双孢菇三级菌种制作规程
香菇三级菌种制作的要点
⾹菇三级菌种制作的要点我们在进⾏⾹菇⽣产栽培时⾹菇三级菌种的制作成为⾹菇技术当中的重中之重，三级菌⽣长的好坏，将直接影响到播种的成败，现将三级菌种的制作过程简要叙述如下： ⼀、配料⽐例⽊屑78%、麸⽪8%、稻糠12%，⽯膏1%，多菌灵1%，⽩糖1%，锯沫选择阔叶林树种，以柞⽊、楸⽊、桦树等硬杂⽊的锯沫最好，尽量少⽤、不⽤杨柳椴⽊锯沫。
针叶林树种禁⽤。
⼆、配料制作将锯沫、麸⽪、稻糠、⽯膏，放在光滑⼲净的⽔泥地⾯上（如果没有⽔泥地条件的，⽤砖铺平也可以）四合⼀充分拌匀，再将多菌灵⽩糖放⼊⽔中充分溶解后，加在拌匀的⼲料中，加⽔多少，以⼿捏培养料，指缝间见⽔渗出⽽不滴下为度。
因锯沫⼲、湿度不同，所以加⽔量要因此调整，⼀般加⽔标准桶25桶（1000公⽄）为宜。
但要将料充分拌匀，⼀般拌3—4遍即可。
这时拌好的培养料要把它装⼊33cm×17cm的三级菌袋内，每袋重量2.1—2.2⽄为宜。
装适量后，要⽤⾃⾏车内胎剪成的⽪套扎起来（以26车胎为准），在袋⼝缠3—4圈为宜（也可⽤尼龙绳扎袋⼝）。
⼲料加⽔后，可达到2100⽄左右，可装1000袋，⼀万棒做800袋三级菌即可。
三、消毒灭菌主要利⽤锅炉来蒸制。
料袋装锅时要有⼀定的空隙或者“#”字型排垒在灭菌锅⾥，这样便于空⽓流通，灭菌时不易出现死⾓。
⼀是采⽤⾼压蒸汽灭菌时，料袋必须是聚丙烯塑料袋，加热灭菌随着温度的升⾼，锅内的冷空⽓要放净，当压⼒表指向1.5公⽄/平⽅厘⽶时，维持压⼒2⼩时不变，停⽌加热。
⾃然降温，让压⼒表指针慢慢回落到0位时，先打开放⽓阀，再开锅出锅。
⼆是采⽤常压蒸汽灭菌锅，开始加热升温时，⽕要旺要猛，从⽣⽕到锅内温度达到100℃的时间最好不超过4⼩时，否则会把料蒸酸蒸臭。
当温度到100℃后，要⽤中⽕维持8～10⼩时，中间不能降温，最后⽤旺⽕猛攻⼀会⼉，再停⽕焖⼀夜后出锅。
出锅前先把冷却室或接种室进⾏空间消毒。
以上⼯序注意事项：①配好料后要马上装袋，防⽌时间长失⽔变酸。
双孢菇菌种的培育方法
双孢菇菌种的培育方法双孢菇是一种优质的食用菌，具有高蛋白、低脂肪、低热量、高营养价值和药用价值等特点，受到广泛的欢迎。
那么，双孢菇的培育方法是怎样的呢？本文将向大家详细介绍双孢菇菌种的培育方法。
一、基础培养基1.成分按以下比例配置：麦芽葡萄糖培养基（Maltose glucose agar，MGA）20克、琼脂12克、蒸馏水1000毫升，pH值调为5.6。
2.操作步骤将上述三种材料配制好后，按正常的琼脂糖制菌方法进行制菌。
制好的菌放到冰箱中保存，可保存半年之久。
拿出后，要放到室温下解冻，并抹取菌塊进行分生，分生后的菌塊可用于接种。
先将菌丝拿到离心管里加50毫升的蒸馏水内，用高速振荡器振荡10-15分钟，使菌丝充分悬浮在水中。
2.接种将菌丝悬浮液用吸管取出，滴入培养瓶中，然后将接种瓶密封。
放到生长室内的恒温箱内，在温度为24度-27度之间，进行培养，保持接种瓶内空气湿润。
3.白化和菌丝均匀化的操作当菌丝长成菌块时，可采用白化和菌丝均匀化的方法来提高生产效率。
白化就是在原有基础培养基上加入一些白化剂来进行培养，使培养的双孢菇菌株变得白色，并且菌丝增长迅速。
菌丝均匀化也可以使菌丝更快的扩散，增加生产效率。
4.产菌在菌丝均匀化后，将双孢菇菌种进行培养。
在适宜的温度、光照和湿度下进行培养，适期收获。
三、营养液培养方法双孢菇菌种的营养液培养方法比较复杂，以下是具体的操作步骤。
1.采集菌丝采用青菜、芹菜等种子孵育来采集菌丝。
2.制备菌种将采集到的菌丝接种到哺乳动物细胞培养基中，然后在37度左右的恒温箱中进行培养，直至菌株繁殖正常。
3.制备培养基按照以下比例配置菌丝培养基：2g的硝酸铵、0.5g的硫酸镁、0.5g的草酸二钙、15g 的葡萄糖、10mg的硫酸亚铁、5mg的硫酸锰、10mg的硫酸铜、5mg的硫酸锌、1g的磷酸氢二钾和500毫升的蒸馏水。
