绿叶中色素的提取和分离(纸层析法)
叶绿素的提取和分离
色素提取 色素分离
试剂 无水乙醇
层析液
原理
绿叶中的色素溶于有机溶剂 无水乙醇,而不溶于水。
各种色素在层析液中的溶解 度不同,溶解度高的随层析 液在滤纸条上扩散得快,反 之则慢。
层析液：20份石油醚,2份丙酮和1份苯混合而成,93 号汽油也可做层析液用
二、实验步骤：
三、实验结果：
四、色素种类及吸收光谱：
2、绿叶中色素提取分离异常现象分析:
1 收集到的滤液绿色过浅的原因分析: ①未加石英砂 二氧化硅 ,研磨不充分. ②使用放置数天的菠菜叶,滤液色素 叶绿素太少 . ③一次加入大量的无水乙醇,提取浓度太低 正确做 法:分次加入少量无水乙醇 。 ④未加碳酸钙或者加入过少,叶绿素被破坏。 2 滤纸条色素带重叠 ①滤液细线不直 ②滤液细线过粗 3 滤纸条无色素带： ①忘记画滤液细线 ②滤液细线接触到层析液,且时间较长,色素全部溶 解到层析液中。
经典高考题 图中①代表新鲜菠菜叶的光合色素纸层析
结果,则图②所示结果最有可能来自 A．水培的洋葱叶
。
D
B．生长的柳树幼叶
C．培养的衣藻
D．秋冬的银杏落叶
解析 新鲜菠菜叶中的光合色素种类齐全、含量丰富、完整,据 图①可知,滤纸上的四条色素带完整,从上到下依次为胡萝卜素、 叶黄素、叶绿素a、叶绿素b。图②滤纸上的色素带不完整,只有 胡萝卜素、叶黄素。秋冬的银杏落叶呈黄色 或橙黄色 ,这是由于 低温破坏了叶绿素所致,因此叶片中几乎不含叶绿素。其他选项 中的材料中都含有四种色素。 答案 D
下 ,与正常叶片相比,实验结果是 A．光吸收差异显著,色素带缺第2条
。
B
B．光吸收差异不显著,色素带缺第2条
C．光吸收差异显著,色素带缺第3条
实验：绿叶中色素的提取和分离
二、方法步骤
1、 提取绿叶中的色素
1）称取5g绿色叶片，剪碎，放入研钵中。 称取5g绿色叶片，剪碎，放入研钵中。 5g绿色叶片 2）向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙，再加入 向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙， 10mL无水乙醇 进行迅速、充分的研磨。（ 无水乙醇， 10mL无水乙醇，进行迅速、充分的研磨。（ 二氧化硅有助于研磨充分， 二氧化硅有助于研磨充分，碳酸钙可防止研磨 中色素被破坏。） 中色素被破坏。） 3）将研磨液迅速倒入小玻璃漏斗中（漏斗基部放 将研磨液迅速倒入小玻璃漏斗中（ 一块单层尼龙布）进行过滤。 一块单层尼龙布）进行过滤。将滤液收集到一 个小试管中，及时用棉塞将试管口塞紧。 个小试管中，及时用棉塞将试管口塞紧。
二、材料用具
新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片) 新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片)。 干燥的定性滤纸，试管，棉塞，试管架， 干燥的定性滤纸，试管，棉塞，试管架， 研钵，玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管， 研钵，玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪 药勺，量筒(10mL) 天平。 (10mL)， 刀，药勺，量筒(10mL)，天平。 无水乙醇，层析液，二氧化硅，碳酸钙。 无水乙醇，层析液，二氧化硅，碳酸钙。
实验设计： 实验设计：
0.3g/ml蔗糖 0.3g/ml蔗糖
紫色的洋葱表皮
吸水纸吸收
吸水纸吸收
清水
质壁分离及复原现象
刚开始发生质壁分离
已明显发生质壁分离
实验十一 叶绿体中色素的提取和分离 一、实验原理
绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙 绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙 色素能够溶解在有机溶剂 所以，可以用无水乙醇 无水乙醇提取绿叶中的色 醇中，所以，可以用无水乙醇提取绿叶中的色 素。 层析液（ 60℃～90℃下分馏出来20份石油 下分馏出来20 层析液（在60℃～90℃下分馏出来20份石油 2份丙酮 1份苯 份苯） 醚 + 2份丙酮 + 1份苯）是一种脂溶性很强的 有机溶剂。绿叶中的色素在层析液中的溶解度 有机溶剂。绿叶中的色素在层析液中的溶解度 不同(溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快； 的随层析液在滤纸上扩散得快 不同(溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快； 溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。 的随层析液在滤纸上扩散得慢 溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。)， 所以，可以用纸层析法分离出绿叶中的色素。 纸层析法分离出绿叶中的色素 所以，可以用纸层析法分离出绿叶中的色素。
