用于培养病毒的培养基及其设备制作方法与设计方案

本技术公开了一种用于培养病毒的培养基及其制备方法，涉及病毒培养基及其制备技术领域，每1L所述培养基中含有以下浓度的组分：DMEM培养液6070g/L、胰岛素1030mg/L、层粘连蛋白0.20.8mg/L、牛血清白蛋白13g/L、胰蛋白酶13mg/L、海藻多糖24g/L、芦荟胶2040mg/L、柠檬酸二铵6080mg/L、维生素C 0.10.3mg/，其制备是取配方量的DMEM培养基溶于1000mL蒸馏水，加入胰岛素、层粘连蛋白、牛血清白蛋白、胰蛋白酶、海藻多糖、芦荟胶、柠檬酸二铵、维生素C，充分混合，调节pH，即得。本技术用于病毒培养的培养基营养丰富，能够满足细胞培养和增殖过程中所需的营养，在低蛋白、无血清的情况下使细胞获得较好的生长状态，将其用于病毒培养，具有效价高、质量好的优点；此外，该培养基的制备方法简单、易操作。

权利要求书

1.一种用于培养病毒的培养基，其特征在于，每1L所述培养基中含有以下浓度的组分：DMEM培养液60-70g/L、胰岛素10-30mg/L、层粘连蛋白0.2-0.8mg/L、牛血清白蛋白1-3g/L、胰蛋白酶1-3mg/L、海藻多糖2-4g/L、芦荟胶20-40mg/L、柠檬酸二铵60-80mg/L、维生素C0.1-0.3mg/L。

2.如权利要求1所述的用于培养病毒的培养基，其特征在于，每1L所述培养基中含有以下浓度的组分：DMEM培养液60-65g/L、胰岛素15-25mg/L、层粘连蛋白0.4-0.7mg/L、牛血清白蛋白1-2g/L、胰蛋白酶2-3mg/L、海藻多糖3-4g/L、芦荟胶20-30mg/L、柠檬酸二铵70-80mg/L、维生素C 0.1-0.2mg/L。

3.如权利要求2所述的用于培养病毒的培养基，其特征在于，每所述1L培养基中含有以下浓度的组分：DMEM培养液62g/L、胰岛素20mg/L、层粘连蛋白0.6mg/L、牛血清白蛋白

1.5g/L、胰蛋白酶

2.4mg/L、海藻多糖

3.2g/L、芦荟胶25mg/L、柠檬酸二铵75mg/L、维生素C 0.1mg/L。

4.如权利要求1所述的用于培养病毒的培养基，其特征在于，所述培养基的pH为7.0-7.2。

5.如权利要求1所述的用于培养病毒的培养基，其特征在于，所述DMEM培养液为低糖型DMEM培养液。

6.如权利要求1-5任一所述的用于培养病毒的培养基的制备方法，其特征在于，步骤如下：取配方量的DMEM培养基溶于1000mL蒸馏水，加入胰岛素、层粘连蛋白、牛血清白蛋白、胰蛋白酶、海藻多糖、芦荟胶、柠檬酸二铵、维生素C，充分混合，调节pH，即得。

技术说明书

一种用于培养病毒的培养基及其制备方法

技术领域

本技术涉及病毒培养基及其制备技术领域，具体涉及一种用于培养病毒的培养基及其制备方法。

背景技术

1996年以来，哺乳动物细胞培养已经发展到能够自由扩大培养并且用于工业化生产。许多生物活性物质、疫苗、载体，如单克隆抗体、药用蛋白质、高职病性蓝耳病疫等，都可以通过动物细胞大规模培养获得。通过细胞培养生产生物制品既能提高生物制品的质量，又能促进细胞培养技术、蛋白质表达纯化技术、病毒培养技术等的发展。

目前，兽用疫苗很多都需要通过细胞培养来进行生产，在生产过程需要使用血清。血清培养存在成分不明确、保存期短，取材中可能带入支原体、病毒，对细胞产生潜在影响，可能导致实验失败或实验结果不可靠性；制作过程复杂、批间差异大，成分不能保持一致，使用使

得实验和生产的标准化困难；质量不稳定，价格昂贵，进出口管制影响盈利，使用不方便等缺点。而无血清培养可以消除来自血清的不均一性；降低生产成本，简化分离纯化步骤，避免病毒污染造成的危害；提高了细胞培养的可重复性，避免了由于血清批次之间差异的影响；供应充足、稳定。因此从当前发趋势来看无血清培养，是近年世界范围内各大生物公司产业化生产的发展方向。