4.接种和培养将制好的菌种接种到营养液中，然后放到恒温箱中进行培养，保持适宜的温度和湿度。
双孢菇三级菌种规范制作技术
01
02
03
扩大培养
将一级菌种转接到二级菌 种培养基上进行扩大培养 ，一般需时14-21天。
菌丝管理
保持培养室的清洁和卫生 ，定期检查菌丝长势和是 否出现杂菌感染。
菌丝成熟
观察菌丝是否成熟，如成 熟则可以转接到三级菌种 培养基上。
三级菌种制作流程
菌种接种
将二级菌种接种到三级菌种 培养基上，进行培养。
详细描述
该案例介绍了如何对选取的菌种进行质量检测和鉴定 ，包括基因测序、形态观察、生化鉴定等方法，以确 保菌种的真实性和稳定性。
案例三：菌种生产工艺改进与应用效果
总结词
通过改进菌种生产工艺，提高菌种生产效率和质量，降 低生产成本，实现可持续发展。
详细描述
该案例介绍了如何改进菌种生产工艺，包括提高菌种产 量、优化培养基配方、改进接种方法等，以提高生产效 率和质量，降低成本，实现可持续发展。同时，该案例 也介绍了改进后的菌种在生产实践中的应用效果。
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菌丝体老化
菌种长时间培养后，菌丝体老 化，失去活力。解决策略为及
时更换新鲜菌种。
不产生孢子
有些菌株可能不产生孢子或产生孢 子数量少。解决策略为选用产孢子 多的菌株或通过诱变育种等方法提 高产孢子能力。
产量低
双孢菇产量低，不能满足生产需求 。解决策略为优化培养基配方和培 养条件，提高菌丝体生长速度和产 量。
询价议价
与供应商就产品价格、质量、服务等方面 进行协商。
菌种采购注意事项
合法合规
确保采购的菌种来源合法、符合相关 法律法规要求。
查证核实
对供应商的资质、证书等进行核实， 确保其具备生产优质菌种的能力。
签订合同
双孢菇栽培工艺技术流程
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人工栽培双孢菇可以分为以下几个阶段：1. 制备培养料双孢菇的培养料主要包括棉籽壳、稻草、玉米芯等植物秸秆。
双孢菇生产工艺流程
双孢菇生产工艺流程1. 培育菌种：选择高质量的双孢菇菌种进行培养，通常是通过遗传育种或者自然分离获得高产菌种。
培育好的菌种用于接种培养基。
2. 制备培养基：双孢菇的培养基一般由秸秆、麸皮、玉米秸秆等原料混合而成，经过处理后得到适合双孢菇生长的培养基。
3. 接种培养基：在适宜的环境条件下，将培育好的菌种接种到培养基中，进行培养。
4. 发酵培养：将接种好的培养基进行固态或液态发酵，促进双孢菇的生长和繁殖。
5. 培养条件控制：控制好适宜的温度、湿度、光照和通气等条件，保持良好的生长环境。
6. 收获成品：在双孢菇的生长周期内，定期检查双孢菇的生长情况，当双孢菇成熟时进行收获。
7. 包装和储存：将收获的双孢菇进行清洗、分类和包装，采用适当的包装材料使其能够长时间保存。
通过以上生产工艺流程，可以生产出高质量的双孢菇产品，满足市场需求，并为人们提供新鲜、健康的食用菌产品。
双孢菇的生产工艺流程可以分为培育菌种、制备培养基、接种培养基、发酵培养、培养条件控制、收获成品及包装和储存等步骤。
在这些步骤中，每一个环节都需要严格控制和管理，以确保双孢菇生产的质量和产量。
在培育菌种的阶段，首先需要选择高质量的双孢菇菌种，这一步是整个生产过程中非常重要的一环。
优质的菌种不仅能够保证双孢菇生产的质量，同时还能够提高产量和抵抗力。
培养好的菌种用于接种培养基。
制备培养基的过程也非常关键，因为培养基是双孢菇生长的基础和提供养分的来源。
一般来说，双孢菇的培养基由秸秆、麸皮、玉米秸秆等原料混合而成，经过适当的处理后得到适合双孢菇生长的培养基。
培养基的质量和配方对双孢菇的生长和产量有着直接影响。
接种培养基是指将培育好的菌种接种到培养基中，进行培养。
这一步骤的目的是使菌种有效地扩散并利用培养基中的养分，从而快速生长和繁殖。
