锁阳中儿茶素、根皮苷的提取及含量测定

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锁阳超临界萃取物成分的GC—MS分析

锁阳超临界萃取物成分的GC—MS分析
抗癌作用 “ 。惕各酸具有 酸辣辛香 , 焙烤 和焦 糖、 的熟 甜
水果香气 , 是天然香料 , 广泛应用于朗姆酒 、 焦糖 、 面包 、 干酪、
果酱 中。
本试验中新发现锁 阳中的超临界萃取 物中含有 6种奇数
碳链的脂肪酸( 五碳 酸、 十 十七碳 酸 、 十一碳 酸、 二 二十 三碳 酸 、 一 0一十七碳 烯酸 、 ,2一十 七碳二 烯 酸 ) 奇 数碳 链 顺 1 91 ,
通信作者 : 国伟 , , 杨 男 山西原平人 , , 硕士 副教授 , 研究方 向为食 品加
工与检测 。E—ma :go @1 3 tm。 i yuw 6 .o l
不饱和脂肪酸中的 一 亚油酸可以调节机体免疫系统 ,

晴等 : 阳超 临界萃取 物成分 的 G 锁 C—MS分析
表 1 锁阳超临界萃取 物的化学成分及相对含量
育和脑神经功能 , 增强胎婴儿视力 ; 同时它不仅对人 体有直接 的保健作用 , 而且还可在体 内合成对人保 健功能更 强的高不
饱和脂肪酸—— E A和 D A… ; 一亚麻 酸在 胃癌新辅助化 P H
疗患者术后康复 中起 到促进作 用 。饱 和脂肪 酸 中棕 榈酸 能引起大 鼠问质干细胞和成人 骨 肉瘤 细胞 M 6 G 3凋亡 , 具有
1 2 主 要 仪 器 .
按照“ . ” 1 3 的方法 , 阳超 临界 萃取 物得率 为 2 5 % 。 锁 .1
将锁 阳萃取物按上述 G MS分析条件进行鉴定 , C— 通过 G C— M S白带 的 N S0 . IT 8 L库 自动检索 获得 目标 组分 的初步鉴 定 结果( 1 , 图 ) 再结合相关专业知识 和有关文献 资料进行 人工 谱图解 析 , 最终确定萃取物的化学组成成分 , 并按照峰面积归

一测多评法测定锁阳中3种有效成分

一测多评法测定锁阳中3种有效成分

一测多评法测定锁阳中3种有效成分杨瀚春;王荣;何家田;夏鹏霄;谢华【摘要】目的:建立同时测定锁阳中儿茶素( CA)、没食子酸( GA)、原儿茶酸( PR)的高效液相色谱一测多评法。

方法以锁阳中CA、GA、PR为考察指标,建立CA、GA、PR间的相对校正因子,并用校正因子计算CA、GA、PR的含量,将一测多评法的计算值与外标法实测值进行比较。

结果建立了锁阳中3种成分的一测多评法;一测多评法的计算值与外标法实测值之间差异无统计学意义。

结论同时测定锁阳中CA、GA、PR等3种成分的一测多评法方法可靠,结果准确,可用于控制锁阳药材及饮片的质量。

【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2014(000)007【总页数】4页(P952-955)【关键词】锁阳;儿茶素;没食子酸;原儿茶酸;一测多评法【作者】杨瀚春;王荣;何家田;夏鹏霄;谢华【作者单位】解放军第513医院药剂科,甘肃东风 732750;兰州军区兰州总医院全军临床药理基地,兰州 730050; 兰州大学药学院,兰州 730000;兰州军区药品仪器检验所,兰州 730050;解放军第513医院药剂科,甘肃东风 732750;兰州军区兰州总医院全军临床药理基地,兰州 730050【正文语种】中文【中图分类】R286;R927.1锁阳亦称不老药,又名锈铁棒、地毛球、羊锁不拉,为锁阳科植物锁阳(CynomoriumsongaricumRupr.)的干燥肉质茎[1]。

锁阳中含有的儿茶素(catechin,CA)具有提高免疫功能、抗氧化等活性,没食子酸(gallic acid,GA)具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤作用;原儿茶酸(protocatechic acid,PR)具有增加冠状动脉血流量、降低心肌耗氧量的作用,在体外具有明显抑制血小板聚集的活性和抗菌活性[2-3]。

本实验采用高效液相色谱(HPLC)法同时测定CA、GA、PR的含量,并利用以上3种成分内在的函数和比例关系,采用一测多评的方法[4-5],计算CA、GA、PR相互之间的相对校正因子(f)和3种成分的含量,为客观评价锁阳及其中成药的质量提供了新的分析模式。

根皮素的制备、结构修饰及生理活性研究进展

根皮素的制备、结构修饰及生理活性研究进展

根皮素的制备、结构修饰及生理活性研究进展魏丽娜; 赵静; 罗仓学; 刘娟; 史长政【期刊名称】《《食品与发酵工业》》【年(卷),期】2019(045)017【总页数】8页(P278-285)【关键词】根皮素; 制备; 生理活性; 结构修饰; 应用前景【作者】魏丽娜; 赵静; 罗仓学; 刘娟; 史长政【作者单位】陕西科技大学食品与生物工程学院陕西西安 710021【正文语种】中文根皮素(phloretin)为具有二氢查尔酮结构的黄酮类化合物,具有多种生理活性。

目前已探明的活性有抗氧化[1]、抑菌[2]、抑制肿瘤细胞增殖[3]、抑制酪氨酸酶活性[4]、抗炎[5]等活性,并且根皮素对人体安全无毒[6],因此在食品、药品、化妆品等领域中具有巨大的应用前景。

天然产物中根皮素大多以糖苷形式存在于苹果树体的根、茎、叶、树皮、果实中,被看做是苹果中的特征酚类物质,可作为特征指纹用于苹果汁的质量控制和鉴伪[7]。

目前研究发现,在多穗柯甜茶、荔枝果皮、海棠等植物中也发现了根皮素。

人体摄入根皮苷后经胃酸或葡萄糖苷酶水解生成根皮素,进入循环系统发挥药效。

研究者围绕根皮素进行了大量的研究,但目前国内外尚缺乏关于根皮素的综述,本文较详细地综述了根皮素的制备、生物活性及结构修饰研究现状,以期为根皮素应用及深入研究奠定基础。