绿叶中色素的提取和分离(纸层析法)
2109年5月18日
感谢你的观看
3
实验步骤：
3.画滤液细线
2109年5月18日
滤液细线的要求：
细、直、齐（使色素处于同 一起跑线）；
重复2—3次（防止色素太少 分离现象不明显）。
感谢你的观看
4
实验步骤：
4.分离绿叶中的色素
培养皿
注意:
滤液细线
层析液
滤液细线不能触到层析液（防止色素溶解在层析液中）
2.滤纸条上的滤液细线，为什么不能触及层析液？
2109年5月18日
感谢你的观看
1
实验步骤：
1.提取绿叶中的色素
SiO2：使碾磨充分 CaCO3：防止色素被破坏 无水乙醇：提取色素
2109年5月18日
感谢你的观看
2
实验步骤：
2.制备滤纸条
铅笔线 画铅笔细线
减去两角的目的：
防止层析液从边缘扩散速 度太快。
• 滤液细线要细、直、齐，防止色素带重叠；
• 滤液细线勿浸入层析液，防止色素溶解在层析液中；
• 层析时，烧杯要加盖，避免苯等有毒物质挥发出来污染空气；
• 实验结束，要用肥皂洗手，因为实验中可能接触了苯等有毒物质；
• 210滤9年纸5月条18要日避光保存，防止褪色感谢你的观看
9
小结：
色素 色素 含量 溶解度 扩散速 吸收光
颜色
度
能
胡萝卜素 橙黄色 最少 叶黄素 黄色 较少
最大 较大
最快 蓝紫光 较快
叶绿素ａ 蓝绿色 最多 叶绿素ｂ 黄绿色 较多
较小 最小
较慢 蓝紫光 最慢 红光
与光合作用有关的色素存在于哪呢？
2109年5月18日
感谢你的观看
《绿叶中色素的提取和分离实验》 讲义
《绿叶中色素的提取和分离实验》讲义一、实验目的1、掌握绿叶中色素的提取方法。
2、学会用纸层析法分离绿叶中的色素。
3、探究绿叶中色素的种类和含量。
二、实验原理1、提取原理绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中，所以可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。
2、分离原理纸层析法是利用不同色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的色素随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的色素随层析液在滤纸上扩散得慢，从而将不同色素分离开来。
三、实验材料和用具1、实验材料新鲜的绿叶（如菠菜叶）。
2、实验用具研钵、漏斗、尼龙布、毛细吸管、剪刀、载玻片、盖玻片、定性滤纸、铅笔、无水乙醇、层析液（由石油醚、丙酮和苯按一定比例混合而成）、二氧化硅、碳酸钙。
四、实验步骤1、提取绿叶中的色素（1）称取 5g 新鲜的绿叶，剪碎，放入研钵中。
（2）向研钵中加入少许二氧化硅和碳酸钙，再加入 10mL 无水乙醇，迅速、充分地研磨。
（3）将研磨液迅速倒入漏斗中进行过滤，用棉塞将收集到的滤液的瓶口塞严。
2、制备滤纸条（1）将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长与直径的滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角，并在距这一端 1cm 处用铅笔画一条细的横线。
3、画滤液细线（1）用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出一条细而直的滤液细线。
待滤液干后，再重复画一到两次。
4、分离绿叶中的色素（1）将适量的层析液倒入试管中，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）轻轻插入层析液中，随后用棉塞塞紧试管口。
5、观察与记录（1）注意观察滤纸条上出现了几条色素带，以及每条色素带的颜色和宽窄。
五、注意事项1、选材应选择新鲜、浓绿的叶片，以保证含有较多的色素。
2、研磨研磨要迅速、充分，防止无水乙醇挥发。
同时加入二氧化硅有助于研磨得充分，加入碳酸钙可防止研磨中色素被破坏。
3、过滤使用单层尼龙布过滤，不用滤纸，因为滤纸会吸附色素。
4、画滤液细线滤液细线要细、直、齐，且干燥后重复画一到两次，使色素多且清晰。
叶绿体中色素的提取与分离
A. ①②③④ C. ④②③①
B. ②④①③ D. ③②①④
捕获光能
色素
色素的种类与颜色：
色素 种类
含量
叶绿 约占 素 3/4
名称 叶绿素a 叶绿素b
颜色
吸收光
蓝绿色 主要吸收红 黄绿色 光和蓝紫光
类胡 萝卜 素
约占 黄色
主要吸收蓝 紫光
画滤液细线 毛细吸管沿铅笔线画一条直的 滤液细线 .