在接种之后，需要进行发酵培养，将接种好的培养基进行固态或液态发酵，促进双孢菇的生长和繁殖。
发酵培养的条件和时间需要根据不同的情况进行调控，以获得理想的发酵效果。
双孢菇三级菌种制作规程原料处理,基本配方,基质混合,装瓶操作,灭菌冷却,接种操作
双孢菇三级菌种制作规程原料处理,基本配方,基质混合,装瓶操作,灭菌冷却,接种操作双孢菇三级种多以麦粒为原料，但在实际生产中发现污染率较高，或出现异常现象，导致生产计划难以落实，究其原因，就是菌种生产操作的不规范所致。
现在，又到双孢菇三级种的生产时间，特提出具体规范操作技术，供菇农朋友参考。
1.原料处理：牛粪破碎处理后过筛，按1∶1.2加水拌匀，堆积发酵，每天翻堆一次，约20天左右，牛粪粉变为褐色、具有正常发酵草料的清香气味，晒干备用。
无受潮的小麦，充分泡透后捞出，适当遮荫、通风，发现表皮发干时，轻喷细雾湿润，24小时即可发芽，待麦芽长至1~2厘米时，即可使用。
如果有虫蛀麦粒，也可使用，但虫蛀后的麦粒有孔洞，淀粉易流出，所以，必须多清洗几遍；然后倒入PH值8～9的石灰水中，浸泡6小时后煮20分钟左右，至麦粒无白心时，捞出麦粒，冷水冲洗后即可。
2.基本配方：麦粒（以干品计）100公斤，牛粪粉30公斤，石膏粉1公斤，碳酸钙1.5公斤。
3.基质混合：将麦粒与牛粪粉按1∶0.2比例混合，并同时拌入其它辅料，注意使牛粪全部粘附到麦粒上，水分不足时适量喷水。
剩余牛粪粉待用。
4.装瓶操作：一般小批量生产多不采用标准瓶，而利用***瓶、葡萄糖玻璃瓶等，装瓶灭菌。
为降低生产成本，可用500毫升输液瓶。
先装一把牛粪粉在瓶底，约1~1.5厘米厚，再装麦粒，装瓶时稍墩瓶，使麦粒至瓶肩以下1厘米处，然后，再装入1~2把牛粪粉，并用“L”形工具将之摊平、压死，之后塞入棉塞。
5.灭菌冷却：采用高压灭菌方法，压力维持在0.15MPa，保持2～2.5小时。
灭菌结束后，压力下降至零后，可取出料瓶，移入冷却室或接种室，室内提前3天清理干净，并喷洒百病傻溶液；至料瓶降温至30℃时即可接种。
6.接种操作：室内喷洒一遍赛百09溶液后，将原种用75%***精擦洗一次，打开接种净化机，10分钟后即可开始接种操作。
每瓶（500毫升）原种可接40瓶以上。
双孢蘑菇生产技术规程
抱蘑菇生产技术规程（DB41/T947—2014）1范围本标准规定了双抱蘑菇生产的术语和定义、栽培环境和栽培基质、菌种、生产季节、菇房建造、培养料配制、播种和发菌期管理、覆土、出菇期管理、病虫害防控、采收和贮藏、生产档案建立和记录。
本标准适用于河南省双孢蘑菇的生产。
2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 5749生活饮用水卫生标；隹GB/T 8321 （所有部分）农药安全使用准则GB/T 12728-2006食用菌术语GB 19171-2003双抱蘑菇菌种NY/T 393-2000绿色食品农药使用准则NY/T 528-2010食用菌菌种生产技术规程NY 5099-2002无公害食品食用菌栽培基质安全技术要求NY 5358-2007无公害食品食用菌产地环境条件3术语和定义GB/T 12728-2006界定的以及下列术语和定义适用于本文件。
3.1菇房用于生产的房屋及设施。
3.2堆料将培养料按一定规格堆制发酵的过程。
3.3前发酵也称一次发酵或室外发酵。
培养料在室外堆制自然发酵的过程。
3.4后发酵也称二次发酵或室内发酵。
经过一次发酵的培养料，在室内控温条件下进行巴斯德消毒发酵的过程。
4产地环境和栽培基质4.1产地环境应符合NY 5358-2007的规定。
无污染和生态条件良好，周围3 km以内没有污染企业。
地势高燥平坦，交通便利，空气清新，水质良好，排灌方便。
4.2栽培基质应符合NY 5099-2002的规定，生产用水应符合GB 5749的要求。
5菌种5.1品种选择选用优质、高产、抗逆性强、适应性广、商品性状好的品种。
