单克隆抗体及基因工程抗体的制备题库1-2-10
单克隆抗体的制备和应用
杂交瘤技术原理
聚乙二醇（）：细胞融合剂，使免疫的小鼠脾细 胞与小 鼠骨髓瘤细胞融合 培养基的选择培养：反复的免疫学检测筛选克隆化增殖的 杂交瘤 细胞系 单克隆抗体生成：接种杂交瘤 细胞于小鼠腹腔，腹水中 即可得到高效价的单克隆抗体
流程
培养液
培养液 培养液
细胞融合剂
:分子量 的是最常用的细胞融合剂 作用机理：诱导细胞膜上脂类物质结构重排， 使细胞膜易打开而有助于细胞融合 作用特点：随机发生的，不同厂商、批号、分 子量的，其纯度与毒性有所不同
特点：
更高的的灵敏度和清晰度
与的比较
抗原要求 得量 特异性 稳定 沉淀反应 成本
可以不纯 高 高 低 无 高
纯度高 低 低 高 有 低
第三节 基因工程抗体
基因工程抗体
根据研究者的意图，采用基因工程方 法，在基因水平，对免疫球蛋白基因进 行切割、拼接或修饰后导入受体细胞进 行表达，产生新型抗体。主要包括嵌合 抗体、单链抗体、人源化抗体、双价抗 体和双特异性抗体。
免疫脾细胞的制备
× 淋巴细胞 无菌手术
采取饲养细胞
细胞密度过低不利于细胞生长繁殖 常用小鼠腹腔细胞作饲养细胞 其中还有清除死亡细胞的作用 饲养存活一般不超过周，不影响杂交瘤细胞的纯化
饲养细胞
。
融合方法
骨髓瘤细胞与淋巴细胞() 内加完;
内加培养液
细胞融合
细胞与脾细胞的比例为： 的（无菌，预温℃）在分钟内滴完,静置秒,时间一到,将事 先准备的培养液一滴一滴加入,停止作用 根据细胞数量加入培养基，使之分加到孔板中时每孔细胞数 为×个。融合后天，换用培养液。
第四节 单克隆抗体应用
检验医学 体外诊断试剂 标记免疫测定
单克隆抗体练习题
单克隆抗体练习题1.下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。
（1） 技术是单克隆抗体技术的基础。
（2）根据培养基的用途分类，图中培养基属于 培养基。
（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比。
最大的优越性是 。
（4）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用诱导剂外，还可以采用 。
（5）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的 特点，又具备淋巴细胞的 特点。
（6）淋巴细胞是由动物体 中的 细胞分化、发育而来。
（7）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是 。
2下图表示用生物工程制备人抗A 抗体的过程。
请回答下列问题选育出产生高特异性抗体的细胞骨髓瘤细胞 不能在HAT 某些淋巴细胞 （产生特异抗体） 混合并进行细胞融合，转到HA T 培养基上 培养 杂交瘤 细胞生长杂交瘤（1）人的红细胞膜表面有被称为凝集原的特异________：从免疫学角度看，这种凝集原是________。
（2）图中细胞中1是小鼠体内注入人A型血红细胞后而获得的________细胞，这种细胞具有产生________________的特点，但难以在体外培养。
甲培养皿中培养的细胞2，是从患骨髓瘤的小鼠体内获取的骨髓瘤细胞，这种细胞在体外培养时能________________，但不会产生抗体。
（3）为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点，经特殊处理，在促细胞融合因子的作用下，使两种细胞发生融合，形成图中的细胞3，这种细胞称为________________。
把它在乙培养皿中进行培养，则能产生大量的细胞群，这种方法称为________________。
（4）过程①的主要目的________________________。
通过过程②或⑧的培养方法能产生大量________________________抗体3.右图是某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。
请据图回答：(1)该方案并不能达到预期效果，请你给予补充纠正。
临床医学检验技师初级(师)临床免疫学及检验(单克隆抗体与基因工程抗体制备技术)-试卷1
临床医学检验技师初级（师）临床免疫学及检验（单克隆抗体与基因工程抗体制备技术）-试卷1(总分：60.00，做题时间：90分钟)一、 A1型题(总题数：17，分数：34.00)1.下列关于杂交瘤细胞特点的错误描述是（分数：2.00）A.具备了双亲细胞的特点B.分泌人源性单克隆抗体√C.分泌鼠源性单克隆抗体D.体外繁殖快速E.能分泌抗体解析：解析：杂交瘤细胞是两个不同特性的细胞融合成一个异型核细胞，这两种细胞分别是小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞，分泌鼠源性单克隆抗体。
2.杂交瘤技术中最常用的骨髓瘤细胞株是（分数：2.00）A.NS-1和SP2／0细胞株√B.NS-2株C.SP5株D.HPG-2E.HAILA解析：解析：杂交瘤技术中最常用的骨髓瘤细胞株是NS一1和SP2／0细胞株。
