艾滋病研究用P3级生物安全实验室

艾滋病研究用P3级生物安全实验室

徐立大* 王秋娣** 冯佩明***

*中国预防医学科学院环境卫生与卫生工程研究所

**中国预防医学科学院

***中国洁净学会

近几年来，我们曾经为国内一些单位主持设计和施工建造了若干个用于艾滋病研究的P3级安全实验室，并全部一次通过了卫生部验收。也曾经参加过一些单位P3级生物安全实验室家验收工作。深深感到在P3级生物安全实验室的建设市场等方面存在着不少问题。本文结作中的一些体会提出一些看法，以期得到有关人员的重视。

自八十年代以来，艾滋病已在全世界广泛流行，严重地威胁着人类的健康和生存。为了战胜迄今无法治愈的疾病，医务工作者和相关科研人员与之进行了顽强的斗争，人类正在朝着有日最终控制和战胜这种疾病的道路上艰难的前进着。既取得了一步一步的胜利，同时也付出重的代价。代价之一就是一些从事此项研究的工作人员自己也受到了感染，甚至变为艾滋病病据美国疾病控制中心(CDC)统计，截止到1992年9月30日，在美国从事艾滋病研究的工作中有25人感染了艾滋病病毒，其中23人与临床有关，2人与临床无关。共有12人已经发为艾滋病病人。在我国，艾滋病流行趋势不容乐观，将会有越来越多的临床和研究人员从事滋病防治有关的工作，虽然至今尚未发现因职业接触导致艾滋病病毒感染的报告，但是为了于未然，及早采取措施保护这些工作人员免受艾滋病病毒的感染已是刻不容缓的事情。在诸范措施中，建设既能保护工作人员，又能保护环境的P3级生物安全实验室是其中重要的一

一、艾滋病实验室的分级

我国至今还未颁布有关生物安全实验室的标准。但对人体有危害的微生物则按其危险性分为类。但由于发表较早，其中并没有列入艾滋病病毒(HIV)。而且我国有关的分类表也并未指种微生物应该在什么级别的实验室中进行操作。国外资料显示，一些国家既有微生物危险性表，又指出进行操作相对应的实验室级别，对于保护人体健康和环境具有很强的指导作用。

国外的资料表明，当进行艾滋病研究时，针对不同的实验内容和操作过程，应该采取不同等防护措施。尽管研究表明，艾滋病病毒的职业性感染的危险性并不高，但是感染了HIV的后十分严重的。实验室工作人员不应低估这种危险性。实验室感染HIV的危险主要是由于手、和眼、鼻和口腔的粘膜感染了污染的血液和体液所致。至今尚无证据表明HIV可以通过空气传播。针对艾滋病的感染途径，世界卫生组织提出了有关艾滋病诊断和研究实验室的生物安作指南。并对血清学实验室、病毒分离实验室以及研究和生产实验室分别提出要求。现在仅

及实验室本身的一些内容简述如下：

1.血清学实验室

要求在一个独立或专用的实验室内进行HIV污染材料的实验。如果不可能做到则可考虑在实开辟一个僻静且容易明显辩认的工作区。实验室应宽敞。不必使用生物安全操作台进行血清验，但应戴上眼镜、口罩或其他保护用品。实验室墙壁、天花板、地面和操作台面应平整光不渗透，便于清洁。能够耐受常规化学试剂和消毒剂的清洗。地面不应太滑。不需要特殊的设施和机械通风系统。窗门应装有防蚊蝇纱窗。各门应能自行关闭，并装有显示牌。应在实内配备高压消毒器。实验室外穿的衣服的衣橱以及进食、饮水、吸烟的场所应置于工作区外

