网织血小板的检测方法及临床应用
网织血小板的检测及其临床应用
I 毕 : 15 - , . 监 : (9 7 ) 盘 黑
: I . : 医 科 人 第 滨 凡 1 淀 哈
师 眯 医 院 血 液 山 科 I . 授 , 任 医 师 I 导 帅 教 任 髓
19 9 0年 K e at ins 等 用 T 作 为 R A 荧 光 O N 染 色 剂 ,C 测 定 正 常 人 R FM P为 ( 8 6±2 8 % , ,)
而 特 发 性 血 小 板 减 少 性 紫 癜 ( 1) 者 明 显 增 兀尸 患
加, 可达 ( 4 9±1 . ) 2 0 9 %。 此 法 较 易地 检 测 O F 阳性 血 小 板 , 需 把 T 但 O与 血 小 扳 共 同孵 育 1h 以 上, 时较长 。 费 19 9 9年 林 - 等 ’对 T 法 作 了如 下 改 进 : 厝 O ①血 小 板 必 须 固 定 ; T 浓 度 要 8倍 上 稀 ② O
19 95年 渡 边 清 明 等 … 应 用 A 作 为 R A O
染色剂测 定 R P水 平 。 他 们 将 l L全 血 与 o Ou 4 L26 的 A % O溶 液 ( 5 9 乙 二 醇 和 l9 O L 9 .% 5‘ 稀 释 液 ) 合 , 血 小 板 在 非 常 短 的 时 间 被 混 使 A O染 色 。 此 方 法 精 确 度 高 , 标 本 在 4 。 且 和
网 织 血 小 板 (e elt l l . P 是 新 释 rl ua d p e R ) i e me  ̄
方法 。
放 人血液 循 环 中的新生 成 的血 小板 , 是最 为 年 轻 的 血 小 板 . 有 较 高 的止 血 活 性 。 R 具 P主 要 位 于 粗 面 内 质 网 和 线 粒 体 内 , 反 映 骨 髓 的 血 小 能 板 生 成 能 力 : 16 9 9年 Ioa 等 首次 发 现 了 R n- m P 的存 在 , 年 来 , 着 R 近 随 P检 测 方 法 的 不 断 改 进 , 其 临 床 应 用 更 趋 广 泛 。 本 文 将 近 来 RP 使
网织血小板在急性白血病中的检测和临床意义
网织血小板在急性白血病中的检测和临床意义作者:张玥玥来源:《医学信息》2014年第18期摘要:目的探讨分析急性白血病(AL)患者外周网织血小板(RP)的检测方法以及RP 检测的临床意义。
方法收集我院血液内科2011年9月~2013年9月住院并接受化疗的AL患者30例,用流式细胞仪(FCM)动态检测AL患者的RP、外周血血小板(PLT)水平,并计算RP百分比(RP%)和RP绝对值(RPC)。
并与30例体检健康的受试者作对照。
结果治疗前,AL患者的RP%和PRC均低于健康受试者,且具有统计学差异(P0.05)。
结论 RP%和RPC不仅可以反映骨髓PLT的生成情况,而且灵敏度比PLT计数高,因此,RP%和RPC可以作为治疗AL过程中的监测指标。
关键词:网织血小板;流式细胞仪;急性白血病网织血小板(Reticulated Platelets,RP)是由骨髓巨核细胞释放进入外周血液的血小板,RP不含细胞核或者DNA成分,但含有少量的信使RNA和粗面内质网用于合成少量的蛋白质,是血液循环系统中最为年轻的血小板[1]。
外周血经新亚甲蓝染色后在显微镜下观察到的网状染色无的部分即为RP。
RP可以反映外周血小板(Peripheral platelet, PLT)的增生情况、更新速度和骨髓造血系统的细胞动力学变化,是评判PLT生成情况的重要指标[2-3]。
急性白血病(Acute Leukemia ,AL)患者PLT较健康者显著减少,其原因复杂。
在临床诊治过程中,骨髓功能状态的变化比较大,PLT或者骨髓穿刺是临床上判断白血病患者不同疾病状态的常规诊断方法,然而PLR升高或者骨髓造血功能的恢复存在明显滞后的问题,检验误差大,影响因素多等不足,并且多次骨髓穿刺给患者带来难以忍受的痛苦。
而采用流式细胞仪(FCM)、检测PR具有简单、准确、外周血采集量少,无需骨髓穿刺等特点,是一种新型的诊断AL患者疾病状态的方法。
应用流式细胞仪检测RP主要是利用网织血小板内残留的少量RNA,可以被多种不溶的核酸特异性荧光染料染色,其中较为好用的是噻唑橙(TO)。
网织红细胞的检测及临床应用
网织红细胞的检测及临床应用网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞,是晚幼红细胞在脱核后到完全成熟之间产生的过渡性细胞。
基于其胞质中尚有核糖体、核糖核酸等嗜碱性物质残存,经煌焦油蓝或新亚甲蓝活体染色后,可见蓝或蓝绿色枝点状甚至网织状结构,所以我们通常称其为网织红细胞。