5.2菌种生产按GB 19171-2003和NY/T 528-2010 的规定执行。
6生产季节根据双孢蘑菇生长发育的特性，利用自然气温安排生产，7月下旬〜8月中旬堆制培养料，9月上旬前后播种，9月中旬〜9月下旬覆土，10月初〜12月中旬为秋菇生长期，12月下旬〜翌年3月上旬为越冬期，翌年3月中旬〜4月下旬为春菇生长期。
双孢菇生产技术流程2
双孢菇生产技术流程一. 品种选择1．AS2796：目前生产上大面积推广品种。
该菌株为杂交型，菌丝白色，基内和气生菌丝均很发达，菇体圆整、盖厚、色白、商品性状较好。
10－32℃菌丝均能正常生长，最适温度为24－28℃。
出菇温度10－24℃，最适温度为14－20℃。
耐肥、耐水和耐高温，适于用二次发酵培养料栽培。
2．F56、F60、F62品系：菇体洁白，圆正，质密，商品率高。
转潮快，后劲足，抗杂力强，并对培养料适应广泛，抗逆性强。
3．夏季种植可选“新登96”，出菇温度20-35度。
二. 原料配方原料配方：麦草2250公斤、干鸡粪750公斤、菜籽饼100公斤、过磷酸钙40公斤、石灰50公斤、石膏75公斤注：稻草要求新鲜、干透、无霉变，鸡粪要求新纯度高，石灰、石膏等辅料要求纯度要高。
三．温室生产布局在温室地面种植双孢菇，由北到南制畦宽度及路面分布分别为1m畦、0.5m路循环、靠北墙规划0.6米宽的东西路一条。
四. 双孢菇生产规程/E_ReadNews.asp?NewsID=1511. 原料一次发酵原料发酵程序表(1) 预堆堆料场的选择上，要求选择地势较高、排水方便、又近水源的地方为堆料场地。
在建堆体积上，一般栽培100平方米，料堆长6米左右，宽2米左右，高1.7米左右。
稻草切短，在1%的石灰水中浸泡充分预湿，捞起随堆随踩成长方形，鸡粪碾碎过筛，均匀混入饼粉，加水预湿堆成长方形，含水量掌握在手抓成团放地松散即可。
（100公斤干粪肥加水110公斤拌匀）(2) 建堆底层铺30cm厚的稻草，然后交替上鸡粪（3cm）和稻草，每层高度25cm左右，层数10-12层，一直堆到料高达1.5米左右，铺稻草时既要疏松抖乱，又要扎边切墙，料对边应基本垂直，铺盖粪肥要求边上多，里面少，下层少，上层多，从第三层起开始均匀加入水和尿素，并逐层增加。
顶层保持鸡粪厚层覆盖，增加上层压力，水分掌握在有少量水流出为准。
（3）翻堆翻堆时应上、下、里、外、生料和熟料相对调位，把粪草充分抖松，干湿拌合均匀，各种铺助材料按程序均匀加入。
简述三级菌种的制作流程
简述三级菌种的制作流程三级菌种的制作流程可有趣啦，就像一场小小的微生物冒险呢。
一、准备工作。
咱们得先把材料准备齐全呀。
需要有合适的基质，就像微生物的小床一样。
这个基质可以是麦粒呀、木屑之类的。
麦粒要选那种饱满的，就像挑小胖子麦粒似的，它们营养丰富，能让微生物吃得饱饱的。
木屑呢，要新鲜的，可不能是那种受潮发霉的哦，不然微生物会很不开心的。
然后还有装基质的容器，像小瓶子或者小袋子都可以。
当然啦，也不能少了接种的工具，比如接种针之类的，这可是把微生物种子种到基质里的重要家伙。
另外，还得有个干净卫生的环境，就像给微生物盖个小城堡，要把制作的地方打扫得干干净净的，细菌灰尘啥的都不能有太多，不然会打扰到微生物的生活的。
二、基质处理。
麦粒要先泡一泡，就像给它们洗个舒服的澡。
泡的时间可不能太长也不能太短，大概几个小时就好，让它们吸饱水。
然后要煮一煮，煮到麦粒变得软软的，但是又不能太烂，这就很考验功夫啦。
煮好之后还要沥干水分，就像把麦粒从水里捞出来擦干身子。
木屑呢，要是太粗了就得粉碎一下，让它变得细细的，这样微生物住起来才舒服。
处理好的基质还要加点营养物质，就像给微生物加餐一样，可以加些石膏粉之类的，能让它们长得更壮实。
三、灭菌。
这一步可重要啦。
要把装有基质的容器放到灭菌锅里，就像把微生物的小床放进大蒸锅里一样。
