弧菌属
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弧菌属
弧菌属(Vibriol)
弧菌有100多种，广泛分布于自然界，尤以水中最多见。 形态短小呈弧形或杆形，菌体一端有鞭毛，能活泼运动， 革兰氏染色阴性，培养特性为喜碱怕酸，皆有内毒素，霍 乱弧菌可产生外毒素；大多数弧菌不致病，能引起人体致
病的有以下几种：
1，霍乱弧菌：是引起人类霍乱病的烈性病原菌；
2，不凝集弧菌（non-agglutinable vibrio, NAG）, 即 不被抗霍乱弧菌免疫血清所凝集的弧菌，有很多种，小部 分可引起人类致病，发生霍乱样腹泻；
为7.6-8.2;对酸敏感； 3， 生长迅速： ◆ 碱性蛋白胨水生长为浑浊，表面形成菌膜；
◆ 碱性琼脂培养基生长有菌落较大、扁平、湿 润、 边缘整齐、透明似水滴；
◆ 亚碲酸钾的平皿上，菌落呈黑色。
（三）、生化反应：
1， 糖发酵反应：霍乱弧菌能发酵蔗糖、甘露糖、 产酸不产气；不分解阿拉伯糖
2， V-P试验：大多Eltor型V-P试验为阳性；而经 典型为阴性；
-
-
第2次 1826-37(11) +++ +++ +++ +++ +++ ++
第3次 1846-62(16) +++ +++ +++ +++ +++ -
第4次 1864-75(11) +++ +++ +++ +++ +++ -
第5次 1883-87(4) +++ +++ +++ +++ -
弧菌有100多种，广泛分布于自然界，尤以水中最多见。 形态短小呈弧形或杆形，菌体一端有鞭毛，能活泼运动， 革兰氏染色阴性，培养特性为喜碱怕酸，皆有内毒素，霍 乱弧菌可产生外毒素；大多数弧菌不致病，能引起人体致
病的有以下几种：
1，霍乱弧菌：是引起人类霍乱病的烈性病原菌；
2，不凝集弧菌（non-agglutinable vibrio, NAG）, 即 不被抗霍乱弧菌免疫血清所凝集的弧菌，有很多种，小部 分可引起人类致病，发生霍乱样腹泻；
为7.6-8.2;对酸敏感； 3， 生长迅速： ◆ 碱性蛋白胨水生长为浑浊，表面形成菌膜；
◆ 碱性琼脂培养基生长有菌落较大、扁平、湿 润、 边缘整齐、透明似水滴；
◆ 亚碲酸钾的平皿上，菌落呈黑色。
（三）、生化反应：
1， 糖发酵反应：霍乱弧菌能发酵蔗糖、甘露糖、 产酸不产气；不分解阿拉伯糖
2， V-P试验：大多Eltor型V-P试验为阳性；而经 典型为阴性；
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第2次 1826-37(11) +++ +++ +++ +++ +++ ++
第3次 1846-62(16) +++ +++ +++ +++ +++ -
第4次 1864-75(11) +++ +++ +++ +++ +++ -
第5次 1883-87(4) +++ +++ +++ +++ -
11_弧菌属
（三）免疫性
感染机体后可获得牢固免疫力 肠道局部黏膜免疫（SIgA)是免疫基础： 肠道局部黏膜免疫（SIgA)是免疫基础： 是免疫基础 凝集黏膜表面的病菌使失去动力 阻止病菌黏附 阻断肠毒素结合
三、微生物学检查
对首例病人应快速诊断并作疫情报告； 对首例病人应快速诊断并作疫情报告； 1.标本 注意及时培养或适当保存) 标本( 1.标本(注意及时培养或适当保存) 2.方法 方法: 2.方法: 直接镜检 分离培养 生化鉴定 血清学试验
一、生物学性状
（一）形态染色 革兰染色阴性。 呈逗点状或弧状；有菌毛， 革兰染色阴性。 呈逗点状或弧状；有菌毛，无 芽胞，有些有荚膜。 芽胞，有些有荚膜。 有单根鞭毛， 有单根鞭毛，运动活泼 悬滴观察 穿梭样/流星状运动 穿梭样 流星状运动 涂片中 排列整齐，呈鱼群状。 排列整齐，呈鱼群状。
扫描电镜下的霍乱弧菌
传染源： 传染源：患者及无症状感染者 传播途径： 传播途径：经口摄入 （通过污染的水源或食物） 通过污染的水源或食物） 胃酸降低是感染的先决条件 感染过程： 感染过程： 病菌→小肠→肠黏膜表面→ 病菌→小肠→肠黏膜表面→繁殖 →产 生肠毒素→致病（2~3天 生肠毒素→致病（2~3天） 病愈后一些患者可短期带菌（＜2w） 病愈后一些患者可短期带菌（＜2w） （＜2w
生化反应
分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖， 分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖， 产酸不产气。 产酸不产气。
抵抗力
