实验二青霉素发酵综合实验
青霉素的发酵教案.总结
青霉素的发酵教案.总结项目式教学法教案：青霉素的发酵一、任务背景本项目是抗生素类药物的生产，项目引导旨在学生进行抗生素生产前掌握一些必备的基础知识，包括青霉素、红霉素和链霉素的基本知识。
本任务是青霉素的发酵生产，从青霉素发酵的整个生产工艺流程来训练学生对发酵工程的掌握，针对的培训工种为菌种培育工、微生物发酵工、微生物发酵灭菌工、发酵液提取工、微生物发酵药品精制工、抗生素酶裂解工。
二、培养目标1、知识目标【明确】明确青霉素、结构特点、理化性质及作用机理。
【熟悉】青霉素的定义、分类和命名。
【掌握】青霉素发酵的的工艺特点、要求及一般原理和控制过程。
2、技能目标【1】能熟练进行微生物的初步分离、纯化、鉴定及保藏。
【2】能熟练进行青霉素的发酵生产。
3、素质目标【1】基本素质：能根据需要，确定信息渠道，通过阅读、访谈等方式，收集信息，能用准确的语言表达工作成果。
【2】职业素质：能够按照岗位职责要求，完成各项实训任务，养成良好的职业道德【3】道德素质：能够遵守生产纪律，爱护仪器，节约能源，认真工作，严格遵守仪器操作规程，爱护公共财产，具有安全意识。
三、教学重点与难点【教学重点】青霉素发酵的工艺流程【教学难点】青霉素发酵的条件控制四、教学流程五、教学内容1、生产前准备（1）查找资料，了解青霉素生产基本知识a.什么类的化合物成为青霉素？青霉素的分子结构及其衍生物？b.青霉素的作用机理及应用?c.青霉素理化性质?d.青霉素生产菌有哪些生物学特性？（2）确定生产技术、生产菌种和工艺路线a. 生产技术：微生物发酵技术b.菌种：产黄青霉（Penicillium chrosogenum）c.发酵工艺流程图2、菌种培养（1）生产孢子的制备将砂土保藏的孢子用甘油、葡萄糖、蛋白胨组成的培养基进行斜面培养,经传代活化。
最适生长温度在25~26℃,培养6~8d,得单菌落,再转斜面,培养7~9d,得斜面孢子。
移植到优质小米(或大米)固体培养基上,25℃生长6~7d,制得小米孢子。
实验二青霉素发酵综合实验
实验二青霉素发酵综合实验（七）发酵罐的操作及控制[实验目的]1、学习发酵过程中发酵控制、取样、流加等一般操作过程。
2、了解和学习自动发酵罐的操作过程和注意事项。
[实验原理]一、发酵控制（一）发酵温度的控制1、一般来说，接种后应适当提高培养温度，以利于孢子的萌发或加快微生物的生长、繁殖，而且此时发酵的温度大多数是上升的。
随着发酵液的温度逐渐上升，发酵液的温度应该控制在微生物的最适生长温度；到主发酵旺盛阶段温度的控制可比最适生长温度低些，即控制在微生物代谢产物合成的最适温度；到发酵的后期，温度出现下降的趋势，直至发酵成熟即可放罐。
2、工业发酵过程一般无须加热，因为释放的发酵热常常超过微生物的最适生长温度，所以需要冷却阶段较多。
通常是利用发酵罐的热交换装置进行降温（如采用夹套或蛇形管进行调温），冬季发酵时空气还需进行加热处理，以便维持发酵的正常温度。
（二）发酵pH值控制首先应根据不同微生物的特性，不仅要控制原始培养基的pH值，而且在整个发酵过程中，必须随时检测pH值的变化情况，根据发酵过程中的pH值变化规律，选用适当的方法对pH值进行调节和控制。
在实际生产中，调节和控制pH值的方法主要有以下几种。
1、调节培养基的原始pH值，或加入缓冲溶液（如磷酸盐）制成缓冲能力强、pH值变化不大的培养基，或使眼泪和碳源的配比平衡。
2、在发酵过程中加入弱酸或弱碱经行pH值调节，进而合理的控制发酵条件；也可通过调整通风量来控制pH值。
3、如果仅用酸或碱调节pH值不能改善发酵情况时，进行补料是一个较好的办法，它既可调节培养基的pH值，又可补充营养，增加培养液的浓度和减少阻遏作用，进一步提高发酵产物产率。
4、采用生理酸性铵盐作为氮源时，可在培养液中加入碳酸钙来调节pH值。
但是碳酸钙的加入量一般都很大，在操作上很容易引起染菌。
因此，此方法在发酵过程中应用布氏太广。
5、在发酵过程中根据pH值的变化可用流加氨水的方法来调节，同行又可把氨水作为氮源供给。
青霉素发酵工艺流程实验报告
青霉素发酵工艺流程实验报告下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!一、前言青霉素作为一种广泛应用的抗生素，其发酵工艺的研究对于提高产量、降低生产成本具有重要意义。
实验二 青霉素发酵斜面的制备与接种
实验二青霉素发酵斜面的制备与接种一、实验目的1、掌握斜面的制备和接种的基本操作。
2、了解青霉素发酵的一般知识，对微生物工程生产流程有所了解。
二、实验原理培养基是按照微生物生长繁殖所需要的各种营养物质，用人工方法配制而成的营养基质。
将已灭菌装有琼脂培养基的试管，趁热置于木棒或玻棒上，使之成适当斜度，凝固后即成斜面。
斜面长度不超过试管长度1/2为宜。
如制作半固体或固体深层培养基时，灭菌后则应垂直放置至凝固。
工业微生物斜面试管菌种有几种方法。
（1）点种：把菌种点种在斜面的中部，此法多用于酵母菌的接种。
（2）中央划线：在斜面的中部自下而上划一条线，此法可用于酵母菌的接种，也用于比较细菌的生长速度。
（3）稀波状蜿蜒划线：对于易扩散的菌种多采用此法，以免连成一片。
细菌和放线菌多用此法接种。
（4）密波状蜿蜒划线：多用于斜面以获得大量菌体细胞，生产中多用此法。
（5）纵向划线：多用于快速接种。
（6）挖块接种：挖去菌丝连同少量琼脂培养基，再接种到斜面培养基上，此法多用于真菌的接种。
三、实验材料1、菌种产黄青霉（Pencillium chrysogenum）。