中国专利申请201410467191.2公开了无血清培养基及其用途和一种猪瘟病毒的培养方法，无血清培养基，所述无血清培养基为pH为7.0～7.5的水溶液，其组分如下：MEM基础培养基；丙酮酸钠；大豆蛋白水解物；胆固醇；碱性成纤维细胞生长因子；抑制素B；胰岛素；L-丙氨酸；L-缬氨酸；L-亮氨酸；L-异亮氨酸；L-甲硫氨酸；L-脯氨酸；L-苯丙氨酸；L-色氨酸；L-甘氨酸；L-丝氨酸；L-苏氨酸；L-半胱氨酸；L-天冬酰胺；L-谷氨酰胺；L-酪氨酸；L-天冬氨酸；L-谷氨酸；L-赖氨酸；L-精氨酸；L-组氨酸；羟脯氨酸；豆蔻酸；棕榈酸；棕榈油酸；硬脂酸；精胺；亚精胺；还原型谷胱甘肽；乙醇胺；β-巯基乙醇；甘油；生物素；吡哆醇；抗坏血酸；维生素B-12；次黄嘌呤；胸苷；NaHCO3；FeSO47H2O；ZnSO4；

Na2SeO3；柠檬酸铁。该培养基成分复杂，不利于制备，生产成本高。

技术内容

针对以上存在的技术问题，本技术的目的在于提供一种用于培养病毒的培养基及其制备方法，简单易操作。

为实现以上目的，本技术通过以下技术方案予以实现：

一种用于培养病毒的培养基，每1L所述培养基中含有以下浓度的组分：DMEM培养液60-70g/L、胰岛素10-30mg/L、层粘连蛋白0.2-0.8mg/L、牛血清白蛋白1-3g/L、胰蛋白酶1-

3mg/L、海藻多糖2-4g/L、芦荟胶20-40mg/L、柠檬酸二铵60-80mg/L、维生素C0.1-0.3mg/L。

优选地，每1L所述培养基中含有以下浓度的组分：DMEM培养液60-65g/L、胰岛素15-

25mg/L、层粘连蛋白0.4-0.7mg/L、牛血清白蛋白1-2g/L、胰蛋白酶2-3mg/L、海藻多糖3-

4g/L、芦荟胶20-30mg/L、柠檬酸二铵70-80mg/L、维生素C 0.1-0.2mg/L。

优选地，每所述1L培养基中含有以下浓度的组分：DMEM培养液62g/L、胰岛素20mg/L、层粘连蛋白0.6mg/L、牛血清白蛋白1.5g/L、胰蛋白酶2.4mg/L、海藻多糖3.2g/L、芦荟胶

25mg/L、柠檬酸二铵75mg/L、维生素C 0.1mg/L。

优选地，所述培养基的pH为7.0-7.2。

优选地，所述DMEM培养液为低糖型DMEM培养液。

用于培养病毒的培养基的制备方法，步骤如下：取配方量的DMEM培养基溶于1000mL蒸馏水，加入胰岛素、层粘连蛋白、牛血清白蛋白、胰蛋白酶、海藻多糖、芦荟胶、柠檬酸二铵、维生素C，充分混合，调节pH，即得。

有益效果：本技术用于病毒培养的培养基营养丰富，能够满足细胞培养和增殖过程中所需的营养，在低蛋白、无血清的情况下使细胞获得较好的生长状态，将其用于病毒培养，具有效价高、质量好的优点；此外，该培养基的制备方法简单、易操作，便于实现大规模生产的需要。

具体实施方式

为使本技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本技术实施例，对本技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本技术保护的范围。

实施例1：

一种用于培养病毒的培养基，每1L所述培养基中含有以下浓度的组分：低糖型DMEM培养液62g/L、胰岛素20mg/L、层粘连蛋白0.6mg/L、牛血清白蛋白1.5g/L、胰蛋白酶2.4mg/L、海藻多糖3.2g/L、芦荟胶25mg/L、柠檬酸二铵75mg/L、维生素C 0.1mg/L。

