大豆蛋白酶解的研究
大豆酶解蛋白的应用原理
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大豆酶解蛋白的应用原理1. 引言大豆酶解蛋白是一种常见的食品加工技术,它通过酶解蛋白质分子,改变其结构和功能。
这种技术被广泛应用于食品工业,特别是大豆制品的生产中。
本文将介绍大豆酶解蛋白的应用原理,以及其在食品工业中的重要性。
2. 大豆酶解蛋白的原理大豆酶解蛋白基于酶的作用原理,将大豆中的蛋白质分子通过特定的酶解剂进行酶解。
这些酶解剂可以是多种酶,如蛋白酶、胰蛋白酶等。
酶解的过程中,蛋白质分子的肽键被酶水解,从而使蛋白质的结构和功能发生改变。
3. 大豆酶解蛋白的作用大豆酶解蛋白能够改变大豆蛋白质的性质和功能,从而在食品工业中发挥重要作用。
以下是大豆酶解蛋白的主要应用:•增加水解蛋白含量:大豆中的蛋白质经过酶解后,可以得到更多的水解蛋白,提高食品的蛋白含量。
这对于需要高蛋白质的食品产品,如肉制品、乳制品等,具有重要意义。
•改善食品口感:大豆蛋白质经过酶解后,其结构和功能发生改变,可以改善食品的质地和口感。
例如,在肉制品中添加酶解大豆蛋白,可以增加肉制品的嚼劲和口感。
•增强食品稳定性:酶解大豆蛋白可以形成胶状物质,在食品中具有较好的稳定性。
这使得酶解大豆蛋白在制造乳制品、调味品等需要稳定性的食品产品中得到广泛应用。
•改善食品营养价值:大豆蛋白质是一种优质的蛋白质,酶解后蛋白质的消化吸收率更高。
因此,酶解大豆蛋白可以提高食品的营养价值,增加人体对蛋白质的摄入。
4. 大豆酶解蛋白的生产工艺大豆酶解蛋白的生产工艺可以分为以下几个步骤:1.原料准备:选用优质的大豆作为原料,进行清洗和筛选,去除杂质和不良豆。
2.浸泡蒸煮:将清洗后的大豆浸泡在水中,然后进行蒸煮处理。
蒸煮的时间和温度要根据具体产品的要求进行控制。
3.酶解处理:将蒸煮后的大豆与酶解剂混合,进行酶解处理。
酶解的时间和温度要根据具体的酶种和大豆品种进行控制。
酶解结束后,通过加热杀酶或其他方法停止酶反应。
4.离析和浓缩:将酶解后的混合物进行离析,分离出液相和固相。
大豆蛋白的功能性改善研究
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大豆蛋白的功能性改善研究随着人们对健康饮食的关注度越来越高,大豆蛋白作为一种重要的植物蛋白源,受到了越来越多的关注。
然而,传统的大豆蛋白存在一些功能性方面的限制,比如口感不佳、稳定性较差等。
因此,研究者们开始试图通过一些手段来改善大豆蛋白的功能性。
首先,利用酶解技术来提升大豆蛋白的功能性已经成为一个热门的研究方向。
通过酶解,可以将大豆蛋白分解成相对较小的肽段,从而改善其溶解性和稳定性。
同时,酶解还能使大豆蛋白具备一定的生理活性,如降低胆固醇、抗氧化等。
因此,酶解技术被广泛应用于大豆蛋白的功能性改善中。
其次,利用纳米技术来改善大豆蛋白的功能性也成为一个研究热点。
纳米技术可以将大豆蛋白分散成纳米级乳液,从而提高其可溶性和稳定性。
此外,纳米技术还能改善大豆蛋白的可口性和咀嚼感,使其更适合用于食品加工。
因此,利用纳米技术改善大豆蛋白的功能性已经成为一个备受关注的技术手段。
此外,利用改性技术来改善大豆蛋白的功能性也具有一定的潜力。
改性技术可以通过改变大豆蛋白的结构和性质,来提高其功能性。
比如,通过酸碱处理、酶解、热处理等手段,可以调节大豆蛋白的溶解度、凝聚性、胶模能力等。
同时,改性技术还可以提高大豆蛋白的稳定性和乳化性,从而改善其适用性。
除了上述几种常见的研究方法外,一些新兴的研究方向也值得关注。
比如,利用基因工程技术来改良大豆蛋白的功能性,可以通过调控特定基因的表达来提高其营养价值和功能性。
此外,还有一些研究者尝试将大豆蛋白与其他植物蛋白进行复配,以期提高其功能性和应用价值。
在大豆蛋白功能性改善的研究中,当然也存在一些挑战。
首先,由于大豆蛋白本身的复杂结构,改善其功能性并非易事,需要研究者们投入更多的时间和精力。
其次,大豆蛋白改性涉及到一些复杂的技术和工艺,需要技术研究的支持。
此外,大豆蛋白的应用范围也需要进一步扩展,以满足人们不同的需求和口味。
总结起来,大豆蛋白的功能性改善研究是一个富有挑战又具有广阔应用前景的领域。
Alcalase水解大豆蛋白制备大豆蛋白寡肽的研究
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白质 含量很接近¨。大豆蛋 白是植物 性食物 中氨基酸 j 组成 比例最合理 、最接近于 F / AO WHO理想模式 的蛋 白质 。由于大豆 蛋 白质 分子结构复杂 ,分予量较 大(0 8
%大豆蛋 白质 分子量均在 1 0万 L ,所 以其 溶解度 )
Ab t a t Th fe t o v r l a t r o e ac ls —aa y e y r lsso y e n p o en s c st ee z med s g , e e a r , sr c : ee c s f e ea fc o s nt laa e c tl z d h d o y i fs b a r t i , u ha h n y o a e tmp rt e s h o u p v lea dr a t n t , r t de . eo o o a s s o dt a e o t z d h d o y i c n i o s r sf l w: H au f . , H au n c i i wee s id T ah g n l e t h we t h p i e y lss o dt n ea l e o me u h t h t mi r i we o o p v leo 5 7
水解 液 水解 度 达到 了 2 .%。 41 关键 词 :A cl e 大豆 蛋 白 ; 水解度 l a ; as 中 图分 类号 :T 2 1 ;文 献标 识码 :A;文 章篇 号 : 7—082 0 )1 0 1 3 S0, 2 1 39 7 (0 71- 5 - 6 0 0
Pr pa a i n o o be n O l o ptde c l s — a a y e dr l i f e r to fS y a i pe i sbyAl a a e c t l z d Hy oysso g S y e n Pr t i o b a o en
木瓜蛋白酶对大豆分离蛋白水解作用研究1
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r木瓜蛋白酶对大豆分离蛋白的水解作用研究1黄惠华何铁剑许南燕f华南理工大学食品与生物工程学院,510641)摘要用木瓜蛋白酶对大豆分离蛋白进行了酶解研究,结果表明:以大豆分离蛋白作为底物,木瓜蛋白酶的反应动力学参数妇l值为0.34%,酶的最适反应pH值为7.5,在pH争O的碱性条件下有较好的适应性。
酶的最大反应温度为60"(2。
在此温度条件下,温浴180分钟仍能保持70%的酶活。
2.0%一2j%的大豆分离蛋白溶液经木瓜蛋白酶水解后,丝氨酸、苏氨酸、脯氨酸、组氨酸、蛋氨酸等游离氨基酸含量明显增加,大豆多肽每lOOml提高92--94mg,等电点分布范围变宽,由原来大豆分离蛋白的pH3.1~4.3变为pH3.1—5.5。
关键词:大豆多肽木瓜蛋白酶大豆分离蛋白AStudyOilHydrolysiswithPapainonIsolatedSoybearl.ProteinHuangH“ihuaHeTiojian)(nNanyang(SouthChinaUniversityofTechnology)Abstract:Thispaperdealswiththe坶drolysis0nisolatedsoybeanproteinwithp舢.Themsultsshowthatthekmvalueofpapa/nwithisolatedsoybeanproteinassubstratewas3.4%.TheoptimumtemperatureandpHvaluewas60"CandpH7.5.Papainwasadapmbletoconditionsof60"(2andpH9.0.Peptidewerereleasedwithi.nercmentof92·94mg/lOOmlwhiletheSolutionofisolatedsoybeanprotein埘tll2.0-2.5%Washydrolyzcdbypapain.Andtheisoeleetricpointsofthepepti幽swererange.dfrompH3.ItopH55keynords:peptideofsoybeanpapainisolatedsoybeanprotein1、前言大豆含有近40%的蛋白质,开发大豆蛋白系列产品,对于充分利用我国的现有食品资源,改善我国人民的膳食结构有着重要的意义。
大豆蛋白纤维的生物降解性研究
