细菌培养检测技术
检验科常见感染性疾病检测方法
检验科常见感染性疾病检测方法随着人类对疾病认识的不断深入和医学技术的迅速发展，感染性疾病的准确检测变得越来越重要。
检验科作为医学领域中的重要环节，承担着感染性疾病的检测任务。
本文将介绍检验科常见的感染性疾病检测方法，包括培养法、特异抗原检测法、核酸扩增技术等。
一、培养法培养法是最传统也是最常用的感染性疾病检测方法之一。
它通过将患者样本（如血液、尿液、呼吸道分泌物等）接种到适宜的培养基中，利用细菌或病毒的生长繁殖来进行检测。
根据不同的疾病，可采用不同的培养基，如血液琼脂、麦康奈尔琼脂、肉汤等。
二、特异抗原检测法特异抗原检测法是一种基于免疫学原理的感染性疾病检测方法。
其通过检测血清或体液中的特异抗原来确认感染的病原体。
常见的特异抗原检测方法有酶联免疫吸附试验（ELISA）、放射免疫测定法（RIA）等。
这些方法具有高度敏感性和特异性，可以快速准确地检测出感染性疾病的病原体。
三、核酸扩增技术随着分子生物学的发展，核酸扩增技术在感染性疾病的检测中得到广泛应用。
其中最常用的技术是聚合酶链反应（PCR）。
PCR能够通过扩增病原体的核酸片段来快速检测感染性疾病。
此外，还有实时荧光定量PCR（qPCR）、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）等技术，能够提高检测的敏感性和准确性。
四、免疫荧光技术免疫荧光技术是一种通过荧光标记的抗体来检测感染性疾病的方法。
它可用于直接检测病原体抗原或抗体，具有高度特异性和灵敏度。
免疫荧光技术可以应用于细胞或组织的检测，常见的方法有间接免疫荧光法和直接免疫荧光法。
五、质谱技术质谱技术是指利用质谱仪对样本中的分子进行分析和检测的方法。
在感染性疾病的检测中，质谱技术可以通过分析样本中的代谢产物或微生物群落来判断感染情况。
其中质谱仪分为质子化飞行时间质谱仪（TOF-MS）和气相色谱质谱仪（GC-MS）等。
质谱技术具有高分辨率、高敏感度和高特异性的优点，能够提供详细的代谢和微生物信息。
综上所述，感染性疾病的准确检测对于临床诊断和治疗至关重要。
细菌的一般检验方法
细菌的一般检验方法
细菌是一类微生物，它们存在于自然界的各个角落，有些对人类健康有益，有些则可能引发疾病。
因此，对细菌的检验是非常重要的。
下面将介绍细菌的一般检验方法。
首先，细菌的检验可以通过培养方法进行。
这是一种常见的检验方法，通过将样本放置在适当的培养基上，利用细菌的生长特性来进行检验。
培养方法可以帮助我们了解细菌的种类和数量，为后续的研究和治疗提供重要信息。
其次，细菌的检验还可以通过显微镜观察进行。
将样本放置在显微镜下，通过放大镜头观察细菌的形态和结构特征，可以帮助我们确定细菌的种类和数量。
这种方法对于一些特定的细菌检验非常有效，能够提供直观的信息。
另外，分子生物学方法也是一种常用的细菌检验方法。
这种方法利用PCR等技术，通过检测细菌的DNA或RNA来进行检验。
分子生物学方法具有高度的特异性和灵敏度，能够快速准确地确定细菌的种类和数量，对于一些特殊的细菌检验非常重要。
除了上述方法，还可以通过生化方法进行细菌的检验。
这种方
法通过检测细菌的代谢产物或酶活性来进行检验，可以帮助我们了
解细菌的生理特性和代谢途径，为细菌的鉴定和研究提供重要依据。
综上所述，细菌的检验方法多种多样，可以根据需要选择合适
的方法进行检验。
这些方法在细菌学研究、临床诊断和食品安全等
领域都具有重要意义，为我们认识细菌、预防疾病和保障健康提供
了重要的技术支持。
希望本文介绍的细菌的一般检验方法对您有所
帮助。
病原学检测方法
病原学检测方法摘要病原学检测方法是用于检测疾病的致病因子，包括病毒、细菌、真菌和寄生虫等。
本文将介绍几种常见的病原学检测方法，包括传统的培养方法、分子生物学方法和免疫学方法。
这些方法可以用于早期疾病的诊断、治疗和预防控制，对于保障公共卫生具有重要意义。
1. 传统培养方法传统培养方法是最早期也是最常见的病原学检测方法之一。
其基本原理是将患者样本（如血液、尿液、组织样本等）在适当的培养基上进行培养。
通过观察培养后的菌落形态、生长速度和产生的代谢产物等特征，可以鉴定病原体的种类。
传统培养方法主要适用于细菌和真菌的检测。
对于细菌的培养，常见的培养基有血琼脂、马铃薯蔗糖琼脂等。
而对于真菌的培养，可以使用麦康凯琼脂等特殊培养基。
然而，该方法存在一定的局限性，一方面，细菌和真菌的培养需要较长的时间，一般需要48小时或更长时间才能获得结果；另一方面，该方法无法对病毒和寄生虫进行直接检测。
2. 分子生物学方法随着分子生物学技术的发展，分子生物学方法成为病原学检测的重要手段。
其中最常用的是聚合酶链反应（PCR）技术。
PCR技术通过扩增特定的DNA或RNA序列，从而对病原体进行快速、精准的检测。
PCR技术不仅可以应用于病原体的检测，还可以用于鉴定病原体的菌株和基因型。
此外，PCR技术还可以利用定量PCR（qPCR）来确定病原体的拷贝数目，从而评估其感染程度。
近年来，PCR技术也得到了不断的改进和创新，如实时荧光PCR（RT-PCR）、逆转录PCR（RT-PCR）等，进一步提高了病原学检测的准确性和灵敏度。
除了PCR技术，还有其他分子生物学方法可用于病原学检测，如核酸杂交、DNA测序、基因芯片等。
这些方法的广泛应用推动了病原学检测技术的快速发展。
3. 免疫学方法免疫学方法是利用人体免疫系统对病原体的特异性识别和应答来进行病原学检测。
常见的免疫学方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光技术（IFA）、流式细胞术等。
临床细菌培养鉴定流程及报告
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一、医学微生物实验室基本条件及设备
▪ 细菌实验室 ▪ 无菌实验室 ▪ 基本设备