色素分离
干燥后， 重复一两 次 将滤纸条轻轻插入 层析液 中
滤纸条上呈 现四条颜色、 宽度不同的 色素带
用培养皿盖住烧杯
胡萝卜素： 橙黄 色 叶黄素： 黄 色 叶绿素a： 蓝绿 色 叶绿素b： 黄绿 色
1.在提取绿叶中的色素时，研磨绿叶碎片需要
加入碳酸钙，目的是 （ B ）
捕获光能
色素
色素的吸收光谱
延伸拓展
色素的分布： 叶绿体的类囊体薄膜上
色素的作用： 吸收、传递、转化光能
不同颜色的大棚对光和效率的影响： ① 无色透明大棚光和效率最高； ② 绿色塑料大棚光和效率最低。 ③ 在农业生产中，有些温室中悬挂红色或蓝 色光的灯，可有效提高蔬菜产量。
甲＞乙＞丙＞丁
叶绿体中色素
实验目的：
提取和分离
1) 进行绿叶中色素的提取和分离； 2) 探究绿叶中含有几种色素。
材料用具：
新鲜的绿叶、干燥的定性滤纸、无 水乙醇、层析液、二氧化硅、碳酸 钙、毛细吸管、研钵、剪刀、量筒 等。
一、提取绿叶中的色素
1.取材： 5g绿叶+剪碎+研钵 2.研磨： 二氧化硅+碳酸钙+10ml无水乙醇 3.过滤： 玻璃漏斗+单层尼龙布
绿叶中色素的提取和分离
实验原理：
1.提取：绿叶中的色素都能溶解于有机溶剂无水乙醇 中，所以可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。
2.分离：纸层析法
绿叶中的色素不止一种，它们都能溶解在层析液中。 然而，它们在层析液中的溶解度不同。溶解度高的随 层析液在滤纸上扩散得快；反之则慢。这样滤液中不 同的色素就随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。
光能→ATP中活跃的化学能 ATP中活跃的化学能→(CH2O)中稳 定的化学能
①光反应为暗反应提供还原剂[H]、能量ATP；暗反应为光反应提供
关系 ADP和Pi；
小结：
叶绿体是进行光合作用的场所。它内部的 巨大膜表面上，不仅分布着许多吸收光能 的色素分子，还有许多进行光合作用所必 需的酶。
与生活的联系
根据不同色素对不同波长的光的吸收不同 的特点，想一想温室或大棚种植蔬菜时， 应选择什么颜色的玻璃、塑料薄膜或补充 光源？
无色最好，其次是红光或蓝紫光， 最次是绿光
1．研磨绿叶时要加入碳酸钙，其目的是
(C)
A．使各种色素溶解在丙酮中 B．使研磨充分
C．防止色素分子被破坏 D．加速研磨
2．对“叶绿体中色素的提取和分离”实验中，下列描
－
＋
－
注：“＋”表示加；“－”表示不加。试回答： （1）A处理得到的溶液颜色是_黄_绿__色，原因是_部__分__叶__绿__素__受__到__破_。坏 （2）B处理得到的溶液颜色是___ __，原因是_叶__绿__素__不__溶__于__水__。
（3）C处理得到的溶液颜色_深__绿_ 色__，原因是大__量__叶__绿__素__溶__于__乙__醇。中
铅笔线
画铅笔细线
剪角的目的：防止两侧色素扩散快，色素带不整齐
绿叶色素的分离实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习绿叶中色素的提取和分离方法。
2. 掌握层析法分离不同色素的原理和操作。
3. 了解不同色素在叶绿体中的分布和特点。
二、实验原理绿叶中的色素主要包括叶绿素、类胡萝卜素和叶黄素等。
这些色素在有机溶剂中具有良好的溶解度，因此可以通过有机溶剂提取绿叶中的色素。
在层析过程中，不同色素在层析液中的溶解度不同，从而在滤纸上形成不同的色素带。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜的绿色叶片、无水乙醇、层析液（20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合）、二氧化硅、碳酸钙、定性滤纸、研钵、烧杯、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒等。
2. 实验仪器：分析天平、酒精灯、烘箱、显微镜、电子天平等。
四、实验步骤1. 提取绿叶中的色素：（1）取新鲜的绿色叶片，用剪刀剪成小块，放入研钵中。
（2）加入适量的二氧化硅和碳酸钙，充分研磨。
（3）向研钵中加入10ml无水乙醇，继续研磨，使色素充分溶解。
（4）将研磨好的混合物过滤，收集滤液。
2. 制备滤纸条：（1）取一张定性滤纸，剪去两角，使滤纸条呈三角形。
（2）将滤纸条放入烧杯中，加入少量层析液，使滤纸条充分湿润。
（3）将滤纸条取出，在通风处吹干。
3. 画滤液细线：（1）用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀画一条细而直的滤液线。
（2）待滤液线干燥后，重复画2-3次，以增加色素量。
4. 色素分离：（1）将干燥后的滤纸条画线一端朝下放入有少许层析液的层析瓶中。
（2）盖上培养皿，使层析瓶密封。
（3）待层析液上升到滤纸条上端后，取下培养皿，观察色素分离情况。
