气相色谱填充柱的制备

做了20多年的气相色谱，在以前大多数使用的是填充柱，并且基本上是自己制作填充料，所以只是简单说说填充柱的制备。

气相色谱填充柱的制备
气相色谱柱一般分为填充柱和毛细管柱，填充柱适合常规样品的定量分析，尤其是高纯度的样品；毛细管柱适合分离组成比较复杂或微量样品以及残留分析等。目前来说，在常规样品和高纯样品的定量分析时，经常使用的还是填充柱。
毛细管柱一般为商品柱，买来后，接上仪器，老化一下即可直接使用。填充柱，大多是自己制备的，填充柱的柱效，和柱的制备有很大的关系，尤其是填充物的制备。下面就以制备5%OV-101/Chromosorb W HP玻璃色谱柱为例，简单说说填充柱的制备。
一、 色谱柱的制备
1、 固定液的涂渍：
称取0.5g OV-101于200mL烧杯中，加入适量三氯甲烷溶解，将10 g干燥
的Chromosorb W HP载体徐徐倾入，使载体完全浸没。将烧杯置于通风柜中，在红外灯下干燥，并不断搅拌至溶剂挥发干，然后移至110℃烘箱中干燥2h,备用。
2、 色谱柱的填充：
将一小漏斗接已经洗涤干燥的色谱柱的出口，分次把制备好的填充物填入柱内，同时不断轻敲柱壁，直至填到离柱口1.5cm处为止。将玻璃漏斗移至色谱柱的入口，在出口端塞一小团经硅烷化处理的玻璃棉，并包以薄层棉花或2层纱布，通过橡皮管接到真空泵上，开启真空泵，从漏斗处，继续缓缓加入制备好的填充物，并不断轻敲柱壁使其填充得均匀紧密。填充完毕，在入口端也塞一小团经硅烷化处理的玻璃棉，并适当压紧以保持柱内填充物不被移动。
3、 色谱柱的老化：
将色谱柱入口与气化室相连，出口端先不接检测器，以15mL/min流量通入载气(N2)。分阶段升温至250℃,并在此温度下至少老化24 h。
以上是采用气相色谱法检测一个农药有效成分的色谱柱制备典型操作。
二、 注意事项
1、 色谱柱的处理
玻璃柱：
新柱，接上胶管用清水直接冲洗约20分钟，然后依次用蒸馏水、乙醇冲洗，于烘箱中干燥。
注：冲洗方法：用一个干净的洗耳球吸入蒸馏水或乙醇，然后将液体用力挤
入柱管中。
旧柱（指使用过的柱）：接上胶管先用清水直接冲洗约20分钟，然后将稀酸
（一般为0.1mol/L硝酸或盐酸溶液）灌入柱管中，让其浸泡2小时以上，再用清水冲洗至洗出液为中性，再以同样方法注入乙醇或丙酮，浸泡2小时以上，然后依次用蒸馏水、乙醇冲洗，于烘箱中干燥。
不锈钢柱：
新柱：洗涤、干燥方法同玻璃柱。
旧柱：洗涤、干燥方法同玻璃柱，但是，需把稀酸换为稀碱，一般为0.1mol/L
氢氧化钠溶液。
2、 固定液涂

渍时的溶剂量
固定液涂渍时的溶剂量是最不容易掌握的，通常资料介绍“取所需量的固定液，用适量（能浸过担体）的溶剂溶解”，而“适量（能浸过担体）的溶剂”到底是多少，一般很难掌握。在这里，告诉大家一个简单的方法，将所需要的载体称量后，置于量筒中，量出其体积，这就是溶解固定液的溶剂的量。采用此方法溶解固定液后，再徐徐倾入载体，一般正好能浸没载体，只要稍加搅拌，这样制成的填充物涂布均匀，不会有涂层厚薄不匀，以致产生柱效差。如果溶剂过多，容易造成上层的载体涂层较厚，因为上层液体挥发较快。
3、 填柱的方法
填柱时，要注意柱内填充物的均匀紧密，一般不锈钢柱比较好填，因为在敲
打柱时，用力较大也可。而玻璃柱就不容易了，敲打轻了，松紧度不够，通入载气后，柱内会出现较大的空隙，造成死体积大，影响柱效；重了，不小心会将玻璃柱损坏，所以要注意敲打的力度。有时候，也会在柱子老化后，从入口处再次补加填充物。
4、 色谱柱老化
色谱柱老化时，千万要注意不能接检测器，否则，检测器容易被污染。
老化温度必须大于使用时的柱温，这样在做分析时基线会比较稳。
老化时间，一般为连续24小时，如果有困难，也可以分时间段老化，只要基线稳定即可。