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细菌实验室
细菌实验室是细菌检验的场所，在此完 成标本接种、孵育、分离、细菌鉴定和 药物敏感试验。所以细菌实验室必须具 备空气及桌面消毒的条件，确保室内相 对无菌。如：足够强度的紫外线灯管， 耐酸碱的桌面等。
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⒋结果分析及报告
⑴结果分析 痰及下呼吸道分泌物标本易受到 定植在上呼吸道的正常菌群污染。当从送检标 本中分离出多种细菌时，确定那一种分离细菌 是引起下呼吸道感染的病原菌，这对临床诊断 与治疗至关重要。当在同一培养基上分离出1 种以上的病原菌（复合菌）时，要结合患者的 临床症状，涂片染色镜检情况及患者近期细菌 分离培养结果等，综合判断所分离的多种细菌 中那一种细菌可能为致病菌，通常多为优势菌。 当分离的优势菌与涂片染色镜检结果一致时， 要做药敏试验。若分离培养结果与涂片染色镜 检结果不一致时，可不进行药敏试验，以免误 导，仅报告分离鉴定结果，由临床大夫定夺是 否重试。
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⑶标本运送 采血后应立即送检，如不能立即 送检，需室温保存或置35～37℃孵箱中，切勿 冷藏。自动化连续检测系统虽有允许延迟上机 检测微生物生长的原理，还是应该尽量减少延 迟上机时间。
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3.分离培养
⑴血培养操作过程中应注意生物安全防护。
⑵血培养瓶处理 传统手工法血培养每天至少检 查一次，注意微生物生长可视信号，应无菌抽 取培养物，涂片革兰氏染色，选择合适的培养 基转种，同时做药敏试验。
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致病菌能够破坏宿主的防御系统，其致 病机理是细菌产生毒素和对人体组织的 侵袭性，值得注意的是有些细菌既具有 侵袭性又能产生毒素。抗生素治疗可以 破坏宿主的正常菌群，导致某些细菌如 艰难梭菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单 胞菌和念珠菌等过度生长，也可引起腹 泻。沙门氏菌、志贺氏菌、气单胞菌和 邻单胞菌应作为实验室常规培养的主要 腹泻病原菌。
细菌检验基本技术难培养细菌的分离
２．梅毒螺旋体分离
梅毒螺旋体在人工培养基上不易生长，可接种在兔睾丸或眼前房内繁殖。目前研究表明，梅毒螺旋体并不是严格的厌氧菌，在氧浓度为１．５％条件下，接种到含有棉尾兔上皮细胞的组织培养基上可有一定程度繁殖，其最适合培养温度为３４～３５℃。
（五）立克次体分离
立克次体是专性细胞内寄生菌，人工培养基不生长，必须通过动物及细胞分离。
细菌检验基本技术：难培养细菌的分离
在细菌分离中经常会遇到各种各样的难培养细菌，主要包括以下几种类型：
营养要求高（或培养基中需要添加特定成分）：这类细菌在一般的增菌培养基和普通平板（包括血平板）中往往不能被分离成功，如支原体的培养等。
需要特殊的温度、湿度、ｐＨ和气体条件：许多细菌（如螺杆菌属的细菌和弯曲菌属的细菌等）只能在微氧环境下生长，有些（如类杆菌属和梭杆菌属的细菌等）则只能在厌氧环境中生长，普通需氧培养条件下无法分离成功。
生长特别缓慢：在１８～２４小时内无大量细菌生长繁殖，也无法在短时间内形成肉眼可见的菌落，需要数天或数周的培养时间，在从临床样本中分离此类细菌时，培养过程中防止杂菌的污染和过度生长的难度较大。
对于这种类型的细菌，常需要特殊的分离手段。
（一）厌氧菌分离
厌氧菌的培养必须在厌氧培养箱中隔绝氧气进行，必要时充以惰性气体。必须在简陋条件下进行时，可利用烛缸：将培养基置于一个可密闭的容器内，并在容器中点燃一支蜡烛，密闭，并置培养箱中培养。燃烧的蜡烛耗尽容器中的氧，并产生二氧化碳，以满足厌氧细菌生长的条件。
（三）Ｌ型分离
Ｌ型为细胞壁缺损的细菌，许多致病细菌都能转化为Ｌ型，由于不能在普通培养基上生长而难于分离。在普通的渗透压下，细胞壁缺损的细菌会因“胀破”死亡，因而，分离Ｌ型的培养基必须具有高渗透压。通常使用琼脂浓度０．５以下的半固体培养基，加马血清及１０％蔗糖以维持渗透压。在这种培养基上，细菌的Ｌ型可生长成“油煎蛋”样的细小菌落。有些Ｌ型的细菌可以恢复，恢复后即可按正常方法培养。
院感细菌培养
院感细菌培养院感细菌培养是一种常见的实验技术，用于检测医疗机构内的细菌感染情况。
本文将详细介绍院感细菌培养的标准格式，包括实验步骤、所需材料、操作注意事项以及结果分析等内容。
一、实验步骤1. 准备工作：清洗培养皿、试管和培养基，并消毒实验台面和操作工具。
2. 样本采集：从医疗机构内的患者或者环境中采集样本，如血液、尿液、呼吸道分泌物等。
3. 样本处理：将采集到的样本进行初步处理，如离心、过滤或者稀释等，以获得合适的样本浓度。
4. 培养基接种：将处理后的样本分别接种在适当的培养基上，如血琼脂培养基、巴氏培养基等。
5. 培养条件：将接种后的培养基置于适当的培养箱中，控制温度、湿度和氧气含量等条件，促进细菌的生长。
6. 培养时间：根据不同的细菌种类，培养时间普通为24-48小时，有些特殊菌种可能需要更长期。
7. 细菌分离：观察培养基上的菌落形态，选择单一的菌落进行分离，避免混杂菌的干扰。
8. 细菌鉴定：通过形态学、生理生化特性和份子生物学方法对分离得到的菌株进行鉴定，确定其种属和品系。
二、所需材料1. 培养皿：用于接种和培养细菌的平板，常见的有Petri培养皿和巴氏培养皿。
2. 试管：用于样本的采集和处理，也可用于培养基的制备。
3. 培养基：提供细菌生长所需的营养物质，常见的有血琼脂培养基、巴氏培养基等。
4. 培养箱：提供适当的温度、湿度和氧气含量等条件，促进细菌的生长。
5. 显微镜：用于观察细菌的形态特征，配合染色技术进行细菌鉴定。