霍乱弧菌对热、干燥、日光、 霍乱弧菌对热、干燥、日光、化学消毒 剂和酸均很敏感。 剂和酸均很敏感。 霍乱弧菌古典生物型对外环境抵抗力较 弱，E1-Tor生物型抵抗力较强。 Tor生物型抵抗力较强。 生物型抵抗力较强 病人排泄物或呕吐物经25% 病人排泄物或呕吐物经 25% 次氯酸钙处 25 小时可达到消毒目的。 理1小时可达到消毒目的。
弧菌属
霍乱弧菌古典生物型与EI Tor生物型的区别
鉴别试验 溶血试验 鸡红细胞凝集试验 VP试验a 多黏菌素B抑制试验 第IV组噬菌体裂解试 验 古典生物型 -(+) + + EI Tor生物型 +(-) + +(-) -(+) -(+)
抗原结构与分型
H抗原：特异性较低，为弧菌属所共有。 H抗原无保护作用。
O抗原：特异性高，根据O抗原的特异性差别，分为139个血清群。
O1群：3个血清型，即原型（稻叶型）、异型（小川型）、 中间型（彦岛型)； 2个生物型，即即古典生物型和EI Tor生物型 ； O2-O138群:非O1群；
O139群：
O1和O139是引起霍乱病流行的病原菌。
生物学性状
抵抗力
霍乱弧菌对热及消毒剂抵抗力弱，在55℃湿热中 15min即死亡，对酸的抵抗力更弱，在正常胃酸中仅能 存活4min，该菌在河水中能存活较长时间。 霍乱弧菌对氯敏感，用漂白粉处理排泄物可达达 消毒目的。 EI Tor 生物型比古典生物型的抵抗力强。
所致疾病
致病性和免疫性
人类是霍乱弧菌的唯一易感者，一般认为摄入108～1010个细 菌才可导致发生霍乱。
传染源：污染的水源与食物。
传播途径：胃肠道。 致病过程： 霍乱的潜伏期为1d左右，但可短短至数小时或长至几天。霍 乱的发病多较突然，一般以剧烈的腹泻开始，继之为呕吐，个别 病人可伴随腹绞痛。每日大便次数可达数次至数十次。腹泻物多 为水样为米泔水样。临床可见严重脱水、电解质紊乱和代谢性酸 中毒。病人可死于肾功能衰竭和休克，但大多数病人如脱水能得 到及时纠正，可在3～7d内恢复。
标本
分离培养（PH8.0～9.0硷性蛋白胨水或硷性琼脂平板） 涂片镜检； 可疑菌落 生化反应； 血清学玻片凝集检查。 快速诊断 可用荧光菌球检查法或SPA协同凝集试验检测霍乱弧菌。
致病性弧菌
霍乱弧菌包括两个生物型
古典生物型（Classical biotype） 埃尔托生物型（EL-Torbio-type）。
一、生物学性状
1、形态与染色
革兰染色阴性；弧性或逗点状；在病人“米泔水” 样便中呈“鱼群”样排列；
有一根单鞭毛，运动非常活泼，呈鱼群穿梭样或流 星状，
有菌毛和性菌毛，0139群有荚膜。
致病性弧菌
弧菌属（Vibrio）
弧菌属，为一大群菌体短小、弯曲成弧形的 革兰阴性菌
主要特点
有单鞭毛，运动活泼 培养要求为碱性环境 自然界广泛分布，以水中最多 只要有霍乱弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌
一、霍乱弧菌
霍乱主要表现为剧烈的呕吐、腹泻、失水，死亡率 甚高。属于国际检疫的烈性传染病。
诊断
标本采集：患者粪便、肛拭或剩余食物 分离培养：SS琼脂平板或嗜盐菌选择平板 嗜盐性试验与生化反应 诊断血清进行鉴定
防治
治疗可用抗菌药物 严重病例需输液和补充电解质
抵抗力
El Tor生物型和其它非01群霍乱弧菌 在外环境中的生存力较古典型为强
不耐酸，在正常胃酸中仅能存活4分钟 水中存活长，河水、井水、海水中1-3周 怕热，100℃1-2分钟死亡
致病物质
ToxR蛋白调控的ctxA、ctxB、tcp、zot、ace等基 因
不受ToxR蛋白调控的毒力因子基因hlyA和hap
生化反应：
过氧化氢酶、氧化酶阳性 发酵多种糖类，产酸不产气 还原亚硝酸盐，吲哚反应阳性 霍乱红反应阳性，不同生物型生化反应不同 （当培养在含硝酸盐及色氨酸的培养基中，产生靛基质与亚硝
酸盐，在浓硫酸存在时，生成红色，称为霍乱红反应）
抗原的构造与分群
有不耐热H抗原和耐热的O抗原。
古典生物型（Classical biotype） 埃尔托生物型（EL-Torbio-type）。
一、生物学性状
1、形态与染色
革兰染色阴性；弧性或逗点状；在病人“米泔水” 样便中呈“鱼群”样排列；
有一根单鞭毛，运动非常活泼，呈鱼群穿梭样或流 星状，
有菌毛和性菌毛，0139群有荚膜。
致病性弧菌
弧菌属（Vibrio）
弧菌属，为一大群菌体短小、弯曲成弧形的 革兰阴性菌
主要特点
有单鞭毛，运动活泼 培养要求为碱性环境 自然界广泛分布，以水中最多 只要有霍乱弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌
一、霍乱弧菌
霍乱主要表现为剧烈的呕吐、腹泻、失水，死亡率 甚高。属于国际检疫的烈性传染病。
诊断
