检验科生化项目操作规程—E

文件编号：WH-DSFC-JYK-E

发布日期：2018-01-01

武汉都市妇产医院检验科管理文件

生化项目操作规程目录

一血清总蛋白测定

1检验申请

单独检验项目申请：血清总蛋白测定 ( 缩写 TP)；组合项目申请：肝功能测定项目组合。临床医生根据需要提出检验申请。

2.1标本采集

2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中或采用含分离胶的真空采

2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间，如急诊标本，加上急查标识。

2.1.4 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本

2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml 的全血标本，或少于0.1ml 的血清或血浆。

2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2标本保存

2.2.1 接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。

2.2.2 标本保存时间：室温（15℃～25℃）下可稳定一周，普通冰箱中（2℃～8℃）稳定一个

月。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过 1d 的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置2℃～ 8℃冰箱内保存7d。

2.3标本采集的注意事项

2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。

2.3.2不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。

3方法原理

双缩脲法。碱性溶液中的铜离子和蛋白质或多肽分子中的肽键反应，生成紫

红色络合物，络合物在波长546nm处的吸光度和蛋白质的浓度成正比。

4试剂及其他用品

4.1试剂：双缩脲法测定总蛋白试剂盒，由迈瑞生物科技有限公司出品。

4.2试剂盒保存：保存于2-8 ℃，避光保存可稳定18个月。开盖后放于仪器的

试剂仓冰箱中至少稳定28天。

4.3试剂盒准备：液态试剂型，即开即用，无特殊准备。

4.4试剂盒主要成分

R ：

氢氧化钠 200mmol/L，

酒石酸钾钠 32 mmol/L

硫酸铜 12mmol/L ，

碘化钾 30 mmol/L ，

5校准品与校准模式

5.1校准品：由迈瑞提供的多项目校准液

5.2校准类型和校准点数目：线性模式，2个校准点。

5.3 校准周期：校准间隔时间7 天，批内校准时间90 天。但在：①更换试剂批号或出现质

控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后；均须进行一次校准。

5.4校准液重建方法：用3.00ml蒸馏水溶解，轻轻混匀，20min后即可使用。

6质控品与室内质控规则

6.1质控品采用迈瑞公司提供的定值质控血清，

6.2质控液重建方法：用 5.00ml 蒸馏水溶解，轻轻混匀，20min 后即可使用。

6.3质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。

6.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。

6.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时

纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测

7适用仪器

适用迈瑞BS系列全自动生化分析仪。

8标本检测步骤

装载试剂→ 进行校准→ 进行质控→ 输入标本检测项目→ 加载标本→ 标本测定→结果复核→ 报告。

9主要分析参数

化学原理：双缩脲法；

测定原理 : 比色法；在碱性条件下，蛋白质与铜离子生成紫蓝色复合物，显色强度和蛋白质浓度成正比；

单位： g/L ；校准模式：线性；校准周期： 14 天；校准点： 2 个；波长 : 546nm，样本量：4.0μl ；试剂： R 200μ l ；

10结果计算

总蛋白浓度（ g/L ）＝ ( A 标本 / A 标准 ) ×校准液蛋白浓度 (g/L)

A＝A546nm－ A660nm；

仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。

11检验结果的报告及范围

11.1 结果的报告

11.1.1 结果经审核确认准确无误后发出报告。

11.1.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和

审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。

11.1.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。

11.2 报告范围： 2～ 120g/L ，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠

的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。

12操作性能

12.1 精密度：血清/血浆：重复性：变异系数≤3.0%，批间差：相对偏差≤4.5%。

分析灵敏度：浓度为70 g/L时吸光度≥0.09A

试剂空白吸光度：试剂以水为空白在37±1℃，546nm波长条件下，吸光度0.3＜A。

12.2 线性范围：2～120g/L。

12.3 方法的有限性及干扰因素：甘油三酯达 11.3mmol/L 时影响小于 2%，血红蛋白达

5g/L 时影响小于 9%，胆红素达 547umol/L 时影响小于 10%。

13参考范围及医学决定水平参考范

围： 66～87 g/L 。

14临床意义

14.1 血浆总蛋白包括血浆中所有的蛋白质，其中主要有白蛋白和球蛋白两大

类。血浆蛋白主要的生理功能是维持血浆胶体渗透压和 pH 值、运送多种物质的载体、参

与凝血和抗凝血、免疫作用和营养作用等。