三、操作注意事项1. 严格遵守无菌操作规范，避免外源菌的污染。
2. 样本采集时，使用无菌采样器具，并确保采集到的样本能够代表实际情况。
3. 培养基的制备要准确，严格按照配方和操作步骤进行。
4. 培养箱的温度、湿度和氧气含量等条件要根据细菌种类进行调整，以促进细菌的生长。
5. 在培养过程中，定期观察培养基上的菌落形态，并及时记录和分离单一菌落。
6. 细菌鉴定时，应结合形态学、生理生化特性和份子生物学方法进行，以确保鉴定结果的准确性。
微生物学--细菌检验基本技术
• 常用的指示剂：酚红、中性红、溴麝香草酚蓝、溴甲酚紫、 甲基红等
一、培养基
（二）培养基分类
1．按成分分类
• 合成培养基：是人工合成，组分明确，都是无机盐和化学 纯物质组成的培养基 • 天然培养基：也称复合培养基。是指含有化学成分不完全 明了或各批物质的成分很难一致的天然物质所组成的培养基， 如蛋白胨、牛肉膏、肉浸液、鸡蛋、马铃薯等。细菌检验常 用
一、培养基
6．灭菌 • 高压蒸汽灭菌
• 无糖：103．4kPa
121．3℃维持
15~20min
• 有糖： 68．95kPa 115℃ 维持
15min
• 间歇蒸汽灭菌法：血清、牛乳、鸡蛋 • 血清凝固器灭菌
一、培养基
7．质量检验 • 无菌试验：将制好的培养基在35℃温箱培养过夜，判定是否 灭菌合格 • 效果检查：按不同的培养要求，接种相应菌种，观察细菌的 生长、菌落形态、色素、溶血及生化反应等特征，判断培养基 是否符合要求
（2）结果 抗酸性细菌和非抗酸性细菌
三、细菌染色标本的检查-革兰染色
三、细菌染色标本的检查
•未脱色细菌呈红色为抗酸性细菌 •脱色经复染呈蓝色为非抗酸性细菌
三、细菌染色标本的检查
3．其他染色方法
（1）鞭毛染色 （2）荚膜染色
第二节 细菌的培养与分离技术
重点提示
• 培养基的主要成分及作用 • 培养基的种类 • 培养基制备的基本程序 • 细菌接种与培养方法 • 细菌在培养基中的生长现象
2020/2/28
7
常用诊断流程
• 表解法 区别比较复杂细菌，将各种细菌及其多 种
特性列成矩阵表格，使相互区别点十分明显，便于分析 比较
•
肠杆菌科初步分属
微生物检验的基本操作技术
微生物检验的基本操作技术一、无菌操作技术1、定义是指在执行实验过程中，防止一切微生物侵入机体和保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作技术和管理方法；无菌操作技术是微生物实验的基本技术，是保证微生物实验准确和顺利完成的重要环节。
2、内容无菌操作技术主要包括两方面：1）创造无菌的培养环境。
包括提供密闭的培养容器、培养容器的灭菌、培养基的灭菌等；2）在操作和培养过程中防止一切其它微生物的侵入的措施。
包括紫外线杀菌、甲醛熏蒸、超净台的消毒与检测、操作工具、器皿灭菌、操作方法等。
3、无菌操作原则1）在执行无菌操作时，必须明确物品的无菌区和非无菌区，接种时必须穿工作服、戴工作帽，应在进无菌室前用肥皂洗手，然后用75%酒精棉球将手擦干净；2）在操作前20～30分钟要先启动超净台和紫外灯，进行接种所用的吸管、平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使用完的器皿，不能放置后再使用，金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼3次后使用。
严禁用手直接拿无菌物品，如瓶塞等，而必须用消毒的钳、镊子等；3）从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位，使用吸管接种于试管或平皿时，吸管尖不能触及试管或平皿边；4）接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作，接种细菌或样品时，吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒；5）接种环或接种针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝，必须时还要烧到环和针与杆的连接处；6）吸管吸取菌液或样品时，应用相应的橡皮头吸取，不得直接用口吸。
倾倒平板应在超净台内操作，并且在开启和加盖瓶塞时需反复用酒精灯烧。
二、无菌操作的环境要求1、无菌室（1）无菌室的结构：更衣间、缓冲间、操作间；（2）无菌室的消毒和防污染•每日（使用前）紫外线照射（0.5~1小时）；•每月用新洁尔灭擦拭地面和墙壁一次的方式进行消毒；•每季度用甲醛、乳酸、过氧乙酸熏蒸（2小时），特殊情况下可增加熏蒸频次。
（3）无菌室使用要求①无菌室内应保持清洁，工作后用2%-3%煤酚皂溶液消毒，拭擦工作台面，不得存放与实验无关的物品；②无菌室使用前后应将门关紧，打开紫外线，如采用室内悬吊紫外灯消毒时，需30W紫外灯，距离在1.0m处，照射时间不少于30min，使用紫外灯，应注意不得直接在紫外线下操作，以免引起损伤，灯管每隔两周需用酒精棉球轻轻拭擦，除去上面灰尘和油垢，以减少紫外线穿透的影响；③处理和接种食品标本时，进入无菌室操作，不得随意出入，如需要传递物品，可通过小窗传递。
病原微生物中细菌常见检测方法有哪些
病原微生物中细菌常见检测方法有哪些病原微生物种类繁多，变异迅速，快速鉴定病原微生物的检验技术也在不断发展前进着。
目前，应用比较广泛的病原微生物检测方法主要有直接涂片镜检、分离培养、生化反应、血清学反应、核酸分子杂交、基因芯片、多聚酶链反应等，该文对这些检测技术进展做一综述。
对人和动物具有致病性的微生物称为病原微生物，又称病原体，有病毒、细菌、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体、真菌、放线菌、朊粒等。
这些病原微生物可引起感染、过敏、肿瘤、痴呆等疾病，也是危害食品安全的主要因素之一。