标本采集：患者粪便、肛拭或剩余食物 分离培养：SS琼脂平板或嗜盐菌选择平板 嗜盐性试验与生化反应 诊断血清进行鉴定
防治
治疗可用抗菌药物 严重病例需输液和补充电解质
抵抗力
El Tor生物型和其它非01群霍乱弧菌 在外环境中的生存力较古典型为强
不耐酸，在正常胃酸中仅能存活4分钟 水中存活长，河水、井水、海水中1-3周 怕热，100℃1-2分钟死亡
致病物质
ToxR蛋白调控的ctxA、ctxB、tcp、zot、ace等基 因
不受ToxR蛋白调控的毒力因子基因hlyA和hap
生化反应：
过氧化氢酶、氧化酶阳性 发酵多种糖类，产酸不产气 还原亚硝酸盐，吲哚反应阳性 霍乱红反应阳性，不同生物型生化反应不同 （当培养在含硝酸盐及色氨酸的培养基中，产生靛基质与亚硝
酸盐，在浓硫酸存在时，生成红色，称为霍乱红反应）
抗原的构造与分群
有不耐热H抗原和耐热的O抗原。
弧菌科
不耐热的H抗原
为共同抗原
耐热的O抗原
具有群特异性和型特异性，是霍乱弧菌分群和 分型的基础
分型
根据O抗原的不同，现有155个血清群 O1群、O139群引起霍乱
O139血清群的抗原编码基因中出现了36kb的新基因 缺少了O1群高分子量的O抗原侧链 与O1群抗血清无交叉反应，但可与O22血清群和 O155血清群产生交叉反应，遗传学特征和毒力基因 与O1群相似。
培养特性
TCBS琼脂平板: 0.5~2.0mm大小，蔗糖不发酵而呈蓝绿色菌落 普通血平板: 不溶血或只产生α溶血 从腹泻患者中分离到的菌株95%以上在我妻（wagatsuma）琼脂上产生 β溶血现象，称为神奈川现象（Kanagawa phenomenon, KP） 嗜盐性选择平板: 较大，圆形，隆起，稍浑浊，半透明或不透 明，无粘性
（二）生物学特性
1. 形态
革兰阴性杆菌，有鞭毛（极单毛），无荚膜， 无芽胞
2. 抗原结构
耐热的菌体（O）抗原，具有群特征性，副溶 血性弧菌的O抗原有13种 鞭毛抗原，不耐热，无型特异性
3．培养特性
营养要求不高 在无盐培养基上不能生长，最适合生长的 氯化钠浓度为3.5%，超过8%不能生长 最适pH为7.7~8.0，但pH9.5时仍能生长， 最适生长温度为30~37℃ 在碱性胨水中经6~9h增菌可形成菌膜
用于霍乱弧菌的鉴别试验
霍乱红试验 霍乱弧菌有色氨酸酶和硝酸盐还原能力。 霍乱弧菌和其他弧菌均有此种反应 粘丝试验（String Test） 弧菌属细菌除副溶血性弧菌部分菌株外，均有此反应 O/129敏感试验 O/129 （2，4－Diamino－6，7－Diisopropylpteridine，2，4二氨基 －6，7－二异丙基喋啶） 10μg及150μg纸片周围出现任何大小的抑菌环均为敏感。 O1群和非O1群霍乱弧菌均敏感。 但已有对O/129耐药的菌株出现。用此试验作鉴定时，需特别谨 慎。需结合其他试验结果如耐盐生长试验等综合考虑
弧菌属
三、微生物学检查
烈性传染病及时做出疫情报告
四、防治原则
1.切断传播途径。
2.治疗
1）及时补液和电解质，预防大量失水导致的低血 容量性休克和酸中毒是治疗霍乱的关键； 2）抗生素
强化
1.悬滴标本中呈穿梭样运动的细菌是 A.大肠埃希菌 B.伤寒沙门菌 C.幽门螺杆菌 D.霍乱弧菌 E.变形杆菌 2.根据霍乱弧菌鞭毛的数量和位置，它属于 A.周毛菌 B.从毛菌 C.双毛菌 D.单毛菌 E.无鞭毛细菌
• 疾病特征： 1）胃部的炎症，胃酸产生的改变和组织的 破坏； 2）一旦定植，尤其导致的炎症可持续数年， 甚至终生。
4.微生物检测 检测尿素酶活性 1）胃镜检查时“搭车”采样，快速尿素酶检测 2）13C呼气试验（吃一粒药，吹口气） 4.治疗 胃黏膜保护剂+抑酸剂+抗菌治疗
1.形态与染色 革兰染色阴性，常排列成 S形或海鸥状。
2.培养特性 微需氧菌 3.生化反应 尿素酶丰富，可迅速分解 尿素释放氨，是鉴别该菌 的主要依据之一。
4.致病性 与免疫性 传染源： 传播途径：粪口途径 致病相关因素： 1）Hp能在其他细菌很难生存的胃中生存；（可产生酸 抑制蛋白，封闭胃酸的产生；尿素酶分解食物中的尿 素产生氨气，缓解局部胃酸的杀菌作用；） 2）黏附性强； 3）免疫产生的细胞因子，引起胃酸的大量分泌并造成 胃上皮细胞程序性死亡。
副溶血弧菌
主要引起食物中毒，是我国沿海地区食物中毒最常见的一种 病原菌。该菌引起的食物中毒经烹饪不当的海产品或盐腌制 品传播。临床表现：腹痛、腹泻、呕吐和低热。水样粪便， 但恢复较快。该菌具有嗜盐性。 某单位发生了以呕吐、腹泻呈水样便为主要症状的食物中毒, 防疫站调查后认定为与吃新鲜海蜇丝拌凉菜有关。 问题: 1)如何进行微生物学诊断? 2)请问致病菌可能是什么?