5. 观察与记录实验结果：（1）观察滤纸条上出现的色素带数目、颜色、位置和宽窄。
（2）记录实验结果，分析不同色素的分布和特点。
五、实验结果与分析1. 滤纸条上出现的色素带从上至下依次为：胡萝卜素（橙黄色）、叶黄素（黄色）、叶绿素a（蓝绿色）、叶绿素b（黄绿色）。
2. 胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光，叶绿素a和叶绿素b主要吸收蓝紫光和红光。
绿叶中色素的提取和分离过程
称量：称取 5 g 新鲜绿叶 提 取 色 素 剪碎：去掉叶柄和粗的叶脉 研磨：加入少许SiO2、CaCO3和 10 mL 无水乙醇 过滤：漏斗基部放单层尼龙布 收集滤液：用棉塞将试管口塞严
制备 滤纸 条
①将干燥的滤纸剪成长与宽略小于试管长与宽 的滤纸条，并在一端剪去两角； ②在距剪去两角的一端 1 cm 处用铅笔画一条细 的横线 ①用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔画线处均匀 画一条直的滤液细线； ②干燥后，再画一两次
画滤 液细 线
①倒入试管 3 mL 层析液
色素 分离
②将滤纸条有滤液细线的一端插
实验七：叶绿体色素的提取和纸层析
实验七：叶绿体色素的提取和纸层析于路遥 121140072一．实验目的：了解叶绿素的提取和纸层析的方法二．实验原理：【1】叶绿体色素的提取、分离实验原理：1.植物叶绿体色素是吸收太阳光能,进行光合作用的重要物质.它一般由叶绿素a,叶绿素b,胡萝卜素和叶黄素组成，它们与类囊体膜上的蛋白质相结合，而成为色素蛋白复合体。
2.绿色素（包括叶绿素a和叶绿素b）和黄色素（包括胡萝卜素和叶黄素）这两类色素都很难溶于水，而易溶于有机溶剂,故可用乙醇,丙酮等有机溶剂提取。
【2】叶绿体色素的提取原理：1.由于光合色素位于叶绿体中的类囊体上，要把它提取出来必须破坏叶表皮、细胞壁和细胞膜、叶绿体的双层膜，所以要剪碎后加二氧化硅研磨，以便使色素充分被提取。
又因为叶绿体的色素不溶于水，但可溶于有机溶剂中，所以还要加入乙醇或其它有机溶剂使色素溶解，来提取各种色素。
2.另外还要加碳酸钙以保护叶绿体中的色素，原因是加碳酸钙以调节液体的pH，防止叶绿素被破坏。
叶绿体中的色素溶解于有机溶剂如乙醇或丙酮(相似相溶)，形成色素液。
三．实验材料：1.菠菜或青菜叶片.2.仪器设备：研钵，漏斗，冻存管，剪刀，滴管, 滤纸，脱脂棉（或尼龙布或纱布），毛细管，吸水纸。
3.药品试剂：①无水乙醇或丙酮;②石英砂;③碳酸钙粉;④层析液: 石油醚10ml+丙酮2ml+苯1ml四．方法与步骤：1.叶绿体色素的提取(1)取植物新鲜叶片2 g,洗净,擦干,去掉粗的叶脉，剪碎,放入研钵中；(2)研钵中加入少量石英砂及碳酸钙粉, 研磨至近乎糊状，加入10-15mL 无水乙醇,再研磨片刻，提取3-5 min，然后用漏斗（内放一层薄的脱脂棉）过滤,即得色素提取液。
2.叶绿体色素的分离(1)制备滤纸条：剪去一端两角，在距离剪角一端1～ 1.5 cm处用铅笔画线（或简单做个记号）。
(2) 画滤液细线：用毛细吸管吸收少量滤液，沿铅笔线（记号）处均匀地画一条直的滤液细线。
干燥后，连续重复3～5次，至滤液细线呈绿色。
绿叶中色素提取和分离ppt课件
为什么有些植物叶片不是绿色的? 为什么有些植物的叶片在不同时期颜色不同呢？ 植物叶片中到底含有哪些色素？
2
汤阴一中：司庆文
3
一、实验目的
1.掌握叶绿体色素的提取方法； 2.掌握纸层析法分离叶绿体色素的原
理和步骤；
4
二、实验原理
叶绿素
叶绿素a（黄绿色） 叶绿素b（蓝绿色）
类胡萝卜素
胡萝卜素（橙黄色） 叶黄素 （黄色）
6
四、实验步骤
（一）提取色素：
原理： 色素能溶解在酒精等有机溶剂中，
所以可用无水乙醇提取色素。
材料:5g鲜叶
1.研磨
SiO2——使研磨充分
药品 CaCO3 ——防止色素破坏
无水乙醇——溶解色素
7
2.过滤：获取绿色滤液
8
（二）分离色素
原理： 色素随层析液在滤纸上扩散速度不同，从而
分离色素。
★扩散速度与色素在层析中的溶解度的关系：
4．如图做色素层析分离的正确装置是（ D ）
15
七、课后作业
1、在作业本上画出滤纸条的色素分布 2、查阅相关资料，了解各种色素的功能
16
胡萝卜素（橙黄色）
类胡萝卜素
1 /4
叶黄素（黄色）
叶绿素
3 /4
叶绿素a (蓝绿色) 叶绿素b（黄绿色）
13
六、课堂训练
1．通过纸层析法分离叶绿体色素，结果在滤纸条上
出现4条色素带，从上而下依次为：（ A ）
A．胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b B．胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b、叶黄素 C．叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素、叶黄素 D．叶黄素、叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素 2．假如在圆形滤纸的中央点上色素滤液，对叶绿体 的色素进行纸层析法分离，会得到近似同心的四个