3.HAT培养基中三种关键成分为（分数：2.00）A.次黄嘌岭、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷√B.黄嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷C.氨基嘌岭、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷D.腺嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷E.鸟嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷解析：解析：HAT系次黄嘌呤(hypoxantin)、氨基蝶呤 (aminopterin)和胸腺嘧啶脱氧核苷(thymidin)三种物质各英文首字之缀列，HAT培养基也就是指含有这三种物质的细胞培养基。
4.阳性杂交瘤细胞的克隆化培养方法不包括（分数：2.00）A.有限稀释法B.无限稀释法√C.显微操作法D.荧光激活细胞分选仪E.软琼脂平板法解析：解析：阳性杂交瘤细胞的克隆化(单个细胞培养)方法包括有限稀释法、显微操作法、荧光激活细胞分选仪、软琼脂平板法。
5.实验室最常用的阳性杂交瘤细胞的克隆化方法是（分数：2.00）A.无限稀释法B.有限稀释法√C.荧光激活细胞分选仪D.软琼脂平板法E.显微操作法解析：解析：阳性杂交瘤细胞的克隆化(单个细胞培养)方法包括有限稀释法、显微操作法、荧光激活细胞分选仪、软琼脂平板法。
单克隆抗体的练习题
动物细胞融合和单克隆抗体导学案高二生物组教学目标：知道动物细胞融合的方法；理解单克隆抗体制备的过程、原理和应用教学重、难点：单克隆抗体制备的过程、原理和应用考试命题分析：单克隆抗体制备过程是考试的热点，学习本部分内容，既要注重文字知识的记忆和理解，更重要的是能看懂单克隆抗体制备的流程图教学过程1 动物细胞融合⑴动物细胞融合的概念：。
⑵动物细胞融合的方法：⑶目前动物细胞融合最常用的方法是：⑷动物细胞融合方法和植物细胞融合方法的比较①植物细胞融合前要先去除，动物细胞融合无此操作②植物细胞融合的促融方法有两种：物理法和化学法；动物细胞融合的促融方法除了物理法和化学法外，还有。
2 单克隆抗体的制备⑴B淋巴细胞的特点：B淋巴细胞受抗原刺激后，可分化成效应B细胞，效应B细胞能分泌，对抗侵入机体的病原体。
刺激或侵入机体的病原体（抗原）有许多种，因此，被多种抗原刺激后的B淋巴细胞产生的效应B细胞也有许多种，每种效应B细胞产生一种特定的抗体。
人体内所有效应B细胞产生的抗体应该是混合抗体（含多种抗体）。
⑵医学上传统抗体的制备从人的血液中提取，但提取的抗体是多种抗体的混合物。
这种混合抗体，不能专一性地对抗某一种病原体，因此治疗效果差。
⑶制备化学性质单一的抗体的原理单个效应B细胞能产生化学性质单一的抗体，但在体外培养条件下，效应B细胞不能无限增殖，因此产生的抗体的量非常有限。
在体外培养的骨髓瘤细胞具有无限增殖的特点，但不能产生抗体根据上述事实，科学家大胆设想了制备单克隆抗体的方案。
⑷单克隆抗体制备过程示意图见课本①分离小鼠B淋巴细胞前，应给小鼠注射特定的抗原蛋白②被免疫过的B淋巴细胞的特点：能产生化学性质单一的抗体，但不能无限增殖；骨髓瘤细胞的特点：能无限增殖，但不能产生抗体。
③将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞在培养皿中混合，通过一定手段诱导融合，融合之后培养皿上存在哪几种细胞？④科学家应将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的细胞筛选出来，继续培养，去除或淘汰其他各种细胞。
单克隆抗体与基因工程抗体的制备
第四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备将单个B细胞分离出来加以增殖形成一个克隆群落，该B细胞克隆产生出针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体，称为单克隆抗体。
第一节杂交瘤技术的基本原理杂交瘤技术的原理是利用聚乙二醇（PEG）为细胞融合剂，使免疫的小鼠脾细胞与具有体外长期繁殖能力的小鼠骨髓瘤细胞融为一体，在HAT选择性培养基的作用下，只让融合成功的杂交瘤细胞生长，经过反复的免疫学检测、筛选和单个细胞培养（克隆化），最终获得既能产生所需单克隆抗体，又能长期繁殖的杂交瘤细胞系。
将这种杂交瘤细胞扩大培养，接种于小鼠腹腔，在小鼠腹腔积液中即可得到高效价的单克隆抗体。
杂交瘤技术是一项周期长和高度连续性的实验技术，涉及大量的细胞培养、免疫化学等方法。
具体包括两种亲本细胞的选择与制备，细胞融合，杂交瘤细胞的筛选与克隆化等。
一、杂交瘤技术（一）小鼠骨髓瘤细胞1.细胞株稳定，易于传代培养。
2.细胞株自身不会产生免疫球蛋白或细胞因子。
3.该细胞是次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶（HGPRT）或胸腺嘧啶激酶（TK）的缺陷株。
4.目前最常用的骨髓瘤细胞是NS-1和SP2/O细胞株。
（二）免疫脾细胞免疫时选用与骨髓瘤细胞同源的BALB/c小鼠，鼠龄8～12周，体重约20g，雌雄均可，但必须分笼。
免疫用抗原尽量提高其纯度和活性，免疫途径多用腹腔内或皮内多点注射法。
如为珍贵微量抗原，可用脾脏内直接注射法进行免疫。
（三）细胞融合细胞融合是产生杂交瘤细胞的中心环节。