2、培养基察氏固体培养基成分：蔗糖30g，NaNO3 2g，K2HPO4 1g，KCl 0.5g，MgSO4 0.5g，FeSO4 0.01g，琼脂20g，水1000ml，pH自然，121℃灭菌20min。
3、器材镊子，1ml和10ml无菌吸管，无菌水，天平，高压蒸汽灭菌锅，超净台，培养箱等。
四、方法步骤（一）固体培养基的配制1. 称量：按照培养基的配方准确称取各成分。
2. 溶解：用烧杯先装少许水，依此将药品倒入烧杯，加足水，然后在电炉上加热溶解。
待煮沸后加入称好的琼脂（1.5％－2％），并用玻棒不断搅拌。
3.定容：待全部药品溶解后，倒入量筒中，加入至所需要的体积。
如某中药品用量太少时，可预先配成较浓溶液，然后按照比例吸取一定体积溶液，加入至培养基中。
4. 调节pH值：用精密的pH试纸测定，并用1% 氧化钠或5％盐酸调节到所需的pH值。
青霉素发酵工艺仿真实验报告
青霉素发酵工艺仿真实验报告
一、实验目的
1、了解青霉素发酵工艺原理及操作过程。
2、掌握青霉素发酵装置的基本操作方法，掌握发酵参数的调节技巧。
3、进行实验仿真，验证参数的调节方法是否符合实验要求。
二、实验原理
青霉素发酵工艺是指利用青霉素菌进行发酵获得青霉素的过程，一般采用液态发酵。
发酵工艺的发酵条件有温度、湿度、pH值、时间等，发酵液体的物理性质也会影响青霉素发酵的产率。
三、实验方法
1、实验仪器准备：
（1）青霉素发酵模拟装置
（2）量筒
（3）直流搅拌机
2、操作步骤：
（1）安装青霉素发酵仪；
（2）待装置稳定后，校准温度及湿度，进行发酵；
（3）根据发酵过程的参数调定好，设置发酵时间，开始发酵；
（4）根据实验结果，对参数进行调整，观察发酵后产物的变化；
（5）判断实验结果是否达到实验要求，如有不符合要求的参数，进行调整，直至实验结果满足要求。
四、实验结果
1、发酵后的青霉素含量为11.4%，较理想值接近；
2、温度在25℃-30℃之间，湿度50%-60%；
3、发酵时间设置在48小时，搅拌机调节在240-250RPM，杀菌温度在120℃以上。
五、实验总结
1、实验结果符合实验要求，表明发酵温度、湿度、pH值、搅拌转速的设置符合有机发酵要求；
2、本实验的实验数据可以为后续发酵技术的应用提供参考；
3、可以在未来针对有机发酵体系的其他指标进行深入研究。
青霉素的发酵实训报告
一、实训背景青霉素作为一种重要的抗生素，广泛应用于临床治疗细菌感染。
青霉素的发酵生产是生物制药的重要环节，通过微生物发酵技术生产青霉素是获得大量青霉素的关键步骤。
本次实训旨在通过模拟青霉素发酵过程，了解青霉素的生产工艺，掌握发酵操作技能，提高对生物制药行业的认识。
二、实训目的1. 了解青霉素发酵的基本原理和工艺流程。
2. 掌握青霉素发酵过程中的操作技能。
3. 培养实际操作能力，提高生物制药行业从业人员的综合素质。
三、实训内容1. 青霉素发酵的基本原理青霉素发酵是指利用微生物（如青霉菌）在适宜的条件下，将原料转化为青霉素的过程。
发酵过程中，微生物分泌的酶将原料分解为青霉素的中间体，进而转化为青霉素。
2. 青霉素发酵工艺流程青霉素发酵工艺流程主要包括以下步骤：（1）原料准备：包括淀粉、糖、氮源、磷酸盐、维生素等。
（2）菌种活化：将菌种从保藏培养基中转接到发酵培养基上，进行活化培养。
（3）种子扩大培养：将活化后的菌种扩大培养，获得一定浓度的种子液。
（4）发酵：将种子液接种到发酵培养基中，在适宜的条件下进行发酵。
（5）提取：将发酵液进行提取，获得青霉素粗品。
（6）精制：对青霉素粗品进行精制，得到纯度较高的青霉素产品。
3. 青霉素发酵操作技能（1）原料准备：按照工艺要求，准确称量各种原料，加入适量水，搅拌均匀。
（2）菌种活化：将菌种从保藏培养基中转接到发酵培养基上，置于适宜条件下进行活化培养。
（3）种子扩大培养：将活化后的菌种扩大培养，获得一定浓度的种子液。
（4）发酵：将种子液接种到发酵培养基中，控制发酵温度、pH值、溶氧等条件，使青霉菌在发酵过程中产生青霉素。
（5）提取：将发酵液进行提取，得到青霉素粗品。
（6）精制：对青霉素粗品进行精制，得到纯度较高的青霉素产品。
四、实训结果与分析1. 青霉素发酵过程中，温度、pH值、溶氧等条件对青霉素产量有显著影响。
通过优化发酵条件，可以提高青霉素的产量。
2. 实训过程中，通过熟练掌握发酵操作技能，提高了青霉素的发酵效率。
发酵工程综合性实验2青霉素发酵实验
发酵工程综合性实验2青霉素发酵实验发酵工程综合性实验2：青霉素的发酵一、目的与要求1、学习青霉素生产发酵的工艺流程；2、学习微型发酵罐（5L）的使用；2、通过实验，以具体的青霉素发酵生产工艺流程为例，学习发酵原理，掌握种子制备、发酵过程控制、与发酵相关参数的检测，掌握效价测定方法；二、实验原理1、工艺控制（1）影响发酵产率的因素基质浓度在分批发酵中，常常因为前期基质量浓度过高，对生物合成酶系产生阻遏（或抑制）或对菌丝生长产生抑制（如葡萄糖和钱的阻遏或抑制, 苯乙酸的生长抑制）, 而后期基质浓度低限制了菌丝生长和产物合成, 为了避免这一现象, 在青霉素发酵中通常采用补料分批操作法, 即对容易产生阻遏、抑制和限制作用的基质进行缓慢流加以维持一定的最适浓度。
这里必须特别注意的是葡萄糖的流加, 因为即使是超出最适浓度范围较小的波动, 都将引起严重的阻遏或限制, 使生物合成速度减慢或停止。
目前, 糖浓度的检测尚难在线进行, 故葡萄糖的流加不是依据糖浓度控制, 而是间接根据pH 值、溶氧或C02 释放率予以调节。
（2）温度青霉素发酵的最适温度随所用菌株的不同可能稍有差别, 但一般认为应在25 °C 左右。