网织红细胞可以直接对骨髓红系造血功能进行反映,主要是应用于评价骨髓增生能力、判断贫血类型,评价贫血疗效,骨髓移植前后监测,放疗和化疗的监测等方面。
随着高端检测仪器的普遍使用,网织红细胞相关参数的检测为疾病提供了大量的信息,临床应用价值越来越高。
1网织红细胞的检测网织红细胞的检测方法有活体染色手工镜检法、血细胞分析仪法、流式细胞仪法和专用网织红细胞分析仪法。
活体染色手工镜检法分为玻片法和试管法。
由于玻片法在实际应用中很可能造成混合血液中水分的蒸发,染色时间不足,所以检测的结果可能会出现偏低的情况。
而试管法则更容易掌握,具备较为显著的重复性优势,在必要的情况下还可以进行复查,最大程度上降低了被检查者的痛苦,是手工法网织红细胞计数的参考方法。
由于传统的显微镜计数方法操作比较繁琐,影响因素比较多,近年来,我国主要采用米勒窥盘的方式进行计数统计,不仅有效规范了计算区域,同时还明显降低了实验中出现的误差,对于结果的准确性提升有着重要帮助和影响。
目前血细胞分析仪的应用,给网织红细胞的计数提供了更为有效的帮助。
此种仪器不仅能更为精准的计数网织红细胞,同时还能检测出网织红细胞的绝对值、网织红细胞的平均体积、网织红细胞的成熟指数等许多参数,这些参数为疾病的诊断、鉴别诊断及治疗等提供更为显著的帮助作用。
流式细胞仪法是一种多用途的精密分析仪器,应用特殊的荧光染料对网织红细胞染色后进行技术分析,从而得出网织红细胞的百分比和绝对值等参数,它还可对网织红细胞的成熟程度进行分群,将其划分为低荧光强度网织红细胞、中荧光强度网织红细胞、高荧光强度网织红细胞、。
仪器法在应用过程中的主要优势就是能对大量红细胞进行测量,同时又能避免主观因素对工作产生的影响,方法的标准性更强。
网织红细胞的临床意义
网织红细胞的临床意义
网织红细胞(reticulated red cells)由于其明显的形态特征,广泛用于血液检查中。
它们可帮助医生诊断出血液疾病和其他健康问题。
因此,它们具有相当重要的临床意义。
网织红细胞由血小板、白细胞和血小板产生,它们是一种凝集性细胞,表现为大量非常小的形状不规则的细胞,小的红细胞集合在一起形成网状状结构。
它们在微量血症,贫血,铁缺乏性贫血症,血液凝固和免疫系统疾病中发现。
此外,网织红细胞也可用于诊断肝病,免疫缺陷,淋巴瘤,肿瘤,发热,肝炎等疾病。
网织红细胞可以在常规血液检查中检测到,也可以使用血液分析仪或计算机仪器进行检测。
它们经过细致的观察,可分类出数种不同的网织状,包括四种反映常见的血液疾病的网状结构。
根据发现的网织状,医生可以针对特定的血液疾病进行检测。
此外,网织红细胞也可用于预测择期手术的麻醉反应,婴儿出生时血液检查中的贫示变异,贫血患者的诊断以及用于手术之前的血液科学检查中的特异性血液病症的诊断和治疗。
总之,网织红细胞具有很强的临床意义,为医疗提供了有力的支持。
它们可以帮助医生准确诊断血液的疾病,有助于患者的治疗和后续观察。
网织血小板比率测定在异基因骨髓干细胞移植中的应用
l J J .E x p H e ma t o l ,2 0 0 9, 3 7 ( 1 0 ) :1 1 3 1 ~1 1 4 2 .
[ 3 2 ]C H E N Z, L U O H Y, S T E I N B E R G M H, e t a 1 .B C L 1 1 A r e p r e s s e s
网织血小板 比率 ( i m ma t u r e p l a t e l e t f r a c t i o n , I P F ) 的测 定 , 以 往 均 采 用 流 式 无一个较好 的指标来提示 P l t 的重建情 况, 从而造成临床 很多 不合 理的 P 1 t 输 注 。网织 P 1 t 是骨髓 中最新释放到外周 血 的幼 稚 P l t , 其数量 不受外界输 注 P I t 的影响 , 能较好地反 映 P l t 的生成状 况 , B R I G G S等 甚至 提 出了采用 网织 P h 检测为 P l t 输注 的必要条件 , 以观察 P l t 的重建和合理输注 P l t 。
( 收稿 日 期: 2 0 1 3 — 0 4 — 0 8 编辑 : 罗劲娜)
网织 血小 板 比率 测定 在 异基 因骨 髓 干 细胞 移植 中的应 用
束 国防 ,高茂馗 , 杨 立 刚 ,芦 慧霞
东 南大 学附属 中大医院临床检验 中心( 南京 2 1 0 0 0 9 ) ; 东 南大学公共 卫生学院( 南京 2 1 0 0 0 9 )
t o h y d m x y u r e a i n s i c k l e c e l l d i s e a s e [ J ] .P e d i a t r B l o o d C a n c e r ,
2 0 1 1 , 5 6 ( 2) :1 7 7—1 8 1 .