然后高温灭菌，这个温度要足够高，时间也要足够长，把那些杂菌都统统消灭掉。
就好像是在给微生物的小世界来一场大扫除，只留下干净的空间给我们想要的菌种。
灭菌完了之后，可不能马上打开，要让它慢慢降温，就像让刚蒸完桑拿的小容器冷静一下。
四、接种。
等基质冷却好了，就可以接种啦。
把我们的二级菌种像宝贝一样小心翼翼地接到基质上。
用接种针挑一点点二级菌种，轻轻地放到基质里，就像把小种子种到土里一样。
这个过程要快，而且要在很干净的环境里进行，不然那些杂菌又会趁机跑进来捣乱了。
五、培养。
接种好之后，就要把这些小容器放到合适的地方去培养啦。
双孢菇生产工艺
双孢菇生产工艺一步：对原料进行化验主要原料：麦秸、鸡粪、豆粕等。
二步：对原料进行充分浸泡，预湿主要对麦秸、鸡粪通过机械碾压的手段充分预湿。
同鸡粪充分搅拌均匀，为后期闷堆发酵做好充分准备。
三步：闷堆闷堆12—24小时，目的是充分对鸡粪进行发酵，为下一步拌料做准备。
四步：拌料将石膏，尿素，豆粕按所需成分比例搅拌均匀后均匀撒在料堆上搅拌均匀。
五步：一次发酵发酵温度控制在75—82摄氏度内。
经过13—15天得发酵腐熟而完成第一次发酵。
首先培养料颜色发酵腐熟后为棕褐色，有极浓的氨水味，有粘干得感觉，含水量70—78%.六步：二次发酵在全封闭的环境下进行发酵。
一般需6—8天时间。
湿度55—60%温度45—48摄氏度。
达到麦草无氨味，质地松软为好。
七步：播种、打菌包选择大型播种机，打包机均匀把菌种播入包内。
包做到有角有边，一般重量25千克，每个包播种量120克左右。
八步：菌包培养一般发菌期为14天，温度控制在22—25摄氏度，湿度应该保持在60—70%.九步：覆土1.土为涵水力强，透气性好的草炭土。
2.用3—5%的甲醛充分进行搅拌。
3.用覆土机均匀上料到菇床，覆土厚度为3—4cm为宜。
十步：出菇温度控制在15.5—16.5℃湿度控制在93%以上，二氧化碳含量1500毫克/升。
十一步：采摘采摘前两天应该停止浇水。
采收应分级装箱，共分为三级。
A1：4cm以上.A2:4—3.5cm.A3:3.5—2cm.采收方法：用手握住菇盖朝一个方向转动双孢菇再向上把菇提出来。
双孢蘑菇菌种制作农事
双孢蘑菇菌种制作农事当前，上海地区秋季双孢蘑菇的原种、栽培种的制备工作已经开始了，菌种生产单位应注意以下各个方面：1．母种方面，必须引自有菌种生产资质的单位，且引进的母种已进行出菇试验并能成功出菇。
2．原辅料方面，投入使用的原辅料必须无霉变、无结块、无虫蛀现象。
需要堆置的棉籽壳、牛粪等应按要求进行堆置、发酵，如牛粪，可堆置发酵后晒干备用。
3．配料、拌料、装瓶方面，①原辅料配比应适宜，牛粪需预湿后拌入，防止干心；②混合培养料的水分应控制在55%左右，过干，菌丝稀疏无力，过湿，瓶底易积水，菌丝吃料缓慢；③人工安排应合理，拌料、装瓶的速度要快，装瓶结束应及时灭菌，防止培养料在灭菌前发生酸败，影响菌丝吃料。
4．灭菌方面，采用高压灭菌的应确保压力不低于0.13MPa，保持2小时；采用常压灭菌的应确保温度达100℃，保持时间8小时。
以上灭菌前提是保温保压之前应排除锅内冷空气，锅体内的蒸汽孔不堵塞，各部位蒸汽流通良好，灭菌锅的压力表应定期送检，以确保灭菌操作的安全性和准确性。
5．冷却方面，灭菌结束后，应先小开锅门，利用余热烘干棉塞，然后将料瓶搬入预先消毒好的环境中冷却，防止带菌冷空气倒吸造成料瓶污染。
6．接种方面，应注意以下几点：①严格进行母种、原种的挑选，对菌丝形态可疑的菌种应摒弃不用；②选择适宜菌龄的菌种作为种源，母种菌丝满管后一周内使用完毕，原种菌丝满瓶后2周内使用完毕（种源菌丝满管或满瓶后置于5~10℃暂存）；③备用种源、接种环境、接种工器具、接种手应严格消毒；④接种时发现湿的棉花塞应严格进行更换（新的棉花塞与料包一起灭菌备用），这是预防菌种在培养过程中发生链孢霉的最有效措施。