温度过高将明显降低发酵产率, 同时增加葡萄糖的维持消耗, 降低葡萄糖至青霉素的转化率。
对菌丝生长和青霉素合成来说, 最适温度不是一样的, 一般前者略高于后者, 故有的发酵过程在菌丝生长阶段采用较高的温度，以缩短生长时间, 到达生产阶段后便适当降低温度, 以利于青霉素的合成。
（3）pH 值青霉素发酵的最适pH 值一般认为在 6. 5 左右, 有时也可以略高或略低一些, 但应尽量避免pH 值超过7.0, 因为青霉素在碱性条件下不稳定,容易加速其水解。
在缓冲能力较弱的培养基中, pH 值的变化是葡萄糖流加速度高低的反映。
过高的流加速率造成酸性中间产物的积累使pH 值降低；过低的加糖速率不足以中和蛋白质代谢产生的氨或其他生理碱性物质代谢产生的碱性化合物而引起pH 值上升。
青霉素的实习报告
一、实习背景青霉素，作为人类历史上发现的第一种抗生素，自20世纪以来，其在临床医学领域的作用举足轻重。
为了深入了解青霉素的生产过程，提高自身在生物制药领域的实践能力，我于近期参加了青霉素发酵生产实习。
二、实习目的1. 熟悉青霉素发酵生产的基本原理和工艺流程；2. 掌握青霉素生产过程中的关键操作和设备；3. 培养团队合作精神和实践能力；4. 提高自身在生物制药领域的综合素质。
三、实习内容1. 青霉素发酵生产的基本原理青霉素发酵生产是通过微生物发酵产生青霉素的过程。
在发酵过程中，微生物利用培养基中的营养物质，通过代谢产生青霉素。
青霉素属于β-内酰胺类抗生素，具有杀菌作用，主要用于治疗敏感菌引起的各种疾病。
2. 青霉素发酵工艺流程青霉素发酵工艺流程主要包括以下步骤：（1）培养基制备：根据微生物的生长需求，制备含有碳源、氮源、无机盐、维生素等营养物质的培养基。
（2）种子培养：将制备好的培养基在一定的温度、pH值和通气条件下进行种子培养，培养出一定浓度的种子液。
（3）发酵：将种子液接种到发酵罐中，在适宜的温度、pH值和通气条件下进行发酵，产生青霉素。
（4）发酵液的分离：发酵结束后，通过离心、过滤等手段将发酵液中的青霉素提取出来。
（5）精制：对提取出的青霉素进行精制，去除杂质，得到高纯度的青霉素产品。
3. 青霉素生产过程中的关键操作和设备（1）关键操作1）培养基的制备：严格按照配方和工艺要求，准确称量各种原料，并充分搅拌均匀。
2）种子培养：控制好温度、pH值和通气量，确保种子液的浓度和活力。
3）发酵：严格控制发酵过程中的温度、pH值、通气量等参数，保证发酵效果。
4）发酵液的分离：根据青霉素的溶解度，选择合适的分离方法，提高青霉素的提取率。
5）精制：采用合适的精制工艺，去除杂质，得到高纯度的青霉素产品。
（2）关键设备1）发酵罐：用于发酵过程中微生物的生长和青霉素的生成。
2）离心机：用于发酵液的分离，提取青霉素。
青霉素发酵综合性实验
发酵工艺学综合性实验：青霉素的发酵一、目的与要求通过实验，以具体的青霉素发酵生产工艺流程为例，掌握发酵原理，掌握种子制备、发酵过程控制、与发酵相关参数的检测，掌握效价测定方法，为学生提供理论联系实际的机会。
二、材料和用品菌种：产黄青霉、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌仪器：灭菌锅、培养箱、超净工作台、大三角瓶、烘箱、水浴锅三、实验内容（一）、发酵过程控制1.培养基配制培养基的组成（％）：PDA培养基。
2．培养基的分装及其灭菌将配好的培养基分装到250mL摇瓶中，每瓶100mL，最后将培养基置于121℃灭菌20min。
3．接种将已经活化的斜面种子（产黄青霉）接种到摇瓶中30℃摇床中培养。
4．观察和取样观察发酵过程中是否存在异常情况，如发酵液颜色、气味等是否异常等情况。
每12h取样一次，每次10mL左右。
4．培养时间及镜检一般培养需要3-4d左右，然后利用镜检来检测发酵过程是否染菌。
（二）、发酵过程中生理生化指标的检测1.利用称重法测定生长曲线将每批次的样品（5-10mL）离心后称重，测得不同时间菌体的质量，以时间为横坐标，质量为纵坐标，得到曲线。
2.测糖利用DNS法，测定每批次的样品（5-10mL）离心后的发酵液的还原糖的含量，以时间为横坐标，含量为纵坐标，得到曲线。
（三）、青霉素效价测定（利用抑菌圈的实验方法测定青霉素效价）1.培养基配制LB培养基2.指示菌的培养选取指示菌金黄色葡萄球菌、枯草杆菌接种到灭过菌的液体培养基中，在300C左右培养24-36h。
3.抑菌试验步骤a.取0.2mL培养好的指示菌于平皿中，每种菌做2-3个平行样。
b.用涂棒将指示菌在平皿中涂布均匀。
c.用打孔器在涂布均匀的平皿中央打孔。
d.取0.1mL不同时间取样的发酵液于孔中。
e.最后将平皿放置于300C左右培养箱中培养并观察。
四、实验结果分析1.绘制生长曲线（即干重-t曲线）。
；2.绘制残糖变化曲线；3.绘制青霉素效价（透明圈直径表示）变化曲线测定菌体干重（3学时）一、实验目的学会测定菌体干重的方法。
青霉素发酵综合实验
实验二青霉素发酵综合实验（三)青霉素发酵效价的生物学测定一、实验目的1、了解青霉素作用的机理2、了解青霉素效价的生物学测定的原理3、掌握管碟法测量抗生素效价的方法4、掌握青霉素摇瓶培养的操作流程二、实验原理（一）、青霉素及作用的机理1.抗生素：是某些微生物在其代谢过程中所产生的，能抑制或杀灭其他病原微生物的化学物质；是细菌、真菌、放线菌等微生物的代谢产物。
主要从微生物的培养液中提取，能杀死或抑制其他病原微生物。
⏹在低浓度即可对某些生物的生命活动有特异一直作用的化学物质的总称。