1 根皮素的制备1.1 天然产物中提取分离从苹果树体及果皮中提取。

法国化学家1835年就从苹果树皮中分离得到了根皮苷[8],后来发现根皮素及根皮苷大量存在于苹果树的根皮、茎、嫩叶以及苹果果实的各个部位[9]。

采用有机溶剂(甲醇、乙醇等)从苹果树皮中进行提取,利用制备型高效液相色谱进行分离纯化可得到根皮苷,通过酸(盐酸或硫酸)水解可制得根皮素[10]。

根皮苷在苹果树体各部位含量有所不同,其中苹果树皮含量最高,为64.32 mg/g,其次是树叶含量40.30 mg/g,树枝含量为30.43 mg/g[11]。

从苹果疏落果(幼果)中提取苹果多酚,进而分离纯化得到根皮苷,产品的得率为0.104%。

新疆锁阳中总黄酮的提取工艺优化及含量测定

新疆锁阳中总黄酮的提取工艺优化及含量测定

新疆锁阳中总黄酮的提取工艺优化及含量测定【摘要】目的优选新疆锁阳中总黄酮的提取工艺,比较不同产地新疆锁阳中总黄酮的含量。

方法以总黄酮含量为指标,以芦丁为对照品, 用分光光度法比较了回流法、超声法、煎煮法从锁阳干燥肉质茎中提取黄酮类化合物的提取效率,采用正交表进行实验优化了超声法的提取工艺。

比较了不同地区不同生长期的锁阳中总黄酮的含量。

结果固液比和超声时间对黄酮类化合物的提取效率有显着影响,乙醇浓度对提取效率影响不显着。

结论最佳提取工艺为60%乙醇、1:60固液比、超声 h,且总黄酮含量以奇台地区的锁阳最高,出土期比开花期高,花中总黄酮含量高于茎中。

【关键词】锁阳;黄酮类化合物;最佳提取工艺;超声Abstract:ObjectiveTo ascertain the optimum condition for extracting Cynomorium songaricum rutin as acomparison, we compared the extraction methods of the total flavones of Cynomorium songaricum Rupr., and studied the optimal conditions for extracting flavonoid compounds of Cynomorium songaricum using L9 (34) orthogonal table, and compared the total flavone contents of Cynomorium songaricum Rupr. from different regions at different growth The volume of alcohol and the time of extraction affected the total flavones significantly. ConclusionThe results showed that the highest extraction rate of the total flavones could be obtained with 60% ethanol solution at a ratio of solid to liquid 1:60 and ultrasound h and the highest content of the total flavones is obtained from Qitai region at unearthed stage.Key words:Cynomorium songaricum Rupr.; Total flavones; The optimumextraction process; Ultrasound锁阳Cynomorium songaricum Rupr.,又名不老药、铁棒槌、锈铁棒、地毛球、乌兰高腰(蒙语) 、锁严子,是锁阳科Cynomoriaceae锁阳属的单科单属单种植物, 多寄生于蒺藜科(Zygophyllaceae) 白刺属(Nityaria L. )植物根部, 是全寄生种子植物。

锁阳中黄酮的提取工艺研究

锁阳中黄酮的提取工艺研究

锁阳中黄酮的提取工艺研究孟敏刘晔玮贺殿邸多隆【摘要】目的优选锁阳中黄酮的最正确提取工艺。

方式别离以总黄酮含量、浸膏得率、儿茶素含量和抗自由基活性为评判指标,选择物料比(A)、提取时刻(B)和提取次数(C)为考察因素, 采纳正交实验L9 (34)优选锁阳中黄酮的最正确提取工艺。

结果锁阳中黄酮的最正确提取工艺条件为:以60 %的乙醇为提取溶剂, 物料比为1∶14 , 提取时刻 h , 共提取1 次。

结论优选工艺条件可为新药研究和工业化生产提供参考。

【关键词】锁阳; 正交实验; 提取工艺; 总黄酮; 儿茶素; 清除自由基活性Abstract:ObjectiveTo investigate the optimum ethanol extraction process conditions for the flavonoids in Cynomorium songaricum Rupr. MethodsThe content of total flavonoids and catechin , extraction rate, free radical scavenging activity were chosen as the assessment indices. With the solid-liquid ratio, reflux time and extraction time as investigation factors, the optimum ethanol extraction process of the flavonoids from Cynomorium songaricum Rupr was determined by L9 (34) orthogonalexperimental design. ResultsThe optimum extracting conditions was selected as follow: the ratio of raw material to 60% alcohol was 14∶1, the reflux time was 3 hours, and extraction times was optimum extraction process can give a reference to the research of a new medicine and industry production.Key words: Cynomorium songaricum Rupr.; Orthogonal experiment; Extraction technology; Total flavonoids; Catechin; Free radical scavenging activity锁阳Cynomorium songaricum Rupr.为锁阳科Cynomoiraceae锁阳属寄生植物锁阳的干燥肉质茎,常寄生于蒺藜科植物白刺Nitrariasibirica的根上,多生擅长干旱与含碱的沙地,主产于内蒙古、宁夏、新疆、甘肃、青海等西北地域。

HPLC法测定锁阳中没食子酸和原儿茶酸的含量

HPLC法测定锁阳中没食子酸和原儿茶酸的含量

HPLC法测定锁阳中没食子酸和原儿茶酸的含量王勤;孙芸【摘要】目的建立同时测定中药锁阳中没食子酸和原儿茶酸含量的高效液相色谱法.方法采用Eclipse XDB C18柱(150mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-水-冰醋酸(5:95:0.1)为流动相,检测波长:260 nm,流速:0.8 mL·min-1.结果没食子酸和原儿茶酸进样量分别在0.104~0.520μg(r=0.999 8),0.107~0.538μg(r=0.999 9)时,与峰面积值具有良好的线性关系.结论该方法简便,结果准确、重现性好,可为控制该药材和饮片的内在质量提供参考依据,从而为锁阳药材的质量评价和资源的合理开发利用提供科学依据.【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2010(025)003【总页数】3页(P190-192)【关键词】高效液相色谱法;锁阳;没食子酸;原儿荼酸【作者】王勤;孙芸【作者单位】甘肃省张掖市药品检验所,甘肃,张掖,734000;甘肃省张掖市药品检验所,甘肃,张掖,734000【正文语种】中文【中图分类】R927.2锁阳俗称“不老药”,又名锈铁棒、地毛球、羊锁不拉,为锁阳科植物锁阳Cynomorium songaricum Rupr. 的干燥肉质茎[1],分布于甘肃、新疆、内蒙古、青海、宁夏等地,产于河西走廊沙地、腾格里沙漠、浑善达克沙地西部,尤其是甘肃河西走廊出产的锁阳因疗效好而被历代中医认为是锁阳的道地性产区[2-3],具有补肾阳、益精血、润肠通便的作用,临床上主要用于腰膝痿软、阳萎滑精、肠燥便秘等症[4],疗效确切。

