040嗜肺军团菌

HKCDC/JL-WJ-040 上海市虹口区疾病预防控制中心检验原始记录

（嗜肺军团菌）

样品编号：第页共页样品名称: 样号标记:

收样日期: 检验完成日期:

检验项目和检验依据：

嗜肺军团菌卫生部《公共场所集中空调通风系统检验卫生规范》2006.3（附录A）

设备：CO2培养箱（仪器编号：S/N 305529-461）

生物安全柜（仪器编号：S/N 102589-95）

环境温度（℃）: 环境湿度（%）:

检测结果及记录：

样品形状：

1 材料：GVPC选择性平板：有效期，BCYE平板：有效期，

血平板：有效期，军团菌分型血清：有效期

（法国生物梅里埃公司提供），血平板（科玛嘉制备）分型血清（SCDC制备）

2 方法与步骤：

2.1无菌方法将500ml水样全部通过µm滤膜，取下滤膜仔细剪碎，置入一

含15ml原水样的大试管中，涡旋震荡充分洗脱后，备用。

2.2酸处理：取5ml洗脱样品，用0.01mol/L HCL调PH至2.2，混匀后静置5分钟。

2.3热处理：取1ml洗脱样品置50℃水浴加热30min。

2.4取2.1洗脱样品，2.2酸处理样品，2.3热处理样品各0.1ml，置入GVPC平

板，用L型玻璃棒将其在琼脂表面推开。

2.5将上述接种好的GVPC平板置入36℃ 2.5% CO2含量的二氧化碳培养箱中（有

湿盘）培养，每日观察GVPC平板上有无可疑菌落生长。

3 培养结果：

3.1三天后GVPC平板若有表面光滑，整齐，灰白，灰蓝或紫色呈典型毛玻璃状，

在紫外光灯下，有荧光的可疑菌落，做革兰氏染色镜检。

3.2结果记录：

3.2.1平板培养每日可疑菌落观察记录（有无可疑菌落分别以“+”，“-”表示

测试人：复核人：审核人：

年月日年月日年月日

第页共页

3.2.2 如无可疑菌落生长，则二氧化碳培养箱中培养至第十天。

4 菌落验证试验：

4.1 镜检为革兰氏阴性杆菌的可疑菌落转种BCYE平板，血平板和缺L-半胱氨酸的BCYE平

板，将接种好的平板置入36℃ 2.5% CO2含量的二氧化碳培养箱中（有湿盘）培养，小时作菌落验证试验。凡是在BCYE平板上生长，在血平板和缺L-半胱氨酸的BCYE平板上不生长的为嗜肺军团菌疑似菌。

4.2 生化反应：取BCYE平板上的疑似菌落做氧化酶，硝酸盐还原试验，尿素酶，明胶液化，

水解马尿酸等生化反应。

4.3 血清分型：取BCYE平板上的嗜肺军团菌疑似菌落做血清分型（玻片凝集），结果见下表。

5. 检验结果与评价：