近年来出现的SARS、高致病性禽流感、西尼罗病毒感染等疾病的传染性极强，往往造成世界性大流行，因此对病原体的检测必须做到快速、准确。
常规病原学检测方法操作繁琐，检测周期长，而且对操作人员技术水平要求比较高。
随着医学微生物学研究技术的不断发展，病原学诊断已不再局限于病原体水平，深入到分子水平、基因水平的检测手段不断出现并被应用于临床和实验室J。
核酸分子杂交技术、PCR技术、基因芯片技术等检测方法，自动化程度高，快速省时、无污染、结果精确，可以准确灵敏地鉴定病原微生物。
1传统的病原微生物的检测方法传统的病原微生物学实验室检查以染色、培养、生化鉴定等为主，将标本直接涂片染色镜检和接种在培养基上进行分离培养是对细菌或真菌感染性疾病进行病原学诊断的常用方法。
1．1直接涂片镜检病原微生物体形体积微小，大多无色半透明状，将其染色后可借助显微镜观察其大小、形态、排列等。
直接涂片染色镜检简便快速，对那些具有特殊形态的病原微生物感染仍然适用，例如淋球菌感染、结核分枝杆菌、螺旋体感染等的早期初步诊断。
直接涂片镜检不需要特殊的仪器和设备，在基层实验室里仍然是十分重要的病原微生物检测手段。
1．2分离培养与生化反应分离培养主要用于临床标本(如血液、痰、粪便等)或培养物中有多种细菌时对某一种细菌的分离。
细菌的生长繁殖需要一定时间，检测周期较长，不能同时处理批量样本。
微生物菌种分离和鉴定技术
微生物菌种鉴定技术
表征（表型）特征 形态特征 生理和代谢特征 生态特征
遗传（基因型）特征 蛋白质比较 核酸碱基组成 核酸序列
分子标尺
多相鉴定技术 Polyphasic Identification
新型显色培养基：
利用微生物自身代谢产生的酶与相应显色底物反应显色的原理来检测微生物 的培养基 。
微生物快速分离、计数方法
Petrifilm Plate (3M)
微生物快速分离、计数方法
3M Petrifilm Plate
Aerobic Count Plate Coliform Count Plate Rapid Coliform Count Plate E. coli /Coliform Count Plate Enterbacteriaceae Count Plate Yeast and Mold Count Plate Staph. aureus Express Count Plate Environmental Listeria Plate
单细胞（孢子）分离
选择培养基分离
传统选择性培养基
血平板：适于各类细菌的生长，一般细菌检验标本的分离，都应接种此平板。 巧克力血平板：其中含有V和X因子，适于接种疑有嗜血杆菌、奈瑟菌等的标
本。 中国蓝平板或伊红美蓝平板：可抑制革兰阳性细菌，有选择地促进G-菌生长，
是较好的弱选择性培养基。 麦康凯平板：具中等强度选择性，抑菌力略强，有较少革兰阴性菌不生长。 SS琼脂：有较强的抑菌力，用于志贺菌和沙门菌的分离。 碱性琼脂：用于从粪便中分离霍乱弧菌及其它弧菌。 血液增菌培养基：用于从血液、骨髓中分离常见病原菌。 营养肉汤：用于标本及各类细菌的增菌
(完整版)细菌培养技术
第二节细菌培养检测技术节概述细菌的培养技术是微生物实验中基本技术之一。
大多数细菌均可用人工方法培养，只有将细菌培养出来才能对它进行研究和鉴定知识点导航一.培养基的种类培养基（culture medium）是细菌生长繁殖所需要的各种营养物质的人工制品。
适宜的培养基能使细菌在体外迅速生长繁殖，便于对细菌进行分离和鉴别。
可分为基础培养基、营养培养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧菌用培养基和特殊培养基。
（一）基础培养基只含有细菌生长所需的最基本营养成分，应用最广泛，为制备多种培养基的基础，常见的有肉汤培养基、琼脂培养基。
（二）营养培养基在基础培养基中加入葡萄糖、血液、血清、腹水或酵母浸膏等有机物，可供营养要求较高的细菌生长需要或增菌用。
如结核分枝杆菌培养基中添加鸡蛋、马铃薯、甘油等。
（三）选择培养基利用不同种类细菌对化学物质的敏感性不同而制成，使分离菌大量繁殖而抑制其它细菌生长的培养基。
培养基中含有的抑制剂能抑制非目的菌生长或使其生长不佳，有利于目的菌的检出和识别。
选择培养基多为固体平板，用于从标本中分离某些特定的细菌。
（四）鉴别培养基培养基中加有某些特定成分，如糖、醇类和指示剂等，用于检查细菌的各种生化反应，以资鉴别和鉴定细菌。
（五）厌氧菌用培养基专性厌氧菌须在无氧条件下才能生长，故需在培养基中加入半胱氨酸、硫乙醇酸钠等还原剂，降低培养基中氧化还原电势，并应与外界空气隔绝，使培养基本身为无氧的环境。
（六）特殊培养基为某些需要在特殊条件下才能生长的细菌培养之用。
如高渗盐增菌培养基、高渗糖增菌培养基、改良Kagan氏培养基等。
二.培养基的制备制备一般培养基的主要过程基本相似，包括调配、溶化、调整pH、过滤、分装、灭菌及检定和保存。
三.细菌检验室的注意事项及无菌技术细菌培养必须随时为防止污染和病原菌的扩散而进行操作，即无菌操作。
细菌检验室的注意事项如下：1．细菌的培养应在接种罩或无菌室内进行。
有条件的实验室可在超净工作台内进行。
SRB细菌培养检测操作规程
五、 细菌生长的鉴别
瓶中液体变黑或有黑色沉淀，即表示有硫酸盐还原菌。
能源发展采油工程技术服务公司 ISO9001 质量管理体系
化学技术服务操作规程汇编
SRB 细菌培养检测操作规程
编号 批准人
发布日期 生效日期
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六、 菌量的计算 根据下列表可计算出细菌数目的多少:
表一、细菌菌量计数示例表：
能源发展采油工程技术服务公司 ISO9001 质量管理体系
化学技术服务操作规程汇编
SRB 细菌培养检测操作规程
编号 批准人
发布日期 生效日期
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一、 检测原理；
SRB 细菌培养检测操作规程