微生物学--弧菌
分离培养与鉴定
分离培养 粪便或肛拭标本：直接接种改良Campy-BAP
选择平板 血、脑脊液标本：布氏肉汤增菌后转种分离培
养基 微氧环境培养 不同细菌培养温度不同
Key Points
革兰阴性逗点状或S形的菌,运动活泼 微需氧：最佳生长环境为含5%O2、10% CO2、
85%N2 最适生长温度因菌种而异 营养要求高 氧化酶、触酶阳性，不能利用、不发酵各种糖类，
（3）快速诊断：O1和O139抗体做玻片凝集
（4）霍乱毒素的测定
二 分离培养和鉴定
初次分离用pH8.5碱性蛋白胨水，经4～6小时 液体表面大量繁殖，形成菌膜。
二 分离培养和鉴定
TCBS（硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板）
霍乱弧菌在TCBS琼脂平板上形成 发酵蔗糖的较大的黄色菌落
含亚碲酸钾的培养基：4号琼脂 庆大霉素琼脂
临床意义 (致病因素)
1.侵袭力
进入小肠，鞭毛、菌毛、分泌黏液，O139群有荚膜
穿过小肠黏膜表面黏液层
黏附于小肠黏膜上皮细胞刷 状缘的微绒毛上大量繁殖
临床意义 (致Βιβλιοθήκη 因素)2.霍乱肠毒素 MW：80000-90000 A1:活性亚单位 21812 A2:连接亚单位 5000 B：结合亚单位
霍乱弧菌肠毒素（CE, cholera enterotoxin）
鉴
定
定
生物学特性（培养特征）
需氧或兼性厌氧 营养要求不高，嗜盐（无盐不生长,最适盐浓度
3%） TCBS上形成绿色菌落
副溶血弧菌在TCBS 上菌落
鉴定特征
革兰阴性弧菌或杆菌，动力（＋） 氧化酶（＋），临床分离株脲酶常（＋） TCBS上绿色菌落、氯化钠生长试验 神奈川现象(+) 各种生化试验 TDH和TRH的检测：毒素和基因检测
弧菌属 (Vibrio)
致病性
❖ O1群致病物质
▪ 霍乱肠毒素（A亚单位 + 5个B亚单位） ▪ 鞭毛、菌毛及其他毒力因子
• 靠鞭毛运动，穿过粘液层 • 粘附于肠壁上皮细胞刷状缘的微绒毛上
❖ O139群致病物质
▪ 荚膜多糖 ▪ 特殊LPS毒性决定簇
霍乱肠毒素（cholera toxin）
▪ 强烈的致泻作用
▪ 为聚合蛋白，由 1个A亚单 位和5个B亚单位以共价键结 合
• A1为毒性部分,A2为连接 部分
• B是结合部分，与小肠粘 膜上皮细胞膜受体（神经 节苷脂GMI）结合
霍乱肠毒素的作用机制
所致疾病----霍乱
烈性传染病,我国定为甲类法定传染病
❖ 人是霍乱弧菌的唯一易感者,传染源:患者/带菌者 ❖ 传播途径：通过污染的水源或食物经口感染 ❖ 临床表现：突然发病,首先剧烈腹泻,继以呕吐,可有米
微生物学检查法
对首例病人应快速准确诊断，并及时报告，迅速采取防治 措施，扑灭疫情。
▪ 直接镜检 • G-弧菌 • 取米泔水样粪便作悬滴法观察动力
▪ 分离培养 pH8.0-9.0的碱性蛋白胨水增菌, 选择培养基
生化反应及玻片凝集实验 ▪ 快速诊断法
荧光菌球法 协同凝集试验
防治原则
预防：①菌苗 ②疫区管理，注意饮食卫生
非O1和非O139霍乱弧菌血清 群
副溶血性弧菌
胃肠炎 胃肠炎，肠道外感染
其他：拟态弧菌、创伤弧菌、 食物中毒，创伤感染和败血症 霍利斯弧菌、河弧菌
霍乱弧菌 （V. cholerae）
❖ 流行情况 ❖ 生物学特性
▪ 革兰阴性 ▪ 弧形或逗点状 ▪ 菌体单端有一根鞭毛，运动活泼。
•直接染色镜检，可见排列如“鱼群”状； •悬滴观察，可见穿梭运动 ▪ 兼性厌氧,营养要求不高 ▪ 耐碱不耐酸，碱性环境生长良好 （碱性蛋白胨水pH8.8-9.0，选择培养基）
【微生物学】9弧菌属
大量水分和电解质丧失 低容量性休克和肾衰竭（死亡率高达60%）
免疫性
❖ 可获得牢固免疫，再感染少见 ❖ 可出现保护性抗肠毒素抗体（抗B亚单位）、
抗菌抗体（抗O抗原） ❖ 肠腔中SIgA
四、微生物学检查法
病人粪便，肛拭
（流行病学调查包括水样）
标本
直接镜检
涂片见G-性弧菌，鱼群状排列 悬滴法观察细菌呈穿梭样运动
弧菌属
❖菌体短小、弯曲呈弧状的革兰阴性菌 ❖大多数是非致病菌 ❖致病菌主要是霍乱弧菌和副溶血弧菌
霍乱弧菌（V.cholerae）
形态与染色
革兰染色阴性 弧型或逗点状，单鞭毛
液体中 运动非常活泼 呈穿梭样 涂片中 排列整齐 呈鱼群状 培养特性 耐碱不耐酸
在pH8.8~9.0的碱性蛋白胨水/碱性琼脂平板上生长良好
抗原构造
Ｏ抗原: 分成155个血清群
O1群与O139群引起霍乱
古典生物型 O1群
El Tor生物型
抵抗力
较弱，不耐热 对酸敏感，耐碱耐低温 对一般消毒剂都敏感 对链霉素、氯霉素敏感
二、致病性与免疫性
1、致病物质 鞭毛与菌毛 鞭毛－－运动、穿透 菌毛－－粘附作用
霍乱肠毒素
霍乱肠毒素(CT)： 蛋白质, 不耐热
分离培养
碱性蛋白胨水增菌 选择培养基为TCBS 玻片凝集反应
五、防治原则 控制传染源 切断传播途径 改善社区环境，加强水源管理， 提高易感者免疫力 疫苗预防接种
治疗霍乱的关键
及时补充液体和电解质
副溶血性弧菌
❖嗜盐性弧菌 ❖海产品中，食用污染食物引起食物中毒 ❖沿海较常见
