单增李斯特菌的检验方法

单增李斯特菌的检验方法

一.增菌：

1.EB肉汤

2.LB肉汤（根据我的实验结果和请教其他老师的说法，LB增菌效果优于EB）

LB分为LB1和LB2，两者基础培养基相同，区别在于添加辅助试剂丫啶黄、萘啶酮酸的量（基础培养基--杭州天河生物试剂公司；丫、萘—上海疾控中心。上海的辅助试剂已按一定浓度配置成溶液，使用起来比较方便）

25g样品加入到225mlLB1增菌液中，30℃培养24h，吸增菌液到LB2增菌液中，30℃培养24h。

二.选择分离

挑一环LB2增菌液划线接种到科玛嘉选择性培养基上，37℃培养24h，观察现象，可疑菌落在此培养基上为兰色，周围有白晕的菌落。

（国标上使用的选择性培养基是MMA，但是其选择性不强，科玛嘉选择性培养基是法国制造，选择性比MMA强的多，而且现象明显，许多发达国家使用。此培养基是国标编委白萍女士向我推荐的）

三.生化实验

挑可疑菌落穿刺接种到SIM，25℃培养3---5d，观察伞状生长情况、TSI（三糖铁）斜面30℃培养24h—48h，观察，单增李斯特菌在TSI上应该是底面、斜面均产酸，不产H2S，不产气的培养物.

这是单增李斯特菌落在SIM动力培养基上的伞状情形

再挑取TSI上培养物接种其他生化管。

VP MR H2O2七叶苷鼠李糖木糖甘露醇尿素硝

酸

盐

还

原

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