近年来,随着光谱技术的发展,锁阳的化学成分才被逐步揭示,而且对其药理作用也有了更广泛的认识。

这些对测定锁阳的有效成分,建立锁阳的质量标准,保护和合理开发利用锁阳资源都具重要的意义。

研究表明,锁阳能够促进人体细胞再生和新陈代谢,增强免疫调节能力,在防癌、抗病毒、免疫调节、延缓衰老、防治心血管疾病、治疗白细胞减少等方面具有重要价值[2-3]。

锁阳原花青素提取方法及抗氧化和抗糖基化研究

锁阳原花青素提取方法及抗氧化和抗糖基化研究

锁阳原花青素提取方法及抗氧化和抗糖基化研究张喜峰;陈雨迪;崔晶;程雯慧【摘要】为比较不同提取方法对锁阳原花青素得率、抗氧化性和抗糖基化活性的影响,本研究分别采用超声波法、乙醇/硫酸铵双水相萃取法、水提法、微波法和酶解法提取锁阳中原花青素,用香草醛-浓盐酸法测定原花青素含量.采用DPPH·清除能力和·OH清除能力衡量其体外抗氧化能力,采用牛血清白蛋白(BSA)-葡萄糖模拟反应体系和牛血清白蛋白-丙醛酸(MGO)模拟反应体系评价原花青素抗糖基化活性.结果表明:微波法提取得率最高,可达15.00%,提取时间短,仅为19 min.不同提取方法对DPPH·清除能力依次为微波法>酶法>超声波法>乙醇/硫酸铵双水相萃取法>水提法;不同提取方法对·OH清除能力依次为:微波法>酶解法>超声法>水提法>乙醇/硫酸铵双水相萃取法.微波法制备原花青素在牛血清白蛋白-果糖模拟反应体系和牛血清白蛋白-丙酮醛模拟反应中均有最高抑制率;但抗氧化和抗糖基化活性无相关性.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2018(030)012【总页数】10页(P2039-2048)【关键词】锁阳;原花青素;微波法;抗糖基化【作者】张喜峰;陈雨迪;崔晶;程雯慧【作者单位】河西学院农业与生物技术学院;甘肃省河西走廊特色资源利用重点实验室,张掖734000;河西学院农业与生物技术学院;河西学院农业与生物技术学院;河西学院农业与生物技术学院【正文语种】中文【中图分类】R284.2;Q961锁阳(Cynomorium songaricum Rupr.)为锁阳科、锁阳属多年生肉质寄生草本,国内主要分布于新疆、甘肃、内蒙、宁夏等地;其含有多糖、皂苷、原花青素、木脂素和生物碱等多种活性物质[1-3];原花青素作为黄酮类化合物一种,由于具有功能强大的活性和保健功效,已引起国内外研究人员广泛关注,抗氧化和抗糖基化是其最重要功能活性[4,5];国内外研究表明,原花青素可通过清除自由基、螯合金属离子、抑制蛋白质结构修饰等多种作用抑制晚期糖基化终产物(AGEs)形成[6,7]。

根皮苷研究进展_谭飔

根皮苷研究进展_谭飔
抗氧化剂的研究一直是食品营养学研究的重点。 张泽生等[31]人研 究 表 明,根 皮 苷 对 于 高 脂 膳 食 导 致 的氧化损伤的果蝇具有明显保护作用,增强 SOD 和 CAT 活性,能够显著延长果蝇寿命,具有较强的抗氧 化作用。Vasantha Rupasinghe 表 明[32],根 皮 素 的 抗 氧化活性强于根皮苷,但两者的活性均强于 VE,可以 抑制多元未饱和脂肪酸的氧化。正因为根皮苷的抗 氧化性,能够显著延长酵母的寿命,因此根皮苷在延 缓衰老及研究抗衰老药物方面引起了广泛关注[33]。 3. 4 其他活性
糖尿病是威胁人类健康的重大疾病,糖尿病的典 型症状是高血糖。目前治疗糖尿病的主要药物有传 统的磺酰脲类、双胍类和一些新型降糖类药物如罗格 列酮、吡格列酮等。其作用机制大多是促进胰岛素的 分泌或者增加胰岛素的敏感性[23]。现有大量研究表 明根皮苷具有降低空腹血糖的作用,根皮苷降低血糖 的机理在于竞争性的抑制了葡萄糖转运载体( SGLTs 和 GLUTs) 对葡萄糖 分 子 的 运 输[2]。董 华 强[3,24] 报 道,从多穗柯中分离纯化的根皮苷能降低糖尿病小鼠 的血糖、甘油三酯、总胆固醇等含量,对防治糖尿病有 积极作用,并且经水杨酸酰基修饰后的根皮苷的降血 糖能 力 和 清 除 自 由 基 能 力 比 根 皮 苷 强。 Zhao 报 道[25],根皮苷能明显改善 2 型糖尿病小鼠高血糖症 状,但并未改善肝脏胰岛素状况。膳食中的根皮苷能 降低小鼠血糖,改善糖尿病小鼠的脂代谢状况,减少 胰岛素抵抗,提高高密度脂蛋白含量,降低低密度脂 蛋白含量,对 于 糖 尿 病 的 典 型“三 多 一 少 ”症 状 也 有
3 根皮苷的生物活性
3. 1 根皮苷与植物的生理相关性 根皮苷与植物的生长发育以及抗逆性等生理现

一种苦皮藤药材中儿茶素的含量测定方法[发明专利]

一种苦皮藤药材中儿茶素的含量测定方法[发明专利]