![大豆蛋白纤维的生物降解性研究](https://img.taocdn.com/s3/m/a3c470937e192279168884868762caaedc33ba7b.png)
大豆蛋白纤维的生物降解性研究随着环境保护意识的提高和可持续发展的要求,研究生物降解材料变得愈发重要。
大豆蛋白纤维作为一种天然的生物降解材料,因其独特的结构和优良的性能而备受关注。
本文将对大豆蛋白纤维的生物降解性进行研究,并探讨其在环境保护和可持续发展中的应用前景。
大豆蛋白纤维是一种由大豆蛋白质提取而得的纤维素材料。
它具有许多优良的性能,如良好的强度、柔软度、透气性和抗菌性。
在纺织行业,大豆蛋白纤维常被应用于服装、床上用品和家居用品等领域。
然而,与传统的合成纤维相比,大豆蛋白纤维的生物降解性能具有显著优势。
生物降解性是评价材料对环境友好性的重要指标之一。
对于大豆蛋白纤维而言,其生物降解过程主要分为酶解和微生物降解两个阶段。
在酶解阶段,蛋白酶将大豆蛋白纤维分解为小的多肽链和游离氨基酸。
而在微生物降解阶段,微生物会进一步分解这些多肽链和氨基酸,最终将大豆蛋白纤维完全降解为无毒的物质,如水、二氧化碳和氨。
这个过程不会对环境造成污染,并且可以为土壤提供养分。
大豆蛋白纤维的生物降解性能受多种因素影响。
首先,大豆蛋白纤维的结构对其生物降解性能有重要影响。
大豆蛋白纤维由多肽链交织而成,而这些多肽链的结构特性决定了酶解和微生物分解的难易程度。
其次,环境条件也对大豆蛋白纤维的生物降解性能有一定影响。
例如,适宜的温度、湿度和酸碱度可以促进大豆蛋白纤维的降解过程。
最后,降解酶和微生物的种类和数量也是影响大豆蛋白纤维生物降解性的关键因素。
适当的选择和调控这些因素可以提高大豆蛋白纤维的生物降解性。
在环境保护和可持续发展方面,大豆蛋白纤维的生物降解性能使其成为替代传统合成纤维的理想选择。
与合成纤维相比,大豆蛋白纤维不会对环境和健康造成负面影响。
此外,大豆蛋白纤维的生产过程也相对环保,因为它主要通过天然的提取和化学合成过程完成。
因此,大豆蛋白纤维在纺织行业的应用前景广阔,并且在可持续发展方面具有重要意义。
然而,尽管大豆蛋白纤维的生物降解性能在理论和实验室研究中表现出良好的潜力,但在实际应用中仍面临一些挑战。
大豆蛋白酶解物抗氧化及促进微生物生长研究
![大豆蛋白酶解物抗氧化及促进微生物生长研究](https://img.taocdn.com/s3/m/c6b94306ba1aa8114431d972.png)
作者 简 介 :陈 美珍 (9 6 ) 15 一 ,女 ,福 建 人 ,副 教 授 .E m i hn @s . uc — al emz t e . :c ud n
维普资讯
汕 头大 学 学报 ( 自然 科 学 版 )
第3 期
V0.2 No3 12 .
文 章编 号 :10 — 2 7 20 )3 04 — 6 0 1 4 1 (0 7 0 — 0 3 0
大 豆蛋 白酶解物抗 氧化及促进微生物生长研 究
陈美珍 ,廖 灶辉 ,陈英歌 ,何锦 辉
( 头 大学 理 学 院 生 物 系 ,广 东 汕
1 . 水 解度 ( H) 定[ .3 3 D 测 】
称取 1.7g 豆蛋 白粉 ( 1 39 大 含 0g大豆 蛋 白 ) 2 0m 于 0 L蒸馏 水 中混 匀 ,配成 底 物浓 度为 5 %的大 豆蛋 白粉 悬 浊液 ,9 水 浴 预 处 理 1 n 0c c 0mi;然 后加 入 Acl e蛋 白酶水 la s a 解 2 ,水解 过 程滴 加 2m lLN O h o/ a H溶 液 调节 相 应 p 值 .按下 式 计算 水 解 度 :D = H H 日 a /mh×10 0 %.式 中 ,B为 消耗 碱 量 , 为 N O 的摩 尔 浓 度 ,a为 大 豆 蛋 白氨 基 aH 酸 的平 均 解 离度 ( p 当 H值 为 7时 ,a . ,m 为水 解 液 中蛋 白质 的 总质 量 () =04 4) g ,h为
解 最 佳 条 件 为 :p .、温 度 6 H9 0 5℃、底 物 酶量 比 10gmL 0 / ;酶解 9 i 0mn的酶 解 物 清 除 自由 基 能 力 最 强 ,酶 解 3 i 酶解 物 对 酵母 菌 生 长有 促 进 作用 , 酶解 6 i 解 物 对 酵母 菌 0m n的 0mn酶 的代 谢 作 用 显 著 ; 酶解 6 、9 i 酶 解 物 对 黑 曲霉 的 生 长 均 有 较 好 的 促 进 作 用 . 可 见 , 0 0mn的 酶 解 时 间不 同 ,酶 解 物 的抗 氧 化 活性 与 促 进 微生 物 生 长作 用 有 差 别. 关 键 词 :A cls 白酶 ;大 豆蛋 白酶 解 物 ;抗 氧 化性 ;促进 微生 物 生长 l ae蛋 a
大豆蛋白肽 多酶分步定向酶解技术
![大豆蛋白肽 多酶分步定向酶解技术](https://img.taocdn.com/s3/m/9b87e50de418964bcf84b9d528ea81c758f52ef7.png)
大豆蛋白肽多酶分步定向酶解技术1. 引言:大豆蛋白肽的重要性和研究意义(200字)大豆蛋白肽作为一种重要的蛋白质来源,具有广泛的应用前景。
它富含必需氨基酸,具有较好的生物活性和营养价值,不仅能够提供人体所需的营养物质,还具有一定的生理功能。
然而,大豆蛋白肽在天然状态下容易被人体消化酶降解,限制了其进一步的利用和开发。
研究人员通过不同的方法对大豆蛋白肽进行酶解,以提高其生物利用率和功能性。
在这些方法中,多酶分步定向酶解技术因其高效和灵活性而备受瞩目。
2. 多酶分步定向酶解技术的原理和步骤(600字)多酶分步定向酶解技术是一种复杂而高效的大豆蛋白酶解方法。
其基本原理是使用多种不同种类的酶,通过分步酶解将大豆蛋白酶解为多肽和小肽。
这种方法的优势在于,不同酶有不同的特异性和作用方式,可以针对不同的酶解活性和底物特性进行灵活组合,以实现对大豆蛋白的全面酶解和目标产物的高质量提取。
多酶分步定向酶解技术主要包括以下几个步骤:步骤一:选择适当的酶源根据目标产物的要求和酶源的特性,选择适合的酶源,如蛋白酶、胜肽酶、胡萝卜酶等。
不同酶源具有不同的特异性和酶解方式,可以根据需求进行组合使用。
步骤二:调整反应条件通过调节pH、温度等反应条件,以优化酶解过程。
不同酶对温度和pH的适应性不同,因此需要根据酶源的特性进行合理调节,以获得最佳的酶解效果。
步骤三:多维度酶解将选择的酶源按次序加入反应系统,分别进行酶解。
通过控制酶解时间和底物浓度,实现多维度的酶解,提高大豆蛋白酶解的效率和完整性。
步骤四:产物分离和提取将酶解后的反应液进行分离和提取,获得目标产物。
通过离心、过滤等方法,将多肽和小肽从反应液中分离出来,并进行后续纯化和检测。
3. 多酶分步定向酶解技术的优势和应用范围(600字)多酶分步定向酶解技术在大豆蛋白肽的酶解过程中具有许多优势。
通过灵活组合不同的酶源和调控反应条件,该技术可以提高酶解效率和底物完整性,从而获得更高质量的大豆蛋白肽产物。
大豆蛋白的研究进展
![大豆蛋白的研究进展](https://img.taocdn.com/s3/m/e8a2a3e46037ee06eff9aef8941ea76e58fa4a9e.png)
大豆蛋白的研究进展作者:赵博赵元寿苏小红来源:《甘肃科技纵横》2021年第12期摘要:植物蛋白包括大豆蛋白、小麦面筋蛋白、玉米醇溶蛋白等,其中大豆蛋白是最为优质的植物蛋白。
大豆蛋白不仅蛋白质含量高,而且质量亦高,是一种完全蛋白质,其在改进食品结构,发展新食品方面,大豆蛋白的功能性质有着重要意义,因此受到了广泛的关注。
文章综述了大豆蛋白的制备方法、功能特性、其生物活性肽以及其广泛的应用前景,为更好地开发大豆蛋白资源提供参考价值。
关键词:大豆蛋白;制备方法;功能特性;应用前景中图分类号:TS214.2文献标志码:A大豆是中国主要的农作物之一,大豆含18%-22%的油脂和大约40%的蛋白质,含有较少的碳水化合物,大约为20%~ 30%,所以它兼有食用油脂资源和食用蛋白资源的特点,具有很高的营养价值。
1999年,美国食品药品监督局(FDA)发表声明:每天摄入25 g大豆蛋白,能减小患心脑血管疾病的风险[1-3]。
大豆蛋白的主要来源是低温脱脂豆粕,由于它是一种可以降低胆固醇全蛋白来源,被推荐为替代高脂肪动物的膳食凹。
因此,对大豆蛋白的结构和功能进行深入的研究,可为大豆蛋白的充分利用奠定实用性基础,为开发健康的新型蛋白营养产品提供理论性基础。
1大豆蛋白概述大豆蛋白是最优质的植物蛋白,也是居民膳食营养中最优质的的蛋白质来源,2019年12月美国食品药品监督局(FDA)已经批准了大豆血红蛋白用作色素并证明其是安全的[6]。
大豆蛋白质根据其蛋白的含量不同,可分为大豆蛋白粉(soy flour)、大豆浓缩蛋白(soy protein concentrate)、大.分离蛋白(soy protein iso¬late),其中大豆分离蛋白的蛋白质含量高达90%,是营养价值最高的大豆蛋白[7]。
