体纯化、免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)或免疫共沉淀(Co-IP)的即用型预装柱,也称层析柱(Chromatography column)或纯化柱(Purification column)。
本产品也可用于实验中抗原抗体复合物的分离纯化。
特别注意:使用本产品对结合的抗体或抗体复合物进行洗脱时,会有微量Protein A 脱落,洗脱后的样品不适合用于Western 等需要二抗的检测,但适合用于抗原蛋白复合物的质谱分析等不需要使用二抗的检测。
Protein A 是一种发现于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus )的细胞壁表面蛋白,分子量为42kDa ;Protein G 是C 型或G 型链球菌(Streptococcal bacteria)表达的免疫球蛋白结合蛋白。
Protein A 和Protein G 功能相似,能特异性地与哺乳动物免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)结合,结合的部位通常为免疫球蛋白的Fc 区,但有资料显示Protein A 也会和人VH3家族的Fab 区结合,而Protein G 有时与Fab 区也有一定结合。
同时,两者对于不同的免疫球蛋白亚类的结合能力有所不同。
适当重组改造的Protein A 、G 与琼脂糖凝胶(agarose)以一定的方式结合,可用于免疫沉淀或抗体的纯化。
直接偶联法制备配基密度可控的丁基琼脂糖层析介质
![直接偶联法制备配基密度可控的丁基琼脂糖层析介质](https://img.taocdn.com/s3/m/c1e2c0c7afaad1f34693daef5ef7ba0d4a736d0b.png)
直接偶联法制备配基密度可控的丁基琼脂糖层析介质冯清正;孟庆强;王佳兴;马光辉;马润宇;苏志国【期刊名称】《过程工程学报》【年(卷),期】2006(6)6【摘要】以快流速琼脂糖凝胶为基质,采用直接偶联法制备丁基琼脂糖疏水层析介质.考察了影响反应的主要因素,通过四因素三水平正交实验和单因素实验,确定丁基琼脂糖疏水层析介质的优化反应条件为:反应温度45℃,反应时间45min,催化剂三氟化硼乙醚用量0.02mL/g.在此条件下严格控制琼脂糖凝胶的含水量,改变丁基缩水甘油醚用量,制备了不同丁基密度的丁基琼脂糖疏水层析介质.用不同密度的系列介质考察对牛血清白蛋白的吸附性能,初步研究了配基密度与吸附性能的关系;研究了疏水层析介质的机械稳定性和化学稳定性.结果表明,其各项性能良好,具有广阔的应用前景.【总页数】5页(P959-963)【关键词】疏水层析;丁基琼脂糖层析介质;制备;吸附【作者】冯清正;孟庆强;王佳兴;马光辉;马润宇;苏志国【作者单位】中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室;北京化工大学生命科学与技术学院【正文语种】中文【中图分类】TQ033【相关文献】1.苯基-琼脂糖疏水层析介质的制备 [J], 胡洪波;王;威;程悦生;苏志国2.色胺混合模式层析介质制备及配基密度影响研究 [J], 施伟;李明昊;栾浩飞;韩得满3.琼脂糖-DEAE离子交换介质的配基密度和孔径对BSA吸附的影响 [J], 卢慧丽; 林东强; 姚善泾4.琼脂糖-DEAE离子交换介质的配基密度和孔径对BSA吸附的影响 [J], 卢慧丽; 林东强; 姚善泾5.无水体系中环氧氯丙烷活化琼脂糖凝胶制备高载量固定化金属亲和层析介质 [J], 张松平;丁锐;苏志国;王平因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
免疫层析试剂卡说明书