专利名称:一种苦皮藤药材中儿茶素的含量测定方法专利类型:发明专利
发明人:胡奇志,胡成刚,王学军,张军
申请号:CN201810552182.1
申请日:20180531
公开号:CN108645948A
公开日:
20181012
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明公开了一种苦皮藤药材中儿茶素的含量测定方法,色谱条件:JADE‑PAK ODS‑AQ 色谱柱;流动相:以乙腈和冰醋酸的混合液,检测波长:275‑285nm;柱温:25‑35℃;流速:0.8‑1.2mL·min;进样量:5μL;儿茶素对照品溶液的制备:精密称取儿茶素对照品,加入甲醇配成0.10~0.14mg·mL的儿茶素对照品溶液;供试品溶液的制备;HPLC法测定:分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定,测得峰面积值并计算含量,即可。

本发明以儿茶素为测定指标,采用高效液相色谱法,建立苦皮藤药材的含量测定方法,为苦皮藤药材的质量标准研究提供实验依据;所述测定方法准确,灵敏度高,重复性好,结果可靠,为苦皮藤药材质量控制和评价提供依据。

申请人:贵阳中医学院
地址:550025 贵州省贵阳市花溪区大学城栋青南路贵阳中医学院
国籍:CN
代理机构:北京联创佳为专利事务所(普通合伙)
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锁阳中儿茶素、根皮苷的提取及含量测定