2.病毒分离实验室

应是专用实验室。要有足够的空间安装生物安全柜或通风橱，以及基本的设备如冰箱、离心培养箱。生物安全柜是进行感染性微生物实验和防止操作中产生气溶胶和溅液的首选设备，须保持良好的工作状态，否则会无作用或产生潜在的危害。在生物安全柜中的常规实验操作在通风橱中进行。实验室墙壁、天花板、地面和操作台面应该平整光滑，不渗透，便于清洁够耐受常规化学试剂和消毒剂的清洗。地面不应太滑。所用的离心机应当使用密闭的离心杯子，以防止发生意外事故时感染性材料从离心机内散布出来。离心杯的装样和取样应在生物柜中进行。

3.研究和生产实验室

由于在这类实验室中的工作会产生含有高浓度病毒的物质，并要进行浓缩病毒制品的加工和作。因此标准的安全操作规程必须不折不扣的加以贯彻。这类实验室事实上就是一个标准的级生物安全实验室。它要求进入实验室时必须通过两道门，也就是说必须要有一个气闸室或间。实验室的门窗必须保持密闭，门必须能够自动关闭。实验室墙壁、天花板、地面和操作应该平整光滑，不渗透，便于清洁。能够耐受常规化学试剂和消毒剂的清洗。地面不应太滑验室必须要有管道通风系统，实验室内气压相对于外界应该保持负压。对实验室的排气系统一定的要求。如果生物安全柜仅作常规实验且定期（12个月）检查确认其安全性，则由生全柜经过HEPA过滤的气体可以在实验室内循环，否则应当排至外界。实验室内应配备高压器，对离心机的要求同病毒分离实验室。

显然，针对不同的实验和操作内容，对实验室的设备和装置也有不同的要求。那种认为凡是病实验室就是P3实验室的观点是十分片面的。对于绝大多数只承担血清学检验的单位而言有必要建造昂贵的P3级生物安全实验室。相反，承担着研究和生产任务的单位（例如进行病疫苗的研究和生产），为了保护工作人员的健康和环境，相应工作必须在P3实验室进行

二、有关生物安全操作指南

以上我们只叙述了有关生物安全指南中对实验室硬件的要求。事实上，有了合格的硬件，还要有良好的管理和标准化的生物安全操作规程(软件)才有可能真正保护工作人员免受感染。

片面追求高标准硬件而忽视相应软件的做法是不可取的。

首先必须强调的是实验室安全操作规范的培训。必须对所有实验室人员及其辅助人员进行经的岗位安全措施培训。否则任何不合格的实验室以及人为的出错都将可能破坏所有的安全标并损坏良好的设备。

其次，实验室的主管还应当保证其工作人员具有良好的安全意识，并且监督他们的实验操作过必须强调实验室安全是所有实验室人员的职责，每个实验人员应向主管报告任何不安全的行情况。

在艾滋病实验室中，基本的保护性措施有：

－防止产生刺伤、切伤和皮肤擦伤，并保护已有的伤口、皮肤损害以及结膜和粘膜表面。

－使用防止实验人员和衣服污染的简易的防护措施，以及良好的基本卫生操作，包括常规洗

－应用消毒和灭菌方法控制实验室工作区表面污染。

－污染的安全处理。

为此，要在一切相关的环节，采取相应的安全措施。概括起来包括：

－实验室工作人员的防护措施；

－感染性液体溅出和意外事故处理；

－污染物品和废物的管理和处理；

－实验室人员的健康和医学监测。

此外，相关的其他措施还有：

－标本的处理、转送和运输的指南，包括一般指南和在公共运输工具运输标本的指南；

－采集血液样本的指南。

对于所使用的手套的选择和保养；消毒和灭菌方法的选择；可以重复使用的针头和注射器的方法以及正确使用和保养生物安全柜等，也有一系列相应的规定和指南。

限于篇幅，我们只罗列相应的标题。读者可以去阅读相关的文献资料以了解详细内容。我们表明的是，规范化的实验室管理和严格遵守相应的生物安全操作指南的重要性，无论怎样强不过分。

三、实验室建设中若干问题的探讨

目前，不少医院、研究所和卫生防疫部门都有建设P3生物安全实验室的意愿。但其造价昂