用于培养病毒的培养基的制备方法，步骤如下：取配方量的DMEM培养基溶于1000mL蒸馏

水，加入胰岛素、层粘连蛋白、牛血清白蛋白、胰蛋白酶、海藻多糖、芦荟胶、柠檬酸二铵、维生素C，充分混合，调节pH至7.0-7.2，即得。

实施例2：

一种用于培养病毒的培养基，每1L所述培养基中含有以下浓度的组分：低糖型DMEM培养液65g/L、胰岛素22mg/L、层粘连蛋白0.5mg/L、牛血清白蛋白1.8g/L、胰蛋白酶2.7mg/L、海藻多糖3.5g/L、芦荟胶22mg/L、柠檬酸二铵72mg/L、维生素C 0.2mg/L。

用于培养病毒的培养基的制备方法，步骤如下：取配方量的DMEM培养基溶于1000mL蒸馏水，加入胰岛素、层粘连蛋白、牛血清白蛋白、胰蛋白酶、海藻多糖、芦荟胶、柠檬酸二铵、维生素C，充分混合，调节pH至7.0-7.2，即得。

实施例3：

一种用于培养病毒的培养基，每1L所述培养基中含有以下浓度的组分：低糖型DMEM培养液65g/L、胰岛素15mg/L、层粘连蛋白0.7mg/L、牛血清白蛋白1g/L、胰蛋白酶3mg/L、海藻多糖3g/L、芦荟胶30mg/L、柠檬酸二铵70mg/L、维生素C 0.2mg/L。

用于培养病毒的培养基的制备方法，步骤如下：取配方量的DMEM培养基溶于1000mL蒸馏水，加入胰岛素、层粘连蛋白、牛血清白蛋白、胰蛋白酶、海藻多糖、芦荟胶、柠檬酸二铵、维生素C，充分混合，调节pH至7.0-7.2，即得。

实施例4：

一种用于培养病毒的培养基，每1L所述培养基中含有以下浓度的组分：低糖型DMEM培养液60g/L、胰岛素25mg/L、层粘连蛋白0.4mg/L、牛血清白蛋白2g/L、胰蛋白酶2mg/L、海藻多糖4g/L、芦荟胶20mg/L、柠檬酸二铵80mg/L、维生素C 0.1mg/L。

用于培养病毒的培养基的制备方法，步骤如下：取配方量的DMEM培养基溶于1000mL蒸馏水，加入胰岛素、层粘连蛋白、牛血清白蛋白、胰蛋白酶、海藻多糖、芦荟胶、柠檬酸二

铵、维生素C，充分混合，调节pH至7.0-7.2，即得。

实施例5：

一种用于培养病毒的培养基，每1L所述培养基中含有以下浓度的组分：低糖型DMEM培养液70g/L、胰岛素10mg/L、层粘连蛋白0.8mg/L、牛血清白蛋白1g/L、胰蛋白酶3mg/L、海藻多糖2g/L、芦荟胶40mg/L、柠檬酸二铵60mg/L、维生素C 0.3mg/L。

用于培养病毒的培养基的制备方法，步骤如下：取配方量的DMEM培养基溶于1000mL蒸馏水，加入胰岛素、层粘连蛋白、牛血清白蛋白、胰蛋白酶、海藻多糖、芦荟胶、柠檬酸二铵、维生素C，充分混合，调节pH至7.0-7.2，即得。

实施例6：

一种用于培养病毒的培养基，每1L所述培养基中含有以下浓度的组分：低糖型DMEM培养液60g/L、胰岛素30mg/L、层粘连蛋白0.2mg/L、牛血清白蛋白3g/L、胰蛋白酶1mg/L、海藻多糖4g/L、芦荟胶20mg/L、柠檬酸二铵80mg/L、维生素C 0.1mg/L。

用于培养病毒的培养基的制备方法，步骤如下：取配方量的DMEM培养基溶于1000mL蒸馏水，加入胰岛素、层粘连蛋白、牛血清白蛋白、胰蛋白酶、海藻多糖、芦荟胶、柠檬酸二铵、维生素C，充分混合，调节pH至7.0-7.2，即得。

综上所述，本技术制备的培养基营养丰富，能够满足细胞培养和增殖过程中所需的营养，在低蛋白、无血清的情况下使细胞获得较好的生长状态，将其用于病毒培养，具有效价高、质量好的优点；且该培养基的制备方法简单、易操作，便于实现大规模生产的需要。

以上实施例仅用以说明本技术的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本技术进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本技术各实施例技术方案的精神和范围。