实验九 金霉素沉淀法提取工艺

实验九金霉素沉淀法提取工艺

一、实验目的

了解金霉素的沉淀法提取工艺过程，熟悉操作原理。并通过重量差法测定金霉素含量，计算总收率。

二、实验原理

金霉素是金色链霉菌在发酵过程中的代谢产物，生产上采用沉淀、通气、二级发酵培养制得金霉素发酵液。发酵液用草酸酸化，加蛋白凝结剂硫酸锌出去蛋白。再利用金霉素钙镁盐易溶于有机溶媒乙醇、醋酸丁酯、丁醇的特性加以提纯，利用其盐酸盐难溶于溶媒的特性，在醋酸丁酯-丁醇提取液与乙醇提取液中加入过量盐酸使其结晶析出，最后经洗涤、干燥、过筛，即得成品。

1.金霉素沉淀法提取步骤

（1）制备金霉素盐酸盐（CTC）：取 CTC 发酵液若干（称取固体兽药20g，溶于100ml蒸馏水中），加入 1%量的草酸，然后用液体草酸调

pH 1.1~1.3，搅拌0.5h，加入 0.2%黄血盐与硫酸锌，再加入适量的硅

藻土作助滤剂，过滤，滤渣用同样量的 pH1.1~1.3 的酸水顶洗，合并

滤液。然后在滤液中加入与 CTC 等摩尔量 MgCl2（溶液中氯化镁的

浓度达到1mol/L），用氨水调 pH 8.0，过滤，滤饼即复盐。

（2）制备结晶液：取适量乙醇（约100ml），加入 8%的尿素，用盐酸调pH 2.0，加入 CTC 复盐，搅拌使其溶解。

（3）结晶的制备：往结晶液里缓慢滴入浓盐酸，调 pH（0.5±0.02），在结晶液中加入 10%的饱和氯化钠溶液，搅拌结晶（10℃12

h），过滤，结晶用乙醇洗涤，热风吹干。

2.具体流程图如下：

三、思考题

（一）、预习

1．根据实验操作步骤，列出本实验所用的药品和仪器（包括规格和数量，用途）；

2．查阅文献资料，按如下要求归纳金霉素的理化性质：

（ 1）结构式和分子量

（ 2）标明其活性功能团及各自的 pK 值，说明各基团的酸碱性，计算等电点 pI 值；

（ 3）说明不同 pH 条件下，金霉素在水中的溶解度变化情况；

（4）分别写出金霉素游离碱和盐酸盐在水，丙酮和丁醇中的溶解度数值；

（ 5）写出金霉素水溶液稳定性的影响因素。

（二）、实验结果与讨论

1．记录滤洗液效价和成品湿重及干重，分析操作中成功或失败之处；

2．预处理时，加入黄血盐和硫酸锌的目的是什么？

3．加草酸的目的是什么？

4．为什么结晶时， pH 要控制在0.5±0.02？