7．菌种培养方面，做好以下几点：①培养室排放的菌种应做好标识，包括接种日期、数量、名称等，遵循先进先出的原则；②培养室应避光、干燥、恒温，对安装控温设施的应注意用电安全；③应定期进行培养室的消毒，尤其是目前处于梅雨季节，应更加注意菌种场环境卫生的控制，以确保菌种的质量；④菌丝封面后应及时检查菌种的杂菌污染情况，对污染的菌种一定要及时挑出并远离菌种场处理，特别是链孢霉污染的菌种应用尼龙袋套住，防止杂菌孢子到处弥漫。
菌种制作技术
培养 三级菌种
原种、栽培种的制作流程
按配方称取原料→拌料→装瓶（袋）→ 打 洞 （ 孔 径 1cm 深 至 瓶 底 ） → 灭 菌 （ 1.5kg ／ cm2 ， 1.5~2h ） → 冷 却 → 接 种 （ 接 入 黄 豆 大 小 一 块 ） → 培 养 （ 25℃ ~27℃ ） → 菌 丝 长 满 瓶 （ 袋 ） → 培 养 7d~8d→扩大成栽培种。
木 屑 50kg 、 麸 皮 15kg 、 黄 豆 粉 1kg 、 蔗 糖 0.75kg、MgSO4 0.25kg、水70~75kg。 ⑸棉籽壳培养基（平菇、猴头、金针菇）
棉籽壳99.7%、蔗糖0.1%、石膏0.2%、水适量。
（三）培养基配制步骤
称料 拌料
1.不溶性主、辅料混拌均匀 2.可溶性辅料溶于水后拌入主辅料 3.注意检查含水量（手测法等）
母种转管次数多了会削弱菌丝的生活力，降 低出菇率，甚至造成菌丝不孕而不能形成子实 体。因此母种培育可以一次多培育几支试管， 不要反复多次分离转管，以确保菌丝旺盛的生 活力。
（发生异）
4、优良菌种的标准是什么？
各种食用菌菌种，既有特定的质量标准，也有 共同的质量标准。这些共同的质量标准主要是纯、 壮两条。
四.二、三级菌种的培养
菌种的培养实际就是对菌丝体的培养
场所清洁
培 养
温度约25℃
条 空气湿度60%~70%
件 空气清新
光线暗
勿堆放过挤
培 及时剔除污染瓶（袋） 养 方 栽培种的菌袋缺氧时可 法 刺孔增氧
控制菌龄（菌丝长满710天后使用）
五.二、三级菌种的质量鉴定
合 格 菌
菌丝白（或呈该菌种应有的颜色） 均匀、粗壮、有菇香味 接种后萌发快
培
第2节 二、三级菌种制作技术
④
制做培养基(料)的原料，有些代用原料理，
择
可用一些农副产品代替化学药品，常用的有马铃
经
薯、麦芽，玉米面、麦麸等。
济
实
在食用菌制种中，原种和栽培种因原料用量较
用
大，选择合适的代用原料，其经济意义就更大。
的
过去多用麦粒和玉米，现在可用锯木屑和棉籽
原
壳等来代替。但是选用代用料时，必须就地取材，
试管 (18mmXl80mm、20mmX200mm) 菌种瓶 (750mL、500mL盐水瓶或罐头瓶)
菌种袋(17cmX 33cm、14cmX 28cm等的聚乙烯或聚 丙烯插角、平底袋)
二、三级菌种制作技术-制种用品及材料
2、制种用品及材料 卡尺
(3)分装及检测用具
温度计
检测用 具有
pH试纸 生物显微镜
若原种直接用于生产，则成本太高，因此，原种 还必须进一步扩大繁殖成三级种，使菌种数量增多， 才能用于栽培。由于原种的培养基质接近栽培所用的 基质，因此原种也可用于小规模的栽培。
二、三级菌种制作技术-菌种定义
2、三级种
三级种又称栽培种，它是由二级种进一步扩大繁 殖而得。
栽培种的培养基质与二级种相似，更接近于栽培 基质。三级种数量多、成本低。
半合成培养基
在天然培养基中适当添 加一些无机盐类，或者在 合成培养基中添加少数天 然有机物质配制而成。
培养基的优点是营 养全面丰富、宜于控 制。常用的有综合马 铃薯培养基等。
一 、菌种的制作 3、菌种培养基的制备 （2）培养基的类型 ②物理状态
液体培养基
培养基呈 液体状态。 它含有食用 菌菌丝生长 发育所需要 的各种营养 物质。
养
比，一般碳氮比(C：N)以20:1为好。
双孢蘑菇制种技术
双孢蘑菇制种技术一、配制原则和种类（一）培养基配制原则１、培养基：培养基是提供食用菌等生物生长发育所需的营养与特定环境条件的基质，如蘑菇菌是有机营养型中的草腐生菌。