张翠芳⑺研究了大豆分离蛋白在面包中的应用,发现在面包中添加大豆分离蛋白可以提高营养价值,又通过对多添加大豆分离蛋白的面包的老化程度进行分析研究,发现大豆分离蛋白的添加延缓了面包的老化速度。
预处理对大豆蛋白酶解的影响
![预处理对大豆蛋白酶解的影响](https://img.taocdn.com/s3/m/802c82d7360cba1aa811da65.png)
预处理对大豆蛋白酶解的影响Ξ钱 方 邓 岩 大连轻工业学院食品科学与生物工程系 116001周 晶 刘海波 宝生物工程(大连)有限公司 116001摘要 以Alcalase碱性内切酶为例,研究了不同热处理温度、时间对大豆蛋白酶解率的影响,实验表明大豆蛋白经100℃, 20min热处理,其相对酶解率达100%。
关键词 预处理 大豆蛋白 酶解率 为了改善大豆蛋白质的品质,提高营养价值,进一步改善其溶解性、起泡性等功能特性,最重要的方法就是将其酶解。
大豆蛋白经水解后其酶解物比氨基酸和蛋白质更易于消化吸收,且促进了乳酸菌、双歧杆菌等人体内有益菌类的生理活性和生长发育,还能改变其溶解性、降低粘度等功能特性〔1〕,这进一步促进了大豆蛋白在食品工业中的应用。
影响大豆蛋白酶解的因素很多,诸如酶的种类、预处理条件、水解条件及酶解物的处理方法等〔2〕。
天然大豆蛋白分子具有紧密的立体结构,由于其酶切位点包藏于蛋白质分子内部,而很难被蛋白酶水解,必须对其进行预处理,使蛋白变性。
蛋白变性方法有很多,其中热处理由于具有经济、设备投资少,且经热变性的蛋白质不易回复等特点而倍受青睐。
但必须采取适当的热变性方式,若加热过度,不但不能促进反而还会阻碍酶对大豆蛋白的水解作用。
为了研究不同热处理方式对酶解速度的影响,这里以Alcalase碱性内切酶为例进行下列实验。
1 实验材料与方法111 实验材料11111 Alcalase Food Grade碱性内切蛋白酶:丹麦NOVO公司11112 大豆分离蛋白:吉林不二公司11113 小牛血清白蛋白(BSA)No.232092mg/ ml:宝生物公司112 实验仪器11211 MC-756型紫外可见分光光度计:上海第三分析仪器厂11212 p HS-3C型精密p H计:上海雷磁仪器厂11213 LD4-2型离心机:北京医用离心机厂11214 电热恒温水浴锅:江苏南通竹行电热恒温四厂11215 恒温干燥箱:上海市跃进医疗器械一厂1131实验方法11311 蛋白质浓度及可溶氮的测定〔3〕1131111 标准蛋白曲线制作将牛血清白蛋白(BSA,№23209)的标准溶液按下表用蒸馏水稀释至0、80、160、240、320、400、480(μg/ml不同浓度。
不同蛋白酶酶解大豆蛋白的过程变化规律研究
![不同蛋白酶酶解大豆蛋白的过程变化规律研究](https://img.taocdn.com/s3/m/d83b35ff9e31433239689356.png)
较 高。
关键词 : 大豆 蛋 白 ; 解 ; 解度 ; ; 离氨 基 酸 ; 白酶 酶 水 肽 游 蛋 中 图分 类 号 : 2 1 2 ; 2 1 2 TS 0 . 1 TS 0 . 5 文献 标 志 码 : A 文 章 编 号 :0 3 2 2 2 1 ) O O 2 4 1 0 —6 0 ( 0 2 1 —O 2 一O
( .Ce ta a oao y,FuinAcd myo rc lu a ce cs 1 n rlL b r tr ja a e fAg iut rl in e ,Fu h u3 0 0 Chn ;2 S z o 5 0 3, ia .FuinKe b rtr fPrcs j yLa o ao yo e ie a
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不 同 蛋 白酶 酶 解 大 豆 蛋 白 的 过 程 变 化 规 律 研 究
黄 薇 , 宋永 康 , 林 虬 , 清 华 , 。姚 林 健
酶解豆粕和发酵豆粕的研究进展[1]
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今日畜牧兽医55饲料天地为了减轻养殖中对抗生素、血浆蛋白等动物蛋白原料的依赖,国内外的科研人员经过大量研究:运用现代生物工程、代谢调控发酵技术、动物营养平衡吸收理论等一系列高新技术生产出富含生物活性多肽、蛋白酶以及大量益生菌的绿色生物饲料。
酶解豆粕和发酵豆粕即是利用现代生物技术将大豆蛋白通过蛋白酶酶解或微生物发酵降解为可溶性蛋白和小分子多肽的混合物。
经过酶解或发酵处理的蛋白由于比传统大豆中蛋白质更易于吸收、低抗原等特点,被认为是幼龄动物饲料的理想植物蛋白。
近几年酶解豆粕和发酵豆粕产品的研究开发酶解豆粕和发酵豆粕的研究进展范彦令,张士辉(石家庄依欣饲料有限公司,河北石家庄050000)3苜蓿的青贮与利用苜蓿青贮或半干青贮,养分损失小,具有青绿饲料的营养特点,适口性好,消化率高,能长期保存,目前畜牧业发达国家大都以干草为重点的调制方式向青贮利用方式转变。
主要采用以下几种青贮方式。
3.1半干青贮国外普遍采用青贮塔进行半干青贮保存苜蓿,青贮塔造价较高,我国一般采用青贮窑贮存苜蓿,无论采用哪种方式,关键首先使苜蓿迅速风干使含水量降到40%~50%再进行青贮。
这种青贮料兼有干草和青贮的优点。
3.2加甲酸青贮这是近年来国外推广的一种是每吨青贮原料加85%~90%甲酸2.8~3千克,分层喷晒。
甲酸在青贮和瘤胃消化过程中,能分解成对家畜无毒的CO2和CH4,并且甲酸本身也可被家畜吸收利用,用这种青贮料饲喂乳用犊牛,平均日增重达0.757~0.817千克,比普通青贮料增重提高近1倍。
3.3拉伸膜青贮技术这是近年来国外采用的一种新方法,全部机械化作业。
操作程序为:割草-打捆-出草捆-缠绕拉伸膜。
其优点主要是不受天气变化影响,保存时间长,一般可存放3~5年,使用方便。
4紫花苜蓿叶蛋白的利用紫花苜蓿叶蛋白(ALP)是将适时收割的苜蓿粉碎,压榨、凝固、析出和干燥而形成的蛋白质浓缩物。
一般粗蛋白50%~60%,粗纤维0.5%~2%,并含有丰富的维生素、矿物质等。
大豆蛋白酶解实验方案
![大豆蛋白酶解实验方案](https://img.taocdn.com/s3/m/22fa1dee250c844769eae009581b6bd97f19bc8c.png)
大豆蛋白酶解实验方案介绍大豆蛋白酶解实验是一种常用的生物化学实验,旨在通过酶解的方式破坏大豆蛋白结构,从而改变其功能和性质。
本实验方案将详细介绍该实验的步骤和操作要点,并探讨实验的目的、原理以及可能的应用。
实验目的1.研究大豆蛋白酶解的过程及其影响因素。
2.探究酶解对大豆蛋白功能和性质的改变。
3.分析酶解后的产物在食品工业等领域的应用前景。
实验原理大豆蛋白酶解是指利用特定蛋白酶对大豆蛋白进行水解反应的过程。
大豆蛋白是植物蛋白质的一种,具有多种功能和应用价值。
通过酶解,可以改变其结构和性质,进而扩展其应用范围。
大豆蛋白酶解的实验原理如下:1.选择适当的蛋白酶。
常用的蛋白酶包括胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等。
根据目的选择合适的酶种和酶解条件。
2.大豆蛋白的酶解过程。
将大豆蛋白与蛋白酶按照一定比例混合,控制温度、酶解时间等因素,使酶能够与蛋白质发生作用。
3.蛋白酶的作用机制。
蛋白酶通过水解蛋白质中的肽键,将其分解成较小的肽段或氨基酸。
这些肽段和氨基酸的序列、长度和分布方式,会对蛋白质的功能和性质产生显著影响。
实验步骤1.准备工作。
清洗试管、移液器等实验仪器,并消毒处理。
准备好所需的试剂和大豆蛋白样品。
2.酶解液的制备。
根据实验要求,配置适当浓度的蛋白酶溶液。
可以根据大豆蛋白样品的含量和酶解时间的需要,来确定酶解液的浓度。
3.处理大豆蛋白样品。
将大豆蛋白样品溶解或悬浮在适量的缓冲液中,使其均匀混合。
4.酶解反应。
将酶解液和大豆蛋白样品按照一定比例混合,同时控制好反应的温度和时间。
通常情况下,反应温度为37摄氏度,反应时间为2-4小时。
5.反应终止。
在酶解反应完成后,加入适当的试剂或改变环境条件,以终止酶的活性。
常见的方法包括加热、改变pH值等。
6.产物收集和分析。
将酶解后的产物收集,可以采用离心、过滤等方法。
收集到的产物可以进行质谱分析、电泳分析等,以获取其分子量、组成及特性信息。
7.结果记录与分析。
将所有实验数据整理并记录,进行数据分析,比较不同条件下的实验结果,评估酶解效果和产物的特性变化。
大豆蛋白水解物的酶法修饰及其亚铁和钙离子的螯合能力