叶绿体色素的提取和分离(纸层析法)
叶绿体色素的提取和分离(纸层析法)叶绿体是植物细胞中重要的细胞质器之一，它们负责植物的光合作用，能够将光能转化为化学能，生产出有机物质和氧气。
叶绿体中含有多种色素，包括叶绿素、类胡萝卜素和花青素等，它们的色彩不同，吸收光的波长也不同，能够促进光合作用的进行。
叶绿体色素的提取和分离是一项重要的实验技术，科研工作者可以通过这种方法研究叶绿体的结构和功能，探究光合作用的机制，还可以进一步研究色素的生物活性和作用机理。
下面介绍纸层析法提取叶绿体色素的方法。
实验材料：1.醋酸丙酮乙酯2.正戊烷3.氯仿4.纯化水5.三氯乙酸6.薄层色谱板（取硅胶G板）7.深磁杯8.玻璃棒（或玻璃片)9.分离漏斗实验过程：1.取新鲜叶片，用纯化水冲洗干净后，将叶片用三氯乙酸溶液浸泡5-10分钟，轻轻搅拌，直至叶绿体脱离。
2.将叶绿体用分离漏斗过滤干净，加入少量的纯化水，制备得到含叶绿体的溶液。
3.将叶绿体溶液与醋酸丙酮乙酯混合，并加入一定量的正戊烷作为流动相，混合均匀后，取一片薄层色谱板，仔细涂抹硅胶G，然后放入深磁杯中。
4.将混合物用玻璃棒（或玻璃片)沿着涂有硅胶的色谱板上的一个角从上往下涂抹成一条线，使其长度大约为2.5cm左右，以保证在移液的过程中色素的有效分离。
5.将涂抹好的薄层色谱板置于流动相中，使其上升，当流动相向上液面到达约10mm处时，将其取出晾干，然后在烘箱中烘干5-10分钟，直至洁白无色，取出备用。
6.利用紫外线灯照射薄层色谱板，色素就会显示出来，然后用扫描器或者其它检测方法，对其中的不同颜色区域进行分离。
7.进行分离后，将薄层色谱板中各区域的色素用氯仿溶液洗净，然后加入适量的正戊烷，将其中的花青素、叶绿素和类胡萝卜素分别收集起来，称重、干燥，制备得到不同色素的提取物。
总结：。
绿叶中色素的提取与分离实验操作过程(图文)
绿叶中色素的提取与分离实验一、 实验原理1、提取的原理：利用色素溶于有机溶剂无水乙醇而不溶于水的性质。
2、分离的原理：利用各种色素在层析液中的溶解度不同，随着层析液在滤纸上扩散的速度不同。
（纸层析法）二、目的要求1、进行绿叶中色素的提取和分离；2、探究绿叶中含有几种色素三、材料用具1、材料：新鲜的绿叶（如菠菜、韭菜的绿叶）。
2、用具：剪刀、药匙、研钵、量筒、漏斗、试管、棉塞、尼龙纱布、盖玻片、试管架、干燥的定性滤纸、铅笔、直尺、烧杯、穿针的细线、滴管。
3、试剂：无水乙醇、层析液、二氧化硅（石英沙）和碳酸钙。
四、方法步骤1、提取绿叶中的色素（1）取深绿色的植物叶片，洗净，抹干水分，并称取5g ，剪成小块置于研钵中。
（2）在研钵中加入少许二氧化硅（SiO 2）、碳酸钙（CaCO 3），再加入6ml 无水乙醇。
（3）迅速、充分地研磨成糊状。
（4）在漏斗基部放一小块单层尼龙纱布，将研磨液迅速倒入玻璃漏斗中进行过滤。
将滤液收集到试管中，及时用棉塞将试管口塞严。
剪碎绿叶 加二氧化硅、碳酸钙， （迅速）研磨成糊状再加入10ml 无水乙醇过滤 收集滤液，棉塞封口2、制备滤纸条（如下图）3、画滤液细线（如下图）滤纸条：长6cm ，宽1cm ， 用盖玻片一端蘸取滤液，沿铅笔线画线， 距一端1cm 处用铅笔和直尺 等滤液细线风干后，再画下一道细线，重复 画一条细的横线。
2—3次。
画线要求：细、直、齐。
4、分离色素将3ml 层析液倒入小烧杯中，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）轻轻插入层析液中，随后用培养皿盖盖住小烧杯。
注意：不能让滤液细线接触到层析液。
5、观察与记录观察烧杯中滤纸条上出现了几条色素带，以及每条色素带的颜色和宽度。
将观察结果记录下来，并将层析结果的分离结果贴在上面。
“培养皿法” 五、讨论橙黄色 黄色蓝绿色 黄绿色1、滤纸条上有几条不同颜色的色带？其排序怎样？宽窄如何？这说明了什么？2、滤纸条上的绿叶细线为什么不能触及层析液？3、将有色素带的滤纸条夹在书里，几天后会出现什么现象？这说明了什么？4、到了秋天叶色变黄、变红的原因是什么？注：无水乙醇-------------------溶解、提取色素）--------研磨充分二氧化硅（SiO2碳酸钙（CaCO）--------防止色素破坏3层析液----------------------分离色素。
光合作用色素的提取和分离
5.观察记录
●
▲ 实验结果
胡萝卜素（扩散速度最快, 色素带最窄）
叶黄素
叶绿素a（色素带最宽）
扩散速度叶快绿慢素b与（（扩散溶速解度度最高慢低） ）有关 色素带的宽窄与（ 色素含量多少）有关
☆ 各试剂作用 SiO2 —— 研磨充分
▲ 过量易使滤液颜色变浅
CaCO3 —— 中和有机酸, 防止色素被破坏