PEG（聚乙二醇）有助于细胞融合。
（四）杂交瘤细胞的选择性培养将经过融合的细胞置于含有次黄嘌呤、甲氨蝶呤和胸腺嘧啶核苷的HAT培养基中。
1.脾细胞：在一般培养基中不能生长繁殖。
2.骨髓瘤细胞：采用的小鼠骨髓瘤细胞都是HGPRT或TK代谢缺陷型细胞，在HAT培养基中，不仅合成DNA的主要途径被氨基蝶呤阻断，又因缺乏HGPRT或TK而不能利用次黄嘌呤，虽有TK可利用胸腺嘧啶核苷，但终因缺乏嘌呤不能完整合成DNA，而使骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能增殖而死亡。
单克隆抗体与基因工程抗体制备
ATGA
酶切位
点
上游引物：HF1>5’ CGGAATTCATGGTGGACGCTTTCCTGGGC 3’>
下游引物：HF2>5’ GCCTCGAGTCATGCCTCTTTCTCATAAGT 3’>
限制性内切酶
限制性内切酶可识别特定位点并切割 DNA 产生粘性末 端或平端的外源片段，经 DNA 的纯化处理后用于连接反应。
基因工程的操 作技术
1、体外基因重组
目的基因的制备
载体的构建：质粒或
噬菌体
目的基因与载体重组
2、重组体DNA的转 化增殖和表达 转化 筛选 增殖和基因表达
Foreign DNA to be inserted
+
Plansmid vector Joining
Recombinant DNA molecule
酸，通常为A。因此，Taq DNA聚
合酶扩增的产物可与 T-载体进行 粘端互补连接，达到高效克隆的 目的。因为TA克隆法操作最简单， 快速和高效的原因，成为Taq聚合 酶PCR产物的最佳克隆方法。
试剂与器材
1、材料：纯化的PCR产物 2、试剂 （1）LB液体培养基 （2）1.5%琼脂LB固体培养基 （3）5-溴-4-氯-3-吲哚-β -半乳糖苷（X-gal）储存液(20mg/mL) （4）异丙基-β -D-硫代半乳糖苷（IPTG）储液(20mg/mL) （7）pEASY-Blint载体系统 3、仪器
单克隆抗体与基因工程抗体的制备
抗体种类：
第一代抗体 多克隆抗体（polyclonal antibody) 第二代抗体 单克隆抗体（monoclonal antibody) 第三代抗体 基因工程抗体（genetic engineering antibody)
单克隆抗体及基因工程抗体的制备题库1-2-10
单克隆抗体及基因工程抗体的制备题库1-2-10问题：[单选,A2型题,A1A2型题]杂交瘤细胞保存最好在（）A.室温B.-4℃C.-20℃D.-70℃E.-196℃杂交瘤细胞保存最好在-196℃的液氮中。
问题：[单选,A2型题,A1A2型题]单克隆抗体是由下列何种细胞产生的（）A.杂交瘤细胞B.T细胞C.B细胞D.骨髓瘤细胞E.脾细胞借助化学手段，将2个不同特性的细胞融合成一个异型核细胞为杂交细胞。
杂交细胞经无限繁殖可形成克隆。
由一个细胞系衍生而来的称为"单克隆"，由单克隆细胞分泌的抗体称为"单克隆抗体"。
问题：[单选,A2型题,A1A2型题]多发性骨髓瘤细胞是B淋巴细胞杂交瘤细胞的理想细胞，其原因不包括下列哪项（）A.稳定和易培养B.自身无分泌功能C.改变细胞恶性变化D.融合度高E.HGPRT缺陷多发性骨髓瘤是浆细胞异常增生的恶性肿瘤，细胞由恶性变化。
(古诗词 )问题：[单选,A2型题,A1A2型题]在用小鼠制备单克隆抗体时常选用哪类细胞作为饲养细胞（）A.中性粒细胞B.腹腔细胞C.K细胞D.成纤维细胞E.肥大细胞在制备单克隆抗体过程中，许多环节需要加饲养细胞，如：在杂交瘤细胞筛选、克隆化和扩大培养的过程中，加入饲养细胞是十分必要的。
常用的饲养细胞有：小鼠腹腔巨噬细胞较为常用、小鼠脾脏细胞或小鼠胸腺细胞。
问题：[单选,A2型题,A1A2型题]在杂交瘤技术中常用的选择性培养基是（）A.氨甲蝶呤培养基B.次黄嘌呤培养基C.HAT培养基D.嘧啶核苷培养基E.胸腺嘧啶核苷培养基细胞杂交瘤技术中细胞融合的选择培养基含有三种关键成分：次黄嘌呤H、氨基蝶呤A、胸腺嘧啶核苷T，缩写为HAT培养基。
问题：[单选,A2型题,A1A2型题]下列哪种疾病可出现单克隆的免疫球蛋白（）A.系统性红斑狼疮B.多发性骨髓瘤C.类风湿性关节炎D.慢性粒细胞白血病E.前列腺癌多发性骨髓瘤时产生大量结构、性质均一的免疫球蛋白。
临床检验主管检验师临床免疫学和免疫检验-单克隆抗体与基因工程抗体的制备复习资料汇编
临床检验主管检验师临床免疫学和免疫检验-单克隆抗体与基因工程抗体的制备复习资料汇编一、单克隆抗体与基因工程抗体的制备由一个B细胞克隆产生的，针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体，称为单克隆抗体（mAb）。
第一代抗体：多克隆抗体（pAb）；第二代抗体：单克隆抗体（mAb）；第三代抗体：基因工程抗体（GEAb）。
二、杂交瘤技术的基本原理及杂交瘤技术1.小鼠骨髓瘤细胞①细胞株稳定，易于传代培养；②细胞株自身不会产生免疫球蛋白或细胞因子；③次黄嘌呤磷酸核酸核糖转化酶（HGPRT）的缺陷株。
2.免疫脾细胞①与骨髓瘤细胞同源的纯系小鼠；②皮内多点注射抗原。
3.细胞融合PEG可能导致细胞膜上脂类物质的物理结构重排，使细胞膜容易打开而有助于细胞融合。
4.杂交瘤细胞的选择性培养5.阳性杂交瘤细胞的克隆化培养与冻存6.有限稀释法6.单克隆抗体的制备7.体内诱生法体外培养法：将杂交瘤细胞置培养瓶中培养，待培养液颜色改变或细胞过多开始死亡时，收集上清液，离心去掉碎片及细胞即可。