流式细胞仪检测网织血小板的临床意义
流 式细胞 仪硷 测 网 织血小 板 的临床 意义
王 迎春 丁润生 陆伟 徐瑞容 顾桂 兰 倍 德 炎
血小板 ( L 减 少 引起 的 出血 是血 液 系 统疾 病 P T)
( P<0 0 ) .5 。见表 1 。
表 1 各组 R P荧光 强度和绝对 值( T ) t±s
有 高 度的亲 和性 , 并对血 小板 膜具 有高 度 的渗透性 , 通过 T 染色 的 P O E标记 的 血 小 板膜 表 面的 单 克 隆 抗 体 通过 F M 可 准 确 的 筛检 出 血 小板 中 的 R C P 群体 。浓缩 血 小板 经 T 标 记 检 测 R O P法 , 法 简 方 便 , 用标本 量少 , 定 性 好 , 以检 测重 度 血 小 板 所 稳 可
R %和 R P P绝对 值 明 显 低于 正 常对 照 组 。检 测 R P 有助 于血 小板 减 少性 疾 病 的 临 床诊 断 和 鉴别 诊 断 。
、
jP初 治时 R T P% 明 显 高 于 对 照 组 ( < P
0o , P绝 对 值 低 于 对 照组 ( .m)R P<0 0 ) 治疗 缓 .1 ; 鹪后 R %和 R P P绝 对 值 与 对 照 组 比均 无 明显 差 异 ( P>0.5 1 组 患者糖 皮 质激 素逐 渐 减 量后 , 小 0 )本 血 板 仍维 持在正 常 范 围。重 型 再 障 、 慢性 肝 病合 并脾 功 能 亢进 者 R %和 R P P绝 对 值 均 明 显低 于对 照组
表 2 1侧重 型再障环胞菌 素治疗后 外周血象及 R P的变化
、
对象 和 方法 对 象 : 1名正常 献血 员, 龄 2 ~5 3 年 0 8岁, 男
1 5名, 1 女 6名 初诊 I P 5 T 2例 , 治疗 后 血 小板 > 10×1 L 的 I P患 者 1 0 0/ T 0例 。重 型再 障 6例 , 慢
网织血小板检测方法在血液疾病诊断中的应用
影像检验臻东至东臻爱至至至豢杰歪垂歪臻i墨冀然熬}|黧黧篓羹篓黑东W象or歪ldⅢH歪ea蓦lth墨D至ig豢est至M磊od歪icⅢal至PⅢeri至od歪ic至al臻鬟系显改善患者症状.[2]中华医学会消化病分会.幽门螺杆菌若干问题的共识意(作者简介:任成志(1962一)。
男,职称:外科主治医师,职务:院长.)参考文献[1]胡伏莲,周殿元,贾博琪主编.幽门螺杆菌感染的基础与临床.第1版.北京:中国科技出版社,1998:191—208见.中华内科杂志,2000,39:357—358[3]吴咏冬,杨迅,王惠吉等.兰索拉唑及胶体果胶铋的四联疗法根除幽门螺杆菌感染.中华内科杂志,2001,40:40一41作者单位:833405新疆省博乐市农五师八十四团职工医院网织血小板检测方法在血液疾病诊断中的应用黎启利【中圈分类号]R543【文献标识码】B【文章编号11672—5085(2008)04—0218—02【摘要】目的:探讨血小板减少症外周血中网织血小板(I强)百分比及绝对值的临床意叉.方法:甩噻唑橙(TO)染色法流式细胞仪(FC M)检测了36例特发性血小扳减少性紫痰瘫,12例慢性再障贫血,10例骨髓增生异常综合征,10例脾功能亢进患者外周血R P百分比和绝对值,并与对照组比较。
结果:I T P组和M D5组患者R P百分比明显高于对照组,I T P组R P百分比又高于M D S组。
C A A与脾功能亢进组R P百分比与对照组接近,各组绝对值均低于正常对照组.结论:R P反映骨髓血小板生成能力,检测R P百分比有助于对血小板减少症病因的鉴别.【关键词】血小板;血液疾病,检洲网织血小板(R P)与网织红细胞一样都是刚从骨锶中释放出来的未成熟细胞[1】,R P与正常血小板相比胞浆内含有少量m R—N A,体积较大,而且有更强的活性[2].随着血小板的成熟,胞浆内m R N A逐渐消失,体积逐渐变小.测定外周血R P可以比较精确地反映骨髓血小板生成情况.荧光染料噻唑橙(T0)可以直接穿过细胞膜进入胞浆,当它与R N A结合后,其发射荧光强度的能力可增大3000倍.我们对检测方法进行了改良并探讨外周血R P数值的变化在各型血小板减少性疾病中的诊断价值,现将结果报告如下.1资料与方法1.1研究对象:对照组:31例正常献血员.病例组:特发性血小板减少性紫癜病(I TP)36例,慢性再障碍贫(C A A)12例,骨髓增生异常综合征(M D S)10例,脾功能亢进10例,诊断均符合张之南主编《血液病诊断及疗效标准》,病例均为本院近2年门诊及住院初诊患者.1.2方法:R P测定:①试剂:T0为美国Si gm a公司产品,用乙醇配成l g/L,4℃备用.临用时配成20电/L使用;I s ot on液,美国C oul t er公司.②仪器:C ol t er E PI C S X L—M C L流式细胞仪.美国C oul t er公司.③方法:全血2m l,3.8%枸橼酸钠抗凝,800r/r ui n离心15分钟。
血小板检查方法以及临床意义
血小板检查方法以及临床意义摘要】目的探讨血小板功能检测对于临床相关疾病的诊断和抗血小板药物的筛选及相关研究有着重要的意义。
目前,血小板功能检测的实验与方法日益增多,但所有这些检测方法均有不足之处,因而有必要研究和发展一种操作简便、检测灵敏度高的方法。
对近年来血小板功能检测方法诸如血小板的一般功能检测、血小板黏附功能测定、血小板聚集功能测定、血小板释放功能测定、血小板凝血活性检测和流式细胞术在血小板功能检测中的应用等研究进展进行了综述,并对研究前景作了简单的展望。
【关键词】血小板检查方法临床意义红骨髓中的造血干细胞分化成巨核细胞后,其胞质断离脱落即形成血小板。
初生成的血小板体积较大,黏着力强,易于聚集和发生释放反应,有很强的止血和凝血功能,在循环血液中只有初生成的血小板具有止血功能,且只能维持2天。
老化的血小板75%被脾、肝和骨髓的网状内皮细胞吞噬和破坏,其余老化的血小板在循环过程中破坏。
正常人的血小板为圆形或椭圆形小体,直径2~3μm。
血小板离体后极易聚集、变性、破坏,而且不易与其他小颗粒区别,所以计数较难。
因此,血小板计数必须严格按操作规程操作,仔细观察辨认,才可获得较准确的结果。
(一)试剂血小板稀释液有两类。
一类是不破坏红细胞,以柠檬酸钠甲醛液为代表,其优点是当血液被稀释100~200倍时,可同时做红细胞计数,缺点是血小板混杂在大量红细胞之间,计数时容易遗漏。
在血小板显著减少的情况下这种方法更不适用。
另一类稀释液是能破坏红细胞,由于红细胞完全被溶解,视野清晰,计数方便,稀释倍数可低至20,误差范围较小,尤其适用于血小板减少患者。
缺点是如经验不足可能把红细胞碎片误认为血小板。
我国目前多选用后一类稀释液。
(二)操作1.在一清洁试管内加0.38ml稀释液。
2.常规毛细血管取血20μl,与上述稀释液混匀。
3.静置3~5分钟,待红细胞完全溶解后再摇匀,然后取少量混悬液滴入计数池内。
4.放置10~15分钟(如空气干燥应放入湿室)等血小板完全下沉后用高倍镜进行计数。
XE-5000检测网织血小板在血液病中的临床应用
p a r t me n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y, n F i r s t P e o p l e s Ho s p i t a l o f F o s h a n, G u a n g d o n g 5 2 8 0 0 0 , C h i n a ) [ A b s t r a c t ] Ob j e c t i v e To e x p l o r e t h e a p p l i c a t i o n o f t h e XE - 5 0 0 0 t e s t n e t s w o v e n i n b l o o d p l a t e l e t d i s e a s e .