锁阳中儿茶素、根皮苷的提取及含量测定

锁阳中儿茶素、根皮苷的提取及含量测定李辰;陈卫林;郭玫;邸多隆【摘要】建立了高效泣相色谱一二极管阵列检测器联用测定中药锁阳中黄酮类化合物儿茶素、根皮苷的方法.用C18反相色谱柱梯度洗脱法成功分离了二者;以儿荼素和根皮苷含量总和为指标,以物料比、提取时间和提取次数为正交试验考察因素,优化了锁阳中黄酮的提取方法,得到的最佳提取条件为:28kHz、50℃条件下,以药材量7.5倍的甲醇超声提取3次,每次30 min.该方法提取效果好,精密度、准确度和稳定性较好,用于11个不同产地锁阳样品的提取和含量测定,可作为锁阳及其制品中儿茶素和根皮苷等黄酮类化合物提取、分析及质量控制的方法.【期刊名称】《五邑大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2011(025)001【总页数】6页(P23-28)【关键词】高效液相色谱;锁阳;儿茶素;根皮苷【作者】李辰;陈卫林;郭玫;邸多隆【作者单位】五邑大学分析测试中心,广东江门,529020;中国科学院兰州化学物理研究所西北特色植物资源化学重点实验室和甘肃省天然药物重点实验室,甘肃兰州,730000;甘肃中医学院,甘肃兰州,730000;甘肃中医学院,甘肃兰州,730000;中国科学院兰州化学物理研究所西北特色植物资源化学重点实验室和甘肃省天然药物重点实验室,甘肃兰州,730000【正文语种】中文【中图分类】O657.7;R914.4锁阳(Cynomorium songaricum Rupr.),锁阳科植物锁阳的干燥肉质茎,一种不含叶绿素的全寄生植物,主要分布于中国西北地区,如青海、甘肃、新疆、内蒙古、宁夏等地区的半荒漠或荒漠地带. 传统中药中,锁阳性味甘温有力,有补肾阳、益精血、补血、润肠通便之功效,用于腰膝痿软、阳痿滑精、肠燥便秘[1];现代医学证明:锁阳提取物对人免疫缺陷病毒(HIV)[2]、抗丙型肝炎病毒(HCV)[3]、人成神经细胞瘤[4]有抑制作用,还可用于治疗妇女绝经期症状[5]等. 目前,已从锁阳中分离出有机酸、酚类、甾体、脂肪酸、黄酮、三萜、氨基酸、蛋白质及多种维生素,多酚和黄酮等是锁阳的主要活性成分,儿茶素是黄酮类化合物中最重要的活性成分之一,其含量的准确测定非常重要. 目前以HPLC法同时测定锁阳中儿茶素(catechin,CA)和根皮苷(phloridzin,PH)的方法鲜有报道. 本文采用HPLC-DAD(二极管阵列检测器)法建立了同时测定锁阳提取物中儿茶素和根皮苷的方法,并应用于中国西部不同地区采集的11个锁阳样品中二者含量的分析比较.1.1 仪器Agilent 1200高效液相色谱仪(美国安捷伦公司,包括G1312A二元泵、G1315B(DAD)、自动进样器和Agilent Chemstation工作站),RE-52C型旋转蒸发仪,SHZ-D(Ⅲ)循环式真空泵(巩义市英峪予华仪器厂),BT 224S电子天平(德国赛多利斯仪器公司),KQ-250DE超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司).1.2 材料锁阳药材分别采自甘肃敦煌、民勤、安西、河西、张掖,新疆阜康、阿克苏,青海海西州、门源,宁夏恒武,内蒙古巴盟等11个地区,经兰州大学药学院马志刚教授鉴定为锁阳科植物锁阳的干燥肉质茎,样本存放于甘肃省天然药物重点实验室.1.3 试剂儿茶素对照品(中国药品生物制品检定所,批号877-200001),根皮苷对照品(Sigma公司,批号083K7072),纯净水,乙腈(色谱纯,北京J&K Chemical Ltd.),甲醇(分析纯,天津化学试剂公司),枸椽酸、N,N-二甲基甲酰胺、四氢呋喃等均为分析纯.2.1 色谱条件色谱柱:Eclipse XDB-C18柱(4.6mm×250mm ,5μm,美国安捷伦公司);保护柱:Eclipse XDB-C18(4.6mm×12.5mm ,5μm,美国安捷伦公司);流动相:乙腈(P)和水(W),梯度洗脱,12% P保持不变(0~6 min),12%~30% P(6~30 min),流速1.0 mL/min;DAD检测波长280 nm;柱温:室温;进样量:10 µL. 色谱峰定性由对照品保留时间和紫外光谱图确定,峰面积外标法定量.2.2 对照品溶液和供试品溶液制备2.2.1 对照品溶液制备分别精密称取儿茶素和根皮苷对照品3.10 mg和0.968 mg,以甲醇溶解并定容到5 mL的容量瓶中,二者浓度分别为0.602 mg/mL和0.194 mg/mL,作为储备液,冰箱4 ℃保存. 用前取出放至室温,再各稀释5倍,浓度分别为0.120mg/mL和0.0387 mg/mL.2.2.2 供试品溶液制备精密称取晾干并粉碎的锁阳药材约2.001 5 g,加入15 mL甲醇,在28 kHz和50 ℃条件下超声提取30 min,抽滤,滤渣再加入15 mL甲醇重复提取2次,抽滤,合并3次滤液,滤渣弃去. 将滤液浓缩近干,浓缩残余物以甲醇溶解并定容至5 mL,静置过夜. 测定前取出,放至室温,取上清液,过0.45 μm滤膜后,直接进HPLC分析.3.1 检测波长选择使用DAD在200~400 nm全波长扫描,监测目标化合物的最大吸收波长. 儿茶素和根皮苷的紫外吸收图谱如图1所示:儿茶素的特征吸收波长为210 nm和280 nm,根皮苷的特征吸收波长是225 nm和285 nm. 尽管二者在低波长处的吸收更大,但此处色谱背景的干扰也很大,故选择280 nm对待测成分进行同时检测.3.2 流动相选择由于儿茶素和根皮苷极性有差异,利用等度洗脱不能同时分离二者,故选用梯度洗脱. 比较后发现,乙腈—水梯度洗脱体系的分离效果优于甲醇—水体系. 优化后的梯度条件如下,流动相:乙腈(P)和水(W);梯度:0~6 min保持12% P不变,6~30 min 12%P逐渐递增到30%P;流速1.0 mL/min. 在此条件下,锁阳样品中的儿茶素、根皮苷与其他干扰成分完全分离,对照品和样品的分离谱图分别如图2和图3所示.3.3 样品前处理3.3.1 选择提取溶剂儿茶素和根皮苷易溶于甲醇、乙醇,比较乙醇、50%甲醇和纯甲醇3种有机溶剂作提取剂对二者提取效率的影响. 经HPLC实验发现:乙醇提取物成分复杂,对儿茶素和根皮苷的分离形成干扰;50%甲醇提取液提取出了较多难溶于甲醇的粘度较大的多糖成分,干扰测定;甲醇作提取剂,既能较充分地提取出所需的黄酮成分,又能减少水溶性成分的干扰,提取液浓缩定容也容易,对HPLC测定影响也小,因此,选定甲醇为提取溶剂.3.3.2 确定提取方法考察回流提取法、超声提取法和索氏提取法3种提取方式,经比较发现:超声提取法儿茶素和根皮苷含量最高,且操作简便省时. 以甲醇为溶剂进行超声提取,按表1正交试验设计法考察甲醇用量(A)、提取时间(B)和提取次数(C)等影响因素,结果见表2. 以儿茶素和根皮苷提取含量总和为考察指标,表2中极差R 值大小显示各因素作用主次为C>B>A;表3方差分析结果表明:A、B、C3种因素均无显著性意义(P>0.05),以A2B2C3为最佳提取条件,即优化后的最佳条件为:以药材量7.5倍(mL:g)的甲醇超声提取3次,每次30 min.在此基础上,再考察超声温度(30 ℃、40 ℃)和超声频率(20 kHz、28 kHz)对提取的影响,结果见表4:超声频率对结果影响不大,但温度影响具有显著性,温度越高越有利于提取. 通过实验发现:50 ℃提取效果更好,但为防止黄酮等有效成分在高温下发生变化,影响将来的药效学实验,最高提取温度应小于50 ℃为宜. 通过考察比较,最终确定的超声提取方法为28 kHz、50 ℃条件下,以7.5倍药材量(mL:g)的甲醇超声提取3次,每次30 min.3.4 方法学验证3.4.1 线性方程、线性范围、相关系数和检测限用自动进样器分别吸取0.120 mg/mL儿茶素和0.0387 mg/mL根皮苷的对照品溶液1 µL、2 µL、5 µL、10 µL、15 µL、20 µL、30 µL,依次进样,按上述色谱条件测定,以对照品进样量(µg)为横坐标、峰面积(mAU·s)为纵坐标绘制标准曲线. 结果表明:儿茶素在0.120~3.612 μg范围内线性关系良好,根皮苷在0.0194~0.774 μg范围内线性关系良好.以3倍信噪比计算检测限,得到儿茶素和根皮苷的检测限分别为2.15 ng和0.322 ng.3.4.2 精密度由日内和日间精密度评价方法的重复性,分别取0.602 mg/mL儿茶素对照品和0.194 mg/mL根皮苷对照品溶液连续进样5次,测得儿茶素和根皮苷峰面积的RSD分别为2.08%和1.92%;在6 d内,每天随机对儿茶素和根皮苷的对照品溶液进样1次,2个待测物峰面积6次测定结果的RSD小于3%,说明方法精密度良好.3.4.3 稳定性将同一锁阳样品溶液放置于室温下,连续考察5 d,每次进样4 µL,测得样品中儿茶素和根皮苷含量的RSD小于3%,说明方法稳定性较好.3.4.4 回收率精密称取已知含量的锁阳样品5份,分别加入适量的对照品溶液,按2.2.2项“供试品溶液制备”方法进行样品提取制备,按2.1项“色谱条件”进行分析,测得儿茶素和根皮苷的平均回收率分别为100.5%和99.26%,平行样的RSD分别为1.87%和2.54%,说明方法准确度较高.3.5 样品测定精密称取11个采自中国主要不同产地的锁阳样品,按2.2.2项“供试品溶液制备”方法和2.1项“色谱条件”,以HPLC测定药材中儿茶素和根皮苷的含量,每个样品重复测定3次. 样品的典型图谱见图3,由图可知待测组分没有干扰,提取物不同组分间分辨率较好. 不同产地锁阳中2种被测物的含量由相应标准曲线计算得到,结果列于表5.由表5可知:1)不同产地供试品中儿茶素和根皮苷含量差别较大(青海海西州锁阳儿茶素含量最高,为1.552 mg/g;内蒙古巴盟锁阳根皮苷含量最高,为0.046 mg/g),尤其儿茶素含量差别更大(0.145~1.552 mg/g). 2)不同产地供试锁阳样品中2种待测物均以儿茶素含量为主,且儿茶素含量远高于根皮苷的含量;这一结果与Chu等[6]用毛细管电泳—安培检测器测定锁阳的结果一致(他们测得不同产地锁阳中根皮苷含量为0.011~0.038 mg/g,亦与本文测定结果相近),但Chu[6]和张思巨[7](尤其后者)所测锁阳样品中儿茶素含量较本文所测结果高,其测定含量为分别0.251~2.319 mg/g和0.760~20.79 mg/g,这可能与药材生长环境、采集时间及药材的新鲜程度等有关,如张思巨等指出锁阳样品中儿茶素含量与药材新鲜程度有关,同一产地锁阳鲜品中儿茶素的含量约为陈品的3倍.本文建立了HPLC梯度洗脱同时测定锁阳中2种黄酮化合物儿茶素和根皮苷的方法,该方法操作简便,精密度和准确度较高. 利用该方法测定了采自中国西部主要产区的11个锁阳样品中儿茶素和根皮苷的含量,结果儿茶素含量均显著高于根皮苷含量,并比较了其含量与文献值的差别,指出这些差别可能是由于生长环境、药材采集时间和新鲜程度等不同造成的. 该RP-HPLC梯度洗脱方法可被用作锁阳及其制品的质量控制方法.【相关文献】[1] 苏格尔,常艳旭. 锁阳的化学成分及药理作用研究概况[J]. 中国民族医药杂志,2005, 11(6): 46-49.[2] MA Chaomei, NAKAMARA N, MIYASHIRO H, et al. Inhibitory effects of constituents from Cynomorium songaricum and related triterpene derivatives on HIV-1 protease [J]. Chem Pharm Bull (Tokyo), 1999, 47(2): 141-145.[3] MA Chaomei, WEI Ying, WANG Zhigang, et al. Triterpenes from Cynomorium songaricium-analysis of HCV protease inhibitory activity, quantification, and content change under the influence of heating[J]. Journal of Natural Medicines, 2009, 63: 9-14. [4] LU Yi, WANG Qingguo, MELZIG M F, et al. Extracts of Cynomorium songaricum protect SK-N-SH human neuroblastoma cells against staurosporine-induced apoptosis potentially through their radical scavenging activity [J]. Phytotherapy Research, 2009, 23(2): 257-261.[5] ZHANG Chunzhi, WANG Suxin, ZHANG Yan, et al. In vitro estrogenic activities of Chinese medicinal plants traditionally used for the management of menopausal symptoms [J]. Journal of Ethnopharmacology, 2005, 98(3): 295-300.[6] CHU Qingcui, TIAN Xiuhua, LIN Miao, et al. Electromigration profiles of Cynomorium songaricum based on capillary electrophoresis with amperometric detection[J]. J Agric Food Chem, 2006, 54(21): 7979-7983.[7] 张思巨,刘丽,于江永. 高效液相色谱法测定锁阳儿茶素的含量[J]. 中国药学杂志,2003, 38(8): 578-580.。

