三七不同药用部位有效成分含量测定

三七不同药用部位有效成分含量测定

崔翰明林海路文龙程慧平张春光王阶*

中国中医科学院广安门医院（北京市宣武区北线阁5号，100053）

摘要：目的建立三七不同药用部位中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re和Rb1的HPLC含量测定方法，比较三七不同药用部位中上述4种皂苷的含量。方法三七不同药用部位（主根、筋条、剪口、叶、花）甲醇提取，RP-HPLC/UV法测定，Kromasil C18（250×4.6mm，5μm）色谱柱；以不同比例乙腈和水（v/v）线性梯度洗脱；流速：1mL·min-1；柱温：30℃；检测波长：203nm；进样量：10μL。结果三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re 和Rb1可达到基线分离，其中人参皂苷Rg1和Re的分离度大于1.5；三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re和Rb1的线性范围分别为：4.4-440μg·mL-1，4.32-1080μg·mL-1，4.24-212μg·mL-1和4.48-1120μg·mL-1；4种皂苷的精密度和日间差RSD（n＝5）分别为0.46％，0.24％，0.77％，0.68％和1.64％，0.69％，0.52％，0.65％；加样回收率分别为103.26±1.22％，103.18±0.49％，103.20±1.58％，103.86±0.39％；三七不同药用部位含上述4种皂苷总量的顺序为剪口＞主根＞筋条＞叶＞花；而三七主根含上述4种皂苷总量的顺序为60头＞80头＞40头＞20头＞100头。结论本方法简便、灵敏、准确，重现性良好，可用于准确分析三七不同药用部位中上述4种皂苷的含量。

关键词：三七；三七皂苷；高效液相色谱；含量测定

Abstract: Objective: A quantitative method was developed by gradient elution for the determination of notoginsenoside R1, ginsenoside Rg1, ginsenoside Re and ginsenoside Rb1 in different position of Radix Notoginseng by HPLC. The content of 4 kinds saponins in different position of Radix Notoginseng was compared. Method: The different position of Radix Notoginseng(including root, rhizome, branch root, leaf, flower) were extracted with methanol. The HPLC conditions include Kromasil C18column (250×4.6mm，5μm), different proportion acetonitrile and water linearity gradient elution, flow rate at 1.0mL·min-1, column temperature at 30℃, wavelength 203nm.Result: The linear ranges of notoginsenoside R1, ginsenoside Rg1, ginsenoside Re and ginsenoside Rb1 were 4.4-440μg·mL-1, 4.32-1080μg·mL-1, 4.24-212μg·mL-1 and 4.48-1120μg·mL-1, respectively. 4种皂苷的精密度和日间差RSD（n＝5）分别为0.46％，0.24％，0.77％，0.68％和1.64％，0.69％，0.52％，0.65％；加样回收率分别为103.26±1.22％，103.18±0.49％，103.20±1.58％，103.86±0.39％；三七不同药用部位含上述4种皂苷总量的顺序为剪口＞主根＞筋条＞叶＞花；而三七主根含上述4种皂苷总量的顺序为80头＞60头＞20头＞40头＞100头。结论本方法简便、灵敏、准确，重现性良好，可用于准确分析三七不同药用部位中上述4种皂苷的含量。

Conclusion:The method was simple, sensitive, accurate and repeat, and was suitable in determination of the content of 4 kinds saponins in different position of Radix Notoginseng. method was sampa To structure.

三七为五加科Araliaceae人参属Panax植物三七Panax notoginsng (Burk) F.H.Chen。主产于我国云南、广西等省，为我国特产的传统珍贵药材。三七的主要有效成分为三七皂苷，其中含量较高的有三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd和Rf等[1~4]。目前，市场上商品三七的规格品种多样，质量不一。05版药典规定三七为其原植物的根和根茎，其中主根为临床所用三七，支根习称筋条，根茎习称剪口。三七总皂苷提取物生产厂家常用三七剪口或筋条为原料，民间也有使用三七叶和花。而不同的三七药用部位其主要皂苷类成分的含量差别较大。因此，建立一种测定三七不同药用部位中主要皂苷类成分（三七皂苷R1、人参

皂苷Rg1、Re和Rb1）含量的方法，并比较不同药用部位和不同规格三七中上述4种皂苷的含量具有重要意义。

1. 仪器与试药

德国Knaver二元高压泵、Knaver UV Detecter；Kromasil C18色谱柱（250×4.6mm，5μm，100Å）。三七主根（20-100头）、筋条（侧根）、剪口（根茎）、叶、花均购自云南文山；三七对照药材、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re和Rb1对照品均购自中国药品生物制品检定所；甲醇、乙腈（Fisher制剂公司），高纯水（Milliq超纯水机）。

2. 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Kromasil C18色谱柱（250×4.6mm，5μm，100Å）；流动相：乙腈（A）∶水（B）线性梯度洗脱（v/v），比例见表1；流速：1mL•min-1；柱温：30℃；检测波长：203nm。进样量：10μL。

表1：乙腈（A）∶水（B）流动相梯度表（v/v）

时间0min 13min 30min 35min 40min

乙腈（A）20% 20% 25% 40% 20%

水（B）80% 80% 75% 60% 80%

2.2

参考药典方法[5]，分别取三七主根（20、40、60、80、100头）、三七筋条（侧根）、三七剪口（根茎）、三七叶、三七花粉末（过四号筛）0.6g，精密称定，分别精密加入甲醇50mL，称定重量，放置12小时，置于80℃水浴中保持微沸2h，放冷，称重，用甲醇补足损失的重量，摇匀，0.45μm滤芯过滤，取续滤液作为供试品溶液。分别取上述不同供试品溶液10μL 进样，按照2.1色谱条件测定，记录色谱图。其结果见图1。

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