三、单克隆抗体的纯化①用半饱和、饱和硫酸铵进行沉淀，达到初步浓缩和纯化的目的。
②经过适当溶解和充分稀释后，用亲和层析法进一步纯化。
单克隆抗体的性质鉴定Ig类型测定、特异性测定、抗体效价测定、表位测定、亲和力测定。
四、单克隆抗体的特性1.高度特异性。
2.高度的均一性和可重复性。
3.弱凝集反应和不呈现沉淀反应。
4.对环境敏感性。
（一）单克隆抗体的优点（1）杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代。
（2）可以用相对不纯的抗原，获得大量高度特异的、均一的抗体。
（3）适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法，如IRMA和ELISA等。
（4）由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能，可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗。
（二）单克隆抗体的局限性（1）单克隆抗体固有的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围。
（2）反应强度不如多克隆抗体。
（3）制备技术复杂，而且费时费工，价格较高。
单克隆抗体及基因工程抗体的制备题库2-2-10
单克隆抗体及基因工程抗体的制备题库2-2-10问题：[单选]T淋巴细胞杂交瘤细胞的功能不包括（）A.分泌各种淋巴因子B.具有特异性杀伤功能C.具有自身反应性D.具有调节功能E.具有吞噬功能问题：[单选]制备单克隆细胞最理想的方法是（）A.在一个孔里多个细胞融合再克隆B.孔里多个细胞融合，筛选再克隆C.机体内免疫，筛选再克隆D.在一个孔一个瘤细胞和一个目的细胞融合，筛选再克隆E.在一个孔里一个瘤细胞加一个正常B细胞融合，再用目的抗原致敏，筛选克隆问题：[单选]单克隆抗体纯化法目前最有效的方法是（）A.盐析法B.凝胶过滤C.离子交换D.辛酸提取E.亲和纯化法(11选5 )问题：[单选]关于单克隆抗体描述下哪项是错误的（）A.生物活性专一B.纯度高C.特异性高D.可识别多个表位E.可用于诊断和治疗问题：[单选]双价抗体分子的应用不包括（）A.免疫学诊断B.肿瘤放射显像C.介导药物杀伤D.介导细胞杀伤E.介导补体的生物学活性问题：[单选]多发性骨髓瘤细胞是B淋巴细胞杂交瘤细胞理想细胞，其特点不包括（）A.稳定和易培养B.自身无分泌功能C.改变细胞恶性变化D.融合度高E.HGPRT缺陷问题：[单选]下列免疫不产生抗体的是（）A.人血清免疫马B.马血清免疫人C.人血清免疫羊D.羊细胞免疫兔E.兔血清免疫大鼠问题：[单选]体液免疫应答中最先产生的抗体是（）A.IgGB.IgAC.IgMD.IgDE.IgE。
临床检验技师-临床免疫学和免疫检验(2019)练习第四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备1.doc
临床检验技师-临床免疫学和免疫检验(2019)练习第四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备12019第四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备一、A11、HAT培养基中，阻断细胞DNA合成主要途径的成分是A、HB、AC、TD、H+AE、T+A2、小鼠骨髓瘤细胞与下列哪种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生单克隆抗体A、经过免疫的B淋巴细胞B、经过免疫的T淋巴细胞C、未经过免疫的B淋巴细胞D、未经过免疫的T淋巴细胞E、以上均不对3、制备单克隆抗体最常用的细胞融合剂为A、HATB、8-AGC、PEGD、PHAE、BSA4、细胞克隆化的常用技术为A、加饲养细胞B、HAT培养基培养C、有限稀释法D、软琼脂培养法E、显微操作技术5、关于杂交瘤细胞特点的错误描述A、具备了双亲细胞的特点B、分泌人源性单克隆抗体C、分泌鼠源性单克隆抗体D、体外繁殖快速E、能分泌抗体6、各种单克隆抗体分子都有的特性是A、分子量在10000以下B、具有两个完全相同的抗原结合部位C、H链与L链借非共价键相连D、能结合补体E、能产生沉淀反应7、小鼠骨髓瘤细胞与下列哪种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生单克隆抗体A、经过免疫的B淋巴细胞B、经过免疫的T淋巴细胞C、未经过免疫的B淋巴细胞D、未经过免疫的T淋巴细胞E、以上均不对8、阳性杂交瘤细胞克隆化培养时，多少细胞数才能进行克隆化培养A、单个B、多个C、双个D、混合E、没有数目限制9、人－鼠嵌合抗体是A、人IgV区与鼠IgC区连接B、人IgC区与鼠IgV区连接C、人Ig与鼠Ig重组D、鼠IgV与人IgV区重组E、以上都是10、多发性骨髓瘤细胞是B淋巴细胞杂交瘤细胞的理想细胞，其原因不包括下列哪项A、稳定和易培养B、自身无分泌功能C、改变细胞恶性变化D、融合度高E、HGPRT缺陷11、双特异性抗体分子的应用不包括A、免疫学诊断B、肿瘤放射显像C、介导药物杀伤D、介导细胞杀伤E、介导补体的生物