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大豆蛋白水解物的酶法修饰及其亚铁和钙离子的螯合能力张美玲;赵新淮【摘要】Soybean protein hydrolysates with a degree of hydrolysis of 14. 1% were prepared by hydrolysis of soybean protein isolate with alcalase, and then modified by a plastein reaction in alcohol-water medium. Response surface analysis was applied to optimize the conditions of plastein reaction, when substrate concentration and reaction time were pre-set at 30% and 4 h. The suitable conditions obtained were as following: enzyme addition level of 5. 26 kU/g proteins, volume ratio of ethanol to water of 56. 8% and reaction temperature of 33. 1℃. Some modified products with different reaction extents were prepared in ethanol-water or methanol-water medium, and their chelating activities for iron (Ⅱ) and calcium (Ⅱ) were eval uated. It was found that iron (Ⅱ) chelating activity was increased from the original 39. 8% to 59. 3% while calcium (Ⅱ) chelating activity was enhanced from the original 62. 1% to 76. 6%. The present results suggested that enzymatic hydrolysis coupled with plastein reaction might be served as a new approach to prepare iron soybean protein hydrolysates with better metal chelating activity.%利用碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白制备出水解度为14.1%的水解物,并在醇-水介质中对其进行类蛋白反应修饰.固定底物质量分数30%,反应时间4h,利用响应面分析法对类蛋白反应条件进行优化,得到最优条件为:酶添加量5.26 kU/g蛋白质,乙醇体积分数56.8%,温度33.1℃.在乙醇-水或甲醇-水介质中制备反应程度不同的修饰产物,并评价其对亚铁和钙离子的螯合能力.结果表明,亚铁离子螯合能力由39.8%提升至59.3%,钙离子螯合能力由62.1%提升至76.6%.大豆分离蛋白的酶解以及类蛋白反应修饰,是一个提高金属离子鳌合能力大豆蛋白螯合肽的新技术.【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2012(038)012【总页数】5页(P26-30)【关键词】大豆蛋白水解物;类蛋白反应;碱性蛋白酶;醇-水介质;螯合能力【作者】张美玲;赵新淮【作者单位】东北农业大学,乳品科学教育部重点实验室,黑龙江哈尔滨,150030【正文语种】中文天然蛋白质没有展示出食品工业所需要的性质,经过特定的修饰会改变其相应性质[1],酶水解通常被用来提高蛋白质的功能性及营养性[2]。
碱性蛋白酶水解大豆蛋白过程的拟合及水解产物性质的研究
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碱性蛋白酶水解大豆蛋白过程的拟合及水解产物性质的研究孔祥珍;叶挺;孙灵湘;丁秀臻;华欲飞【摘要】采用Alcalase碱性蛋白酶在50、60℃下以不同酶底比(1∶100、2∶100和3∶100)分别制备水解度(DH)为5%、10%和15%的大豆蛋白水解产物.考察水解反应动力学以及水解产物的DPPH自由基清除率和三氯乙酸可溶性氮含量,并且采用HPLC表征水解产物相对分子质量变化.结果表明:碱性蛋白酶在所考察的条件下水解大豆蛋白,符合指数形式动力学方程;水解产物水解度从5%增加到15%,DPPH自由基清除率和三氯乙酸可溶性氮含量分别由17.07%、16.28%增加到31.84%、64.85%;大豆蛋白经碱性蛋白酶水解至相同水解度时,在同一温度下,随着酶底比的增加,水解产物的DPPH自由基清除率和三氯乙酸可溶性氮含量增加,水解产物中相对分子质量大于10 kD的肽段比例逐渐减小,小于0.5 kD的肽段比例逐渐增大.同一种酶水解同一种蛋白质,虽然水解反应动力学均符合指数形式动力学方程,但是当大豆蛋白被水解至相同水解度时,不同条件下制备的水解产物的性质与结构均有显著性差异.【期刊名称】《中国油脂》【年(卷),期】2015(040)012【总页数】5页(P26-30)【关键词】碱性蛋白酶;水解;拟合方程;水解度;相对分子质量分布【作者】孔祥珍;叶挺;孙灵湘;丁秀臻;华欲飞【作者单位】江南大学食品学院,食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡214122;江南大学食品学院,食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡214122;江南大学食品学院,食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡214122;江南大学食品学院,食品安全与营养协同创新中心,江苏无锡214122;江南大学食品学院,食品安全与营养协同创新中心,江苏无锡214122【正文语种】中文【中图分类】TS229;TQ936蛋白酶水解蛋白质的过程实际上是使蛋白质中的肽键断裂,生成胨、肽等低相对分子质量产物的生化反应过程。
酶解法制备大豆低聚肽工艺的研究_徐丽萍
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第28卷第2期2012年4月哈尔滨商业大学学报(自然科学版)Journal of Harbin University of Commerce (Natural Sciences Edition )Vol.28No.2Apr.2012收稿日期:2011-08-20.作者简介:徐丽萍(1963-),女,教授,硕士生导师,研究方向:农产品加工与贮藏.酶解法制备大豆低聚肽工艺的研究徐丽萍1,邢超1,王鑫1,刘晨2(1.哈尔滨商业大学食品工程学院省高校食品科学与工程重点实验室,哈尔滨150076)2.哈尔滨商业大学化学类人才培养实验班(2010级),哈尔滨150028)摘要:以大豆分离蛋白为原料,采用酶解法对大豆分离蛋白进行水解制备大豆低聚肽.分别筛选出制备大豆低聚肽的最佳单酶、双酶复合.通过单因素和正交试验结果分析,确定了酶解温度55ħ,水解时间2h ,酶的复配比例为2ʒ1,pH 值为6.0,为最佳工艺条件.关键词:大豆分离蛋白;酶解;大豆低聚肽中图分类号:TS201文献标识码:A文章编号:1672-0946(2012)02-0143-04Study on preparation of soybean peptide by enzyme hydrolysisXU Li-ping 1,XING Chao 1,WANG Xin 1,LIU Chen 2(1.Key Laboratory of Food Science and Engineering ,School of Food Engineering ,Harbin University of Commerce ,Harbin 150076,China ;2.2010Experimental Class of Chemistry ,Harbin University of Commerce ,Harbin 150028,China )Abstract :Soy protein isolates were taking as the raw materials ,this paper studied on the ex-traction technology of oligopeptide which were separated by enzyme.based on hydrolysis time ,enzymatic hydrolysis temperature ,pH value ,substrate concentration ,for each single factor analysis ,and determined by orthogonal experiment ,the results showed that the opti-mum technological conditions :the hydrolysis time was 2h ,the enzymatic hydrolysis temper-ature was 55ħ,pH value was 6.0,the substrate concentration was 5g /100mL.Using ul-traviolet spectrum to compare the samples and standard products ,determined that the separa-ted materials after hydrolysis were oligopeptides.The content of soybean oligopeptide was 95.30mg /100mL.Key words :soy protein isolates ;oligopeptide ;hydrolysis ;大豆低聚肽由大豆蛋白经水解得到,一般由38个氨基酸组成,分子质量以低于5000为主[1-2],还含有少量的游离氨基酸,糖类,无机盐等成分.