压片法观察植物染色体

压片法观察植物染色体

植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间，此时把根尖固定，经过染色和压片，再置放在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。根尖染色体压片法，是观察植物染色体最常用的方法，也是研究染色体组型、染色体分带、染色体畸变和姊妹染色单体交换的基础。

1.实验材料

1.1 实验器材

镊子、烧杯、培养皿、载玻片、盖玻片、温度计、试剂瓶、显微镜

1.2 材料

新鲜培养的豆芽根尖

2.实验过程

2.1 实验步骤

2.1.1 材料准备：

培养：取黄豆若干浸泡24h后放入沙盘，25℃下培养，当主根长至0.5—1cm 时去掉根尖，继续培养，直至侧根长度>0.5cm，剪下备用；

前处理：用0.02%的秋水仙素处理剪下的根尖4h；

固定：将上述根尖放入卡诺固定液（无水酒精：冰醋酸=3:1）中，固定24h；

解离：酸解。取出根尖用蒸馏水漂洗后再放到0.1mol/L的HCl中，60℃水浴中解离15min；

染色：将上述根尖用蒸馏水漂洗后放在载玻片上，滴上几滴醋酸洋红溶液，染色20—30min，根尖着色后解压片观察；

压片：把染色后的根尖放在洁净的载玻片上，盖上盖玻片，用滤纸吸去多余的染液，并用铅笔轻轻的敲打盖玻片5—8min，使细胞尽量分散开来；

观察：将敲打好的片子放在显微镜下观察，找出最佳视野。

2.实验结果及分析

经过上述操作，最终在显微镜下观察到了根尖细胞的染色体。如下图：

从上图中可以观察到这些是有丝分裂中期的细胞，染色体散乱的排列在赤道板上，并且可以清晰地数出染色体的数目。

实验注意事项：压片材料要少，以免细胞贴在一起，重复太多；用铅笔敲打

盖玻片时要注意用力适中均匀，否则盖玻片很容易破裂。