病毒感染的诊断
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免疫组织化学染色
1
2
3
Western blot
第三节 检测病毒抗体
1、病毒抗体的种类:IgG、IgM、IgA和IgE。
2、检测抗体的方法 (1)中和试验:特异性的抗病毒免疫血清(中和抗体)
与病毒作用,能抑制病毒对敏感细胞 的吸附、穿入,从而阻止病毒的增殖, 使其失去感染力。 (2)血凝抑制试验 (3)补体结合试验 (4)间接血凝试验 (5)乳胶凝集试验 (6)ELISA
第四节 检测病毒核酸
• 核酸分子杂交技术 • PCR
(2)样品的采集、处理和运输: 1)用无菌棉拭子收集样品; 2)病毒分离前加入抗菌素; 3)缩短运输的时间、注意运输过程中的温度。
(3)分离培养 1)细胞培养 2)实验动物 3)鸡胚接种
(4)鉴定 1)病毒种类与型别鉴定: 已知特异性抗血清,通过免疫学方法如 IFA、ELISA、中和试验等对分离培养的 病毒进行种型鉴定;
病毒在细胞内增殖的指标
1、CPE
正常细胞
病变细胞
2)病毒传染性测定: TCID50:tissue culture infective dose 50, 50%组织细胞感染量; 蚀斑测定:plaque assay,pfu(plaque forming unit)
2、病毒的形态学检查
ຫໍສະໝຸດ Baidu(1)光学显微镜,如包涵体的观察(inclusion body); (2)电子显微镜,用于发现一些新的病毒,如引起腹
泻的轮状病毒和Norwalk病毒等; 免疫电镜技术(immune electron microscope)用于提高检测的敏感 性,如HAV的检测。
第二节 检测病毒抗原
病毒抗原的检测
(1)IFA和IHC:通常是已知抗体去检测抗原; (2)反向被动血凝试验; (3)对流免疫电泳; (4)放射免疫测定法; (5)ELISA; (6)时间分辨荧光测量技术; (7)斑点-酶免疫与Western blot;
第二十六章 病毒感染的诊断
第一节 检测病毒
1、病毒的分离培养
(1)采集样品的时间与部位: 1)发病的早期,尤其是抗病毒治疗前; 2)血液、脑脊液分离病毒诊断意义较大;呼吸道、 胃肠道、泌尿生殖道、创口或皮肤分离的病毒 必须结合临床资料的分析; 3)呼吸道病毒感染采集鼻咽分泌物、脑脊液用于 分离神经系统感染的病毒、消化系统感染的病 毒采集粪便、血液传播病毒采集血液。