检 验 医学 与 临 床 2 0 1 3年 1月 第 1 O卷 第 1期
L a b Me d C l i n , J a n u a r y 2 0 1 3 , Vo 1 . 1 0 , No . 1
・
・
2 7 ・
论 著 ・
XE 一 5 0 0 0检 测 网织 血 小 板 在 血 液 病 中的 临床 应 用
Me t h o d s 3 2 c a s e s wi t h i d i o p a t h i c t h r o mb o c y t o p e n i c p u r p u r a ( I TP) ,3 0 c a s e s wi t h a p l a s t i c a n e mi a ( AA) ,3 5 c a s e s wi t h a c u t e l y mp h o c y t i c 1 e u k e mi a ( AL L)。3 5 c a s e s wi t h a c u t e mo n o n u c l e a r c e l l l e u k e mi a ( AM L),3 5 c a s e s wi t h a c u t e p r o my e l o c y t i c l e u k e mi a ( APL) ,1 0 c a s e s wi t h c h r o n i c my e l o i d l e u k e mi a ( CGL) ,1 0 c a s e s wi t h my e l o d y s p l a s t i c s y n — d r o me s ( M DS )a n d 3 0 n o r ma l c a s e s we r e t e s t e d a b o u t n e t s wo v e n p l a t e l e t a b s o l u t e v a l u e , p l a t e l e t c o u n t I P F( P LT),
网织血小板检测及其临床意义
网织血小板检测及其临床意义核心提示:网织血小板(Reticulatednbsp;Platelets,nbsp;RP)是从骨髓中释放入血的新生血小板,与成熟血小板相比nbsp;,体积大,蛋白质合成能力强,RNA含量多网织血小板(Reticulated Platelets, RP)是从骨髓中释放入血的新生血小板,与成熟血小板相比,体积大,蛋白质合成能力强,RNA含量多。
一、织血小板的得名1969年国外学者Ingram和Coopersmith应用新亚甲蓝染料,对Beagle犬外周血进行染色,发现血小板内有一种网状结构物,故将这一部分血小板命名为网织血小板。
Ingram等发现正常Beagle犬RP为0.8-3.0%。
若对犬进行放血实验,放血后5-10天RP可增加至6%以上。
因此认为这种RP与网织红细胞类似,能反映骨髓血小板的生成状态。
二、网织血小板检测方法RP的网状结构是细胞质中残留的RNA,由于其网状结构非常小,数量又少,在普通光镜下检测非常困难,所以RP检测很长时间未在临床上应用。
1986年外国学者Lee等研制了能与活细胞RNA结合的荧光色素-噻唑橙(thiazole orange,TO)。
1990年Kienast等用TO作为RNA的荧光染料,通过流式细胞仪比较容易地检测出含有RNA的血小板,从此建立了RP 的TO自动化计数方法。
此法虽较准确,但实验时间长、且结果受标本中网织红细胞的荧光干扰。
1995年Richards等对上述方法作了改进,但仍有操作复杂费时之弊。
1995年,日本学者渡道清明等建立了一种用奥黄O(Auramine O,AO)作为RNA染料的RP自动化计数法,这种方法精确度好,且标本在4℃和22℃中可稳定保存12小时。
最大特点是,检测外周血标本仅用80秒。
为临床应用创造了条件。
三、临床意义检测外周血的RP的临床意义主要有:⑴鉴别血小板减少症。
在血小板破坏增多或生成不足所致的疾病中,RP的比例和绝对值均有相应的显著变化。
网织血小板测定在慢性特发性血小板减少性紫癜中的意义
trm oyoei p rua IP 是 患者 体 内产 生 的抗 血 ho bct na up r, ) p T 小板 自身抗 体与血 小板抗 原结合 , 导致血 小板迅 速从
循环 中清 除的一种 自身免疫性 疾病 。本研究 采用流 式 细胞术测定慢性 特发 性血小板减少性紫癜 ( IP 患 c ) T 者外周血 中 R s , P % 以探讨 R s c P中的意义 。 P在 I T
PS B 稀释 ) 均购 自上海禾 优蒙生物科 技有 限公 司 , 工作 浓度 为 1 ( 量/ 积 ) 甲醛 ( 解 于 无 钙 无 镁 % 质 体 的 溶
PS ; B ) 美国 B c m n olr 司的 E IS— L流式 ek a —C u e 公 t PC X 细胞仪 。方法 : 正 常 全血 和待 测 全 血 , 取 分别 加入 5 全血 + L抗 体 + O L 1 L m O工 作液 , 5 5 / LT 室 温避光孵 育 1 i; 5m n 加入 1m L甲醛 工作液 ,5m n内 4 i 上机分析 ; 先上正 常全血染 色管 , 调节 电压使血小板位 于如下方案 A门和 B门所示 位置 , 调节 B门位置 使 B 门内血小板 数量 为 1 左右 ; % 保存 设 置 , 测样 本 管 , 检 由 B门读 出网织血 小板所 占百分 比。见 图 1 。
重要 意义 , 可作 为血 小板 减少症鉴别诊断的重要指标 , 对诊 断 cT IP有一 定价值 , 同时也是 c P疗效判 定的监控 指 I T
【 关键词 】 网织血 小板 ; 特发 性紫癜 ; 小板减 少性 血
.