大豆低聚肽在原大豆蛋白序列中并无活性,一般通过胃肠道时释放出来的很少,但在体外可以通过水解将这些活性肽释放出来,作为新的治疗药剂、功能食品添加剂或饲料添加剂[3].与大豆蛋白相比,大豆低聚肽除氨基酸组成与大豆蛋白一样具有优质蛋白的特点以外,还具有大豆蛋白所不具备的良好溶解性、稳定性等理化性质,而且具有易吸收和低过敏原性、降低血脂和胆固醇、降低血压、促进矿物质吸收和脂肪代谢、增强运动员体能等多种生理功能[4].大豆低聚肽由于具有良好的溶解性和稳定性,可用于大多数的普通食品中.由于其具有多种生理活性,还可用于营养疗效食品、功能保健食品和运动员食品等多类特种食品[5-6].1实验材料与主要仪器1.1实验材料与试剂大豆低聚肽(中食都庆生物技术有限公司);大豆分离蛋白(哈高科大豆食品有限责任公司);茚三酮(中国医药公司北京公司);酪氨酸(天津市元航化学品有限责任公司);中性蛋白酶(北京奥博星生物技术有限责任公司);碱性蛋白酶(北京奥博星生物技术有限责任公司);木瓜蛋白酶(北京奥博星生物技术有限责任公司);胰蛋白酶(北京奥博星生物技术有限责任公司);复合风味蛋白酶(北京奥博星生物技术有限责任公司).1.2实验仪器及设备双光束紫外分光光度计(TU-1900型北京普析通用仪器有限责任公司);双频数控超声波清洗器(KQ—500VDE型昆山市超声仪器有限公司);旋转蒸发仪(R-205型上海申胜生物技术有限公司);电子分析天平(ALC—1100.2型北京赛多利斯仪器系统有限公司).2实验方法2.1水解酶的筛选2.1.1酶活力测定选择木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶,胰蛋白酶,风味符合蛋白酶分别对其活力进行测定.2.1.2水解度的测定准确称取6.00g大豆分离蛋白于水解反应罐中,定容至100mL.于90ħ下加热15min,冷却后,调节溶液pH值至酶的最适pH值.分别准确称取五种蛋白酶加入水解反应罐,在慢速搅拌中进行水解反应,离心得水解液.取水解液1mL,加3mL蒸馏水、1mL pH=8.0的缓冲溶液、1mL茚三酮溶液,混匀.沸水浴加热15min,冷却,蒸馏水稀释至25mL(同时做空白实验).在最大吸收波长570nm处测定其吸光值,按下面公式计算水解度.DH=AˑV1V2ˑ1Wˑ25ˑ10-3其中:A为查表得蛋白质的毫克数,mg;W为称取大豆分离蛋白质量,g;V1为水解液的总体积,mL;V2为显色时所用稀释液的体积,mL.2.2复合酶解条件单因素的选择按照酶解液的水解度测定结果以确定的水解度最高的两种酶以一定的复配比例、pH值、酶解温度、酶解时间为考察因素,为了确定实验中各因素对大豆低聚肽得率的影响,进行单因素实验.即改变某一条件,固定其他条件,测定大豆低聚肽得率.2.3酶解法制备大豆低聚肽选择影响制备效果的四个主要因素:酶解温度(A)、酶复配比(B)、酶解pH值(C)和酶解时间(D),采用正交设计表L9(34)安排实验.因素水平表见表1.表1因素水平表水平因素A酶解温度/ħB酶复配比C酶解pH值D酶解时间/min 1501ʒ15.5602552ʒ16.01203603ʒ16.5180 2.4定性分析实验将大豆低聚肽标准品与制备样液在OD190 600nm范围内扫描,比较标准品与样品的出峰位置及峰形两个图谱.配制等梯度质量浓度的大豆低聚肽标准品溶液,在最大吸收波长处测其吸光度,以大豆低聚肽质量浓度(mg/mL)为横坐标,吸光值为纵坐标制作标准工作曲线.取大豆低聚肽的制备样品,进行紫外分光光度法定量分析,计算大豆低聚肽的得率.3结果与分析3.1水解酶筛选结果分析3.1.1酶活力的测定结果与分析根据酶活测定公式,五种酶的酶活力结果如表2所示.由表2可知,碱性蛋白酶活力最大,木瓜蛋白酶次之,胰蛋白酶、复合风味蛋白酶、中性蛋白酶的酶活力相当.表2酶活力的测定序号蛋白酶类别酶活力/(万U·g-1)1碱性蛋白酶9302木瓜蛋白酶8003胰蛋白酶6004复合风味蛋白酶6205中性蛋白酶600图2五种蛋白酶水解能力直观图3.1.2水解度测定结果与分析根据水解度测定公式,五种酶的水解能力结果如图2所示.木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶的水解能力·441·哈尔滨商业大学学报(自然科学版)第28卷最大,因此,综合考虑将木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶进行复配作为酶解法制备大豆低聚肽的最佳酶制剂.3.2各因素对制备效果的影响3.2.1酶解温度对大豆低聚肽提取效果的影响温度是影响大豆低聚肽溶出率的重要因素之一,在较低温度时随着酶解温度的升高,提取率较好,大豆低聚肽的质量浓度呈上升趋势;在酶解温度上升至55ħ时提取率达到最高点;继续升高水解温度,大豆低聚肽的质量浓度反而下降.因此,选择55ħ为最佳水解温度.见图3.图3酶解温度的标准曲线3.2.2酶复配比对大豆低聚肽提取效果的影响随着木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶比例的减小大豆低聚肽的质量浓度逐渐增加,当木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶的比为2ʒ1时,大豆低聚肽的质量浓度达到最高点,继续降低复配比使大豆低聚肽的质量浓度呈下降趋势.因此,选定木瓜蛋白酶与碱性蛋白酶最佳复配比例为2ʒ1.见图4.图4两种酶的复配比标准曲线3.2.3酶解pH 值对大豆低聚肽提取效果的影响当pH 值较低时,低聚肽的质量浓度随pH 值增大而增大,但当pH 值超过6.0时,低聚肽的质量浓度随pH 值增大而减小.因此,选定提取液pH 值6.0为最佳酶解液pH 值.见图5.图5pH 值的标准曲线3.2.4酶解时间对大豆低聚肽提取效果的影响酶解时间是影响大豆低聚肽提取率的关键因素.根据化学平衡原理,溶质在溶剂中的溶解程度随着提取时间延长而增加,当溶出物质的质量浓度达到一定值时反应趋于平衡,继续延长提取时间,溶出物质量浓度增加不大,且已溶出的大豆低聚肽由于氧化和逆反应等原因而减少.酶解时间为120min 时大豆低聚肽提取效果最好.见图6.图6酶解时间的标准曲线3.3酶解法提取大豆低聚肽正交试验结果由表3正交试验结果及表4方差分析可知,各因素对酶解法提取大豆低聚肽质量浓度影响的大小顺序为C >D >A >B ,即水解pH 值>水解时间>水解温度>酶复配比.最佳的因素水平组合为A 2B 1C 2D 2.即水解pH 为6.0、水解时间为2h 、水解温度55ħ、酶复配比为1ʒ1.表3正交试验结果表实验号因素水平A 酶解温度/ħB 酶复配比C 酶解pHD 酶解时间/h 大豆低聚质量浓度/(mg ·100mL -1)11(50)1(1ʒ1)1(5.5)1(1)94.61212(2ʒ1)2(6.0)2(2)103.90313(3ʒ1)3(6.5)3(3)60.6742(55)213105.485232167.0062132105.8073(60)31278.718312393.1193231100.27K 1220.29202.70207.00217.88K 2206.55217.64217.15219.13K 3217.60224.10220.29207.43k 186.39392.93397.84087.293T =809.55k 292.76088.003103.21796.137x =89.95k 390.69788.91368.79386.420R 6.3674.93034.4249.717最优水平A 2B 1C 2D 23.4紫外分光光度法大豆低聚肽的分析结果由图7、8可见,样品与标品的出峰位置及峰形一致,可确定本实验所提物质为大豆低聚肽.