▲ 不加入则会发生去镁反应, 叶绿素分子成为 褐色的去镁叶绿素, 滤液呈黄绿色或褐色
无水C2H5OH （CCl4、丙酮、石油醚） —— 溶解色素
▲ 不加入则色素不能溶解, 滤液几乎无色
☆ 研磨的要求 —— 迅速、充分（成功关键2）
细、直、均匀
—— 防止色素带重叠, 使扩散起点一致 重复2～3次（干后再画） —— 增加色素含量, 使效果更明显
4.分离色素
3mL层析液 → 小烧杯 → 滤 纸条
插入层析液中（滤液细线一 端☆朝操作要求 下滤）液→细用线培不养能皿接盖触住层析烧液杯（口成功关键5）
（色素会溶于层析液中）
盖住烧杯口 （防止挥发）
有机溶剂易挥发 充分破坏叶绿体，使色素完全释放
☆ 收集滤液的要求 —— 及时塞紧试管口, 防止挥发 （成功关键3）
2.制备滤纸条 ☆ 制备要求
将一端剪去两角 —— 使色素扩散均匀, 色素带整齐 在距此端1cm处画一铅笔横线 —— 标记作用 不要弄脏弄湿滤纸条
3.画滤液细线 ☆ 画线要求（成功关键4）
绿叶中色素的提取和分离
▲ 实验原理 提取 —— 色素不溶于水，溶于有机溶剂 分离 —— 色素在层析液中的溶解度不同
▲ 实验材料 —— 新鲜、颜色深绿的叶片（成功关、提取色素 2、制备滤纸条 3、画滤液细线 4、分离色素 5.观察记录
光合作用相关实验报告
实验二绿叶中色素的提取和分离及光合作用强度影响因素探究实验实验一：绿叶中色素的提取和分离一.实验原理：绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中，所以，可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。
绿叶中色素不止一种，它们在层析液中的溶解度不同：溶解度高的随层析液在滤纸上扩散的快；反之，则慢。
这样，最终不同的光合色素会在扩散过程中分离开来。
二 .实验目的：1 .进行绿叶中色素的提取和分离实验2 .探究绿叶中含有几种色素三 .实验材料、试剂及器材：1.实验材料：菠菜、暴马丁香、生菜、稠李树叶2.实验试剂：无水乙醇、层析液（由20份在60-90 C下分储出来的石油秘、2份丙酮和1份菜混合而成）、93号汽油、二氧化硅和碳酸钙。
3.实验器材：干燥的定性滤纸、试管、棉塞、烧杯、试管架、研钵、玻璃漏斗、盖玻片、毛细吸管、剪刀、药勺、量筒、天平、酒精灯、石棉网、三脚架四.实验步骤及实验现象：（一）色素的提取和分离实验：（研磨法）1 .提取绿叶中的色素分别称取、剪碎菠菜、暴马丁香、生菜5g叶片，放入研钵中。
加入少许二氧化硅、碳酸钙、10mL 酒精。
快速、充分研磨。
根据叶绿体中的色素在乙傅中溶解的特性，用无水乙磐可将色素从叶片中提取出来，过滤后收集滤液（将研磨液迅速倒入三层滤纸的一侧进行过滤），将滤液收集到小试管中，及时用棉塞将试管塞紧备用。
2 .制备滤纸条将干燥过的定性谑纸剪成6 cmXl cm的条，一端剪去两角，距该端1cm处用铅笔画一条极细的横线。
传统做法：用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀画一条细而直的滤液线, 待干燥后再重复画2〜3次。
改进做法：用盖玻片蘸取少量滤液直接压在铅笔线上，重复2 次。
3 .色素分离------ 纸层析法符干燥后的三个植物的滤纸条画线一端朝下放入有少许（2〜3mL）层析液的烧杯中。
4 .观察层析后，取出谑纸条，烘干后观察色素分离情况。
5 .整理、洗手。
（二）将层析液换为93号汽油重复上述实验（经上述实验发现盖玻片蘸取滤液效果明显优于毛细吸管，所以后续实验都采用盖玻片）（三）水浴加热法提取绿叶中的色素L提取绿叶中的色素将研磨法提取滤液的过程改进为剪碎菠菜、生菜、及暴马丁香叶片后，分别用天平称取5克，加入试管，同时加入10ml无水乙醇，在70—下水浴加热5min,注意用棉花或者卫生纸封好试管口。
绿叶中色素的提取和分离实验(含动画)
排列在同心的四个色素环最里圈的色素为橙黄色
3、恩格尔曼用水绵进行的光合作用实验证明的是（ B ） A.绿色叶片在光合作用中产生了淀粉 B.氧气是由叶绿体所释放 C.植物可以净化空气 D.光合作用释放的氧全部来自水
4、下列关于叶绿体中色素的提取和分离实验原理的叙述中，正 确的是（ C ）
(2)将临时装片放在黑暗并且没有空气的环境中，排 除了__光__线和__氧__气的影响，从而确保实验正常进行。
(3)选用了_极__细_光__束__照射，并且选用___好__氧__细__菌检测， 从而能够准确判断出水绵细胞中释放__氧___的部位。
(4)进行黑暗(局部光照)和曝光对比实验，从而明 确实验结果完全是____光_引照起的。
③
④.
① 外膜 ② 内膜
③ 基粒
④ 类囊体膜
⑤ 基质
捕获光能的色素分布在类__囊__体_的__薄_膜__上___
恩格尔曼实验
结论：氧是由_叶_绿__体__释放出来的， 叶绿体是光__合__作_用__的 场所。光合作用需要___光__照___。
思考：恩格尔曼实验在设计上有什么巧妙之处?