网织 血小板 (e cl e l e t, P ) r i a dp tesR s 含有较多 的 tu t al R A, N 是新近生成从骨髓 中释放 的血小板 , 具有 较高 的
网织红细胞检测进展及其临床应用
(3)放、化疗监测
中性红
参考值
成人:0.005-0.015(0.5%-1.5%) 新生儿:0.02-0.06(2%-6%) 儿童:0.005-0.075(0.5%-7.5%) 成人绝对值(24-84) 109/L
2.血细胞分析仪法
虽然仪器法Ret计数有诸多优点,而且精密度明显 优于手工法,但也存在一些不足 :第一,所有仪器分析 的基本原理都是检测Ret内RNA 的存在量来决定其百分 率和绝对值,当某些患者血液中有核细胞或淋巴细胞异 常增加时,可导致 Ret 计数结果的假性增加;第二,冷 凝集素存在、红细胞的聚集、某些病理因素或药物都能 使红细胞产生自身荧光;第三,自动化分析仪结果的准 确性除了依赖于仪器本身的良好性能外,还应有良好的 质控物随时检测仪器的状态。另外,仪器成本高、价格 贵,基层医疗单位投入较为困难。
• 机体接受放、化疗后,如出现骨髓抑制,早期HFR和MFR 降低,然后才检测到网织红细胞的降低。而停止放、化疗, 骨髓功能恢复后,又见上述指标依次上升。可指导临床医 师适时调整治疗方案,避免造成严重的骨髓抑制。
网织红生成指数(Reticulocyte production index,RPI)
• RPI=病人网织红细胞(%)/2 * 病人HCT/正常人HCT(男 0.45,女0.40) • 临床应用: • >3提示溶血性贫血或急性失血性贫血;
• 网织细胞的活体染色:
脑梗死患者血小板和网织血小板计数的变化及临床价值
血细胞分析 仪检测 10例健康体检 者 的 I F ,8 例脑梗 死患者 急性期 ( 0 P数 0 发病 2 内) 天 和缓解期 ①脑梗 死患者急 性期 和体检组 的 lF P 数分别 为(.8 45 1± 19 7 、 .9 .2 )( 4 3±O8 5 ,差 异有 统计学 意义( .5 ,P- . 0。②脑 梗死患者急性期 P T数 1 .4 ) 瑚 62 - 0 ) 00 L (2 . 2 00 6±6 .5明显低 于缓解 期(6 .4±8 . ) 差 异有统计学意义(:31 6 = . 7 01) 244 25 , 7 f一 .1 ,P 00 ) = 0 ;而急 性期 IF 45 1±1 2 ) 高于缓解期(. 6±1 8 ) 差异有统计学意义( .4 , = .1 ) P 数(. 8 .7 9 显著 34 5 . 3, 6 6 1 P 00 9。
b a n ac in p t ns XU Xi z u n ,ZHANG Jn- a ,C r lifrto ai t e u-h a g i c n A/Y n a ,CHENG o g-e , W E L n fi NG
M io s a . p rme t f a o a o Me ii e h h o h uCe ta Hopi l h o h u5 0 , h n a — h n De a t n o L b r t r y d cn ,T eC a z o nr l s t ,C a z o 21 21C i a a
【 要 】 目的 摘 通过观察脑梗死患者血小板 (L ) 网织血小板( F参数在急性期 和缓解期 P T和 I ) P
的变化 , 探讨 P T IF L 和 P 动态变化在治疗 脑梗死 中的临床 应用价值 。 方法 ( 程1 病 周以上) P T IF 。 的 L 和 P 数 结果
网织血小板检测方法改良的临床意义
足所致 的疾病中 , P 比例和绝 对值均有相应 的显 著变化 。 R的 在临床上可
作为 特发性 血小板减 少性紫癜 ( P诊 断的重 要指标 , 可与其 他血 小 I ) T 并 板生 成不足 性疾病 如脾 亢等相鉴 别 。 P I 患者血 小板破坏 增加 , T 骨髓 生 成血 小板加快 , 外周血 中新 生血小 板增 多, 使RP 比例升 高。 由于血 小 但 板寿命缩短 , P 使R 绝对值减 少。 脾亢虽有血 小板减少 , P 但R 比例接近 正 常,P R 绝对值亦低于 正常水平 。 了解骨髓被 抑制后 陵复血小板生 成功 能
【 献标 识 码 I 文 A
【 章 编 号 】 7 —0 4 ( 0 00 () 0 9 - l 文 1 4 7 22 1 )6b一 0 3 0 6 比 , 积大 , 白质合成 能 力强 , NA含量 多 。 体 蛋 R 织血 小板 的得名 16年 99
笔者从 事多年 的 网织血小 板检测 方法 的改 良工作 , 研究外 周血 并
阴性对 照 , 沿血小板实 际点 图上缘 设立界值 , 使其RP 百分数在 1 %以下 ,
检测标 本与 自身对 照试验 条件完全一 致 。 流式细胞 仪检/200 f] J I 00 ̄l t l J l l, l
板,P R 结果以 百分数表 示 , P 对值 为血小 板数乘 以R 百 分数 。 得 R绝 P 所 数据 均 以( ± 3 结果 正常对照组、 巳猢 、 、I 色 A 组R 对值分另= l. -66) l 81+ . X J 6 o 1 、 示 , 间 比较采 用 完全随 机 设计 资料 的方 差分 析 。 组
临 床
医
学
CI 0E N El L H AFRl D A N GM C
网织血小板检测在肿瘤放化疗中的应用
25 ・ 0
垦
垦堂查圭
生2 月第 3 卷第 2 I Lb e, b a 1,o 3,o2 2 期 mJ a dF r r 2 1V1 2 . M e uy0 . N
・
综
述 ・
网织血 小 板检 测在 肿 瘤放 化 疗 中的应用
田 英, 庞 洁 综 述 , 一 雯 审校 王
小板 数 量 与 R P之 间无 相关 关 系 , 不 能 反 映 骨 髓 血 小 板 的 生 更 成情 况 。 虽然 MP 与 R V P均 是 反 映 骨 髓 血 小 板 生 成 的 指 标 ,