制备培养基不仅要考虑它所需要的含碳化合物、含氮化合物、矿物盐类、生长因子，还要考虑水与pH环境，同时还应考虑它们培养方式是固体培养还是液体培养。
因此，可以把按菌类生长发育需要比例配制的灭菌营养基质，称为培养基。
换言之，培养基必须具备三个条件：含有菌株生长发育所需要的营养物质；具有菌类生长环境条件；经过灭菌，并保持无菌状态。
２、培养基的选择：在整菌种制备过程中，从母种到原种、栽培种，各个阶段的目的要求有所不同，所选用的培养基的配比也应有所区别。
一般母种初生菌丝较嫩弱，分解养分能力差，要求营养丰富、完全，氮源、维生素的比例应高。
须选用易于被菌丝吸收利用的物质，如葡萄糖、蔗糖、马铃薯、蛋白胨、无机盐类及生长素等为等而原种、栽培种所需数量较多，且菌丝分解能力强，可利用大量农作物秸秆、粪草、棉籽壳、麸皮、米糠等原料作为培养基。
（二）培养基的种类１、根据营养物质的来源，可以把培养基分炎天然培养基、半合成培养基和合成培养基。
（１）天然培养基天然培养基是指用化学成分还不清楚或化学成分不恒定天然有机物配制而成的培养基，如各种农副产品及其下脚料──小麦、大豆、玉米粉、麸皮、米糠、作物秸秆、木屑、棉籽壳、甘蔗渣等，以及动植物组织的浸出液──牛肉膏、肉汤、马铃薯汁、麦芽汁、豆芽汁等都可以用来配制天然培养基，这种培养基来源广，成本低，营养丰富，适合于在生产上大规模培养菌类使用，但这些天然有机物质因产地、品种、生长期的不同，化学成分不能宣。
每批成分也不稳定，不宜用来做精细的科学实验。
以分离驯化食用菌培养基（２）半合成培养基为了促进食用菌菌丝的生长发育，常在天然培养基中添加适量的无机盐类，或在合成培养基中添加适量的某些天然有机物，就成为半合成培养基。
这类培养基种类繁多，应用广泛，也是生长菌种和实际栽培最常用的培养基。
二、三级菌种制作技术 Microsoft Word 文档
二、三级菌种制作技术二、三级菌种营养条件相同，制作方法一致，所不同的是二级菌种(原种)是由一级菌种(母种)扩大培养来的，而三级菌种(栽培种)是由二级菌种扩大培养来的。
因此，相同内容一起介绍。
二、三级菌种生产的工艺流程为：配料(配制培养基)→装瓶(栽培种可以用塑料袋) →灭菌→接种→培养一、二、三级菌种培养基的配制(一)二、三级菌种培养基配制原则1．选择适宜的营养物质。
2．营养物质间配制的比例要恰当。
3．选择经济实用、来源广泛的原料。
4．适宜的pH值和含水量。
(二)二、三级菌种培养基常用的配方1．木屑培养基：阔叶树木屑78%，麸皮(或米糠)20%，蔗糖1%，石膏粉1%。
这是常见的木屑培养基配方。
适于制作香菇、平菇、黑木耳、金针菇、滑菇、灵芝、猴头菇等多种木腐型菌种。
2．棉籽壳培养基：棉籽壳78%，麸皮(或米糠) 20%，蔗糖1%，石膏粉1%。
适用于制作金针菇、平菇、凤尾菇、草菇、银耳、黑木耳、猴头菇等菌种。
注：其它配方参见课本。
(三)二、三级菌种培养基配制的具体方法及步骤1．称料：先称主料，再称辅料2．拌料：(1)将不溶性主料和辅料拌匀。
(2)将可溶性辅料加水制成母液，用时稀释。
(3)二者混合均匀，堆放片刻，使其吸足水分。
(4)检查含水量(手测法、称重法)3．调节pH值：因灭菌和代谢酸会使pH值下降，故灭菌前应将pH值比指定要求调高1左右。
pH值测定方法：用pH试纸测定并用1%的石灰水上清液或1%过磷酸钙澄清液调节。
4．分装培养料：分装容器：750ml菌种瓶，500ml罐头瓶，菌种袋分装要求：上紧下松，外紧内松，中间一个洞(直径 1～1.5cm)5. 清洁(洗或擦)瓶、袋外壁。
6．封口：菌种瓶用二层报纸或一层牛皮纸外加一层薄膜封口；菌种袋用袋口环套封口。
二、二、三级菌种培养基的灭菌1．灭菌方法及要求高压蒸汽灭菌：压力1.5kg/cm3，温度126～128℃，时间1～1.5h(谷粒和经过堆制发酵的粪草培养基应达到2～2.5h)。
