酵母双杂交原理和应用
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蛋白质相互作用研究—— 酵母双杂交系统
专业: XXX
学生：XXX
研究背景
系统分类
系统原理
操作过程
研究背景
蛋白质---蛋白质的相互作用是细胞生命活动的基础和特 征。例如细胞与细胞、细胞与基质的连接；细胞信号转导； 代谢网络；以及转录、翻译调节等.
研究背景
通过酵母系统进行基因水平的检测，是采用体内实验来研 究蛋白间的相互作用。 所有操作均是在核酸水平上进行，无需纯化大量的蛋白， 并可精确地测定蛋白质间弱相互作用。
DBD-Bait 和 prey-AD 这两个融合蛋白是如何构建的？
又是如何进入同一个酵母细胞的呢？
因此完整的酵母双杂交由三个部分组成：bait 载体，prey 载体，和带有报告基因的酵母菌株。 根据目前通用的系统中DBD来源的不同，主要分为GAL4 系统和LexA系统。
GAL4系统来源于酵母；LexA系统的BD来源于原核生物， 在真核生物内缺少同源性，因此可以减少假阳性的出现。
应用
定义两个已知蛋白质间的相互作用； 筛选新的蛋白质间相互作用（即cDNA文库筛选）； 绘制蛋白质相互作用图谱； 寻找具有药物治疗作用的小分子多肽。
膜蛋白、膜相关蛋白和可溶性 蛋白间相互作用的研究
原理： N-terminus Lysine 63
C-terminus Lysine 48 泛素（ubiquitFra Baidu bibliotekn）
分离的泛素系统
分离泛素（split-ubiquitin）系统
应用
确定两个膜蛋白的相互作用； 从cDNA文库中筛选相互作用的蛋白质。
THANK YOU
酵母双杂交系统分类
核内蛋白质相互作用的研究
膜蛋白、膜相关蛋白和可溶性蛋白间相互 作用的研究
核内蛋白质间相互作用的研究
原理：
转录激活因子通常有两个可分割的、功能相互独立的结构 域，即DNA特异性结合结构域（DNA-binding domain， DBD） 与转录激活结构域（transcriptional activation domain, AD）。
专业: XXX
学生：XXX
研究背景
系统分类
系统原理
操作过程
研究背景
蛋白质---蛋白质的相互作用是细胞生命活动的基础和特 征。例如细胞与细胞、细胞与基质的连接；细胞信号转导； 代谢网络；以及转录、翻译调节等.
研究背景
通过酵母系统进行基因水平的检测，是采用体内实验来研 究蛋白间的相互作用。 所有操作均是在核酸水平上进行，无需纯化大量的蛋白， 并可精确地测定蛋白质间弱相互作用。
DBD-Bait 和 prey-AD 这两个融合蛋白是如何构建的？
又是如何进入同一个酵母细胞的呢？
因此完整的酵母双杂交由三个部分组成：bait 载体，prey 载体，和带有报告基因的酵母菌株。 根据目前通用的系统中DBD来源的不同，主要分为GAL4 系统和LexA系统。
GAL4系统来源于酵母；LexA系统的BD来源于原核生物， 在真核生物内缺少同源性，因此可以减少假阳性的出现。
应用
定义两个已知蛋白质间的相互作用； 筛选新的蛋白质间相互作用（即cDNA文库筛选）； 绘制蛋白质相互作用图谱； 寻找具有药物治疗作用的小分子多肽。
膜蛋白、膜相关蛋白和可溶性 蛋白间相互作用的研究
原理： N-terminus Lysine 63
C-terminus Lysine 48 泛素（ubiquitFra Baidu bibliotekn）
分离的泛素系统
分离泛素（split-ubiquitin）系统
应用
确定两个膜蛋白的相互作用； 从cDNA文库中筛选相互作用的蛋白质。
THANK YOU
酵母双杂交系统分类
核内蛋白质相互作用的研究
膜蛋白、膜相关蛋白和可溶性蛋白间相互 作用的研究
核内蛋白质间相互作用的研究
原理：
转录激活因子通常有两个可分割的、功能相互独立的结构 域，即DNA特异性结合结构域（DNA-binding domain， DBD） 与转录激活结构域（transcriptional activation domain, AD）。