Ｂ亚单位与受体结合
结合部位B 毒性部位A
Ａ亚单位作用于腺苷环化酶
ATP转化成cAMP， cAMP
免疫性
❖ 可获得牢固免疫，再感染少见 ❖ 可出现保护性抗肠毒素抗体（抗B亚单位）、
抗菌抗体（抗O抗原） ❖ 肠腔中SIgA
四、微生物学检查法
病人粪便，肛拭
（流行病学调查包括水样）
标本
直接镜检
涂片见G-性弧菌，鱼群状排列 悬滴法观察细菌呈穿梭样运动
弧菌属
❖菌体短小、弯曲呈弧状的革兰阴性菌 ❖大多数是非致病菌 ❖致病菌主要是霍乱弧菌和副溶血弧菌
霍乱弧菌（V.cholerae）
形态与染色
革兰染色阴性 弧型或逗点状，单鞭毛
液体中 运动非常活泼 呈穿梭样 涂片中 排列整齐 呈鱼群状 培养特性 耐碱不耐酸
在pH8.8~9.0的碱性蛋白胨水/碱性琼脂平板上生长良好
抗原构造
Ｏ抗原: 分成155个血清群
O1群与O139群引起霍乱
古典生物型 O1群
El Tor生物型
抵抗力
较弱，不耐热 对酸敏感，耐碱耐低温 对一般消毒剂都敏感 对链霉素、氯霉素敏感
二、致病性与免疫性
1、致病物质 鞭毛与菌毛 鞭毛－－运动、穿透 菌毛－－粘附作用
霍乱肠毒素
霍乱肠毒素(CT)： 蛋白质, 不耐热
分离培养
碱性蛋白胨水增菌 选择培养基为TCBS 玻片凝集反应
五、防治原则 控制传染源 切断传播途径 改善社区环境，加强水源管理， 提高易感者免疫力 疫苗预防接种
治疗霍乱的关键
及时补充液体和电解质
副溶血性弧菌
❖嗜盐性弧菌 ❖海产品中，食用污染食物引起食物中毒 ❖沿海较常见
Ｂ亚单位与受体结合
结合部位B 毒性部位A
Ａ亚单位作用于腺苷环化酶
ATP转化成cAMP， cAMP
弧菌属_精品文档
二、致病性与免疫性
致病物质
鞭毛、菌毛及其他毒力因子：
acf (accessory colonization factor):编码粘附素 tcpA（toxin coregulated pilus A）:编码菌毛蛋白 hlyA (hemolytic-cytolytic A):溶血-细胞毒性蛋白 hap (hemagglutinin/protease): 血凝素/蛋白酶
霍乱肠毒素（cholerae enterotoxin, CET）
已知致泄毒素中最为强烈的毒素
ctxA
ctxB
A单位 B单位
毒性 单位
结合 单位
GM1 神 经节苷脂
所致疾病
甲类法定传染病
霍乱
人是霍乱弧菌唯一易感宿主
传染源 患者和带菌者
感染
传染途径 粪-口途径
剂量
症状：古典型 2-3d 潜伏期 剧烈腹泻、 呕吐，无腹痛。排便次数数十次。严重时 每小时失水1L，米泔水样排泄物，
弧菌属
弧菌属（Vibrio）
细菌是一大群菌体短小，弯曲成弧形的 革兰阴性菌
霍乱弧菌（V.cholerae）
引起烈性传染病霍乱
1817—1923 六次大流行，遍 布亚、非、欧、美、澳，由古典 生物型引起
1961---至今 的第七次世界 大流行，波及五大洲，140多个 多国家，400万人以上，由ElTor生物型引起
O139群更严重
治疗：及时大量补充液体和电解质
带菌者：病愈后病菌存在于胆囊中
霍 乱 病 人 粪“便 米及 泔霍 水乱 样患 ”儿
免疫性
病后获得牢固免疫力
抗肠毒素抗体（B单位：IgM、 IgG）
局部抗菌抗体（O抗原）
sIgA 霍乱保护性免疫的基础
弧菌
一、生物学性状
形态和染色
1.大小：0.5～0.8×1.5～3μm。 2.形态：弯曲成弧形或逗点状。 3.结构：有菌毛，特别是菌体一端有单鞭 毛，使细菌运动活泼(病人粪便作悬滴标 本,可见鱼群样穿梭 )，部分菌株(例如 O139群)有荚膜 4.染色：革兰氏阴性菌。 形态学特点为逗点状、运动活泼的革兰 氏阴性菌。
一、生物学性状
抵抗力
1.对理化因素抵抗力弱：以1份漂白粉和4 份水比例处理患者排泄物或呕吐物1小时， 可杀死霍乱弧菌。 2.水环境：存活2周左右，与疾病传播有关。 自来水加0.5ppm氯, 15分钟能杀死霍乱 弧菌。 3.抗生素敏感性：对氯霉素、强力霉素等 敏感，注意耐药性。
二、致病性
致病物质
霍乱肠毒素 、鞭毛、菌毛。
霍乱肠毒素机制
• 霍乱肠毒素
B 亚单位 A2亚单位 亚单位 A1亚单位 亚单位
结合部分
与B亚单位结合 亚单位结合
小肠上皮细胞GM1神经节苷脂 受体：小肠上皮细胞 神经节苷脂
毒性部分
活化的A1 活化的
胞内 腺苷环化酶活化
ATP
cAMP 分泌： 分泌：Na+、K+、H2O 导致：严重腹泻、呕吐、脱水。 导致：严重腹泻、呕吐、脱水。
3.治疗措施： 3.治疗措施： 治疗措施
• 及时补充水份、电解质(对症处理)是抢救霍乱病人的关键 • 敏感抗生素治疗(注意耐药性) • 及时隔离病人。
第二节 副溶血性弧菌
副溶血性弧菌(V.parahemolyticus)的生 物学性状类似霍乱弧菌，但与霍乱弧菌比 较，它的一个显著特点是嗜盐性，在NaCl 浓度较高(3%-4%左右)的环境中才能生长繁 殖 ，致病性副溶血性弧菌多出现β溶血 (神奈川现象)，食入烹饪不当的海产品或 腌制品(污染副溶血性弧菌)，可导致食物 中毒(急性胃肠炎)。
[病原生物学] 第9章 弧菌属