2. 青霉素⏹天然青霉素系从青霉菌的培养液中提取获得，主要含有：青霉素F、G、X、K和双氢F五种。
其中以青霉素G(又名苄青霉素)的作用最强，性质较稳定，产量亦较高。
青霉素钾盐、钠盐的性质：⏹遇酸、碱或氧化剂等迅速失效。
有引湿性；在水中极易溶解，乙醇中溶解，在脂肪油或液状石蜡中不溶。
⏹水溶液在室温放置易失效；20万IU/ml青霉素溶液于30 ℃放置24h，效价下降 56%，青霉烯酸含量增加200倍，临床应用时要新鲜配制。
（所以只有粉制剂，没有注射液，用时用注射用水稀释；如使用不完，放置不要过久）。
3. 青霉素作用机理•使细菌细胞壁缺损(黏肽)，菌体内的高渗透压使细胞外面的水分不断地渗入菌体内，引起菌体膨胀变形，加上激活自溶酶，使细菌裂解而死亡.G+(二)青霉素效价的生物学测定的原理1.效价:是评价抗生素效能的标准，也是衡量抗生素活性成分含量的尺度微生物鉴定法：以抗生素对微生物的杀伤力或抑制程度为指标来衡量抗生素效价的方法理化方法：根据抗生素的结构特点，利用其特有的化学或物理性质及反应而进行的抗生素活性表示方法：抗生素的活性以效价单位来表示;每ml或每mg中含有某种抗生素的有效成分的多少，用单位u表示一个青霉素效价单位：能在50mL肉汤培养基中完全抑制金黄色葡萄球菌发育的最小青霉素剂量;以IU表示1mg青霉素G钠盐定为1667单位；1mg青霉素G钾盐为1595单位(三) 管碟法测量抗生素效价的方法1.利用抗生素在培养基内的扩散渗透作用，将已知效价的标准品溶液与未知效价的被检品溶液在同样条件下加入已放置在含有高度敏感性的试验菌的培养基上的小管内2.培养后，在抗生素扩散到达的适当范围内，产生了透明的抑菌圈。
青霉素生产流程实训报告
一、实训背景青霉素作为一种重要的抗生素，广泛应用于临床治疗感染性疾病。
为了深入了解青霉素的生产流程，我们组织了一次青霉素生产流程的实训活动。
通过本次实训，我们旨在掌握青霉素的生产原理、工艺流程以及相关操作技能。
二、实训目的1. 理解青霉素的生产原理和工艺流程。
2. 掌握青霉素生产过程中的关键操作步骤。
3. 培养实际操作能力，提高对青霉素生产的认识。
三、实训内容本次实训主要包括以下几个方面：1. 菌种发酵- 菌种接种：将产黄青霉菌接种到固体培养基上，培养7-10天，得到青霉菌孢子培养物。
- 种子培养：用无菌水将孢子制成悬浮液，接种到种子罐内已灭菌的培养基中，在27℃下培养24-28小时。
- 发酵培养：将种子培养液接种到发酵罐已灭菌的含有苯乙酸前体的培养基中，在27℃下培养7天，过程中需补入苯乙酸前体及适量的培养基。
2. 提取精制- 冷却发酵液：将发酵液冷却至室温。
- 过滤：将冷却后的发酵液进行过滤，得到滤液。
- 萃取：在pH 2-2.5的条件下，用醋酸丁酯进行多级逆流萃取，得到丁酯萃取液。
- 缓冲液处理：将丁酯萃取液转入pH 7.0-7.2的缓冲液中。
- 脱色：将缓冲液中的丁酯萃取液经活性炭脱色。
- 成盐：加入成盐剂，经共沸蒸馏，得到青霉素G钾盐。
- 钠盐制备：将青霉素G钾盐通过离子交换树脂（钠型）制得青霉素G钠盐。
3. 半合成青霉素- 6APA制备：利用微生物产生的青霉素酰化酶裂解青霉素G或V，在40-50℃、pH 8-10的条件下进行酶反应，或用化学法裂解青霉素G制得。
- 侧链引入：将相应的有机酸与6APA进行酰化反应，制得各种类型的半合成青霉素。
四、实训过程1. 菌种发酵- 准备培养基：将产黄青霉菌接种到固体培养基上，培养7-10天。
- 种子培养：将孢子制成悬浮液，接种到种子罐内已灭菌的培养基中，在27℃下培养24-28小时。
- 发酵培养：将种子培养液接种到发酵罐已灭菌的含有苯乙酸前体的培养基中，在27℃下培养7天。
青霉素发酵实操过程 1.15摇瓶菌种制备
通过孢子计数来获得一粒大米的孢子数量，然后称量大米的克数及相应米粒数量，来推知其整体所含孢子数，来确定单位体积培养液的接种量(1粒米含1.4×106个孢子，接种量为200亿孢子/吨)。
得到的培养物能否检测其生长量？（答案是肯定的）
一般用菌体浓度来反映培养液里菌丝生长量，通过溶液比浊度或单位体积菌丝体干重的测定来反映菌体浓度。
分组操作
第五步
（10分钟）
接种工具及材料准备
巡回指导
分组操作
第六步
（30分钟）
紫外照射
加水示范指导
单独练习
第七步
（10分钟
孢子悬浮液制备
教师示范
分组操作
第八步
（20分钟）
倒入悬液、上下振摇
教师示范
轮流监控、压力准确
第九步
（50分钟
摇床动态观察培养
巡回指导
记时准确、书写报告报告
具体教学过程（含讲解内容）
3.方案具体实施
各小组按照产黄青霉菌株大米孢子制备制备流程的定稿方案，利用实验室的器材，具体实施：称量→煮制→分装→灭菌→无菌检验→接种→振荡培养管理，最后进行菌体浓度测定，制作自己青霉素发酵实训动漫演示作业。
仔细观察实训生产的过程，对每一步都进行记录，最后完成小组用书的项目记录表。注意：亲米接种后或亲米接入生产米后要经过激烈振荡混匀才可放置恒温培养；
生产米要求每粒米的孢子量达到300万个以上。
亲米、生产米孢子保存在5℃冰箱内。
4.关键能力的重点指导（检查）
教师对学生的实践练习进行有效监控，巡回指导，及时指出不规范的操作。并对其关键能力进行重点指导。如培养基制备、灭菌、接种、振荡培养及菌体浓度测定等。
青霉素的发酵系列实验
实验三青霉素的发酵系列实验一.实验目的1.通过青霉素发酵,对抗生素发酵有一个初步的了解；2.掌握抗生素发酵过程中一些重要生理指标的分析方法。
二、实验原理抗生素产生菌在发酵过程中，利用培养基中的各种营养成分进行一系列的代谢变化，同时分泌出许多的代谢产物。