学活性12、B细胞杂交瘤技术中细胞融合的选择培养基是A、HAT培养基B、次黄嘌呤培养基C、甲氨蝶呤培养基D、嘧啶核苷培养基E、胸腺嘧啶核苷培养基13、杂交瘤细胞保存最好在A、室温B、-4℃C、-20℃D、-70℃E、液氮14、能够在HAT培养基长期存活的细胞是A、脾-瘤融合细胞B、脾细胞C、骨髓瘤细胞D、脾-脾融合细胞E、瘤-瘤融合细胞15、HAT培养基中三种关键成分为A、次黄嘌岭、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷B、黄嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷C、氨基嘌岭、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷D、腺嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷E、鸟嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷16、多发性骨髓瘤细胞是制备B淋巴细胞杂交瘤细胞的理想细胞，其特点不包括A、稳定和易培养B、自身无分泌功能C、改变细胞恶性变化D、融合度高E、亲缘较近17、可以得到完全人源化抗体，在肿瘤的诊断与治疗中具有独特优越性的是A、嵌合抗体B、小分子抗体C、双特异性抗体D、单克隆抗体E、噬菌体抗体库技术18、生产单克隆抗体细胞最常用的培养方法为A、液体培养B、半固体培养C、固体培养D、鸡胚培养E、动物接种19、双特异性抗体分子的构建是A、特异性不同的两个小分子抗体连接B、特异性相同的两个小分子抗体连接C、在小分子抗体的氨基端设计半胱氨酸残基D、提高抗体的特异性E、只能从Fab组建20、制备单克隆抗体，选择培养基要选择融合的A、脾细胞与骨髓瘤细胞B、骨髓瘤细胞与淋巴瘤细胞C、脾细胞与脾细胞D、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞E、淋巴瘤细胞与淋巴瘤细胞二、B1、A.次黄嘌呤B.胸腺嘧啶核苷C.HGPRTD.甲氨蝶呤E.叶酸、次黄嘌呤磷酸核酸核糖转化酶是A B C D E、叶酸的拮抗药是A B C D E答案部分一、A11、【正确答案】B【答案解析】杂交瘤细胞由骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成的，其合成DNA的主要途径被氨基蝶呤（A）阻断。
临床医学检验技术(师)考试过关(含真题)必做题-(单克隆抗体与基因工程抗体制备)
第四章单克隆抗体与基因工程抗体制备A1/A2型题1．一个单克隆抗体分子（）。
A．能和两个抗原决定簇结合B．只和相应的一个抗原决定簇结合C．不能和任何抗原决定簇结合D．能和多个抗原决定簇结合E．不确定【答案】B2．关于双特异性抗体分子的构建，正确的是（）。
A．特异性不同的两个小分子抗体连接B．特异性相同的两个小分子抗体连接C．提高抗体的特异性D．在小分子抗体的氨基端设计半胱氨酸残基E．只能从Fab组建【答案】A3．选择培养基要选择融合的（）。
A．脾细胞与瘤细胞B．脾细胞与脾细胞C．瘤细胞与瘤细胞D．细胞多聚体E．单倍体细胞【答案】A4．不属于单克隆抗体应用的是（）。
A．肿瘤的诊断B．细胞受体测定C．血清Cl－含量测定D．激素水平测定E．肿瘤的治疗【答案】C5．与杂交瘤单克隆抗体相比较，基因工程抗体的最重要优点为（）。
A．产量多B．纯度高C．容易获得D．非异源性E．应用广泛【答案】D6．多发性骨髓瘤细胞的特点不包括（）。
A．自身无分泌功能B．稳定和易培养C．改变细胞恶性变化D．融合度高E．HGPRT缺陷【答案】C7．用小鼠制备单克隆抗体时常选为饲养细胞的是（）。
A．中性粒细胞B．成纤维细胞C．腹腔细胞D．K细胞E．肥大细胞【答案】C8．关于人－鼠嵌合抗体的说法，正确的是（）。
A．人IgV区与鼠IgC区连接B．人IgC区与鼠IgV区连接C．鼠IgV区与人IgV区重组D．人Ig与鼠Ig重组E．以上都是【答案】B9．制备单克隆细胞最理想的方法为（）。
A．在一个孔里多个细胞融合再克隆B．在一个孔里多个细胞融合，筛选再克隆C．在一个孔里一个瘤细胞和一个目的细胞融合，筛选再克隆D．机体内免疫，筛选再克隆E．在一个孔里一个瘤细胞加一个正常B细胞融合，再用目的抗原致敏，筛选克隆【答案】B10．单克隆抗体纯化法目前最有效的方法是（）。
A．离子交换B．凝胶过滤C．辛酸提取D．盐析法E．亲和纯化法【答案】E11．下列没有抗体活性的片段为（）。
2017年主管检验技师考试临床免疫学和免疫检验练习题第四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备
第四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备一、A11、细胞克隆化的常用技术为A、加饲养细胞B、HAT培养基培养C、有限稀释法D、软琼脂培养法E、显微操作技术2、制备单克隆抗体最常用的细胞融合剂为A、HATB、8-AGC、PEGD、PHAE、BSA3、HAT培养基中，阻断细胞DNA合成主要途径的成分是A、HB、AC、TD、H+AE、T+A4、能够在HAT培养基长期存活的细胞是A、脾-瘤融合细胞B、脾细胞C、骨髓瘤细胞D、脾-脾融合细胞E、瘤-瘤融合细胞5、各种单克隆抗体分子都有的特性是A、分子量在10000以下B、具有两个完全相同的抗原结合部位C、H链与L链借非共价键相连D、能结合补体E、能产生沉淀反应6、能在HAT培养基生长繁殖的细胞是（）。
