微生物的显微镜直接计数法.ppt

1. 取清洁无油的血球计数板，在计数室上面加 盖血盖片。
2. 取酵母菌液，摇匀，用滴管由盖玻片边缘滴 一小滴，使菌液自行渗入，计数室内不得有 气泡。
3. 用4×镜观察并将计数室移至视野中央。
4. 在4×镜下计数：计数4个（或5个）中格的平 均值，然后求得每个中格的平均值。乘上16 （或25）就得出计数区总菌数，最后再换算 到每mL菌液中的含菌数。
酵母菌显微直接计数 方法：活菌计数法——平板菌落计数法；总菌计数
法——血球计数板或霍瑟（Peroff Hausser）细菌计 数板（二者原理和部件相同，只是厚薄不同而已）。
细胞数/ml=100小格内细胞总数÷100×400×10×1000×稀释倍数 细胞数/ml=80小格内细胞总数÷80×400×10×1000×稀释倍数
5. 注意事项：计上不计下，计左不计右。出芽 计一半
实验结果
目镜测微尺标定结果：
×目镜下 倍物镜目镜测微尺每格长度是
菌号
1 2 3 4 5 均值
酵母的直径大小测定结果
目镜测微尺格数
实际直径/µm
μm。
将显微计数结果记录于下表中。T表示五个 中方格中的总菌数；D表示菌液稀释倍数。
各中格中菌数
T D 二室 个
实验目的
学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显 微镜下测定微生物大小的方法。
学习使用血球记数板测定微生物数量的 方法。
实验材料
显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、 血球记数板、酵母菌悬液、盖玻片、 无菌滴管、吸水纸、擦镜纸。
实验步骤
测定酵母菌细胞的大小 测定的工具：目镜测微尺 镜台测微尺
目镜测微尺每格实际代表的长度随物镜的放大倍 数而改变，也会因使用不同的显微镜而产生误差， 因此在使用前必须用镜台测微尺进行校正。 目镜测微尺的每格长度(μm)=镜台测微尺×10/目镜测微尺
平均 /ml
12345
值ຫໍສະໝຸດ Baidu
第一 室
第二 室
问题与讨论
为什么目镜测微尺必须用镜台测微尺来 校正？
在显微镜下直接测定微生物数量有什么 优缺点？
本次实验课结束
请确保血球计数板清洗干净！ 请值日生同学留下值日 下周再见！