就菌体代谢类型来说，可分为分解代谢产物和合成代谢产物，而合成代谢产物又分为初级代谢产物和次级代谢产物，抗生素就是次级代谢产物中的一类。
抗生素发酵的过程中生成菌株的代谢研究是提高抗生素产量的一个重要环节，很多工作，如生产菌株的选育、新抗生素的研究、菌株营养要求、发酵调节以及工艺设备的改进等，都与菌株的代谢研究密切相关。
三、实验材料与器材1.菌种产黄青霉2.发酵培养基配方如下:PDA培养基3.金黄色葡萄球菌4.器材：不锈钢小杯（牛津小杯），培养皿，移液枪，三角瓶等。
四、实验方法1.菌种培养将产黄青霉3.546接种到察氏琼脂斜面培养基上,26度培养5~6天备用.2.发酵从察氏斜面培养基上移种环青霉菌孢子,接种到三角瓶发酵培养液中,然后将三角瓶置于冰箱保存，每隔24h取出一瓶,放入摇床。
3.分析、测定青霉菌效价的测定（单位/mL）抗菌物质的微生物测定方法有稀释法、比浊法以及琼脂扩散法。
本实验采用国际上最普遍应用的琼脂平板扩散法来测定青霉素效价。
它是将规格一定的不锈钢小管置于带菌的琼脂平板上，管中加入被测液，在室温中扩散一定时间后放入恒温箱培养。
在菌体生长的同时，被测液（抗生素）扩散到琼脂平板内，抑制周围菌体的生长或杀死周围菌体，从而产生不长菌的透明抑菌圈。
在一定范围内，抗菌物质的浓度（对数值）与抑菌圈直径（数学值）呈直线关系。
4.金黄色葡萄球菌悬液的制备取在传代琼脂培养基上连续培养3~4代的金黄色葡萄球菌，用0.85%的生理盐水洗下，离心沉淀，倾去上层清夜，菌体沉淀后再用生理盐水洗1~2次，最后将菌液稀释至18~21亿个/mL。
或者用光电比色计测定，透光率为20%（波长在650nm）。
青霉素发酵综合性实验
发酵工程综合性实验2：青霉素的发酵一、目的与要求通过实验，以具体的青霉素发酵生产工艺流程为例，掌握发酵原理，掌握种子制备、发酵过程控制、与发酵相关参数的检测，掌握效价测定方法，为学生提供理论联系实际的机会。
二、材料和用品菌种：产黄青霉、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌仪器：灭菌锅、培养箱、超净工作台、大三角瓶、烘箱、水浴锅三、实验内容（一）、发酵过程控制1.培养基配制培养基的组成（％）：玉米浆3.8，蔗糖2，硫酸铵0.2，碳酸钙0.1，硫酸亚铁0.02，泡敌0.03，pH 4.7～4.9。
2．培养基的分装及其灭菌将配好的培养基分装到250mL摇瓶中，每瓶100mL，最后将培养基置于121℃灭菌20min。
3．接种将已经活化的斜面种子（产黄青霉）接种到摇瓶中30℃摇床中培养。
4．观察和取样观察发酵过程中是否存在异常情况，如发酵液颜色、气味等是否异常等情况。
每12h 取样一次，每次10mL左右。
4．培养时间及镜检一般培养需要3-4d左右，然后利用镜检来检测发酵过程是否染菌。
（二）、发酵过程中生理生化指标的检测1.利用称重法测定生长曲线将每批次的样品（5-10mL）离心后称重，测得不同时间菌体的质量，以时间为横坐标，质量为纵坐标，得到曲线。
2.测糖利用DNS法，测定每批次的样品（5-10mL）离心后的发酵液的还原糖的含量，以时间为横坐标，含量为纵坐标，得到曲线。
（三）、青霉素效价测定（利用抑菌圈的实验方法测定青霉素效价）1.培养基配制LB培养基2.指示菌的培养选取指示菌金黄色葡萄球菌、枯草杆菌接种到灭过菌的液体培养基中，在300C左右培养24-36h。
3.抑菌试验步骤a.取0.2mL培养好的指示菌于平皿中，每种菌做2-3个平行样。
b.用涂棒将指示菌在平皿中涂布均匀。
c.用打孔器在涂布均匀的平皿中央打孔。
d.取0.1mL不同时间取样的发酵液于孔中。
e.最后将平皿放置于300C左右培养箱中培养并观察。
四、实验结果分析1.绘制pH-t（时间）曲线；2.绘制生长曲线（即干重-t曲线）。
青霉素发酵工艺实习报告
一、实习背景青霉素，作为人类历史上发现的第一种抗生素，自20世纪以来在医疗领域发挥着举足轻重的作用。
青霉素的发酵生产是生物制药的典型案例，其生产工艺涉及微生物发酵、生物转化等多个环节。
为了更好地了解青霉素发酵工艺，提高自身实践能力，我们于近期进行了青霉素发酵工艺的实习。
二、实习目的1. 了解青霉素发酵的基本原理和工艺流程。
2. 掌握青霉素发酵过程中的关键操作和控制要点。
3. 熟悉发酵设备的操作和维护方法。
4. 提高团队协作和沟通能力。
三、实习内容1. 青霉素发酵基本原理青霉素是由青霉菌属的微生物通过发酵产生的一种次级代谢产物。
在发酵过程中，青霉菌利用碳源、氮源、无机盐等营养物质，通过生物转化产生青霉素。
2. 青霉素发酵工艺流程青霉素发酵工艺流程主要包括以下步骤：（1）种子培养：从冷冻保存的青霉菌菌株中挑选适宜的菌株进行培养，通常选择青霉菌属中的Penicillium chrysogenum菌株。
（2）发酵罐接种：将培养好的青霉菌菌株接入预先准备好的发酵罐中。
（3）发酵过程：在发酵罐中，青霉菌利用碳源、氮源等营养物质进行生长和代谢，产生青霉素。
（4）发酵液提取：将发酵液进行离心、洗涤、干燥等操作，提取青霉素。
（5）纯化：对提取的青霉素进行纯化，去除杂质，得到高纯度的青霉素产品。
3. 发酵设备操作与维护实习期间，我们学习了发酵设备的操作和维护方法，包括：（1）发酵罐的操作：掌握发酵罐的启动、运行、停止等操作步骤。
（2）发酵罐的清洗与消毒：了解发酵罐的清洗与消毒方法，确保发酵过程的卫生。
（3）辅助设备的操作：熟悉搅拌器、压缩机、冷却器等辅助设备的操作方法。