(1)选材方面，选用___水_绵_为实验材料。水绵不仅具有 细长的带状叶绿体，而且叶绿体螺旋状地分布在细 胞中，便于观察、分析研究。
2.某人做叶绿体中色素分离实验时，使用的 是圆形滤纸，装置如下图。实验结束时在圆形 滤纸上形成四个同心色素圆环，则最内圈所呈 颜色为（ D）
实战演练
1、将提取的绿叶中色素滤液装入试管中，一束白光
穿过该滤液后经三棱镜对光进行色散，哪条光谱的颜
色明显减弱？（C ）
A. 绿光
B. 黄光
实验：绿叶中色素的提取和分离
实验：绿叶中色素的提取和分离实验：绿叶中色素的提取和分离实验原理：绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中，所以，可以用无水乙醇提取绿叶中的色素；石油醚是一种脂溶性很强的有机溶剂。
绿叶中的色素在脂溶性层析液中的学期工作总结溶解度不同，扩散速度也不同，因而可用纸层析法分离。
实验过程及结果：（ 1 ）提取提取色素首先了解色素存在的部位和性质。
本实验色素存在于绿色植物叶肉细胞的叶绿体中，且具有脂溶性。
因此。
①选择的材料应是叶肉细胞（幼嫩、色浓绿的叶片）；②要充分研磨细胞（加二氧化硅）及细胞器——叶绿体，使叶绿体内色素释放出来；③要用亲脂性的有机溶剂无水乙醇（或丙酮）溶解色素。
实验成功的关键之处！①剪：叶片要新鲜、颜色要深绿，越细越好，尽量去除叶脉等部分。
②加药品：二氧化硅、碳酸钙和无水乙醇。
前两种是粉末状药品，各加少许，后者是有机溶剂，研磨时加约5ml。
二氧化硅的作用是使研磨更加充分、迅速；碳酸钙的作用是调节液体的pH，防止叶绿素被破坏保护叶绿素不分解；无水乙醇用来溶解提取叶绿体中的色素。
③磨：研磨要领是不能一下一下的砸，而是要用力的压。
研磨要迅速、充分。
这是因为一是因为无水乙醇容易挥发；二是为了使叶绿体完全破裂，从而能提取较多的色素；三是叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而破坏。
④过滤：将研磨液迅速倒入玻璃漏斗（漏斗基部放一块单层尼龙布）中进行过滤。
将滤液收集到试管中，及时用棉塞将试管口塞严。
研磨液迅速倒入以及用棉塞是因为研磨加的丙酮很容易挥发。
单层尼龙布是为了过滤充分，因为叶片的研磨有残渣。
纸上的滤液细线不能浸没到层析液中。
（ 2 ）分离①制备滤纸条：将预备在试验桌上的滤纸条一端剪去两个角使之呈梯形。
呈梯形，根据小孔(边缘)扩散原理，物质分子沿边缘扩散速度要大于里边扩散的速度，因此要将滤纸条的一端剪去两角，主要是为了延长边缘长度，这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀，便于观察实验结果。
②画滤液细线：细，匀，直，浓。
绿叶中色素的提取和分离
主要吸收蓝 叶绿体的类 叶绿素b 紫光和红光 囊体薄膜上 类胡萝卜素 胡萝卜素 主要吸收蓝 (约占1/4) 叶黄素 紫光 吸收光谱
叶绿素a
(二)叶绿体的结构与功能
1．形态：一般呈扁平的椭球形或球形 外膜 2．结构： 内膜 基粒 由囊状结构的类囊体堆叠而成 需光反应―发生在类囊体薄膜上 基质 3．功能： 叶绿体是进行光合作用的场所，内部膜 表面上分布着许多吸收光能的色素分子 和许多进行光合作用所必需的酶。
③、光照强度与光合作用效率的关系曲线
光照强 度影响光反 应，与光合 强度成正相 关，有饱合 点和补偿点。
二 氧 化 碳 吸 收
c
净光合量
光饱和点
总光合量
二 氧 a 化 碳 释 放
b
光补偿点
呼吸作用
光照强度
④生产应用的具体措施
（2）CO2浓度对光合作用的影响
①规律：影响暗反应，在一定范围内与光合强度成 正相关，有饱合点。浓度过高，则由于抑制呼吸作 用而抑制光合作用的速率。
有光、无光都能进行 6(CH2O) ＋6O2 ＋6H2O
1、叶绿体色素提取液放在自然光源和三棱镜之间， 通过棱镜的连续光谱中缺少 （ A ） Ａ.红光和蓝紫光 Ｂ.红光和绿光 Ｃ.黄光和蓝紫光 Ｄ.黄光和绿光 2、高等绿色植物叶绿体中含量最多的色素是（ A ） Ａ.叶绿素a Ｂ.叶绿素b Ｃ.胡萝卜素 Ｄ.叶黄素
①水的光解
① CO2的固定 CO2+C5
酶
物质 变化 ②ATP的合成
H 2O
光
O2+[H]
2C3
② C3的还原和C5的再生
2C3+[H]+ATP 酶 (CH2O)+C5+ADP+Pi
【人教版】高三上册生物基础实验：实验7 叶绿体色素的提取和分离(含解析)