·541·第2期徐丽萍,等:酶解法制备大豆低聚肽工艺的研究表4方差分析表方差来源SS d f F Fa显著性A 63.31020.365B 41.29320.238C 2057.583211.867F0.10(2,2)=9*e (D )173.38121.000误差173.3824结语以大豆分离蛋白为原料,采用酶解法制备大豆低聚肽,最佳提取工艺条件为:酶解温度为55ħ,酶复配比为1ʒ1,pH 值6.0,酶解时间120min.大豆低聚肽得率为95.30mg /100mL.参考文献:[1]王之盛,况应谷,周安国,等.酶解去除大豆产品抗原蛋白的效果研究[J ].饲料博览,2004(11):1-4.[2]王林凤.酶改性植物蛋白(大豆蛋白质)[J ].郑州粮食学院学报,1989(2):6-9.[3]HAMADA J S ,MARSHALL W E.Preparation and Functionalproperties of Enzymatically Deamidated Soy Proteins [J ].J.Food.Sci.,1989,54(3):598-601.[4]李书国,陈辉.大豆多肽的功能特性及加工工艺[J ].粮油食品科技,2000(1):14-15.[5]糕同友,丛建民.大豆生物活性肽的制备及其生物活性研究[J ].中国酿造,2007(8):6-9.[6]王鑫,徐丽萍,宋伟.溶剂挥发法制备还原型谷胱甘肽徽胶囊[J ].哈尔滨商业大学学报:自然科学版,2012,28(1):49-53.(上接135页)[2]姚冬梅,刘开蕾,周长青,等.超声法提取土茯苓中总黄酮的工艺研究[J ].中国中医药信息杂志,2011,18(6):60-61.[3]陆萍,谭兴起,郭良君,等.正交试验优选咽炎糖浆的提取工艺[J ].中国药师,2011,14(7):1053-1054.[4]梁学政,蔡楚华.101澄清剂在双黄连口服液制备中的应用[J ].中国医院药学杂志,2002.22(6):377-378.[5]孙姣,孙泽沾,康勇.絮凝离心分离法净化养阴清肺糖浆原药提取液[J ].过滤与分离,2011,21(2):6-11.·641·哈尔滨商业大学学报(自然科学版)第28卷。
大豆分离蛋白酶解液抗氧化性的近红外光谱定量测定
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大豆分离蛋白酶解液抗氧化性的近红外光谱定量测定周博1邱智军1(河南科技大学食品与生物工程学院1,洛阳471023)摘要:利用近红外光谱技术对四种蛋白酶(菠萝、碱性、木瓜和中性蛋白酶)的大豆分离蛋白水解样品进行测定,探索同一模型应用于不同酶的水解液抗氧化性测定的可行性。
基于留一交叉验证方法,分析了采样密度和酶物质差异对全波长模型精度的影响,统计检验表明,采样密度与模型精度之间正相关,酶物质差异对单酶样本模型精度无显著影响,但对综合酶样本模型性能有显著影响。
为了建立能够同时准确测定不同酶水解样品抗氧化性能力的综合酶样本预测模型,竞争性自适应重加权抽样(CARS)法用来对模型进行了优化,建模后,校正集R cv和RMSECV分别为0.9601和0.0028,验证集的R p和RMSEP 为0.9237和0.0053,相对分析误差(RPD)为2.45,预测精度较好,说明建立针对不同酶的水解样品的同一模型是可行的。
关键词:近红外光谱竞争性自适应重加权抽样法(CARS)大豆分离蛋白水解抗氧化性偏最小二乘中图分类号:O433.4 文献标志码:A 文章编号:Quantitative Determination of Antioxidant Activity of Hydrolysates from Soy Protein Isolate by Near Infrared Spectroscopy Combinedwith CARSZhou Bo1QiuZhijun1(Henan University of Science and Technology1,Luoyang 471023)Abstract:The hydrolyzed samples of soy protein isolated from four kinds of protease (pineapple, alkaline, papaya and neutral protease) were determined by near infrared spectroscopy and the feasibility of the same model applied to the determination of antioxidant activity of different enzymes was explored. Based on the method of left one cross validation, the influence of sampling density and enzyme substance on the accuracy of full wavelength model was analyzed. The statistical results showed that there was a positive correlation between sampling density and model accuracy. The difference of enzyme material had no significant effect on the accuracy of single enzyme sample model, but it had a significant influence on the performance of the integrated enzyme sample model. In order to establish a comprehensive model of enzyme prediction for simultaneous determination of the antioxidant capacity of different enzymes, the competitive adaptive weighting sampling (CARS) method was used to optimize the model. After modeling, R cv and RMSECV of the calibration set were 0.9601 and 0.0028. R p and RMSEP of the validation set were 0.9237 and 0.0053, and the relative analysis error (RPD) was 2.45. The result showed that the prediction accuracy was good, indicating that it is feasible to establish the same model for hydrolyzing the samples of different enzymes.Key words:Near Infrared Spectroscopy,Competitive Adaptive Reweighted Sampling (CARS),Enzymatic Hydrolysis of Soybean Protein Isolate,Antioxidant Activity, Partial Least Squares (PLS)大豆肽是大豆蛋白经酶水解获得的短肽混合物[1],也是大豆蛋白开发利用的研究热点。
大豆球蛋白的水解研究
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A,3 0 ; y crm ,2 0 )肽分子量标准 品 1 0 u C t ho e 1 0 U 、 7 o C 4
( l- y ,3 . u V lT r V l3 9 ; e - n e h l , G y T r2 9 ; a- y - a ,7 . u L u e k p ai 2 5 n 5 9 ; te e h l .7 .u An itn i I。 9 ) 6 .u Me- k p ai 5 37 ; goe s 1 1 6u : 7 n n 2
为大 豆肽 的生产 提供 了新 的酶类 , 也为工业 生产 高品 质 的大 豆肽提供 了理 论参 考。
1 材料 与方 法
作者简介 : 险峰 (9 1 )男 ( )讲 师。 邹 17一 , 汉 , 博士研究 生 , 研究方 向 : 食
品生物技术 。
1 主要 材料与试剂 . 1 脱脂豆粕 : 吉林省通榆蛋 白质厂; 大豆蛋白改性酶: 南
