菊花检验标准操作规程

菊花检验标准操作规程

验准确无误。

责任人：文件制订人及所有相关人员。

内容：

1、性状

取本品适量，放入白瓷盘中，用眼观察，可见以下性状特征：

亳菊呈倒圆锥形或圆筒形，有时稍压扁呈扇形，直径1.5~3cm，离散。总苞碟状；总苞片3~4层，卵形或椭圆形，草质，黄绿色或褐绿色，外面被柔毛，边缘膜质。花托半球形，无托片或托毛。舌状花数层，雌性，位于外围，类白色，劲直，上举，纵向折缩，散生金黄色腺点；管状花多数，两性，位于中央，为舌状花所隐藏，黄色，顶端5齿裂。瘦果不发育，无冠毛。体轻，质柔润，干时松脆。气清香，味甘、微苦。

滁菊呈不规则球形或扁球形，直径1.5~2.5cm。舌状花类白色，不规则扭曲，内卷，边缘皱缩，有时可见淡褐色腺点；管状花大多隐藏。

贡菊呈扁球形或不规则球形，直径1.5~2.5cm。舌状花白色或类白色，斜升，上部反折，边缘稍内卷而皱缩，通常无腺点；管状花少，外露。

杭菊呈碟形或扁球形，直径2.5~4cm，常数个相连成片。舌状花类白色或黄色，平展或微折叠，彼此粘连，通常无腺点；管状花多数，外露。

2、鉴别

主要使用仪器：电子分析天平、紫外光灯等。

2.1薄层鉴别

取本品1g，剪碎，加石油醚20ml，超声处理10分钟，弃去石油醚，药渣挥干，加稀盐酸1ml与乙酸乙酯50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml 使溶解，作为供试品溶液。另取绿原酸对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各0.5~1μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水（1：15：1：1：2）的

上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

3、检查

主要使用仪器：电子分析天平、电热恒温干燥箱等。

3.1 水分

取供试品2-5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中厚度不超过5mm，精密称定，打开瓶盖在100~105℃干燥5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定，再在上述温度干燥1小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg 为止。根据减失的重量，按下式计算即得。

W2－W3

供试品中的含水量（%）＝──────×100％

W2－W

W 称量瓶重（g）

W2 烘前称量瓶和样品重之和（g）

W3 烘后称量瓶和样品重之和（g）

本品含水量不得过15.0%。

3.2二氧化硫残留量

取本品细粉10g置于两颈圆底烧瓶中，加水300－400ml和6mol/L盐酸10ml连接分液漏斗，并导入氮气至瓶底，连接回流冷凝管，在冷凝管上部连接导气管，将导气管插入250ml锥形瓶底部。锥形瓶内加水125ml和淀粉指示液1ml作为吸收液，置于磁力搅拌器上不断搅拌。加热圆底烧瓶内的溶液至沸，并保持微沸约2分钟后开始用0.01mol/L的碘滴定液滴定，至蓝色持续20秒不消失，记录消耗的碘滴定液的ml 数，并将滴定的结果用空白校正，记录消耗的碘滴定液ml数。按下式计算即得：供试品中二氧化硫残留量（mg/g）=(A-B)×C×0.032×1000/W

式中A为供试品消耗的滴定液的体积，ml

B为空白消耗的滴定液的体积，ml

C为滴定液的浓度，mol/L

D为供试品的重量，g

0.032为每1ml碘滴定液mol/L相当二氧化硫的重量，g

本品二氧化硫量不得过150mg/kg。

4、含量测定

主要使用仪器：电子分析天平、高效液相色谱仪等。

照高效液相色谱法（附录ⅥD）测定。

3.1色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，按下表进行梯度洗脱；检测波长为348nm。理论板数按3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸峰计算应不低于8000。

时间（分钟）流动相A（%）流动相B(%)

0～11 10→18 90→82

11～30 18→20 82→80

30～40 20 80

3.2对照品溶液的制备取绿原酸对照品、木犀草苷对照品、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加70％甲醇制成每1ml 含绿原酸35µg，木犀草苷25µg，3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸80µg的混合溶液，即得（10℃以下保存）。

3.3供试品溶液的制备取本品粉末（过一号筛）约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇25 ml，密塞，称定重量，超声处理（功率300W，频率45kHz）40分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

3.4测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品以干燥品按下式计算即得：

A x×C R×V x

供试品的含量（％）＝────────——×100％

A R×G×（1－W）×103

A x 供试品的峰面积或峰高。

V x 供试品的体积(ml)

C R 对照品的浓度

A R 对照品的峰面积或峰高

G 供试品的重量(g)

W 供试品的含水量(%)

本品按干燥品计算，含绿原酸（C16H18O9）不得少于0.20％，含木犀草苷（C21H20O11）

不得少于0.08％，含3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸（C

25H

24

O

12

）不得少于0.70％。