4. 发酵过程控制发酵过程控制是青霉素发酵工艺的关键环节，主要包括以下内容：（1）温度控制：青霉菌生长和代谢的最佳温度为26~28℃，发酵过程中需严格控制温度。
（2）pH控制：发酵过程中需保持适宜的pH值，一般为6.5~7.5。
（3）溶氧控制：发酵过程中需保持一定的溶氧量，以促进青霉菌的生长和代谢。
青霉素发酵工艺实习报告
实习报告实习内容：青霉素发酵工艺实习时间：xxxx年xx月xx日实习单位：xxxx生物技术有限公司一、实习背景青霉素作为一种重要的抗生素，对于人类医学和兽药领域具有广泛的应用。
青霉素的生产主要通过微生物发酵工艺实现，而发酵过程的控制和优化对于提高生产效率和产品质量至关重要。
为此，我来到了xxxx生物技术有限公司，进行了为期一个月的青霉素发酵工艺实习，以深入了解发酵过程和相关的技术要点。
二、实习内容实习期间，我主要参与了青霉素发酵工艺的各个环节，包括种子培养、发酵罐接种、发酵过程控制、产物提取和纯化等。
1. 种子培养：我首先从冷冻保存的青霉菌菌株中挑选适宜的菌株进行培养。
通过选择Penicillium chrysogenum菌株，我了解到该菌株具有较高的青霉素产量。
菌株可以从微生物种子库获得适合培养的种苗或自行基因工程构建高产菌株。
2. 发酵罐接种：我将培养好的青霉菌菌株接入预先准备好的发酵罐中。
发酵罐具备合适的容积、搅拌速度、通气能力和温度控制系统，以提供适宜的环境条件促进菌株生长和代谢产物合成。
在接入青霉菌菌株之后，发酵罐中的培养基开始剧烈地翻滚，这是因为搅拌器在不断地搅拌，以保证菌株在罐中分布均匀。
3. 发酵过程控制：我了解到通气能力的大小对于青霉菌的生长和代谢产物的合成是至关重要的。
如果通气不足，会导致菌株生长缓慢，而通气过量则可能导致菌株代谢异常。
因此，我学会了如何精确控制通气系统。
同时，温度控制系统也是非常关键的。
青霉菌菌株需要在一定的温度范围内才能正常生长和代谢。
如果温度过高或者过低，都可能影响菌株的生长和代谢产物的合成。
4. 产物提取和纯化：在发酵完成后，我参与了青霉素产物的提取和纯化过程。
通过使用适当的溶剂和分离技术，我学会了如何从发酵液中提取青霉素，并将其纯化至所需的纯度。
三、实习收获通过这次实习，我深入了解了青霉素发酵工艺的各个环节，掌握了发酵过程的控制和优化技术。
我学会了如何进行种子培养、发酵罐接种、发酵过程控制、产物提取和纯化等操作。
药品生产技术《青霉素仿真生产实训》
综合实训工程青霉素仿真生产实训
一、实训目的
1、熟悉青霉素发酵生产的工艺流程
2、完成青霉素发酵和提取的仿真操作。
二、实训原理
1、种子
丝状菌的生产菌种保藏在砂土管中。
由砂土孢子接入拉氏培养基的目瓶斜面上，经25O C培养6-7天，长成绿色孢子，只成孢子悬浮液，接入装有大米的茄子瓶中，经25O C，相对湿度50-45%，培养6-7天，制成大米孢子，真空枯燥。
生产时按一定接种量移入种子罐内，25O C培养40-45小时，菌丝浓度达40%以上，菌丝形态正常，即按10-15%的接种量移入繁殖罐内。
经25O C 培养13-15小时，菌丝体积40%以上，残糖%发酵罐接种量为30%
球状菌的生产种子由冷冻管孢子经的玉米浆的原始亲米孢子，移入罗氏瓶
25O C培养3-4天生产大米孢子〔生产米〕。
将生产米接
入含花生饼粉、玉米胚牙粉、G、饴糖为主的种子罐内，
28O C培养50-60小时，当l开始补前体，每4小时补一
次
使苯乙酰胺浓度为球：因发酵根底培养基中没有前体，在10小时左右
开始参加
尿素、氨水和苯醋酸的混合料，每3小时加一次
c in
6、搅拌10min后，翻开阀V41、V42及泵in。
5、翻开阀V45、V46及泵in。
16、停止洗涤罐搅拌器。
并设定时间，保持10min。
17、翻开阀V50，排出废洗液。
18、待废洗液排尽后，关闭阀V50。
19、点击“移出晶体〞，将洗涤后的晶体移至真空枯燥机。
2021启动枯燥机，进行枯燥，并设定时间为2021n
21、关闭枯燥机开关，停止枯燥。
青霉素实习报告
一、实习背景随着生物制药行业的快速发展，生物工程专业的学生在毕业前需要进行一段时间的实习，以增强实际操作能力，为今后的职业生涯奠定基础。
本次实习，我选择了生物制药仿真实习：工业级青霉素发酵生产项目，通过模拟青霉素生产过程，了解青霉素的发酵工艺、设备操作及质量控制等方面知识。
二、实习目的1. 熟悉青霉素的发酵工艺流程，掌握青霉素发酵的基本原理和操作方法；2. 了解青霉素生产过程中的设备操作，提高实际操作能力；3. 掌握青霉素生产质量控制的方法和标准；4. 培养团队合作精神，提高沟通协调能力。
三、实习内容1. 青霉素发酵工艺流程青霉素发酵生产主要包括以下几个步骤：（1）培养基的制备与灭菌：根据青霉素生产需要，制备含有葡萄糖、蛋白胨、酵母提取物等营养成分的培养基，然后进行高压蒸汽灭菌，确保培养基无菌。
（2）种子液的制备与扩大培养：从母液中接种少量青霉素菌种，进行扩大培养，获得一定浓度的种子液。
（3）发酵过程：将种子液接种到发酵罐中，控制温度、pH值、溶氧等条件，使青霉素菌种在发酵罐内大量繁殖，产生青霉素。
（4）发酵液的处理：发酵结束后，对发酵液进行过滤、离心、浓缩等处理，得到青霉素粗品。
（5）精制：将青霉素粗品进行精制，得到符合质量标准的青霉素产品。
2. 设备操作实习过程中，我熟悉了以下设备操作：（1）配液罐：用于制备培养基，控制搅拌速度、温度等参数，确保培养基均匀混合。
（2）连消塔：用于培养基的连续灭菌，保证培养基的无菌状态。
（3）维持罐：用于种子液的扩大培养，控制温度、pH值等参数，确保种子液质量。