浓 度 /gL (/ )
图 2 底 物 浓 度 对 水 解 度 的 影 响
Fi . Ef e t fs b t a e o c n r i n o DH fh r l s t g 2 f c s o u s r t d c n e t ato n o yd o y a e
在单 因素试验 基础 上 , 选择 酶 与底物 比 、 酶解 时 间、 酶解 温度 和 p H作 为考察 因素 , 采用 正交 表 I(4 J3) 9
美国 S m 公司; i a g 其他化学试剂均 为分 析纯 。
1 仪 器与设备 . 2
1Il H y i gi ㈨n
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F U 20 D 一 10型冷冻干燥仪 :日本 E E A公 司 ; 一 YL J
气质联用大豆蛋白酶解液美拉德反应物成分
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2012年 第 37卷 第 10期 FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
食品开发
气质联用分析大豆蛋白酶解液 美拉德反应物成分
陈丽娜1,吴 琼1,石 矛2 (1.长春大学农产品深加工省重点实验室,长春 130022; 2.吉林省疾病预防控制中心,长春 130022)
摘要 : 利用大豆分离蛋白为原料 , 将其最大程度酶解产物进行美拉德反应 , 通过气质联用仪 (GC-MS)分析检测美拉德反应物中的醚溶性成分。结果表明,醚溶性成分中含有大量的风味成 分(相对质量分数为86.37%),其中包括:2-丁烯酸酐(巴豆酸酐)、甲基麦芽酚、邻苯二甲酸二 异辛酯、十四烷酸甲酯(肉豆蔻酸甲酯)、十六酸甲酯(棕榈酸甲酯)、(Z)-9-十八烯酸甲酯(油酸甲 酯)、(Z)-9-十六烯酸甲酯(棕榈油酸甲酯)等14种芳香族、酯类化合物。 关键词:酶解;大豆分离蛋白;美拉德反应;气质联用仪 中图分类号:TS 201.2 文献标志码:A 文章编号:1005-9989(2012)10-0071-03
·FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY 2012年 第 37卷 第 10期
重要的影响。对美拉德反应的机理进行深入的研 究,有利于在食品贮藏与加工的过程中,控制食 品色泽、香味的变化,使其向着有利于色泽、香 味生成的方向进行,从而提高食品的品质 。 大豆蛋白质是一种优质的蛋白质,其产量高、价 格低、氨基酸种类繁多,属于优质原料。利用 大豆蛋白酶解液发生美拉德反应,能够得到含 有不同种类风味成分的物质,不但增加了香料 品种,还能提高食品的品质,从营养性、安全 性考虑都将是消费者的首选 [3-5] 。因此,本文将 大豆分离蛋白进行酶解,然后与葡萄糖进行美拉 德反应,进而利用GC-MS对其产物进行风味成 分的分析检测。 1 试验材料与方法 1.1 试验材料 大豆分离蛋白:吉林省通榆蛋白质厂;大豆 蛋白改性酶:南宁庞博生物工程有限公司。 1.2 主要仪器设备 QP-2010型气相色谱-质谱联用仪:日本岛 津;601超级恒温油浴:金坛市西晓阳电子仪器 厂;RE-2000E旋转蒸发仪:北京世纪予华仪器有 限公司。 1.3 方法 1.3.1 大豆分离蛋白的酶解 准确称量大豆分离 蛋白按固液比1 : 5加入蒸馏水搅拌均匀,按酶和 底物浓度比为8000 U/g加入大豆蛋白改性酶, 将pH调至7.5,50 ℃温度条件下水解8 h,90 ℃ 灭酶10 min,冷却至室温后加入1 mol/L HCl调 pH4.2沉淀未水解蛋白,8000 r/min离心15 min, 取上清液待用[6-8]。 大豆蛋白酶解液中游离氨基酸含量采用甲醛 滴定法测定[4,9]。 1.3.2 美拉德反应 取大豆蛋白酶解液20 mL,按 固液比5:1加入葡萄糖,将pH调至偏碱性,温度控 制在120 ℃,当反应物变成透明的棕色时停止加 热。用乙醚萃取反应产物3次,将3次的萃取液合 并,利用旋转蒸发浓缩至0.5 mL,供GC-MS分析 检测[9-11]。 1.3.3 醚溶成分GC-MS分析条件 色谱条件[12-15]: 气相色谱柱为毛细管柱(30 mm×0.25 mm,0.25 µm),进样口温度210 ℃,进样体积1 µL;程 序升温:初始温度40 ℃,以50 ℃/min升温至180 ℃,保持1 min,最终以5 ℃/min升至温度250 ℃,
大豆蛋白改性及应用研究
![大豆蛋白改性及应用研究](https://img.taocdn.com/s3/m/1479786e0166f5335a8102d276a20029bd6463b3.png)
大豆蛋白改性及应用研究大豆蛋白是由大豆中提取的一种优质蛋白质,具有丰富的氨基酸含量和营养价值。
然而,由于其在水中溶解度差、气味和口感不佳等特点,限制了其在食品加工中的应用。
因此,对大豆蛋白进行改性研究,以提高其溶解度、稳定性和功能性,是当前的研究热点之一。
大豆蛋白改性的方法有很多种,常用的包括酶解改性、酸碱改性、物理改性、化学改性等。
其中,酶解改性是目前应用最广泛的改性方法之一。
酶解改性通过在大豆蛋白中加入特定的酶,使其发生水解反应,并得到具有改性功能的产物。
通过酶解改性,可以调整大豆蛋白的分子结构和功能性质,从而改善其溶解度、乳化性、凝胶性等。
酶解改性可以通过改变酶的种类、酶解时间和酶解条件等来调控改性产物的性质。
比较常见的酶包括胰蛋白酶、胃蛋白酶和木质素酶等。
酶解时间和酶解条件可以影响酶解程度和产物的性质。
经过酶解改性的大豆蛋白可用于制作乳酸菌饮料、果冻、冷饮等食品,其中乳酸菌饮料中添加酶解改性的大豆蛋白可以提高其口感和稳定性。
此外,酸碱改性也是一种常用的大豆蛋白改性方法。
酸碱改性通过改变大豆蛋白的pH值,使其发生变性和溶解度的改变。
酸碱处理可以引起大豆蛋白的脱水、脱甲基化和部分水解等反应,从而改变其分子结构和功能性质。
通过酸碱改性,可以提高大豆蛋白的凝胶性、泡沫性、乳化性等。
物理改性是指通过物理方法来改变大豆蛋白的结构和性质。
比较常用的物理改性方法包括超声波处理、高压处理和电化学处理等。
这些方法可以通过改变大豆蛋白的物理状态和分子结构,进而改善其溶解度和稳定性。
物理改性还可以通过改变大豆蛋白的细胞结构和分子聚集状态,提高其乳化和凝胶性能。
化学改性是指通过化学方法来改变大豆蛋白的结构和性质。
常用的化学改性方法包括酯化、醚化、酰化、氨基化等。
通过化学改性,可以在大豆蛋白的分子中引入新的官能团,从而改变其溶解度和稳定性。
同时,化学改性还可以提高大豆蛋白的乳化和凝胶性能。
总的来说,大豆蛋白改性可以通过酶解改性、酸碱改性、物理改性和化学改性等方法来实现。
大豆蛋白酶解物的抗癌活性研究
![大豆蛋白酶解物的抗癌活性研究](https://img.taocdn.com/s3/m/5395537331b765ce0508148b.png)
( 北 农 业 大 学食 品 学 院 , 哈 尔 滨 10 3 ) 东 500
摘
要 : 以 大豆 分 离蛋 白为 原料 , 用 中性 蛋 白酶 、木 瓜 蛋 白酶 、碱 性 蛋 白酶 和 胃蛋 白酶 分 别对 其 进 行 酶 解 ,
得到具有抗癌活性的酶解物,测定 大豆分 离蛋 白的水解度和酶解物对 胃癌细胞的生长抑 制率。结果表 明,木瓜蛋 白酶酶 解物 的癌 细胞 生长抑制率为 2 . %,显著高于其他三种酶解物 的抗癌 活性 ,其 次是 中性蛋 白酶( 1 0 73 6 2 . %) 2 和碱性蛋 白酶(80 %) 1 .1 ,酶解物抗癌活性 最低的是 胃蛋 白酶( I 0 。四种蛋 白酶在最适水解条件 下作 用于大豆 1. %) 2
o te rta eh doy ae , e ra l. h lwe n swee n urs y rl ae (12 %)a d foh r oe s y rls ts rmak b T ef l d o e r e t e h d oy t 2 .0 p y oo a s n Al ls y rls t ( .1 . h e snh d oy aeh dtelwe t n e el rw h ihbtr au c a eh doy ae 1 0 %) T e p p i y rl t a a 8 s h o s c r lgo ii y v le a c c t n o ( 1 O . eo t m n y l i c n i n ,h y rl i d ge re f h o b a rti s 1 . %)Ont pi 2 h mu e z moy s o dt s teh doy s e reo d r es y e npoenwa s i o s ot
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收稿日期:2005-11-17 修回日期:2005-12-22作者简介:李大明,男,1982年出生,在读硕士,从事植物蛋白酶解及天然级热反应肉味香精的研究。