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（一）生物学特性
3．抗原结构
有H抗原和O抗原，根据O抗原不同，分为 155个血清群，引起霍乱的是O1群和 O139群，其他血清群可引起人类胃肠炎 等疾病，
O1血清群的霍乱弧菌包括两个生物型，即 古典生物型与El tor生物型。
根据O抗原的成分不同，O1群霍乱弧菌又 进一步分为3个血清型。
（一）生物学特性
1．致病性
霍乱弧菌主要通过污染的水源或饮食经口 传染。在小肠粘膜局部繁殖和产生霍乱肠 毒素使肠液过度分泌，使大量体液和电解 质进入肠腔而发生严重的腹泻及呕吐，由 于大量脱水和失盐，可发生代谢性酸中毒， 血循环衰竭，甚至休克或死亡。
（二）致病性与免疫性
2．免疫性
感染霍乱弧菌后可获得牢固免疫力，再感 染者少见，以特异性体液免疫为主。一般 认为局部 SlgA可在肠粘膜与病菌之间形成 免疫屏障，有阻断粘附和中和毒素的作用。
1854年伦敦
• 616人死亡; • 127人仅在三天内死亡 • 瘴气 • Ghost map
水泵
• John Snow
病原生物学
弧菌属
一、霍乱弧菌（Vibrio）
（一）生物学特性
1．形态与染色 革兰染色阴性，弯曲呈弧 型或逗点状，菌体极端有一根单鞭毛，运 动活泼，鱼群状排列，有菌毛，无芽胞。
4．及时补充液体和电解质，应用抗 菌药物如链霉素、氯霉素、强力霉素、 复方SMZ-TMP等。
二、副溶血性弧菌
1、生物学特性
革兰染色阴性，兼性厌氧菌，为多形态球 杆菌或稍弯曲弧菌。菌体一端有单根鞭毛， 运动活泼。
本菌有嗜盐性，最适宜的培养基为含盐 2%～4%。
二、副溶血性弧菌
2、致病性
人因进食未煮熟的海产品或含有副溶血性 弧菌的盐腌的食物而感染。
生物学第十章弧菌属
– 因自主神经系统功能紊 乱，还可产生心率不齐、 血压波动、呼吸困难而 窒息死亡。
新生儿破伤风
• 牙关紧闭 • 角弓反张
4.免 疫 性
• 主要是体液免疫，破伤风抗毒素可 中和游离毒素的作用；
• 患过破伤风后不易获得牢固的免疫力 • 获得有效抗毒素的途径是人工免疫
（三）微生物学检查法
• 一般不进行涂片镜检和分离培养 • 典型的症状和病史即可作出诊断
生化反应 玻片凝集反应
涂片见G-性弧菌，鱼群状排列 悬滴法观察细菌呈穿梭样运动
四、防治原则：
预防
一般预防 疫苗预防
加强水源管理； 注意饮食卫生； 流行区隔离、消毒
灭活疫苗； 减毒活疫苗等基因工程疫苗
治疗
对症处理，及时补充液体和电解质
抗生素等药物的应用 如四环素、强力霉素、氯霉素等
二 副溶血性弧菌
治疗
尽早手术（切除感染组织，必要时截肢） 多价抗毒素：早期用 抗生素：大剂量治疗 高压氧舱治疗：提高血液和组织的氧含量达15倍
三、肉毒梭菌
肉毒梭菌主要存在于土壤中， 在厌氧环境下产生肉毒毒素引起肉 毒中毒和婴儿肉毒病。
(一)生物学性状
1.形态染色：
➢ G+粗杆菌， ➢ 有芽胞，呈网球
拍状 ➢ 周身鞭毛
二、产 气 荚 膜 梭 菌
是引起气性坏疽的病原菌，广 泛存在于自然界及人和动物肠道中
(一)生物学性状
形态染色：
– G+粗大杆菌 – 有芽胞，位于次
极端，呈椭圆形， 小于菌体直径 – 有荚膜 – 无鞭毛
培厌养氧特，性但：不十分严格；繁殖快； 42℃最好， 生长迅速
血皿：双层溶血环
theta
蛋黄琼脂平板：Nagler反 应
新生儿破伤风
• 牙关紧闭 • 角弓反张
4.免 疫 性
• 主要是体液免疫，破伤风抗毒素可 中和游离毒素的作用；
• 患过破伤风后不易获得牢固的免疫力 • 获得有效抗毒素的途径是人工免疫
（三）微生物学检查法
• 一般不进行涂片镜检和分离培养 • 典型的症状和病史即可作出诊断
生化反应 玻片凝集反应
涂片见G-性弧菌，鱼群状排列 悬滴法观察细菌呈穿梭样运动
四、防治原则：
预防
一般预防 疫苗预防
加强水源管理； 注意饮食卫生； 流行区隔离、消毒
灭活疫苗； 减毒活疫苗等基因工程疫苗
治疗
对症处理，及时补充液体和电解质
抗生素等药物的应用 如四环素、强力霉素、氯霉素等
二 副溶血性弧菌
治疗
尽早手术（切除感染组织，必要时截肢） 多价抗毒素：早期用 抗生素：大剂量治疗 高压氧舱治疗：提高血液和组织的氧含量达15倍
三、肉毒梭菌
肉毒梭菌主要存在于土壤中， 在厌氧环境下产生肉毒毒素引起肉 毒中毒和婴儿肉毒病。
(一)生物学性状
1.形态染色：
➢ G+粗杆菌， ➢ 有芽胞，呈网球
拍状 ➢ 周身鞭毛
二、产 气 荚 膜 梭 菌
是引起气性坏疽的病原菌，广 泛存在于自然界及人和动物肠道中
(一)生物学性状
形态染色：
– G+粗大杆菌 – 有芽胞，位于次
极端，呈椭圆形， 小于菌体直径 – 有荚膜 – 无鞭毛
培厌养氧特，性但：不十分严格；繁殖快； 42℃最好， 生长迅速
血皿：双层溶血环
theta
蛋黄琼脂平板：Nagler反 应
弧菌属 (Vibrio)
一、生物学性状
（三）抗原构造与分型
根据菌体抗原的不同， O1 群霍乱弧菌可分 为3个血清型： 原型（稻叶型, Inaba） 异型（小川型, Ogawa） 中间型（彦岛型, Hikojima) 根据表型差异， O1 群霍乱弧菌可分为 2 个 生物型：古典生物型、El Tor生物型。