![免疫层析试剂卡说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/5e8c045fa9114431b90d6c85ec3a87c240288a97.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)实用新型专利(10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201820244402.X(22)申请日 2018.02.09(73)专利权人 广东优尼德生物科技有限公司地址 523000 广东省东莞市松山湖高新区桃园路1号莞台生物技术合作中心3栋4楼(72)发明人 潘锐 刘建强 汪椿树 袁功谋 李慧华 赖华 (74)专利代理机构 东莞市华南专利商标事务所有限公司 44215代理人 张明(51)Int.Cl.G01N 33/531(2006.01)(54)实用新型名称一种免疫层析试剂卡(57)摘要本实用新型公开了一种免疫层析试剂卡,包括有外壳以及设于外壳内的试剂条,所述试剂条包括有硝酸纤维素膜;所述硝酸纤维素膜的一端层叠设有滤血浆膜;所述硝酸纤维素膜的另一端层叠设有吸水纸;所述外壳设有样本孔;所述外壳设有检测孔;所述外壳设有用于放置试剂条的衬板;所述衬板包括有第一衬托部、用于放置吸水纸的第三衬托部以及与样本孔相应位置的第二衬托部;所述第一衬托部包括有第一凹坑以及第一凸块;所述第一凸块与第二衬托部连接。
本实用新型通过设置第一凹坑以及第一凸块,使得血浆移动至第一凹坑中,由于第一凸块的高度高于第一凹坑,故血浆无法从第一凹坑出渗出移动至硝酸纤维素膜中,提高了血清与血浆的分离效果。
权利要求书1页 说明书3页 附图2页CN 207894939 U 2018.09.21C N 207894939U1.一种免疫层析试剂卡,其特征在于:包括有外壳(1)以及设于外壳(1)内的试剂条(2),所述试剂条(2)包括有设于底部的硝酸纤维素膜(21);所述硝酸纤维素膜(21)的一端层叠设有用于过滤血浆的滤血浆膜;所述硝酸纤维素膜(21)的另一端层叠设有吸水纸(22);所述外壳(1)在滤血浆膜的相应位置开设有样本孔(11);所述外壳(1)在硝酸纤维素膜(21)中部的相应位置开设有检测孔(12);所述外壳(1)设有用于放置试剂条(2)的衬板(3);所述衬板(3)包括有用于放置滤血浆膜的第一衬托部(31)、用于放置吸水纸(22)的第三衬托部(33)以及与样本孔(11)相应位置的第二衬托部(32);所述第一衬托部(31)包括有第一凹坑(41)以及与第一凹坑(41)连接的第一凸块(42);所述第一凸块(42)与第二衬托部(32)连接。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
快速高效偶联亲和层析介质试剂盒说明书
【产品名称】
通用名称:CDI预活化琼脂糖凝胶4B试剂盒。
商品名称:快速高效偶联试剂盒。
【包装规格】
20mL活化柱+500mL缓冲液/盒,附送亲和层析用空柱一支。
【预期用途】
快速高效偶联试剂盒适用于亲和层析填料的快速制备以及固相吸附、固定化酶等用途。
【主要组成成份】
●预活化琼脂糖凝胶4B
●缓冲液
【原理】
本试剂盒系用优质琼脂糖凝胶4B活化后存放于保护液中和适合的偶联缓冲液制成,用活性咪唑碳酸酯基团偶联需要的配体。
使用时,保护液被洗去后就可使欲偶联的配体的氨基和活性咪唑碳酸酯反应,脱去咪唑基,使得配体的氨基通过共价键牢固的链接在基质上,即可方便得到高偶联效率的亲和层析填料。
【存储条件和有效期】
存储条件:原包装应储存于4-8 C。
密封保存在阴凉干燥处切忌冷冻。
有效期:一年。
【适用仪器】
本产品无需特殊仪器辅助使用,只需要在操作时使用抽滤装置帮助抽去洗涤液,以免洗涤时间过长造成偶联效果不理想。
附送的亲和层析空柱可安装适合的接口用于自动纯化仪。
【配体要求】
配体溶液的质量至关重要。