——叶绿体色素的提取和分离原理、色素的种类和吸收光谱、试剂的作用和实验成败关键前情提要：关键词：色素提取和分离的原理、色素的种类、试剂的作用难度系数：★★★重要程度：★★★★基础回顾：考点一、实验的原理（1）实验：绿叶中色素的提取和分离（纸层析法）①可以利用无水乙醇提取绿叶中的色素，在研磨时还应加入少许二氧化硅和碳酸钙，其中前者有助于研磨充分，后者可防止在研磨中色素被破坏。
②分离的原理是利用色素在层析液中的溶解度不同，溶解度越大的在滤纸上扩散的快，反之则慢。
考点二、色素的种类和吸收光谱1．提取绿叶中色素的关键（1）叶绿素不稳定，易被破坏，因此研磨要迅速、充分以保证提取较多的色素。
（2）滤液收集后，要及时用棉塞将试管口塞紧，以防止滤液挥发。
（3）称取绿叶的质量和加入无水乙醇的体积要适当，以保证提取液的浓度。
2．分离绿叶中色素的关键（1）滤液细线不仅要细、直，而且要含有较多的色素，因此要在滤液干后，重复画1～2次。
（2）滤纸上的滤液细线不能触及（或没入）层析液，否则会使滤液中的色素溶解于层析液中，滤纸条上得不到色素带，使实验失败。
3． 实验流程提取色素⎩⎪⎪⎨⎪⎪⎧取材：称取5 g 绿色叶片↓研磨：加少许SiO 2、CaCO 3和10 mL 无水乙醇↓过滤：漏斗基部放一块单层尼龙布 ↓收集：收集滤液，试管口用棉塞塞严制备滤纸条⎩⎪⎪⎨⎪⎪⎧干燥滤纸↓剪滤纸条：将滤纸剪成长与宽略小于试管长和宽的滤纸条，并在一端剪去两角↓铅笔画线：在距剪去两个角一端1 cm 处用 铅笔画一条细的横线画滤液细线⎩⎪⎨⎪⎧用毛细吸管吸取少量滤液↓画线：沿铅笔线画出一条细线↓待滤液干后，重复画一两次分离绿叶中的色素⎩⎪⎨⎪⎧将3 mL 层析液倒入试管中，装置如图所示插入滤纸条有滤液细线的一端朝下，随后用软木塞塞紧试管口。
注意：不能让滤纸条上的滤液细线触到层析液4、由操作要求探究操作目的5（1）收集到的滤液绿色过浅的原因分析 ①未加石英砂（二氧化硅），研磨不充分。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
• 滤液细线勿浸入层析液，防止色素溶解在层析液中；
• 层析时，烧杯要加盖，避免苯等有毒物质挥发出来污染空气；
• 实验结束，要用肥皂洗手，因为实验中可能接触了苯等有毒物质；
• 201滤9-5纸-18条要避光保存，防止褪色 谢谢观赏
9
颜色
度
能
胡萝卜素 橙黄色 最少 叶黄素 黄色 较少
最大 较大
最快 蓝紫光 较快
叶绿素ａ 蓝绿色 最多 叶绿素ｂ 黄绿色 较多
较小 最小
较慢 蓝紫光 最慢 红光
与光合作用有关的色素存在于哪呢？
2019-5-18
谢谢观赏
7
四种色素对光的吸收 叶绿体中的色素提取液
叶绿素a、b主要吸__蓝__紫__光__、__红__光___
2.滤纸条上的滤液细线，为什么不能触及层析液？
2019-5-18
谢谢观赏
1
实验步骤：
1.提取绿叶中的色素
SiO2：使碾磨充分 CaCO3：防止色素被破坏 无水乙醇：提取色素
2019-5-18
谢谢观赏
2
实验步骤：
2.制备滤纸条
铅笔线 画铅笔细线
减去两角的目的：
防止层析液从边缘扩散速 度太快。
2019-5-18
胡萝卜素和叶黄素主要吸收_蓝__紫__光_____
2019-5-18
谢谢观赏
8
叶绿体中色素提取和分离实验中几个关键问题
• 取叶要新鲜 ， 滤液中含有较多的色素；
• 研磨要迅速充分，防止无水乙醇挥发，同时可以得到色素浓度较大的
滤液；
• 画滤液细线要重复２－３次，以便色带清晰；
• 滤液细线要细、直、齐，防止色素带重叠；
谢谢观赏
3
实验步骤：
3.画滤液细线
2019-5-18
滤液细线的要求：
细、直、齐（使色素处于同 一起跑线）；
重复2—3次（防止色素太少 分离现象不明显）。
谢谢观赏
4
实验步骤：
4.分离绿叶中的色素
培养皿
注意:
滤液细线
层析液
滤液细线不能触到层析液（防止色素溶解在层析液中）
烧杯要盖上培养皿、试管要塞上棉塞（层析液易挥发且有毒）
绿叶中色素的提取和分离（纸层析法）
实验原理：提取(无水乙醇)、分离(层析液)
目的要求：绿叶中色素的提取和分离及色素的种类
材料用具：新鲜的绿叶、定性滤纸等、无水乙醇等
方法步骤：
1.提取绿叶中的色素 2.制备滤纸条
3.画滤液细线
4.分离绿叶中的色素
5.观察和记录
讨论：
1.滤纸条上色带的数目、排序、宽窄？
2019-5-18
谢谢观赏
5
实验步骤：
5、观察与记录实验结果
胡萝卜素 捕 类胡萝 （橙黄色）
获 光 能
卜素
(占1/4)
叶黄素
（黄色）
的
叶绿素a
色 叶绿素 （蓝绿色）
素
(占3/4)
叶绿素b
（黄绿色）
滤20纸19-5上-18 色带的排列顺序如谢何谢观？赏 宽窄如何？说明什么？6
小结：
色素 色素 含量 溶解度 扩散速 吸收光