一、生物学性状
（四）抵抗力
流行病学概况
1992年10月印度和孟加拉相继发生一种新型霍乱
暴发和较大流行，并随后在亚洲传播，至今已有
印度、巴基斯坦、孟加拉、中国、泰国、马来西 亚、缅甸、尼泊尔、新加坡、斯里兰卡、香港等 国家和地区报告发生O139霍乱病例。2003年， WHO报告45个国家111 575例病例由O139群霍乱
弧菌引起。
分离培养： SS琼脂平板或嗜盐菌选择平板。
血清学鉴定
基因探针杂交、PCR快速诊断
四、防治原则
治疗可用抗生素： 庆大霉素或复方磺胺甲唑/甲氧苄 啶（SMZ-TMP）
A亚单位
B亚单位
二、致病性与免疫性
（一）致病物质
2.鞭毛、菌毛
鞭毛运动有助于细菌穿过肠粘膜表面粘液 层而接近肠壁上皮细胞。 普通菌毛是细菌定居于小肠所必须的因 子。
毒素协同调节菌毛(toxin co-regulated pilus, TCP)
二、致病性与免疫性
（二）所致疾病
霍乱：烈性肠道传染病，我国的甲类法定传 染病。
传染源：患者及无症状感染者
传播途径：粪-口途径，通过污染的水源或食物 临床表现：剧烈的腹泻和呕吐（米泔水样腹泻）， 大量水分和电解质丧失，引起低容量性休克和肾 衰竭（死亡率高达60％）。
病人 带菌者
经污染的水源
病菌
经未煮熟的食物
弧菌属检验实验报告
弧菌属检验实验报告1. 引言弧菌属（Vibrio）是一类革兰氏阴性的海洋细菌，它们常存在于水体中，包括海洋、河流和湖泊等环境中。
有的弧菌属细菌可以引起人和动物的疾病，因此对其进行检验是十分重要的。
本实验旨在通过一系列实验和检测方法，鉴定和确认水样品中是否存在弧菌属细菌，并进一步确定其种类和数量。
希望通过实验结果能为水质监测和疾病防治提供可靠的依据。
2. 实验材料与方法2.1 实验材料- 弧菌属细菌培养基- 水样品- 实验仪器：恒温培养箱、显微镜等2.2 实验方法1. 取少量水样品制备悬浮液。
2. 用不同培养基接种悬浮液。
3. 将接种后的培养皿放入恒温培养箱，以适当的温度进行培养。
4. 确认弧菌属的存在，观察菌落形态和颜色。
5. 进一步通过显微镜观察细胞形态和运动情况。
3. 实验结果3.1 菌落形态观察根据实验结果，我们观察到在某些培养基上出现了呈现黄绿色或灰绿色的菌落，符合弧菌属的特征。
这些菌落呈圆形或不规则形状，具有光滑的边界。
3.2 显微镜观察通过显微镜观察，我们进一步观察到菌落中存在大量弧状细胞，这也是弧菌属的典型特征。
这些细胞呈弧形或弯曲状，具有鞭毛，可以自由游动。
4. 结论根据实验结果，我们可以得出以下结论：- 水样品中存在弧菌属细菌，其菌落形态和细胞形态均符合弧菌属的特征。
- 弧菌属细菌具有一定的运动能力，通过观察弧状细胞的游动情况可以进一步确认其存在。
5. 实验总结通过本次实验，我们成功鉴定出水样品中存在的弧菌属细菌，并通过相应的检验方法确定了其存在和数量。
这对于水质监测和疾病防治具有重要意义。
在今后的实验工作中，我们可以进一步探索弧菌属细菌的特性和生活习性，通过更加精细的检验方法和技术手段，提高弧菌属细菌的鉴定准确性和效率，为保护水资源和人类健康做出更大贡献。
*注：本文中所提及的实验方法和实验结果仅为示例，实际操作需根据具体情况进行调整和修改。
*。
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菌落较大、光滑、黄或绿 色、中间发暗、扁平、边 缘半透明
生化反应
分解 葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖 产酸不产气，缓慢发酵乳糖 过氧化氢酶阳性，氧化酶阳性 吲哚试验阳性，可还原硝酸盐， 霍乱红实验阳性
抗原构造与分型
霍乱弧菌抗原
小川型 稻叶型 彦岛型 无特异性
O抗原 O1群
H抗原 其他150余个血清群
四、防治原则
控制传染源 切断传播途径：改善社区环境，加强水 源管理 提高易感者免疫力：疫苗预防接种 治疗关键：及时补充液体和电解质，预 防大量失水导致的低血容量 性休克和酸中毒。 抗菌素：四环素、强力霉素、呋喃唑酮 氯霉素、复方SM-TMP
副溶血性弧菌 （V.parahemolyticus）
嗜盐菌，存在于近海岸的海水，海 底沉积物和鱼类、贝类等海产品中。 致病菌株引起人类食物中毒 沿海地区食物中毒常见的病原菌
霍 乱 病 人 “便 米及 泔霍 水乱 样患 ”儿 粪
免疫性
病后获得牢固免疫力 抗肠毒素抗体（B单位：IgM、 IgG） 局部抗菌抗体（O抗原） sIgA 霍乱保护性免疫的基础 可凝集粘膜表面的病菌，使其失去 动力；可组织霍乱弧菌粘附肠粘膜上皮细 胞的能力；阻断肠毒素与其受体结合。 O1群和O139群间无交叉保护作用(抗菌 免疫为主)
一、生物学性状
弧形、杆状、丝状 无芽胞、无荚膜、有单鞭毛 嗜盐性 3%～3.5%NaCl、pH7.5 ～8.5培养 基生长良好，无盐不能生长 生化反应 发酵葡萄糖、甘露醇产酸不产气 不发酵蔗糖、产生吲哚 神奈川现象 抵抗力 弱 56℃ 5min 1%醋酸或50%食醋 5min 多形态