（4）发酵罐：用于青霉素发酵，控制温度、pH值、溶氧等参数，使青霉素菌种大量繁殖。
（5）补料罐：用于发酵过程中添加营养物质，满足青霉素菌种生长需求。
（6）CIP清洗系统：用于发酵罐的在线清洗，确保设备卫生。
3. 质量控制青霉素生产过程中的质量控制主要包括以下几个方面：（1）原料质量：确保培养基、种子液等原料的质量符合要求。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
实验二青霉素发酵综合实验（七）发酵罐的操作及控制[实验目的]1、学习发酵过程中发酵控制、取样、流加等一般操作过程。
2、了解和学习自动发酵罐的操作过程和注意事项。
[实验原理]一、发酵控制（一）发酵温度的控制1、一般来说，接种后应适当提高培养温度，以利于孢子的萌发或加快微生物的生长、繁殖，而且此时发酵的温度大多数是上升的。
随着发酵液的温度逐渐上升，发酵液的温度应该控制在微生物的最适生长温度；到主发酵旺盛阶段温度的控制可比最适生长温度低些，即控制在微生物代谢产物合成的最适温度；到发酵的后期，温度出现下降的趋势，直至发酵成熟即可放罐。
2、工业发酵过程一般无须加热，因为释放的发酵热常常超过微生物的最适生长温度，所以需要冷却阶段较多。
通常是利用发酵罐的热交换装置进行降温（如采用夹套或蛇形管进行调温），冬季发酵时空气还需进行加热处理，以便维持发酵的正常温度。
（二）发酵pH值控制首先应根据不同微生物的特性，不仅要控制原始培养基的pH值，而且在整个发酵过程中，必须随时检测pH值的变化情况，根据发酵过程中的pH值变化规律，选用适当的方法对pH值进行调节和控制。
在实际生产中，调节和控制pH值的方法主要有以下几种。
1、调节培养基的原始pH值，或加入缓冲溶液（如磷酸盐）制成缓冲能力强、pH值变化不大的培养基，或使眼泪和碳源的配比平衡。
2、在发酵过程中加入弱酸或弱碱经行pH值调节，进而合理的控制发酵条件；也可通过调整通风量来控制pH值。
3、如果仅用酸或碱调节pH值不能改善发酵情况时，进行补料是一个较好的办法，它既可调节培养基的pH值，又可补充营养，增加培养液的浓度和减少阻遏作用，进一步提高发酵产物产率。
4、采用生理酸性铵盐作为氮源时，可在培养液中加入碳酸钙来调节pH值。
但是碳酸钙的加入量一般都很大，在操作上很容易引起染菌。
因此，此方法在发酵过程中应用布氏太广。
5、在发酵过程中根据pH值的变化可用流加氨水的方法来调节，同行又可把氨水作为氮源供给。
由于氨水作用快，对发酵液的pH值影响波动大，应采用少量多次的流加方法，以免造成pH值过高，从而抑制微生物细胞的生长，或pH值过低，NH4+不足等现象。
具体的流加方法应根据微生物的特性、发酵过程的菌体生长情况、耗糖情况等来决定，一般控制在pH值7.0～8.0，最好采用自动控制连续流加方法。
6、以尿素作为氮源经行流加调节pH值，是目前国内味精厂普遍采用的方法。
尿素分解放出氨，使pH值上升；同时氨和培养基中的营养成分被微生物利用后形成有机酸等中间代谢产物，使pH值降低；此时就需要流加尿素，以调节pH值和补充氮源。
反复进行流加就可维持一定的pH值。
7、目前已有用于发酵过程的pH测量电极，可连续测量并记录pH值的变化，用于控制和检测发酵pH值。
（三）提高溶解氧的措施控制溶解氧的工艺手段主要是从供氧和需氧两方面来考虑。
影响溶解氧效果的主要因素有：（1）通气流量（通风量）；（2）搅拌速度；（3）气体组分中的氧分压；（4）罐压；（5）温度；（6）温度；（7）培养基的物理性质等。
而影响需氧的则是菌体的生理特性，诸如不同菌龄的呼吸强度差别，基质加入时菌丝耗氧的增加等。
工艺上主要的控制手段有以下几种方法。
1、改变通气速率（增大通风量）改变通气速率主要是通过改变体积溶氧系数K La来改变供氧能力。
有两种情况：A、在低通气量的情况下，增大通气量对提高溶氧浓度有十分显著的效果；B、在空气流速已经十分高的情况下，再增加通气速率，作用便布氏很明显，反而会产生某些副作用，比如泡沫形成、水分蒸发、罐温增加以及染菌几率增加等。
2、改变搅拌速度一般来说，改变搅拌速度的效果要比改变通气速率大，这是因为：A、通气泡沫被充分破碎，增加有效气液接触面积；B、液流滞流增加，汽泡周围液膜厚度和菌丝表面液膜厚度减小，并延长了汽泡在液体中的停留时间，因而就较有效的增加K La，提高了供氧能力。
3、改变气体组成中的氧分压用通入纯氧的方法来改变空气中氧的含量，提高了K La值，因而提供了供氧能力。
纯氧成本较高，但对于某些发酵，如溶氧低于临界值时，短时间内加入纯氧是有效而可行的，这种方法在实验室动植物细胞培养中已被采用。
其他富氧装置也在开发，但因成本核算问题，离实际规模化应用还有距离。
4、改变罐压增加罐压实际上就是改变氧的分压PO2来提高液相氧浓度，从而提高供氧能力，但此法不是十分有效。
5、改变发酵液的理化性质在发酵过程中，菌体本省的繁殖及代谢可引起发酵液性质不断改变，例如改变培养液的表面张力、粘度及离子强度等，就会影响培养液中气泡的大小、气泡的溶解性、稳定性以及合并为大气泡的速率。
同时发酵液的性质还影响到液体的流动及界面或液膜的阻力，因而显著的影响到氧的溶解速度，而且由于发酵液中菌丝浓度所引起的表观粘度的增加，可使通气速率下降。
如果培养基性质为限制氧传递的因素时，就根据具体情况对培养液的某一物理性质稍作改造，例如加消泡剂、补加无菌水、改变培养基成分等都可以改善通气效果，以适应菌的正常生长。
（四）二氧化碳浓度控制1、CO2在发酵液中的浓度变化受到许多因素的影响，如细胞的呼吸强度、发酵液的流变学特性、通气搅拌程度；罐压大小、设备规模等。