二次重复法
采用绝种稀释法，即将预测定的水样用无菌注射器逐级注射到测试瓶中，进行接种稀释，
在实验室中进行培养。根据细菌瓶阳性反应和稀释的倍数，计算出水样中细菌的数目。
震荡。
4， 用另一支无菌注射器从一号瓶内取 1ml 水样，注入到二号瓶内，充分震荡。 5， 再更换一支无菌注射器，从二号瓶内取 1ml 水样，注入到三号瓶内，充分震荡。 6， 依次类推，一直稀释到最后一瓶为止。根据细菌含量确定稀释瓶数，一般稀释到 7
号瓶。
7， 把上述测试瓶放入到恒温培养箱中，培养温度控制在现场水温正负 1℃范围内，两周 后读数。
实验室接种。
5， 采样后随即贴上标签，标签上应注明取样日期，时间，地点，取样条件和取样人。 四、 操作步骤
采用二次重复法。
1， 根据水样中 SRB 的估计浓度，可以选择一组合适数目的细菌瓶。首先将培养瓶排成 一组，并依次编上序号。
2， 将细菌瓶的瓶塞保护膜揭去，并用 70%的乙醇溶液消毒。 3， 按照准备工作的第 3 条操作后，用无菌注射器取 1ml 水样，注入到一号瓶内，充分
尿细菌培养注意事项与操作步骤
尿细菌培养注意事项与操作步骤尿细菌培养是一项常用的实验室技术，用于检测尿液中是否存在细菌感染。
正确的注意事项和操作步骤对于确保实验结果的准确性和可靠性至关重要。
本文将从深度和广度两个标准对尿细菌培养注意事项和操作步骤进行评估，并提供有价值的、高质量的文章。
深度评估：1. 无菌操作环境：在进行尿细菌培养之前，必须创建一个无菌操作环境，以避免外界细菌对实验结果的干扰。
确保实验台面、培养皿和试管都经过消毒处理，并注意随手消毒。
2. 样本采集：正确的尿液采样方式至关重要。
建议患者在清洁私处后，收集中段尿，避免尿道口或盆腔区域的细菌和皮肤表面的细菌进入尿液中。
3. 样本储存和运输：采集到的尿样应尽快送至实验室进行培养，以避免样本中细菌数量的变化。
如果无法立即送达实验室，则应在常温下储存，并保持样本的稳定性。
4. 培养基选择：根据不同的需求，选择合适的培养基进行尿细菌培养。
在培养基的选择上，应综合考虑培养菌种的特性、培养时间和方法的要求等因素。
广度评估：1. 前处理：将尿样进行前处理，可以有效去除潜伏细菌。
一般常用的方法有离心沉淀、过滤和盐析等。
2. 培养方法：尿细菌培养的常见方法包括表面培养和加入培养基中培养。
前者的操作简便，后者则可避免因培养方法导致的菌落数量变化。
3. 孵育条件：不同的细菌对温度和氧气需求有所不同，因此根据培养菌种的特性进行合适的温度和氧气条件调节。
4. 培养时间：尿液中的细菌通常需要较长时间才能生长到可见的水平。
在进行尿细菌培养时，需要根据特定菌种的培养时间来控制培养的持续时间。
总结和回顾：尿细菌培养是一种常见的实验室技术，它可以用于检测尿液中是否存在细菌感染。
为确保实验结果的准确性和可靠性，我们需要注意以下几个方面：1. 创建无菌操作环境，确保实验的净化和消毒。
2. 采集尿液样本时，注意正确的采样方法，避免外界细菌污染。
3. 在样本储存和运输过程中，注意保持尿样的稳定性，避免细菌数量的变化。
一般细菌培养及鉴定和无菌体液细菌培养鉴定-概述说明以及解释
一般细菌培养及鉴定和无菌体液细菌培养鉴定-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述部分主要介绍了本文的研究内容和背景。
文章将分别探讨一般细菌培养及鉴定和无菌体液细菌培养的鉴定技术。
在当今医学领域，对于细菌的培养和鉴定具有重要意义。
通过培养和鉴定细菌，可以快速准确地诊断疾病，指导临床治疗，并提供有效的预防和控制措施。
在一般细菌培养及鉴定方面，我们将关注培养基和条件的选择，以及常用的鉴定方法。
通过选择适当的培养基和提供合适的培养条件，可以为细菌的生长和繁殖提供一个良好的环境。
同时，我们将介绍一些常用的鉴定方法，如形态学观察、生理生化试验和分子生物学技术等，来确定细菌的种类和特征。
在无菌体液细菌培养鉴定方面，我们将重点讨论采样技术、培养方法和鉴定技术。
无菌体液包括血液、尿液、脑脊液等，对于这些细菌的培养和鉴定，需要特殊的操作和技术。
我们将介绍一些常用的采样技术，如血液培养和尿液培养的方法，并探讨细菌培养和鉴定时可能遇到的问题和解决方法。
通过本文的研究，我们希望能够提供一些实用的方法和技术，为医学领域中的细菌培养和鉴定工作提供一些指导和参考。
进一步，我们对于临床疾病的诊断和治疗、疾病预防和控制等方面也可以提供一些支持和帮助。
1.2 文章结构本文将会按以下结构进行内容展开：引言部分将对细菌培养及鉴定以及无菌体液细菌培养鉴定的概述进行介绍，明确本文的研究背景和意义。
在正文中，将会详细探讨一般细菌培养及鉴定和无菌体液细菌培养鉴定这两个主题。
首先，在2.1节，我们将介绍一般细菌培养及鉴定的相关内容。
其中，2.1.1小节将讨论培养基和条件，包括常见的培养基种类和其配制方法，以及细菌培养的温度、湿度和氧气要求等条件。
2.1.2小节将介绍一般细菌的鉴定方法，如形态特征观察、生理生化试验和分子生物学技术等。
接下来，在2.2节，我们将关注无菌体液细菌培养鉴定。
2.2.1小节将讨论采样技术，包括无菌采样的操作步骤和常用的采样工具。
细菌检测方法
细菌检测方法细菌是一类微生物，它们存在于自然界的各个角落，有些对人类有益，有些则可能对人体健康造成威胁。
因此，对细菌的检测就显得尤为重要。
本文将介绍几种常见的细菌检测方法，希望能够为相关领域的研究人员和实验人员提供一些参考。
首先，常见的细菌检测方法之一是培养法。
这是一种传统的方法，通过将样品放置在适当的培养基上，利用适当的温度、湿度和气氛条件，使细菌在培养基上繁殖生长，然后观察和鉴定细菌的种类和数量。
培养法的优点是可以对细菌进行鉴定和分离，但缺点是需要较长的时间，且对于一些难以培养的细菌可能无法检测出来。
其次，PCR法也是一种常用的细菌检测方法。
PCR法利用聚合酶链式反应技术，通过扩增细菌DNA片段来检测细菌的存在和种类。