配体需溶解于偶联缓冲液中并使得浓度大于15mg/mL,并且浓度越大,偶联效果越好,如已经溶解在其他缓冲液中,可用偶联缓冲液透析平衡。
【偶联方法】
方法一:
1、预先准备好溶解在偶联缓冲液中的配体(可用直接溶解或透析
方法制备),浓度>15mg/ml或者更高,浓度越高偶联效果越好。
2、将活化琼脂糖摇匀,倒入抽滤漏斗,加5倍体积的去离子水,抽气至快干时拔掉抽气管,注意不可抽干,此步速度宜快。
3、用配体溶液悬浮抽滤漏斗里的琼脂糖固体,摇床缓慢振荡(不可使用磁力搅拌器),室温3小时或4摄氏度过夜,然后洗净即可。
洗出来的配体可回收使用。
此方法适用于比较昂贵的配体。
方法二:
1、用干燥枪头吸去保护剂。
制备配体在溶液B中的溶液(可用直接溶解或透析方法制备),浓度>15mg/ml或者更高,浓度越高偶联效果越好。
2、用5倍以上体积配体溶液悬浮抽滤漏斗里的琼脂糖固体,4度摇床缓慢振荡(不可使用磁力搅拌器),过夜后用适当缓冲液洗净即可。
洗出来的配体可回收使用。
此方法适用于比较廉价的配体。
注意:
如果配体不耐高pH条件,可以用1M盐酸调节缓冲液至适合pH。
【装柱】
塑料层析柱
1、将层析柱固定,封闭层析柱下端出口,向柱内充入去离子水,排开层析柱内空气,先将垫片完全浸没于水面下方,在保持水平的状态下,小心推向底部,避免垫片下方滞留气泡。
2、先将介质混匀,打开层析柱下端出口,排出柱中去离子水;在液面低至距垫片1~1.5cm高度时封闭下端出口,用导流棒沿内壁倒入介质或移液枪吸取介质,将介质加入到层析柱中;静置,待介质自
然沉降。
3、从上端管口将另一垫片缓慢推至介质沉降平面,使介质表面保持水平状态,注意避免垫片与介质接触面滞留气泡。
4、若使用一段时间后,如果层析柱流速减慢,可按2)、3)所述步骤重新装柱。
5、注意整个操作过程无气泡。
玻璃层析柱
1、将层析柱洗净后固定;向柱中加入去离子水,排开柱子中的空气,纯水排尽以前,关闭柱子出口,在柱内保留一定高度的去离子水。
2、先将介质混匀,用导流棒沿内壁倒入介质或移液枪吸取介质,将介质加入到层析柱中;静置,待介质自然沉降。
3、从上端管口将转杆出液端缓慢推至介质沉降平面,使介质表面保持水平状态,注意避免转换杆与介质接触面间滞留气泡。
4、在使用一段时间后,如果流速减慢,可先卸下上转换杆,将介质倒出,再取出下转换接头中滤网,清洗或更换后重新装柱。
5、注意整个操作过程无气泡。
【产品性能指标】
本试剂盒具有快速、简便、高效等优点,是一种迅速偶联配体的方法,偶联效率最高可达到50mg/mL(IgG),活化基密度并且没有引入电荷,减少了非特异性吸附,共价化合牢固,不会脱落,特别适用于不耐盐的亲和系统。
独特的免封闭设计,使得合成更高效,回收配体更容易。
图:偶联配体后纯化效果
Marker 1 2 3
1:发酵液2:流窜液3:洗脱液
【注意事项】
1. 抽滤的时候不能抽干,以免影响效果。
2. 活化琼脂糖倒出来后请尽量一次性使用,不要受潮。
3. 操作越快偶联效率越高。
【参考文献】
1.Mallia A K,Hernanson GT,Krohn R I,et al. Preparation and use of a boronic acid affinity support for separation and quantitation of glysocylated hemoglobins.Anal Lett,1981,14(B8):649-661 2.Kuhn N.Activation of molecular oxygen by hemin complexes. Prikl Biokhim Mikrobiol,1982,18(4):489-98
【生产企业】
企业名称:柳州市智萃生物试剂研制中心
企业地址:柳州市雅儒路东四巷182号2楼
邮政编码:545001
销售热线:136********
技术支持:151********。