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双孢菇三级菌种制作规程
双孢菇三级种多以麦粒为原料，但在实际生产中发现污染率较高，或出现异常现象，导致生产计划难以落实，究其原因，就是菌种生产操作的不规范所致。
现在，又到双孢菇三级种的生产时间，特提出具体规范操作技术，供菇农朋友参考。
1.原料处理：牛粪破碎处理后过筛，按1∶1.2加水拌匀，堆积发酵，每天翻堆一次，约20天左右，牛粪粉变为褐色、具有正常发酵草料的清香气味，晒干备用。
无受潮的小麦，充分泡透后捞出，适当遮荫、通风，发现表皮发干时，轻喷细雾湿润，24小时即可发芽，待麦芽长至1~2厘米时，即可使用。
如果有虫蛀麦粒，也可使用，但虫蛀后的麦粒有孔洞，淀粉易流出，所以，必须多清洗几遍；然后倒入PH值8～9的石灰水中，浸泡6小时后煮20分钟左右，至麦粒无白心时，捞出麦粒，冷水冲洗后即可。
2.基本配方：麦粒（以干品计）100公斤，牛粪粉30公斤，石膏粉1公斤，碳酸钙1.5公斤。
3.基质混合：将麦粒与牛粪粉按1∶0.2比例混合，并同时拌入其
它辅料，注意使牛粪全部粘附到麦粒上，水分不足时适量喷水。
剩余牛粪粉待用。
4.装瓶操作：一般小批量生产多不采用标准瓶，而利用酒瓶、葡萄糖玻璃瓶等，装瓶灭菌。
为降低生产成本，可用500毫升输液瓶。
先装一把牛粪粉在瓶底，约1~1.5厘米厚，再装麦粒，装瓶时稍墩瓶，使麦粒至瓶肩以下1厘米处，然后，再装入1~2把牛粪粉，并用“L”形工具将之摊平、压死，之后塞入棉塞。
5.灭菌冷却：采用高压灭菌方法，压力维持在0.15MPa，保持2～2.5小时。
灭菌结束后，压力下降至零后，可取出料瓶，移入冷却室或接种室，室内提前3天清理干净，并喷洒百病傻溶液；至料瓶降温至30℃时即可接种。
6.接种操作：室内喷洒一遍赛百09溶液后，将原种用75%酒精擦洗一次，打开接种净化机，10分钟后即可开始接种操作。
每瓶（500毫升）原种可接40瓶以上。
7.发菌培养：培养室（棚）提前清理卫生，地面灌水，地毯式喷洒百病傻溶液，密闭2天后，地面撒施石灰粉，即可将接种后的菌种移入。
发菌期间，尽量控制温度在25℃左右，不超过28℃，安装水温空调的最低可降至22℃左右，一般农户不具备条件，可采用土法降温：
发菌棚内地面码砖20厘米高，铺上新塑膜，将菌种瓶立式排入，灌入地下水，每天换水1～2次，即可使菌瓶内温度保持25℃以下。
每3天左右喷洒一次药物以作预防，可采用百病傻与赛百09交替；发现有菇蚊类成虫时，随即喷施高效氯氰菊酯杀灭。
8.剔杂处理：接种后第三天，即开始检查剔杂，发现任何非双孢菇菌丝的菌瓶，随即移出室外，有链孢霉污染的，应用方便袋从上往下套住菌瓶，慢慢移出。
对一般杂菌的污染，可喷施药物后将料倒出，晒干后再次利用；对链孢霉污染，应远离培养室倒料，并予焚烧或深埋，空瓶用70℃以上热水烫杀，洗净后再用。
9.暂时保存：经35～45天，菌种完成发菌，暂时不用的菌种，应予低温存放，一般保持2℃～4℃条件即可。
10.质量检验：双孢菇的菌丝浓白、清晰，生长有力，呈扇形生长，绒毛状菌丝多，整齐，气生菌丝洁白；现在采用最多的“2796”属半气生型品种，其菌丝旺盛、一致；没有黄白色厚菌被；菌丝浓白粗壮，遇高温时微黄，可出现少量束状菌丝，上下均匀一致。
瓶内菌丝生长不健壮、呈散乱状态，或有“退菌”、“断菌”现象，料转色、结块或干缩，出现白色、浅黄色圆形块状物或不规则暗斑，有杂菌和螨类滋生，无蘑菇香味，具漂白粉或腥臭味等，均为不合格
菌种。
若菌丝呈淡黄白色，且菌丝萎缩，生长无力，或生长中就有菌被形成，则为培养基较湿或较老的菌种；菌种瓶内上部菌丝收缩变干，下部菌丝生长尚好，为培养基过干，培养温度过高；如果生长不均匀，表明麦粒浸泡和预煮时间不够；若生长中菌丝渐变黄，表明培养温度过高；若菌种瓶内上方出现很厚的菌被，是生产性能差或生理性状老化的菌种，不宜使用。
一直在高温条件下培养的菌种，播种后不易吃料，发菌慢。