PCR法具有高灵敏度和特异性，能够快速准确地检测出细菌的存在，但需要特定的实验条件和设备，并且对样品的处理和提取要求较高。
另外，免疫学方法也是一种常见的细菌检测方法。
免疫学方法利用抗体与特定细菌抗原的结合来检测细菌的存在和种类。
这种方法具有高度的特异性和灵敏度，可以快速准确地检测出细菌的存在，但需要具备一定的实验技术和专业知识。
最后，质谱法也是一种先进的细菌检测方法。
质谱法利用质谱仪对样品中的细菌进行分析和鉴定，能够快速准确地检测出细菌的种类和数量，具有高度的特异性和灵敏度，但需要较高的设备和技术要求。
综上所述，针对不同的实验目的和要求，可以选择不同的细菌检测方法。
在实际应用中，可以根据实验条件、样品特性和实验目的综合考虑，选择合适的方法进行细菌检测。
希望本文介绍的内容能够对相关领域的研究人员和实验人员提供一些帮助和参考，促进细菌检测技术的发展和进步。
常见的微生物检测方法
常见的微生物检测方法微生物检测是生物科技领域中非常重要的一个环节，广泛应用于食品、药品、环境等领域。
随着科技的发展，微生物检测的方法也在不断进步，从最初的定性检测到现在的高通量、高精度检测，为各个行业提供了强有力的支持。
下面，我们将介绍几种常见的微生物检测方法。
1、显微镜直接观察法显微镜直接观察法是一种通过显微镜直接观察样本中微生物形态和数量的方法。
该方法操作简单，但需要专业的显微镜操作技能。
显微镜直接观察法可用于食品、药品、化妆品等领域的微生物检测。
2、培养法培养法是一种将样本接种到培养基上，通过培养基提供营养物质和适宜的生长环境，使微生物生长繁殖的方法。
培养法可对样本中的微生物进行计数和鉴定，是一种广泛应用于食品、药品、环境等领域的方法。
3、免疫学方法免疫学方法是利用抗原-抗体反应的特异性，对样本中的微生物进行检测和鉴定的一种方法。
免疫学方法具有快速、灵敏度高、特异性强的特点，但可能会因为交叉反应而出现假阳性结果。
免疫学方法广泛应用于食品、药品、环境等领域。
4、分子生物学方法分子生物学方法是一种利用DNA或RNA的特异性序列进行检测和鉴定微生物的方法。
该方法具有高灵敏度、高特异性、高精度等特点，可对微生物进行亚型分析，适用于食品、药品、环境等领域的微生物检测。
5、质谱技术质谱技术是一种利用离子源将微生物的蛋白质或代谢物电离，然后通过质量分析器将离子按质量/电荷比分离，由离子检测器进行检测的方法。
质谱技术具有高灵敏度、高分辨率和高重现性的特点，可用于食品、药品等领域的微生物检测。
总结：微生物检测是各个领域中非常重要的一个环节，不同的检测方法具有不同的特点和应用范围。
在实际应用中，应根据具体的情况选择合适的检测方法，以保证检测结果的准确性和可靠性。
随着科技的不断进步，相信未来还会有更多新的微生物检测方法出现，为各个领域的发展提供更加强有力的支持。
微生物快速检测方法在食品工业中，微生物的快速检测对于保障食品安全和防止疾病传播至关重要。
家禽养殖中的病原微生物检测技术
家禽养殖中的病原微生物检测技术家禽养殖是农业领域的重要组成部分，然而，病原微生物的存在给养殖业带来了严重的威胁。
为了保障禽畜健康，确保食品安全，病原微生物检测技术在家禽养殖中得到了广泛应用。
本文将介绍家禽养殖中常用的病原微生物检测技术及其应用。
一、细菌检测技术细菌是家禽疾病的主要致病原因，因此，细菌检测技术非常重要。
常用的细菌检测技术包括培养法、PCR法、荧光定量PCR法等。
1. 培养法培养法是一种传统的细菌检测方法，通过将样品在富含营养成分的培养基上进行培养，来观察和鉴定细菌的生长情况。
这种方法具有成本低、操作简单等优点，但是缺点是需要较长的培养周期，并且对一些难以培养的细菌无法检测到。
2. PCR法PCR法是一种基因扩增技术，通过引物特异性扩增目标细菌的DNA片段，并通过荧光信号来检测细菌的存在。
PCR法具有高灵敏度、特异性强的优点，可以在短时间内进行检测，但是对于复杂的样品处理和设备要求较高。
3. 荧光定量PCR法荧光定量PCR法是PCR技术的改进，通过添加荧光探针并利用荧光信号进行定量检测。
这种方法不仅能够检测到细菌的存在，还能够确定其数量，对于病原微生物的追踪和监测非常有帮助。
二、病毒检测技术除了细菌外，病毒也是家禽疾病的重要致病因素。
针对病毒的检测技术主要包括ELISA法、PCR法和免疫荧光法等。
1. ELISA法ELISA法是一种基于抗原抗体反应的检测方法，通过将样品与特异性的抗体结合，再添加酶标记的二抗，通过酶的反应来检测病毒的存在。
这种方法具有高灵敏度、简单快捷的特点，适用于病毒的筛查和监测。
2. PCR法PCR法在病毒检测中同样发挥了重要作用，通过扩增病毒的核酸片段来检测病毒的存在。
PCR法对病毒的检测特异性强，灵敏度高，可以在短时间内进行检测。
3. 免疫荧光法免疫荧光法是一种结合了免疫学和荧光技术的检测方法，通过将样品与特异性的抗体结合，再添加荧光标记的二抗，并通过荧光显微镜观察荧光信号来检测病毒的存在。
大肠杆菌检测方法
大肠杆菌检测方法大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的细菌，存在于人和动物的肠道中，同时也是一种重要的致病菌。
因此，对大肠杆菌的检测至关重要，可以有效预防食品安全问题和疾病传播。
下面将介绍几种常见的大肠杆菌检测方法。
首先，传统的大肠杆菌检测方法包括培养法和生化法。
培养法是将样品在含有营养物质的培养基上培养，利用大肠杆菌的特定生长条件，观察培养基上是否出现典型的大肠杆菌菌落。
生化法则是通过检测大肠杆菌的代谢产物来判断其存在与否，比如利用大肠杆菌产生的酶来进行检测。
这两种方法都是经典的大肠杆菌检测方法，虽然操作简单，但需要较长的培养时间，且对操作者的技术要求较高。
其次，近年来，分子生物学方法的应用使得大肠杆菌的检测更加快速和准确。
其中，聚合酶链式反应（PCR）技术是一种常用的分子生物学方法之一。