用HPLC法同时测定锁阳中的多种有效成分

用HPLC法同时测定锁阳中的多种有效成分

用HPLC法同时测定锁阳中的多种有效成分杨瀚春;王荣;夏鹏霄;贾文超;杨长勇【期刊名称】《药学服务与研究》【年(卷),期】2014(14)2【摘要】目的:建立同时测定锁阳中儿茶素、没食子酸和原儿茶酸含量的HPLC 法。

方法:采用 Hypersil ODS C18柱(250 mm×4.6 mm,2.5 μm);流动相:乙腈-水-36%乙酸(8∶92∶0.1);流速:1.0 ml/min;检测波长258.7 nm;柱温:室温。

结果:儿茶素、没食子酸、原儿茶酸分别在0.047~1.510 μg(r=0.999 9);0.050~1.613 μg (r=0.999 6)和0.059~1.882 μg (r=0.999 8)范围内有良好的线性关系。

儿茶素、没食子酸和原儿茶酸的平均回收率分别为100.59%、101.24%和97.90%,RSD分别为3.35%、2.36%和3.14%(n=6)。

结论:该方法简便、准确、重现性好,可为控制该药材和饮片的内在质量提供参考依据。

【总页数】3页(P122-124)【关键词】锁阳;儿茶素;没食子酸;原儿茶酸;色谱法;高效液相【作者】杨瀚春;王荣;夏鹏霄;贾文超;杨长勇【作者单位】解放军第五一三医院药剂科;兰州军区兰州总医院全军临床药理基地;兰州大学药学院【正文语种】中文【中图分类】R281.1【相关文献】1.HPLC法同时测定中药多种有效成分含量的应用 [J], 严红2.HPLC法同时测定中药多种有效成分含量的应用 [J], 秦卫红;王响群;秦迎春3.HPLC法同时测定锁阳中没食子酸和儿茶素的含量 [J], 顾健沛4.HPLC法同时测定锁阳中没食子酸和儿茶素的含量 [J], 顾健沛5.HPLC波长切换法同时测定金衣万应丸中多种有效成分的含量 [J], 马丹凤;李素娟;刘雯因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

锁阳提取物对DPPH自由基的清除能力研究

锁阳提取物对DPPH自由基的清除能力研究

锁阳提取物对DPPH自由基的清除能力研究
张霁红;李新明;曾朝珍;张芳
【期刊名称】《中国食品工业》
【年(卷),期】2011(000)006
【摘要】对琐阳进行水提和不同浓度的乙醇提取,得到4个提取物,并对提取物进行总酚、总黄酮的测定和DPPH自由基清除能力的研究。

结果表明:4个锁阳提取物中总酚、总黄酮含量均较高,其中70%浓度的乙醇提取物中总酚、总黄酮含量分别达到2.63mg/mL、1.51mg/mL,50%浓度的乙醇提取物中抗氧化能力较强,加入浓度5μg/mL时DPPH自由基清除率达80%,EC50值0.0371,APR值26.95,其抗氧化性能力大于BHT,而小于VC。