A、小鼠脾细胞B、小鼠骨髓瘤细胞C、饲养细胞D、杂交瘤细胞E、以上都可以7、阳性杂交瘤细胞常用的保存方法是（）。
A、4℃冰箱保存B、37℃保存C、-20℃保存D、-30℃保存E、液氮（-196℃）保存8、人源化抗体是（）。
A、由鼠抗体的Fc与人抗体的Fab组成B、由鼠体内编码人抗体的基因指导合成的抗体C、由2个相串联的人抗体Fab段连接而成D、用鼠抗体CDR嵌如人抗体可变区而成E、完全的人体合成抗体9、制备单克隆抗体时为获得经过抗原免疫的B细胞通常采用（）。
A、B细胞体外培养B、小鼠腹腔内接种抗原C、大白鼠体内接种抗原D、小鼠肌肉内接种抗原E、小鼠皮下注射B细胞10、单克隆抗体制备时作为细胞融合剂的是（）。
A、HATB、PEGC、TKD、DNAE、ConA11、制备单克隆抗体常选用小鼠的哪类细胞作为饲养细胞（）。
A、中性粒细胞B、K细胞C、肥大细胞D、成纤维细胞E、腹腔细胞12、培养骨髓细胞时为避免返祖，定期用于处理细胞的是（）。
A、PEGB、TKC、8-AGD、HATE、ConA13、免疫治疗中，同时具有特异性结合Tc和肿瘤细胞的抗体是（）。
A、单链抗体B、人源化抗体C、双价抗体D、嵌和抗体E、双特异性抗体14、单克隆抗体制备过程中用于阻断瘤细胞通过正常途径合成DNA的化合物是（）。
单克隆抗体及基因工程抗体的制备题库7-1-8
单克隆抗体及基因工程抗体的制备题库7-1-8问题：[单选]下列基因工程抗体免疫原性最低的是（）A.小分子抗体B.嵌合抗体C.抗体融合蛋白D.改形抗体E.双特异性抗体虽然嵌合抗体的免疫原性明显低于鼠McAb，但可变区仍保留鼠源性，为了进一步提高抗体的免疫原性，在嵌合抗体的基础上构建了改形抗体。
问题：[单选]分子量小，具有抗原结合功能的分子片段是（）A.人源化抗体B.小分子抗体C.抗体融合蛋白D.双特异性抗体E.抗体库技术人源化抗体主要指鼠源单克隆抗体以基因克隆及DNA重组技术改造，其大部分氨基酸序列为人源序列所取代，基本保留亲本鼠单克隆抗体的亲和力和特异性，又降低了鼠单抗的异源性问题：[单选]将抗体分子片段与其他蛋白融合得到的是（）A.人源化抗体B.小分子抗体C.抗体融合蛋白D.双特异性抗体E.抗体库技术通过基因工程技术构建的小分子抗体都是单价的，不能使抗原或抗体耦联，将特异性不同两个小分子抗体连接在一起则可得到双特异性抗体(走势娱乐资讯网 )问题：[单选]特异性不同的两个小分子抗体连接在一起可得到（）A.人源化抗体B.小分子抗体C.抗体融合蛋白D.双特异性抗体E.抗体库技术抗体分子的抗原结合部位是可变区，可以组建成分子量较小，但具有抗原结合功能的分子片段，称为小分子抗体。
问题：[单选]叶酸的拮抗剂是（）A.次黄嘌呤B.胸腺嘧啶核苷C.HGPRTD.甲氨蝶呤E.叶酸次黄嘌呤磷酸核酸核糖转化酶是HGPRT。
问题：[单选]次黄嘌呤磷酸核酸核糖转化酶是（）A.次黄嘌呤B.胸腺嘧啶核苷C.HGPRTD.甲氨蝶呤E.叶酸甲氨蝶呤是叶酸的拮抗药。
问题：[单选]即有抗体分泌功能又有细胞永生性的是（）A.淋巴细胞B.小鼠脾细胞C.小鼠骨髓细胞D.小鼠骨髓瘤细胞E.杂交细胞小鼠脾细胞能分泌抗体但不能在体外连续培养；。
基因工程试题库及答案
基因工程习题集一、名词解释：（20×4/）1、基因2、克隆3、基因定位4、PCR5、基因工程工具酶6、组织培养7、限制性核酸内切酶8、受体细胞9、生物技术 10、基因沉默11、重组DNA技术12、逆转录酶13、单克隆抗体14、核移植技术15、细胞融合16、胞内酶17、凝胶过滤18、固定化酶 19、蛋白质工程20、生物反应器二、单项选择题：(60×2/)1．下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（）A．基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B．基因诊断的基本原理是DNA分子杂交C．一种基因探针能检测水体中的各种病毒D．原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良2．在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是（）A．用mRNA为模板逆转录合成DNA B．以4种脱氧核苷酸为原料人工合成C．将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选 D．由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA 3．我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导人棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。
下列叙述不．正确的是（）A．基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的4．采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出转基因羊。