通过PCR技术，可以快速扩增大肠杆菌的特定基因片段，然后利用凝胶电泳等方法进行检测，能够在短时间内得到结果，且具有较高的特异性和敏感性。
另外，近年来还出现了更为先进的快速检测技术，比如实时荧光定量PCR和基因芯片技术，这些方法能够更加快速、准确地进行大肠杆菌的检测，逐渐替代了传统的检测方法。
除了实验室中的检测方法，现场快速检测技术也得到了广泛的应用。
比如，免疫层析法和免疫荧光法能够在短时间内对大肠杆菌进行快速检测，无需复杂的操作和设备，适用于食品安全监测和现场应急检测。
此外，近年来还出现了一些基于光学原理和生物传感技术的检测方法，比如表面等离子共振传感器和质子传感器，这些方法具有检测速度快、灵敏度高的特点，能够在实际生产中进行快速、准确的大肠杆菌检测。
总的来说，随着科学技术的不断发展，大肠杆菌检测方法也在不断更新和完善。
传统的培养法和生化法虽然操作简单，但存在时间长、技术要求高的缺点，而分子生物学方法和现场快速检测技术则能够更快速、准确地进行大肠杆菌的检测，为食品安全和公共卫生提供了更有力的保障。
细菌划线分离与纯培养
未来研究方向与展望
研究方向1
研究方向2
优化划线分离与纯培养的方法，提高分离 效率。
研究不同细菌在划线分离与纯培养过程中 的差异。
研究方向3
展望
将该技术应用于其他微生物的分离与纯化 ，扩大应用范围。
随着微生物学研究的深入，细菌划线分离 与纯培养技术将不断完善，为微生物资源 的开发利用提供更多可能性。
实验总结
02
01
03
实验步骤 1. 选择适当的培养基和培养条件。 2. 对细菌样品进行稀释处理。
实验总结
5. 挑取单一菌落进行 4. 在适宜温度下培养， 纯培养。 观察菌落形成。
3. 在固体培养基上划线 接种。
实验结果：成功分离得 到单一菌落，为后续研 究提供了纯净的菌种。
实验中遇到的问题与解决方案
实验材料与设备
实验材料
细菌划线分离与纯培养需要使用 细菌培养基、接种环、灭菌棉签 等。
实验设备
实验设备包括恒温培养箱、灭菌 锅、显微镜等。
02
细菌划线分离技术
实验原理
细菌划线分离技术是利用细菌在固体培养基表面划线的操作，将 混合菌样中的不同菌种一一分离，并各自形成单一的菌落，以便 进一步纯化。
确保所有工具和材料在使 用前已经灭菌处理。
取样时要避免交叉污染， 使用无菌操作技术。
保持恒定的温度和湿度， 有利于细菌的生长繁殖。
密切观察细菌的生长情况 ，及时记录并分析数据。
04
划线分离与纯培养的应用
在医学领域的应用
80%
病原菌分离与鉴定
通过划线分离与纯培养技术，可 以将混合菌液中的病原菌分离出 来，并进行鉴定，为临床诊断和 治疗提供依据。
实验原理基于细菌在固体培养基上的生长特性，通过划线操作将 细菌分散到培养基表面，并控制适宜的培养条件，使不同菌种在 各自区域内生长繁殖。
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养的要求。
（三）厌氧培养法
厌氧菌标本的采集及运送有特殊的要求及注意事项，应避免正常菌群的污染，尽量少接触空气
并立刻送检。厌氧菌的培养法可大致分为：①物理学方法：遮断空气法（层积法）、 真空法、 空
出物而设计的负压过滤排风柜。
（五）生物安全实验室（Biosafety Laboratory），简称“BSL实验室”，是指通过规范的实
验设计、实验设备的配置、个人防护装备的使用等建造的实验室。在结构上由一级防护屏障（安全
设备）和二级防护屏障（设施）构成，实验室生物安全防护的安全设备和设施的不同组合，构成了
等。
1．持好菌种管及培养基管。
2．灭菌接种环，由菌种管取菌，伸入培养基管中，在接近液面的管壁上方轻轻研磨，并沾取少
许培养基液体调和，使接种物充分混合于培养基的液体中。
3．液体培养一般以18～24小时观察生长特征为好。
（四）穿刺接种法
试管内半固体培养基采用此法接种，多用于保存菌种、观察动力及做厌氧培养等。亦可用于观
种好的置37℃孵箱中培养18～24小时。但标本中菌量很少或难于生长的细菌（如结核分技杆菌）需
培养3～7天甚至 l个月才能生长。
（二）二氧化碳培养法
某些细菌的培养，需要5～10%二氧化碳环境中培养才能生长良好。可采用二氧化碳孵箱，它能
自动调节二氧化碳的浓度和温度，使用极为方便。传统的方法则采用烛缸法，将培养基放入缸内，
轻涂布，再在2，3……区划线。每划完一个区域，均将接种环灭菌一次，冷后再化下一个区域。每
一区域的划线均接触上一区域的接种线 l～2次，使菌量逐渐减少，以获得单个菌落（见图20-1）。
图20-1 细菌分离接种法
4．划线完毕，盖好皿盖，做好标记将平皿倒置，置37℃培养18～24小时后观察结果。
在基础培养基中加入葡萄糖、血液、血清、腹水或酵母浸膏等有机物，可供营养要求较高的细
菌生长需要或增菌用。如结核分枝杆菌培养基中添加鸡蛋、马铃薯、甘油等。
（三）选择培养基
利用不同种类细菌对化学物质的敏感性不同而制成，使分离菌大量繁殖而抑制其它细菌生长的
培养基。培养基中含有的抑制剂能抑制非目的菌生长或使其生长不佳，有利于目的菌的检出和识别
察细菌的某些生化反应。
1．持好菌种管和培养基管。
2．以灭菌接种针从菌种管取菌。
3．接种针直刺入培养基的中心（半固体或一般琼脂高层）直达管底部（深入培养基3/4处）或
沿管壁刺入（醋酸铅高层），接种后接种针应沿原路退出。
4．经培养后即可观察结果。沿穿刺线生长，线外的培养基清亮者表示细菌无动力；穿刺线模糊
室。室内应有空气过滤装置、紫外线杀菌灯等。
（四）生物安全柜 （biological safety cabinet，BSC）目前微生物试验中多采用生物安全
柜，是为操作原代培养物、菌（毒）株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作
者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅
细菌培养检测技术
节概述
细菌的培养技术是微生物实验中基本技术之一。大多数细菌均可用人工方法培养，只有将细菌