【总页数】2页(P58-59)
【作者】张霁红;李新明;曾朝珍;张芳
【作者单位】甘肃省农业科学院农产品贮藏加工研究所;甘肃省农业科学院农产品贮藏加工研究所;甘肃省农业科学院农产品贮藏加工研究所;甘肃省农业科学院农产品贮藏加工研究所
【正文语种】中文
【中图分类】TS264.22
【相关文献】
1.芒果废弃物不同部位乙醇提取物DPPH·自由基清除能力的研究 [J], 向海艳;刘颖怡;戴开金
2.刺老芽根提取物对DPPH自由基的清除能力及抑菌作用 [J], 庞永;白雪梅;姜成哲;崔明勋;李太元;许广波
3.麻风树籽初提取物对DPPH·自由基的清除能力研究 [J], 莫绪(如生);邹碧群;刘贤贤
4.桑叶提取物对DPPH自由基的清除能力研究 [J], 覃雯;徐健飞;张业
5.DPPH法测定龙眼叶丙酮提取物的自由基清除能力 [J], 李培源;彭炳华;莫媛媛;霍丽妮;秦一兰
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《锁阳多糖提取纯化、结构解析及生物活性研究》范文

《锁阳多糖提取纯化、结构解析及生物活性研究》范文

《锁阳多糖提取纯化、结构解析及生物活性研究》篇一一、引言随着现代生物技术的飞速发展,多糖类物质因其独特的生物活性和药用价值逐渐成为研究热点。

锁阳作为一种具有悠久药用历史的中药材,其多糖成分具有极高的研究价值。

本文以锁阳多糖为研究对象,进行提取纯化、结构解析及生物活性研究,旨在为锁阳多糖的深入研究和应用提供理论依据。

二、锁阳多糖的提取纯化1. 材料与方法本实验所使用的锁阳购自药材市场,经鉴定为正品。

采用热水浸提法提取锁阳多糖,通过离心、沉淀、透析等步骤进行纯化。

2. 实验步骤(1)将锁阳粉碎,加入适量去离子水,浸泡一定时间后进行热水浸提。

(2)浸提液经离心后,收集上清液,加入乙醇沉淀多糖。

(3)沉淀经透析、冷冻干燥后,得到锁阳多糖粗品。

(4)采用凝胶渗透色谱、离子交换色谱等手段对粗品进行纯化,得到纯度较高的锁阳多糖。

3. 结果与讨论通过上述方法,成功提取并纯化了锁阳多糖。

在纯化过程中,我们发现锁阳多糖的分子量分布较广,需要通过多次纯化才能得到较高纯度的多糖。

此外,不同批次、不同产地的锁阳多糖含量及纯度存在一定差异,这可能与锁阳的生长环境、采摘时间等因素有关。

三、锁阳多糖的结构解析1. 实验方法利用现代光谱技术(如红外光谱、核磁共振等)对锁阳多糖进行结构解析。

2. 结果与讨论通过光谱分析,我们发现锁阳多糖主要由葡萄糖、甘露糖等单糖组成,具有一定的支链结构。

此外,锁阳多糖还含有一些乙酰基、硫酸基等修饰基团,这些基团的存使得锁阳多糖具有更高的生物活性。

锁阳多糖的空间构象也可能影响其生物活性,值得进一步研究。

四、锁阳多糖的生物活性研究1. 抗肿瘤活性研究通过体外细胞实验和动物实验,研究锁阳多糖对肿瘤细胞的抑制作用。

结果表明,锁阳多糖对多种肿瘤细胞具有显著的抑制作用,可能与其诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖等机制有关。

2. 免疫调节作用研究探讨锁阳多糖对机体免疫系统的影响。

实验结果表明,锁阳多糖能够显著提高机体的免疫力,增强机体的抗病能力。

《锁阳转录组测序与儿茶素合成途径相关基因的分析》范文

《锁阳转录组测序与儿茶素合成途径相关基因的分析》范文

《锁阳转录组测序与儿茶素合成途径相关基因的分析》篇一一、引言随着现代生物技术的快速发展,转录组测序技术为研究植物生理代谢和遗传机制提供了强大的工具。

锁阳作为一种具有重要药用价值的植物,其代谢途径及其相关基因的研究对于了解其药用价值和开发新药具有重要意义。

本文旨在通过锁阳转录组测序技术,分析儿茶素合成途径相关基因,为进一步研究锁阳的生理功能和代谢机制提供理论基础。

二、材料与方法2.1 材料实验材料为锁阳样品,采集自特定地区并经过严格的鉴定和保存。

同时,我们还准备了相关实验试剂和设备。

2.2 方法2.2.1 转录组测序采用新一代高通量测序技术对锁阳进行转录组测序,获取转录本序列数据。

2.2.2 数据分析对测序数据进行质量控制、序列组装、基因注释和功能分析等。

2.2.3 儿茶素合成途径相关基因分析基于转录组数据,分析儿茶素合成途径相关基因的表达情况,包括基因的转录水平、表达模式等。

三、结果与分析3.1 锁阳转录组测序结果通过转录组测序,我们获得了大量的转录本序列数据。

经过质量控制和序列组装,共获得数万个基因的转录本信息。

3.2 儿茶素合成途径相关基因的鉴定通过生物信息学分析和实验验证,我们鉴定了与儿茶素合成途径相关的基因。

这些基因在锁阳中的表达情况与儿茶素的合成密切相关。

3.3 儿茶素合成途径相关基因的表达分析通过分析这些基因的转录水平和表达模式,我们发现儿茶素合成途径相关基因在锁阳的不同组织和生长发育阶段中存在差异表达。

这些差异表达可能与锁阳的药用价值和生理功能有关。

3.4 儿茶素合成途径的解析结合转录组数据和已有研究,我们解析了锁阳中儿茶素的合成途径。

该途径涉及多个酶的催化反应和相关基因的表达调控。

四、讨论4.1 锁阳的药用价值与儿茶素的关系锁阳作为一种具有重要药用价值的植物,其儿茶素含量和合成途径对于了解其药用价值和开发新药具有重要意义。

通过分析儿茶素合成途径相关基因的表达情况和差异表达,我们可以更好地理解锁阳的药用价值和生理功能。

锁阳多糖的含量测定

锁阳多糖的含量测定

锁阳多糖的含量测定
吕英英;高丰;俞腾飞;田兴龙
【期刊名称】《中国民族医药杂志》
【年(卷),期】2000(0)S1
【总页数】2页(P63-65)
【关键词】锁阳多糖;含量测定;蒙药
【作者】吕英英;高丰;俞腾飞;田兴龙
【作者单位】内蒙古药品检验所;内蒙古医学院;内蒙古鄂托克制药厂
【正文语种】中文
【中图分类】R291.2
【相关文献】
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4.微量分析法测定锁阳中多糖含量 [J], 高建萍;赵凯;陈旭;
5.天然锁阳栽培锁阳中多糖的含量测定 [J], 盛惟;周红城;白伟
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《锁阳转录组测序与儿茶素合成途径相关基因的分析》范文