但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。
以下有关叙述，正确的是（）A．人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目，等于凝血因子氨基酸数目的3倍B．可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵C．在该转基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中D．人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA5.科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。
中级临床医学检验技术临床免疫学及检验(单克隆抗体与基因工程抗
中级临床医学检验技术临床免疫学及检验（单克隆抗体与基因工程抗体的制备、凝集反应）模拟试卷1(题后含答案及解析) 题型有：1. A1型题 2. B1型题1．制备单克隆抗体常选用小鼠的哪类细胞作为饲养细胞A．中性粒细胞B．K细胞C．肥大细胞D．成纤维细胞E．腹腔细胞正确答案：E解析：小鼠腹腔细胞含有巨噬细胞，除具有饲养作用外，还可清除死亡破碎细胞及微生物。
知识模块：单克隆抗体与基因工程抗体的制备2．下列有关单克隆抗体特点的叙述中错误的是A．特异性强B．灵敏度高C．高度的均一性D．对pH、温度及盐类浓度耐受性强E．可重复性正确答案：D解析：单克隆抗体纯度高，与抗原结合的特异性强，理化性状高度均一，有效抗体含量高，但抗原抗体反应仍受pH、温度及盐类浓度的影响。
知识模块：单克隆抗体与基因工程抗体的制备3．B细胞杂交瘤技术中细胞融合的选择培养基是A．HAT培养基B．次黄嘌呤培养基C．甲氨蝶呤培养基D．嘧啶核苷培养基E．胸腺嘧啶核苷培养基正确答案：A解析：细胞杂交瘤技术中细胞融合的选择培养基含有三种关键成分：次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)、胸腺嘧啶核苷(T)，缩写为HAT培养基。
知识模块：单克隆抗体与基因工程抗体的制备4．多发性骨髓瘤细胞是B淋巴细胞杂交瘤细胞的理想细胞，其原因不包括下列哪项A．稳定和易培养B．自身无分泌功能C．改变细胞恶性变化D．融合度高E．HGPRT缺陷正确答案：C解析：多发性骨髓瘤是浆细胞异常增生的恶性肿瘤，细胞有恶性变化。
知识模块：单克隆抗体与基因工程抗体的制备5．关于单克隆抗体特点的错误叙述A．理化性状高度均一B．生物活性单一C．来源容易D．特异性强E．针对多种抗原决定簇正确答案：E解析：杂交瘤细胞产生的单克隆抗体是针对抗原分子上某一单个抗原决定簇的抗体，其特点是理化性状高度均一、生物活性单一、来源容易和特异性强。
知识模块：单克隆抗体与基因工程抗体的制备6．杂交瘤细胞含有A．两亲本细胞各一半染色体B．两亲本细胞全部染色体C．两个染色体D．融合特有基因信息E．亲代某些特性基因正确答案：B解析：杂交瘤细胞由两个细胞融合而成，含有两亲本细胞全部染色体，同时具有两种细胞的特性。
(完整版)初级检验技师临床免疫学和免疫检验(2017年练习题)第四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备
第四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备一、A11、细胞克隆化的常用技术为A、加饲养细胞B、HAT培养基培养C、有限稀释法D、软琼脂培养法E、显微操作技术2、HAT培养基中，阻断细胞DNA合成主要途径的成分是A、HB、AC、TD、H+AE、T+A3、能够在HAT培养基长期存活的细胞是A、脾-瘤融合细胞B、脾细胞C、骨髓瘤细胞D、脾-脾融合细胞E、瘤-瘤融合细胞4、制备单克隆抗体最常用的细胞融合剂为A、HATB、8-AGC、PEGD、PHAE、BSA5、各种单克隆抗体分子都有的特性是A、分子量在10000以下B、具有两个完全相同的抗原结合部位C、H链与L链借非共价键相连D、能结合补体E、能产生沉淀反应6、多发性骨髓瘤细胞是B淋巴细胞杂交瘤细胞的理想细胞，其原因不包括下列哪项A、稳定和易培养B、自身无分泌功能C、改变细胞恶性变化D、融合度高E、HGPRT缺陷7、阳性杂交瘤细胞克隆化培养时，多少细胞数才能进行克隆化培养A、单个B、多个C、双个D、混合E、没有数目限制8、杂交瘤细胞保存最好在A、室温B、-4℃C、-20℃D、-70℃E、-196℃9、B细胞杂交瘤技术中细胞融合的选择培养基是A、HAT培养基B、次黄嘌呤培养基C、甲氨蝶呤培养基D、嘧啶核苷培养基E、胸腺嘧啶核苷培养基10、小鼠骨髓瘤细胞与下列哪种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生单克隆抗体A、经过免疫的B淋巴细胞B、经过免疫的T淋巴细胞C、未经过免疫的B淋巴细胞D、未经过免疫的T淋巴细胞E、以上均不对11、关于杂交瘤细胞特点的错误描述A、具备了双亲细胞的特点B、分泌人源性单克隆抗体C、分泌鼠源性单克隆抗体D、体外繁殖快速E、能分泌抗体12、杂交瘤细胞保存最好在A、室温B、-4℃C、-20℃D、-70℃E、液氮13、双特异性抗体分子的应用不包括A、免疫学诊断B、肿瘤放射显像C、介导药物杀伤D、介导细胞杀伤E、介导补体的生