临 床应 用及 意义 作 一 简要 阐述 。
1 RP 概 述
Iga 和 C o es t 于 16 n rm o p rmi h 9 9年 首 次 发 现 在 大 量 失 血 后 , 周 血 会 出 现 1种 不 同 于 成 熟 血 小 板 的 新 生 血 小 板 , 种 外 这
片 的 干扰 , 而 使 R 从 P与 I F能 够 比 MP 更 能 反 映 骨 髓 巨核 P V
细胞 的功 能活 性 , l 提 供 更 加 翔 实 的 信 息 ] 为 临床 。 33 R . P监 测 在 肿 瘤 放 化 疗 中பைடு நூலகம்的 重 要 性 由 于红 细 胞 在 血 液
中所 占 比例 较 大 , 瘤 患 者 放 化 疗 后 骨 髓 抑 制 情 况 在 红细 胞 系 肿
新 生血 小 板 比成 熟 血 小 板 体 积 更 大 , 质 颗 粒 更 粗 糙 , 被 美 胞 可 蓝染 色 , 明 胞 质 中残 存 R 说 NA 成 分 , 此 将 这 种 不 成 熟 血 小 因 板 称 为 RP或 未 成 熟 血 小 板 , 巨 核 细 胞 转 化 为 血 小 板 过 程 中 是
未成熟血小板比率(IPF)在血小板减少性疾病中的临床应用
未成熟血小板比率(IPF)在血小板减少性疾病中的临床应用作者:郭敏易甜甜来源:《健康之路(医药研究)》2016年第01期【摘要】目的:研究未成熟血小板比率(IPF)与血小板减少性疾病的相关性,及发现未成熟血小板比率(IPF)在血小板减少性疾病临床实践中的价值。
方法:收集20例正常健康人全血标本及103例血小板减少性疾病(PLT【关键词】未成熟血小板比率(IPF);血小板减少性疾病;特发性血小板减少性紫癜(ITP)【中图分类号】R4 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801(2016)01-0047-01前言未成熟血小板比率(immature platelet fraction,IPF),又称网织血小板(reticulated platelet,RP),是指骨髓新近释放进入外周血液并且胞质中还残留一些RNA的血小板,当用新亚甲蓝染料进行染色,因会呈现浅蓝色或深蓝色的网织状结构而得名。
未成熟血小板比率(IPF)能较好地反映骨髓血小板的生成状态,是分析血小板生成状态的有用指标。
目前,随着检测方法的不断改进与提高,未成熟血小板比率的检测也变得越来越方便、快速、准确,从而使它在血小板减少性疾病中的应用也变得越来越广泛。
本研究就是探讨未成熟血小板比率与血小板减少性疾病的相关性,还有它在血小板减少性疾病中的临床应用。
1 材料和方法1.1 材料试剂、校准物及质控品均为日本希森美康公司SysmexXN-3000型全自动血液分析仪的原装配套。
1.2 方法1.2.1 標本收集临床诊断明确的苏州大学附属第二医院2015年8月至12月的住院及门诊血小板减少性疾病(PLT1.2.2 标本检测将收集的患者EDTA-K2抗凝2mL全血标本进行充分的混匀,在Sysmex XN-3000型全自动血液分析仪的PLT-F通道来测定未成熟血小板比率(IPF)。
1.2.3 统计学处理所得数据均采用GraphPad Prism Version 5.0软件进行统计学处理,用均数±标准差( ±s )表示。
网织血小板检测在妊高征患者中的临床意义
( 南 方 医科大 学 附属潮 州 中心 医 院检验 实验 中心 , 广 东潮 州 5 2 1 0 2 1 )
摘 要: 目的 探 讨 网 织 血 小板 在 妊 娠 高血 压 综 合 征 ( 简 称 妊 高征 ) 患者 中 的 变 化 及 临 床 意 义 。方 法 对 经 临 床 确 诊 的 妊 高征 组 的 I P F 较 正 常 非 孕 对 照 组 1 0 8例 妊 高征 患 者 、 4 0例 正 常 晚 期 妊 娠 妇 女 与 4 O 例 正 常 非 孕 妇 女 进 行 网 织 血 小板 百 分 率 ( I P F ) 、 血 小板计 数 ( P L T) 、 平 均 血 小板 体 积 ( MP V) 及 血 小板 分 布 宽 度 ( P DW ) 的检测 , 并进 行 统 计 学 分析 。结 果 及 正 常 晚 期 妊 娠 组 明显 升 高 , 与 正 常 非孕 对 照 组 比 较 差 异 有 统 计 学 意 义 ( £ 一3 . 9 4 , P <0 . 0 0 1 ) , 与 正 常 晚 期 妊 娠 组 比较 差 异 有 统 计 学 意义 ( 一3 . 3 0 , P一0 . 0 0 1 ) 。妊 高征 组 的 P L T 较 正 常非 孕 对 照 组及 正 常 晚 期 妊娠 组 降 低 , 与正 常 非 孕 对 照组 比 较
( De p a r t me n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y C e n t e r , A f f t l i a t e d C h a o z h o u C e n t r a l Ho s p i t a l o f
Pl a t e l e t i n Pr e g n a n c y 。 I n d u c e d Hy p e r t e n s i o n( P I H)
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
网织血小板的检测方法及临床应用肖成华1 李文倩2 冯建明2 [关键词] 网织血小板;血小板减少性紫癜 [中图分类号] R466.6 [文献标志码] B [文章编号] 100422806(2010)0720440202 网织血小板(reticulated platelet s,RP)是介于骨髓成熟的巨核细胞与成熟血小板之间的不成熟血小板,与网织红细胞一样都是刚从骨髓中释放出来的未成熟细胞〔1〕,胞质内含有少量mRNA,体积较大,蛋白质合成能力强〔2〕。