对CO2浓度的控制主要看其对发酵的影响，如果对发酵有促进作用，应该提高其浓度；反之应设法降低其浓度。
2、通过提高通气量和搅拌速率，在调节溶解氧的同时，还可以调节CO2的浓度，通气使溶解氧保持在临界值以上，CO2又可随着废气排出，使其维持在引起抑制作用的浓度之下。
3、降低通气量和搅拌速率，有利于提高CO2在发酵液中的浓度。
4、CO2的产生与补料控制有密切关系。
（五）泡沫的控制1、泡沫产生的原因通气和搅拌、培养基成分、培养基的灭菌方法、培养液的温度、酸碱度、浓度等对发酵过程的泡沫形成也有一定的影响。
2、泡沫的消除和防止了解发酵过程中泡沫的消长规律，方可有效的控制泡沫。
消除和控制泡沫的方法主要包括化学消泡和机械消泡两种方法，同行司还可以考虑从减少起泡物质和产泡外力着手（如起泡物质多为表面活性物质，可以适当予以减少；通气使氧的含量达到临界值即可，不一定要达到饱和度）。
（1）化学消泡其优点是化学消泡剂来源广泛，消泡效果好，作用迅速可靠，尤其是合成消泡剂的效率更高，用量少，不需要改造现有的生产设备，不仅适用于大规模发酵生产，同时也适用于小规模的发酵实验。
这是目前应用最广的一种消泡方法。
工业上常用的化学消泡剂种类：天然油脂类、高级醇类、聚醚类（生产上应用较多的有聚氧丙烯甘油、聚氧乙烯氧丙烯甘油等，它们以一定比例配制的消泡剂又称“泡敌”，消泡能力是天然植物油的10倍以上）、硅酮类、氟化烷烃。
（2）机械消泡机械消泡不同于化学消泡，它是靠强烈机械振动和压力的变化，促使气泡破裂，或借助于机械力将气体中排出的液体加以分离回收，从而达到消泡的作用。
A、罐内机械消泡包括耙式消泡桨的机械消泡、旋转圆板式的机械消泡、流体吹入式机械消泡、冲击反射板机械消泡、超声波消泡、碟片式消泡器的机械消泡。
B、罐外机械消泡包括旋转叶片罐外机械消泡、转向板消泡、喷雾消泡、离心力消泡、旋风分离器消泡。
二、抗生素发酵控制发酵过程的目的是使微生物大量分泌抗生素。
在发酵开始前，有关设备和培养基也必须先经过灭菌后再接入种子。
接种量一般为10%或10％以上，发酵期视抗生素品种和发酵工艺而定。
在整个发酵过程中，需不断通无菌空气和搅拌，以维持一定罐压或溶氧，在罐的夹层或蛇管中需通冷却水以维持一定罐温。
此外，还要加入消泡剂以控制泡沫，必要时还加入酸、碱以调节发酵液的pH。
对有的品种在发酵过程中还需加入葡萄糖、铵盐或嵌体，以促进抗生素的产生。
对其中一些主要发酵参数可以用电子计算机进行反馈控制。
在发酵期间每隔一定时间应取样进行生化分析、镜检和无菌试验。
分析或控制的参数有菌丝形状和浓度、残糖量、氨基氮、抗生素含量、溶解氧、pH、通气量、搅拌转速和液面控制等。
其中有些项目可以通过在线控制。
青霉素发酵控制具体包括以下几个方面。
1、加糖控制加糖的控制主要根据产糖即发酵过程中的pH，或最好是根据排气中CO2及O2的量来控制。
一般在残糖量降至0.6%左右，pH上升时开始加糖。
2、补氮及加嵌体补氮是指加硫酸铵、氨或尿素，使发酵液氨氮控制在0.01%～0.05%。
补前体以使发酵液中参与苯乙酰胺浓度为0.05%～0.08%。
3、pH控制对pH的要求视不同菌种而已，一般为6.4～6.6。
可以加葡萄糖来控制pH。
当前趋势是加酸或碱自动控制pH。
4、温度控制一般前期为25～26℃，后期为23℃，以减少后期发酵液中青霉素的降解破坏。
5、通气与搅拌抗生素深层培养需要通气与搅拌，一般要求发酵液中溶解氧含量不低于饱和情况下溶解氧的30%。
通气比一般为1：0.8VVM。
搅拌转速在发酵各阶段应根据需要而调整。
6、泡沫与消泡在发酵过程中产生大量泡沫，可以用天然油脂如豆油、玉米油等或用化学合成消泡剂“泡敌”来消泡。
应当控制其用量并少量多次加入，尤其在发酵前期不宜多用，否则会影响菌的呼吸代谢。
[方法步骤]（一）发酵培养1、通气量的调节要加大通气量，则需调大进气阀F13，反之则调小进气阀F13的开度；阀F14要作出相应调整，以保持罐压。
通气量的测量：通过流量计进行检测。
青霉素发酵过程中通气量一般为1：1～1：0.8VVM。
2、发酵温度、pH、转速、流加控制、消泡等各参数的调整按照“DF-BIC控制系统或发酵罐过程控制系统的操作说明”所述方法进行调整。
将控制器设置至“开机”状态，并分别按“加热”、“冷却”、“搅拌”键，使之置于“自动”状态。
此时，各参数进入自动控制，并根据记录周期所定的时间进行各参数的记录。
如果在自动控制过程中某参数出现过调或调不到所需值，则需调整该参数设定值中的“开度”。
如果过调，则需减小“开度”值；如果调不到所需值，则需加大“开度”值。
青霉素发酵温度设定在23℃，pH控制在6.4～6.6，流加氨水溶液控制；消泡自动控制；转速待定。
3、DO电极的满度校正当温度、通风量、罐压、搅拌转速稳定后，将此时的DO值校正为100%。
4、将预先准备好的碱液和灭过菌的消泡剂、流加物料及硅胶管与蠕动泵及发酵罐（将针插入发酵罐备用口）联接好；注意操作过程中必须保持无菌。
5、打开“pH”、“消泡”、“流加”开关，将手动、自动开关置于“自动”位置。
此时，上述参数进入自动控制。
6、取样测定发酵过程中还原糖含量、青霉素效价、酸碱度等指标。
取样步骤按GUJS-10说明进行。
（二）单片机控制GUJS-10型搅拌发酵系统配备了先进的自动控制系统。
DF-BIC控制系统可分为以下两种控制。
1、自动控制（1）打开单片机确定运行状态为开机状态。
（2）打开单片机的主界面，进入参数设定，选定所需要设定的参数，最常用的是温度、pH值、DO值、搅拌机速度等。