物学活性14、HAT培养基中三种关键成分为A、次黄嘌岭、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷B、黄嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷C、氨基嘌岭、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷D、腺嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷E、鸟嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶核苷15、多发性骨髓瘤细胞是制备B淋巴细胞杂交瘤细胞的理想细胞，其特点不包括A、稳定和易培养B、自身无分泌功能C、改变细胞恶性变化D、融合度高E、亲缘较近16、人－鼠嵌合抗体是A、人IgV区与鼠IgC区连接B、人IgC区与鼠IgV区连接C、人Ig与鼠Ig重组D、鼠IgV与人IgV区重组E、以上都是17、生产单克隆抗体细胞最常用的培养方法为A、液体培养B、半固体培养C、固体培养D、鸡胚培养E、动物接种18、双特异性抗体分子的构建是A、特异性不同的两个小分子抗体连接B、特异性相同的两个小分子抗体连接C、在小分子抗体的氨基端设计半胱氨酸残基D、提高抗体的特异性E、只能从Fab组建19、制备单克隆抗体，选择培养基要选择融合的A、脾细胞与骨髓瘤细胞B、骨髓瘤细胞与淋巴瘤细胞C、脾细胞与脾细胞D、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞E、淋巴瘤细胞与淋巴瘤细胞20、可以得到完全人源化抗体，在肿瘤的诊断与治疗中具有独特优越性的是A、嵌合抗体B、小分子抗体C、双特异性抗体D、单克隆抗体E、噬菌体抗体库技术二、B1、A.次黄嘌呤B.胸腺嘧啶核苷C.HGPRTD.甲氨蝶呤E.叶酸<1> 、次黄嘌呤磷酸核酸核糖转化酶是A B C D E<2> 、是叶酸的拮抗药A B C D E答案部分一、A11、【正确答案】 C【答案解析】有限稀释法不需特殊设备，克隆出现率高，为实验室最常用的方法。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
单克隆抗体及基因工程抗体的制备题库1-
2-10
问题：
[单选,A2型题,A1A2型题]B细胞杂交瘤技术中细胞融合的选择培养基是（）。
A.HAT培养基
B.次黄嘌呤培养基
C.甲氨蝶呤培养基
D.嘧啶核苷培养基
E.胸腺嘧啶核苷培养基
细胞杂交瘤技术中细胞融合的选择培养基含有三种关键成分：次黄嘌呤（H）、氨基蝶呤（A）、胸腺嘧啶核苷（T），缩写为HAT培养基。
问题：
[单选,A2型题,A1A2型题]阳性杂交瘤细胞克隆化培养时，多少细胞数才能进行克隆化培养（）。
A.单个
B.多个
C.双个
D.混合
E.没有数目限制
杂交瘤细胞形成后的初期很不稳定，为确保单克隆抗体的专一性及避免其他阴性细胞对其生长的影响，必须将阳性杂交瘤细胞进行单细胞分离培养，产生单克隆杂交瘤细胞，经2～3次检测均为阳性的杂交瘤单个细胞，才能进行克隆化培养。
问题：
[单选,A2型题,A1A2型题]用于制备单克隆抗体的骨髓瘤细胞不具有以下哪一特点（）。
A.稳定易培养
B.自身可分泌免疫球蛋白
C.融合率高
D.HCPRT缺陷株
E.是肿瘤细胞
多发性骨髓瘤是B细胞系恶性肿瘤，骨髓瘤细胞具有稳定、易培养，自身不分泌免疫球蛋白及细胞因子，融合率高，HGPRT缺陷等特点。
(rpg游戏 /)
问题：
[单选,A2型题,A1A2型题]单克隆抗体的纯化可不采用以下哪一种方法（）。
A.盐析法
B.凝胶过滤法
C.离子交换层析法
D.辛酸提取法
E.放射免疫法
单克隆抗体经初步处理后，再按所要求的纯度不同采用相应的纯化方法，一般采用盐析、凝胶过滤、离子交换层析和辛酸提取等方法。
问题：
[单选,A2型题,A1A2型题]关于单克隆抗体特点的错误叙述（）。
A.理化性状高度均一
B.生物活性单一
C.来源容易
D.特异性强
E.针对多种抗原决定簇
杂交瘤细胞产生的单克隆抗体是针对抗原分子上某一单个抗原决定簇的抗体，其特点是理化性状高度均一、生物活性单一、来源容易和特异性强。
问题：
[单选,A2型题,A1A2型题]将特异性不同的两个小分子抗体连接在一起则得到是（）。
A.嵌合抗体
B.小分子抗体
C.双特异性抗体
D.单克隆抗体
E.多克隆抗体
通过基因工程技术构建的小分子抗体都是单价的，不能使抗原或抗体耦联，将特异性不同的两个小分子抗体连接在一起就可以得到双特异性抗体。
问题：
[单选,A2型题,A1A2型题]杂交瘤细胞含有（）。
A.两亲本细胞各一半染色体
B.两亲本细胞全部染色体
C.两个染色体
D.融合特有基因信息
E.亲代某些特性基因
杂交瘤细胞由两个细胞融合而成，含有两亲本细胞全部染色体，同时具有两种细胞的特性。
问题：
[单选,A2型题,A1A2型题]以下关于噬菌体抗体库的说法错误的是（）。
A.模拟单一的特异性抗体
B.可以不使用人工免疫技术和细胞融合技术
C.可获得人源化的抗体
D.获得的抗体具有高亲和力
E.抗体VH和VL基因重组增加了抗体的多样性
噬菌体抗体库所用的建库的mRNA是人体多克隆细胞的总mRNA，抗体的VH和VL基因重组增加了抗体的多样性，因此噬菌体抗体库可以模拟天然全套的抗体。