用新亚甲蓝染料,呈现浅蓝色或深蓝色的网织状细胞而得名。
RP能较好地反应骨髓血小板的生成状态。
RP检测是分析血小板生成状态的有用指标,随着检测方法的不断改进,其在临床上应用更广泛,成为血小板减少症的病因诊断和治疗效果评价重要的指标。
1 RP的检测1.1 人工计数与网织红细胞的显微镜计数法相似,在低倍镜下每个视野计数10个血小板,同时计数网织血小板的个数,总共计数100个视野,算出RP的百分比。
由于血小板中网状结构的颗粒非常小、数量又少,在普通光镜下检测非常困难,所以RP的检查很长时间未被临床应用。
1.2 流氏细胞仪测定RNA可以被许多不同的核酸特异荧光染料染色,其中较好的为噻唑橙(t hiazole orange,TO)。
1990年K ienast等用TO作为RNA的荧光染色,通过流式细胞仪能够比较容易地检测出含有RNA 的血小板。
用该法测定50例正常人RP为(8.6±2.8)%(2.8%~15.8%),21例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者RP明显增加,可达(24.9±1019)%(13.3%~57.1%)。
此法对鉴定TO阳性血小板比较容易而准确,不足之处是需把TO和血小板共同孵育1h以上,时间较长,而且全血标本受网织红细胞的荧光干扰较大。
1995年Richards等在上述方法的基础上作了一些改进,将全血标本改为血浆,用缓冲液冲洗后,主要采取1%甲醛固定,再用TO染色,经流式细胞仪测定525nm波长处的荧光强度即为RP数,同时计数血小板总数即求出RP的比值。
1999年林悟等又进一步对TO法作如下改良:①血小板经过固定;②TO浓度需要稀释8倍;③染色时间60~120min,置于室温暗处;④染色时血小板数不受到影响;⑤用抗CD42b单克隆抗体集聚1青海大学医学院(西宁,810001)2青海省人民医院血液科通信作者:冯建明,E2mail:fjmok@ 血小板。
通过以上改良,TO法收到良好效果,但仍有操作复杂、费时之弊。
1.3 自动计数法1995年渡道清明等建立了一种用奥黄O(Au2 ramine O,AO)作为RNA染色剂的RP自动化AO 计数法,主要将RP检测软件安装在自动网织红细胞检测仪上。
具体方法是将外周血标本200μl吸入自动RP检测仪内,其中10μl用于检测,10μl的全血立即与40μl2.6%的AO溶液(95.9%乙二醇和1950μl稀释液)混合,短时间内血小板就被AO 染色。
取2.4μl混合液进入测量室,用波长488nm 的氩激光照射即可自动检测前向散射光强度和荧光强度的散点分布图,前者散点为血小板总数,后者散点为RP数。
这种方法精确度好,而且标本在4℃和22℃中可稳定保存12h。
其最大特点是检测外周血标本仅80s即可检测完毕,为临床应用创造了条件。
2000年Takubo等〔3〕使用该仪器同时测定了免疫性血小板减少性紫癜患者的RP%和大血小板(1arge platelet s,L P)水平,发现慢性免疫性血小板减少性紫癜患者的RP及L P显著高于正常对照组。
1.4 Sysmex XE2100测定2004年日本Sysmex公司研制全自动血球分析仪XE22100,它是一种高档的用于常规检测的血细胞分析仪,其在流式细胞仪的基础上,通过设立、构建网织红细胞和RP的检测通道,并通过升级的软件系统进行不成熟血小板比值(immat ure plate2 let f raction,IPF)检测。
不需要对全血进行预处理,可以快速检测RP,在临床有希望成为一种有效和实用的临床常规检测项目〔4〕。
使用该方法测定IPF在48h以内有良好的重复性和稳定性。
对照组IFP%为(1.1~6.1)%,平均值3.4%;急性ITP 组范围(9.2~33.1)%,平均值为22.3%;急性血栓性血小板减少性紫癜组范围(11.2~30.9)%,平均值为17.2%。
并且随着疾病的治疗好转,IFP%下降〔5〕。
RP稳定性差,Osei2bimpong〔6〕通过对同一受试者新鲜样本及储存样本的IPF测定,发现贮存后样本的IPF改变了,新鲜和储存的IPF差异有统计学意义(P<0.01)。
因此为了获得临床有效的IPF,用新鲜采集的标本进行检查是非常必要的。
Maruyama等〔7〕采用全血的方法(t he whole blood・44・Journal of Clinical Hematology,J ul2010,Vol23No7met hod,WBM)和富含血小板血浆的方法(platelet rich plasma met hod,PRPM)不同的RP收集过程,通过流式细胞仪测定RP并做比较。
结果显示两种方法具有良好、稳定的一致性。
虽然高档的血细胞分析仪已经使网织血小板的自动检测成为可能,但是该类型仪器价格昂贵,需要在某种专门的血细胞分析仪上加装专用软件才可检测RP%,这在多数医院是无法进行的。
流式细胞仪对RP的检测目前仍然是检测网织血小板的主要仪器。
2 RP的临床应用2.1 ITPITP是因血小板免疫性破坏,导致外周血中血小板减少,骨髓巨核细胞代偿性增加,释放到外周的RP增加,随着外周血小板的恢复,RP逐渐降低。
对于临床表现典型的ITP患者,可以不进行骨髓检查,采用周围血RP计数辅助诊断,特别是对小儿ITP具有更加重要的意义〔8〕。
ITP患者的RP、血小板平均容积(M PV)、分布宽度(PDW)、大血小板比率(P2L CR)及血小板相关抗体(PA Ig G)比正常对照组及血小板减少的其他患者明显升高(P<0.05)。
RP、PA Ig G是诊断ITP比较敏感的指标。
RP与ITP的诊断呈正相关(χ2=10.458,P =0.001)〔9〕。