《锁阳转录组测序与儿茶素合成途径相关基因的分析》范文

《锁阳转录组测序与儿茶素合成途径相关基因的分析》篇一一、引言近年来,随着生物信息学和分子生物学的快速发展,转录组测序技术已经成为研究植物基因表达、代谢途径及其调控机制的重要手段。

锁阳作为一种具有重要药用价值的植物,其代谢产物的合成途径及关键基因的研究对于深入了解其药理作用具有重要意义。

本文旨在通过对锁阳转录组测序数据的分析,探讨儿茶素合成途径相关基因的表达情况,为进一步研究锁阳的药用价值和代谢调控机制提供理论依据。

二、材料与方法1. 材料实验所用的锁阳样品采集自适宜生长的地区,经过鉴定和纯化后用于转录组测序。

2. 方法(1)转录组测序:利用新一代测序技术对锁阳样品进行转录组测序,获得大量的转录本序列数据。

(2)数据预处理:对获得的原始数据进行质量控制,包括数据过滤、碱基识别和序列拼接等步骤,得到高质量的转录本序列。

(3)基因功能注释与分类:利用生物信息学软件和数据库对转录本序列进行功能注释和分类,包括GO注释、KEGG代谢途径分析和COG分类等。

(4)儿茶素合成途径相关基因分析:在转录本序列中筛选出与儿茶素合成途径相关的基因,分析其表达情况和调控机制。

三、结果与分析1. 转录组测序结果概述通过对锁阳样品进行转录组测序,共获得了数百万条高质量的转录本序列。

经过数据预处理和质量控制,得到了可用于后续分析的干净数据。

2. 基因功能注释与分类通过对转录本序列进行功能注释和分类,发现锁阳中含有大量与代谢、转运、信号传导等生物学过程相关的基因。

其中,与儿茶素合成途径相关的基因也得到了鉴定和分类。

3. 儿茶素合成途径相关基因分析在转录本序列中筛选出与儿茶素合成途径相关的基因,包括苯丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂酸-4-羟化酶(C4H)、4-香豆酸辅酶A连接酶(4CL)等关键酶编码基因。

通过分析这些基因的表达情况和调控机制,发现它们在儿茶素合成过程中发挥着重要作用。

其中,某些基因的表达量在特定组织或特定发育阶段表现出明显的差异,这可能与锁阳的药用价值和代谢调控机制有关。

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测 定 。可 作 为 锁 阳 及 其 制 品 中 儿 茶 素 和 根 皮 苷 等 黄 酮 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 化 合 物 提 取 、 分 析 及 质 量 控 制 的 方 法 .
关 键 词 : 高 效 液 相 色谱 ;锁 阳 ; 儿 茶 素 ;根 皮 苷
中图 分 类 号 : O 5 .;R 1 . 6 77 9 44
摘 要 :建立 了高效 液相 色谱一 二极 管阵列检 测 器联 用测 定 中药锁 阳 中黄 酮类化 合 物儿茶素 、 根
皮 苷 的 方 法 .用C 8 相 色谱 柱 梯 度 洗 脱 法 成 功 分 离 了二 者 ; 以 儿 茶 素 和 根 皮 苷 含 量 总 和 为指 1 反 标 。以物 料 比 、提 取 时 间和 提 取 次 数 为 正 交试 验 考 察 因 素 ,优 化 了锁 阳 中 黄 酮 的 提 取 方 法 , 得
2 l 01
文章 编 号 :1 0 . 3 2 ( 0l )0 .0 3 0 0 6 7 0 2 1 10 2 ・ 6
锁 阳 中儿 茶 素 、根 皮苷 的提 取 及 含 量 测 定
李 辰 , 陈 卫 林 。 郭 玫 。 邸 多 隆 , ,
(.五 邑大 学 分 析 测 试 中 心 , 广 东 江 门 5 9 2 ;2 1 2 0 0 .中 国 科 学 院 兰 州化 学 物 理 研 究 所 西 北特 色植 物 资 源 化 学 重 点 实验 室 和 甘 肃 省 天 然 药物 重 点 实 验 室 ,甘 肃 兰 州 7 0 0 ; 3 0 0 3 甘 肃 中 医学 院 。甘 肃 兰 州 7 0 0 . 3 0 0)
2 Ke a o a o y o e sr fNo t we t r a tRe o r e . y L b r t r fCh mityo rh se n Pln s u c s& Ke b r tr o t r lM e c n yLa o a o yf rNau a dii e o n u Pr v n e a z o n tt t fCh mi a y i s Chi e eAc d m yo ce c s La z o fGa s o i c ,L n h u I siu e o e c lPh sc , n s a e fS i n e , n h u
s n a iu w so tmie sn h oa o tn f() Cae hn a d P lrd i se t cin id x og re m a p i z d u igte ttl n e to + - tc i n h oizna xr t n e c a o
第2 5卷 第 l 期
2 I 年 O1
五邑大学学报 (自然科学 版 )
J UR L F O NA O WUYI NI E ST ( trl c n e dt n U V R IY Na a u S i c E io ) e i
V_ .5 No 1 0 2 1 .
2月
Fe . b
文 献 标 志 码 :A
E ta t na d Dee mia ino ( )Cae hn a dP l rd i r m x r ci n t r n t f + - tc i n h o iznfo o o
C n m o i m ¥o ga i u y o ru n rc m
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到 的最佳提取 条件 为 :2 H 、5 ℃条件 下 ,以药材 量75 的 甲醇超 声提 取 3 ,每 次3 i. 8 z 0 k .倍 次 0r n a
该 方 法 提 取 效 果 好 。精 密 度 、准 确 度 和 稳 定 性 较 好 。用 于 l 个 不 同产 地 锁 阳 样 品 的 提 取 和 含 量 1
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