培养出来才能对它进行研究和鉴定。
知识点导航
一.培养基的种类
培养基（culture medium）是细菌生长繁殖所需要的各种营养物质的人工制品。适宜的培养基
3．从培养瓶或试管培养物中取标本或移种时，在打开瓶口、管口或关闭前，均要在火焰上通过
2～3次。切不可将含菌材料污染台面和其他物体。
4．如不慎将试管等打破造成菌液污染时，不要惊慌，应立即报告负责人，然后用3％来苏或5％
石炭酸处理污染台面或地面，至少浸泡30分种。
5．工作完毕后，用紫外光灯照射30分钟，或用3％来苏擦拭台面，并清洗双手。
保存。
三.细菌检验室的注意事项及无菌技术
细菌培养必须随时为防止污染和病原菌的扩散而进行操作，即无菌操作。细菌检验室的注意事
项如下：
1．细菌的培养应在接种罩或无菌室内进行。有条件的实验室可在超净工作台内进行。
2．用接种环分离和移种细菌时，用前用后均需灭菌处理。一般采用火焰灭菌法。
离细菌。划线时，接种环与平板呈30～40°角，轻轻接触平板，以腕力平行滑动接种环。应避免将
琼脂划破。先在平板上 l／5处轻轻涂布，然后即可左右来回以作连续划线接种，线与线间留有适当
距离，做到线密而不重复，将整个平板表面布满划线。
如果菌量较大可采用分区划线法。可将平皿分为若干个区（一般为5个区）。先在平板上 l区轻
滤，从出风面吹出的洁净气流，以一定的和均匀的断面风速通过工作区时，将尘埃颗粒和微生物颗
粒带走，从而形成无尘无菌的工作环境。使用时应提前50分钟打开紫外线杀菌灯，30分钟后关闭并
启动送风机。净化区内严禁存放不必要的物件，以保持洁净气流型不受干扰。
（三）无菌室 无菌室又称洁净室（clean room），是在实验室内部安装的用于无菌操作的小
迅速通过火焰 l～2次。
4．将已灭菌的接种环伸入菌种管中，从斜面上取少许菌，迅速伸入待接种的培养基管中，在斜
面底部向上划一条直线，然后从底部起向上作曲折连续划线，直至斜面上方顶端。37℃孵箱中培养
18～24小时即可观察结果。
（三）液体接种法
肉汤、胨水、发酵管等均系液体培养基。用于增菌，观察细菌生长现象和检测细菌的生化反应
形成菌落，以便根据菌落形态及特征，挑选单个菌落，经过移种而获得纯种细菌（纯培养）。
分离细菌最常用的为平板划线分离法。
1．将接种环火焰灭菌，待冷却后取标本或混合菌液。
2．用左手持起平板，使平皿盖向上放于台面上或打开平皿盖。
3．左手斜持（45℃角）平板，右手持已取材的接种环，在酒精灯上方5～6cm处作连续划线法分
四、接种环和接种针使用
接种环和接种针由三部分组成，即环（针）部分、金属柄部分和绝热柄部分。接种环和接种针
通常选用电热（镍）丝，环的直径随使用目的而不同，一般多为2～4mm，环和针的长度为40～
50mm。
接种环（针）使用前后均应进行灭菌处理，将接种环（针）末端直立火焰中，烧红镍丝部分，
再使接种环（针）金属柄旋转通过火焰3次灭菌，冷却后用以取菌或待试标本。使用接种环（针）完
毕后立即将染菌的镍丝部分于还原焰（内焰）中加热，烤干环（针）端附着的细菌或标本，以免环
（针）上残余的细菌或标本因突受高热，爆烈四溅，而污染环境和导致传染危险。然后再移于氧化
焰（外焰）中烧红灭菌，最后将金属柄部分往复在火焰中通过3次。用完后的接种环（针），应立即
不清，或沿穿刺线向外扩散生长，或整个培养基混浊者表示细菌有动力。
七、培养法
根据培养目的和细菌的种类选用最适宜的培养方法。常用的有一般培养法、二氧化碳培养法和
厌氧培养法。
（一）一般培养法
一般培养法系指需氧菌或兼性厌氧菌等在需氧条件下的培养方法，故又称需氧培养法。将已接
能使细菌在体外迅速生长繁殖，便于对细菌进行分离和鉴别。可分为基础培养基、营养培养基、选
择培养基、鉴别培养基、厌氧菌用培养基和特殊培养基。
（一）基础培养基
只含有细菌生长所需的最基本营养成分，应用最广泛，为制备多种培养基的基础，常见的有肉
汤培养基、琼脂培养基。
（二）营养培养基
四级生物安全防护水平，一级为最低。
六、接种法
根据待检标本的性质，培养目的及所用培养基的种类，采用不同的接种方法。常用的有平板划
线分离培养法、斜面接培养法
分离培养法就是通过划线使标本或培养物中混杂的多种细菌在培养基表面逐一分散生长，各自
（二）斜面接种法
主要用于划线分离培养所获得的单个菌落的移种，以得到纯种细菌和保存菌种，以及观察细菌
的某些培养特性。
1．取菌种管置左手食指、中指、无名指之间，拇指压住管底部上侧面。
2．火焰灭菌接种环。
3．以右手小指与手掌拔取棉塞（如同时持有两管，可用小指与无名指拔取另一棉塞），将管口
。选择培养基多为固体平板，用于从标本中分离某些特定的细菌。
（四）鉴别培养基
培养基中加有某些特定成分，如糖、醇类和指示剂等，用于检查细菌的各种生化反应，以资鉴
别和鉴定细菌。
（五）厌氧菌用培养基
专性厌氧菌须在无氧条件下才能生长，故需在培养基中加入半胱氨酸、硫乙醇酸钠等还原剂，
气置换法、厌氧罐培养、厌氧袋法、厌氧手套箱等。②化学方法：焦性没食子酸法、硫乙醇酸钠法
、黄磷燃烧法。③生物学方法： 需氧菌共生法、燕麦发芽法。④混合法：真空或气体置换与焦性没
食子酸法相结合，可根据实际情况选用。
降低培养基中氧化还原电势，并应与外界空气隔绝，使培养基本身为无氧的环境。
（六）特殊培养基
为某些需要在特殊条件下才能生长的细菌培养之用。如高渗盐增菌培养基、高渗糖增菌培养
基、改良 Kagan氏培养基等。
二.培养基的制备
制备一般培养基的主要过程基本相似，包括调配、溶化、调整 pH、过滤、分装、灭菌及检定和
搁置于架上，切勿随手弃置，以免灼焦台面或其他物件。
五、接种操作区
为避免在接种过程中污染环境以及空气中的细菌污染培养物，接种均应在接种罩或无菌室内进
行，此外细菌学实验室所必需的设备还包括无菌工作台、生物安全柜和生物安全实验室。
（一）接种罩 接种罩的式样很多，可用木框和玻璃制成，亦有用有机玻璃制成。接种罩在用
前先以3％石炭酸或来苏轻拭，内需装有紫外线杀菌灯，用前可先行照射，以保证罩内无尘埃和细