2.2 造血干细胞移植RP是造血干细胞移植中预测骨髓恢复的有效的指标,Michur等〔10〕研究发现在异体造血干细胞移植后10~26d RP由(2.9±1.7)%升至(13.6±614)%,在RP达到峰值后平均3d,外周血小板升至45.6×109/L,RP逐渐降低。
表明RP在骨髓恢复时血小板计数增加前增加,而当血小板计数开始增加时,RP开始下降。
2.3 化疗后骨髓抑制及恢复的指标近年来的研究结果表明外周血RP%、RP绝对值是反映急性白血病(AL)化疗后骨髓变化的一个早期且敏感的指标,AL患者化疗后RP增加,反映骨髓血小板生成能力较好,可为预测PL T恢复时间提供有价值的信息〔11〕。
2.4 在透析患者中的应用血液透析和腹膜透析患者的RP明显高于正常对照组,而血小板总数无变化,提示血小板的更新加速可提供血小板的消耗〔12〕。
2.5 在肝移植中的应用在原位肝移植的患者中,移植后外周血血小板计数在最初5d降至基值,而RP%逐渐升高,第2天由基点1.0%开始升高,在第6天至峰值为416%。
当外周血PL T达到正常范围时(平均11d),RP%重新恢复至移植前水平。
故认为肝移植后RP%的升高加速了外周血血小板的恢复,可作为移植后肝功能重建和血小板恢复的检测指标〔13〕。
参考文献[1]L EINO E E B,HOFFMANN M H,K J A ERSGAARDE,et al.Prediction of haemorrhage in the early stageof actue myeloid leukemia by flow cytometric anaysisof platelet f unction[J].Br J Haematol,2005,128:526-532.[2]UL RIKE N G,EL V IRA A,GUDRUN F,et al.Th2romboembolic events in children with acute lympho2blastic leukemia:prednisoe versus dexamethasone ad2ministration[J].Blood,2003,101:2529-2533.[3]TA KUBO T,YAMAN E T,HINO M,et al.TatsumiN.Clinical significance of simultaneous measurementof reticulated platelets and large platelets in idiopathicthromboeytopenic purpura[J].Haematologia(Buda2p),2000,30:183-192.[4]刘湘帆,HIDEO WADA,胡翊群,等.网织血小板的研究和应用[J].诊断学理论与实践,2005,4(6):505-506.[5]BRIGS C,KUN KA S,HAR T D,et al.Assessment ofan immature platelet fraction(IPF)in peripheralthrombocytopenia[J].Br J Haematol,2004,126:93-99.[6]OSEI2BIMPON G A.The effect of storage on the clini2cal utility of the immature platelet f raction[J].Hema2tol,2009,14:118-121.[7]MARU YAMA H,YAMA GAMI H,WA TARI T,etal.Reticulated platelet levels in whole blood and plate2 let2rich plasma of dogs with various platelet countsmeasured by flow cytometry[J].J Vet Med Sci,2009,71:195-197.[8]L A KKIS N,DO KAINISH H,ABU ZA HRA M,et al.Reticulated platelets in acute coronary syndrome:amarker of platelet activity[J].J Am Coil Cardiol,2004,44:2091-2093.[9]ZHOU J,J IAN G N G,KUAN G L H,et binedindicators for diagnosing immune thrombocytopenicpurpura[J].Sichuan Da Xue Xue Bao Y i Xue Ban,2008,39:1000-1003.[10]MICHU R H,MASL AN KA K,SZCZEPINSKI A,etal.Reticulated platelets as a marker of platelet recov2ery after allogeneic stem cell transplantation[J].Int JLab Hematol,2008,30:519-525.[11]SAL VA GNO G L,MON TA GNANA M,et al.Evalu2aation of platelt turnover by flow cytometry[J].Plate2 lets,2006,17:170-177.[12]HIMM EL FARB J,HOLBROO K D,MCROMONA2G L E E,et al.Increased reticulated platelets in dialysispatients[J].K idney Int,1997,51:83837.[13]李智婷,杨林花.网织血小板检测的临床意义[J].血栓与止血学,2003,9(2):82-84.(收稿日期:2009207207)・144・临床血液学杂志2010年7月第23卷第7期。