二、致病性与免疫性
三、微生物学检查法
1.标本（及时培养或碱性保存液） 污染的水样、食物和粪便，病人肛拭子 2.直接镜检 悬滴法观察细菌呈穿梭样运动； 鱼群状排列。 3.分离培养 碱性蛋白胨水或选择培养基（thiosulfate-citrate-bile-sucrose, TCBS）。 4.血清学鉴定 玻片凝集反应。
霍乱肠毒素（cholerae enterotoxin, CET）
已知致泄毒素中最为强烈的毒素 ctxA ctxB A单位 B单位 毒性 单位 结合 单位
GM1 神 经节苷脂
所致疾病
霍乱
甲类法定传染病
人是霍乱弧菌唯一易感宿主 传染源 患者和带菌者 感染 剂量 传染途径 粪-口途径 症状：古典型 2-3d 潜伏期 剧烈腹泻、 呕吐，无腹痛。排便次数数十次。严重时 每小时失水1L，米泔水样排泄物， O139群更严重 治疗：及时大量补充液体和电解质 带菌者：病愈后病菌存在于胆囊中
一、生物学性状
形态与染色
大小 0.3~0.5μm×1~3μm 新分离：形态典型，弧形/逗点状，G有菌毛，荚膜（O139）无芽胞 端单鞭毛，运动活泼 米泔水样粪便 “鱼群”穿梭运动
纯 培 养 革 兰 染 色 米 泔 水 样 粪 便 涂 片
培养特性
兼性厌氧，氧气充分生长更好 营养要求不高， 生长温度范围广（18--37℃） 耐碱不耐酸，PH7.4-9.6 碱性蛋白胨水/琼脂平板（ PH8.8-9.0 ） 碱性琼脂平板(TCBS)：圆形、扁平、 透明、黄色、光滑菌落。
弧菌属
弧菌属（Vibrio）
细菌是一大群菌体短小，弯曲成弧形的 革兰阴性菌
霍乱弧菌（V.cholerae）
引起烈性传染病霍乱 1817—1923 六次大流行，遍 布亚、非、欧、美、澳，由古典 生物型引起 1961---至今 的第七次世界 大流行，波及五大洲，140多个 多国家，400万人以上，由ElTor生物型引起 1992 年，新的流行株O139 群沿孟加拉湾的印度和孟加拉出 现，很快传遍亚洲。
螺杆菌属 （Helicobacter）
G-，弧形、螺旋形、S形 中等大小、运动活泼的杆菌 寄居动物或人的胃肠道 代表菌 幽门螺杆菌（H.pylori, HP） 与胃窦炎、十二指肠溃疡、胃溃疡 关系密切 胃癌的发生有关
共同 特征
幽门螺杆菌 (Helicobacter. Pylori)
2005诺贝尔生理学 或医学奖Warren和 Marshall
非侵入性诊断
尿素呼气试验 血清学试验 粪便中细菌抗原检测
四、防治原则
预 防
重组脲酶幽门螺杆菌疫苗
抗菌（胶体次枸橼酸铋或抑酸剂） +两种抗生素 三联疗法
治疗
致病物质 溶血毒素 粘附素、粘液素酶 所致疾病 食物中毒
症状 腹痛、腹泻、呕吐、脱水、发热 水样或糊状便，粘液血便 免疫力不强、可重复感染
三、微生物学检查与防治原则
标本 粪便、肛拭子、剩余食物
分离培养及鉴定
嗜盐菌选择培养基（TCBS） 生化反应、血清学实验 快速诊断 基因探针杂交、PCR （毒素基因） 防治原则 不吃生海鲜 庆大霉素、 复方新诺明、氟哌酸 输液补充电解质
所致疾病
感染普遍 我国感染率为60% 胃窦为定植最佳部位。 慢性胃炎、消化性 溃疡，胃癌及MALT淋巴瘤相关
免疫性
体内有相应抗体和细胞因பைடு நூலகம்， 但作用不明
三、微生物学检查法 分离培养
标本
直接镜检 尿素酶活性
快速诊断
侵入性诊断
组织学染色镜检：HE、Giemsa 快速脲酶分解实验：胃镜室最常用方 法 分子生物学技术：PCR、 分离培养：
一、生物学性状
形态与染色
菌体螺旋状、U、S状、海鸥展翅 大小 0.2~1.0μm×2.0~5.0μm 无芽胞、无荚膜 单端丛鞭毛 2-6根
培养特性
微需氧，营养要求高 35-37℃，相对湿度98% 生长缓慢，轻度溶血
圆 形 光 滑 透 明 无 色 菌 落
生化反应
不活泼，不分解糖类 氧化酶和过氧化氢酶均阳性 脲酶丰富，快速脲酶试验强阳性
二、致病性与免疫性
致病物质
鞭毛、菌毛及其他毒力因子：
acf (accessory colonization factor):编码粘附素 tcpA（toxin coregulated pilus A）:编码菌毛蛋白 hlyA (hemolytic-cytolytic A):溶血-细胞毒性蛋白 hap (hemagglutinin/protease): 血凝素/蛋白酶
抵抗力
弱，耐酸。Β-内酰胺类、大环内酯类敏 感，万古霉素、多粘菌素、磺胺类不敏感
致病物质
二、致病性与免疫性
1、穿透、定植因素： 鞭毛、粘附素、脲酶、 2、破坏黏膜上皮细胞因素： 细胞毒素相关基因A蛋白（CagA）：炎症 空泡毒素（VacA）：溃疡 蛋白酶、脂酶和磷脂酶A：降解粘液层 内毒素：抑制上皮细胞基质的合成 3、致癌因素：
O139群
霍 乱
古典生物型
El Tor 生物型
溶解羊红细胞，凝集鸡红细胞，对多 粘菌素不敏感，不被第Ⅳ噬菌体裂解
抵抗力
较弱 55℃ 15min 对酸敏感 正常胃酸仅存活4min 1份漂白粉加4份水处理患者排泄物和呕吐 物，1h可达消毒目的 耐药性范围日益广泛 El Tor生物型和非O1群在自然界生存力强