大豆蛋白酶解的研究李大明,宋焕禄,祖道海北京工商大学化学与环境工程学院 (北京 100037)摘 要:用几种常用蛋白酶对大豆蛋白进行酶解,利用均匀设计安排试验,确定各种酶的最佳酶解条件,并以水解度(DH )为考察标准,选出水解度最大的酶,确定其最佳加酶量和酶解时间。
关键词:大豆蛋白;水解植物蛋白(HVP );水解度(DH );酶解;均匀设计中图分类号:TS201.1 文献标识码:B 文章编号:1672-5026(2006)02-0020-04Study on enzymatic hydrolysis of soybean proteinLi Daming ,Song Huanlu ,Zu DaohaiCollege of Chem ical and Envi ronmental Engi neeri ng ,Beiji ng Technology and B usi ness U niversity (Beiji ng 100037)Abstract :The enzymatic hydrolysis of soybean protein by several normal enzymes is studied.The best condition for enzymatic hydrolysis by experiments uniform designed is confirmed.Making hydrol 2ysis degree (DH )as the standard ,the best adding amounts and hydrolysis time of enzymes whose DH are largest are got.K ey w ords :soybean protein ;hydrolyzed vegetable protein (HVP );hydrolysis degree (DH );en 2zymatic hydrolysis ;uniform designs 大豆蛋白的营养价值很高,含有丰富的优质蛋白质,可以提供充足的人体所需的八种必需的氨基酸以及多种维生素和矿物质等[1]。
水解植物蛋白(HVP )是一种营养型食品添加剂,以其柔和丰满的鲜美口感广泛用于肉产品加工、方便面、膨化食品以及调味品中[2]。
特别是在Maillard 反应制备肉味香精的研究中,HVP 作为一种前体物质和丰富的氨基酸源得到广泛的应用。
Cadwallader 等人以酶解大豆蛋白为前体物质通过Maillard 反应制备肉味香精,并通过GC -MS 和GCO 检测分析出大量特征香味物质[3]。
因此HVP 在绿色食品添加剂的生产中将得到广泛的应用。
目前工业上主要采用酸水解法生产HVP 。
但酸水解反应条件激烈,会破坏氨基酸,此外,酸水解法会产生1,3-二氯-2-丙醇(1,3-DCP )和3-氯-1,2-丙二醇(3-MCPD )具有致癌性[4]。
酶法水解具有条件温和、副反应少、水解程度容易控制,特别是在营养成分的保留上,具有不可比拟的优点。
随着酶工业的发展,酶解方法将替代酸法,成为水解大豆蛋白最有效的方法之一。
1 材料与方法111 材料11111 试验原料与主要试剂。
豆粕,购于北京和田宽酿造厂;甲醛溶液,优级纯,北京市旭东化工厂;L -酪氨酸,BR ,上海政翔化学试剂研究所;福林酚试剂,Sigma F -9252,北京欣经科生物技术有限公司;干酪素,BR ,北京双旋微生物培养基制品厂;复合风味酶(Flavozyme )、复合内切酶(Protamex )和碱性内切酶(Alcalase ),Novo Nodisk 公司;其他化学试剂均为分析纯;试验用水为蒸馏水。
2Vol.13,2006,No.2 粮食与食品工业Cereal and Food Indust ry食品科技11112 主要仪器设备。
精密数字酸度计,PHS -25C ,上海鹏顺科学仪器有限公司;可见分光光度计,Spectrumlab 22PC ,上海棱光技术有限公司;数显电子恒温水浴锅,HH -1,金坛市至翔科教仪器厂;光学读数分析天平,TG 328B ,上海第二天平仪器厂;上皿电子天平,JA2003,上海天平仪器厂;磁力加热搅拌器,H J -1型,江苏省国华仪器厂;微量凯氏定氮蒸馏装置,实验室自装。
112 试验方法11211 样品蛋白质含量的测定。
微量凯氏定氮法[5]11212 氨态氮测定。
甲醛电位滴定法[5]11213 酶活测定。
福林酚法[6]11214 水解度(DH )的计算。
D H =(N 2-N 1)/(N 0-N 1)N 2—酶解后游离氨基氮含量(%);N 1—酶解前游离氨基氮含量(%);N 0—总氮含量(%)。
11215 原料的预处理。
将豆粕粉用水充分浸泡后,于沸水浴中加热30min 进行熟化处理,用于酶解试验。
2 试验结果与讨论211 样品蛋白质含量的测定经凯氏定氮法测定,样品中的蛋白质含量为41123%。
212 酶活的测定表1为几种蛋白酶的特性参数,作为试验参考。
表1 几种蛋白酶的特性[7]酶的种类作用特性最适p H最适温度/℃复合风味酶内+外肽酶510~710≈50复合内切酶复合内肽酶515~71555~60碱性内切酶内肽酶615~81555~7521211 酪氨酸标准曲线的绘制。
图1 酪氨酸标准曲线线性方程:y =0101x +010155 相关系数:R 2=01999 吸光常数K =9814521212 酶活的测定。
表2 几种蛋白酶的酶活复合风味酶复合内切酶碱性内切酶测定温度/℃505555测定p H 值710615715称酶量01202g 01204g 1mL 稀释倍数1001001000吸光度A 1015500193301982吸光度A 2015570193601985吸光度A 3015550193501983平均吸光度A 015540193501983酶活力/U ·g -1107511796738573213 最佳酶解条件的确定以参考资料为依据,每组试验称取20g 豆粕,经过熟化处理后,在固液比1∶7的条件下[8],改变温度、时间、p H 、加酶量以及酶比等因素,运用均匀设计[9]来安排实验,进行酶解,达到反应时间后取出一定量的酶解液,用甲醛滴定法测定其水解度,然后用DPS 数据处理系统来分析其酶解的最佳条件,最后再用验证实验加以验证。
21311 复合风味酶(F )最佳酶解条件的确定。
表3 复合风味酶(F )酶解条件均匀设计表温度/℃时间/hp H 加酶量/%DH/%165551051710525526156211793607610115122445671042016857047153111636503515217165 DPS 处理结果为温度:50℃;时间:7h ;p H =618;加酶量:6%;DH =23175%。
验证实验结果:DH =23103%结果符合。
21312 复合内切酶(P )最佳酶解条件的确定。
表4 复合内切酶(P )酶解条件均匀设计表温度/℃时间/hp H 加酶量/%DH/%1605510510178250261561512035576101111154406710412175565471538136645351521117912粮食与食品工业 Cerealand Food Indust ry Vol.13,2006,No.2 DPS处理结果为温度:57℃;时间:7h;p H= 613;加酶量:6%;DH=17142%。
验证实验结果:DH=16168%结果符合。
21313 碱性内切酶(A)最佳酶解条件的确定。
表5 碱性内切酶(A)酶解条件均匀设计表温度/℃时间/h p H加酶量/%DH/%1755515510171 2652710612146 3707615111125 4556715410165 580481037165660361029146 DPS处理结果为温度:55℃;时间:7h;p H= 714;加酶量:6%;DH=12181%。
验证实验结果:DH=12156%结果符合。
21314 F+P组合酶最佳酶解条件的确定。
表6 F+P酶解条件均匀设计表温度/℃时间/h p H F∶P加酶量/%DH/%15576103526110 2506615115323175 35035152218155 46045100133420154 5552710015617187 66057151114175 DPS处理结果为温度:51℃;时间:7h;p H= 619;F∶P=3∶1;加酶量:6%DH=31187%。
验证实验结果:DH=30198%结果符合。
21315 F+A组合酶最佳酶解条件的确定。
表7 F+A酶解条件均匀设计表温度/℃时间/h p H F∶A加酶量/%DH/%15576153523112 2506710115319175 35036102214168 46045150133415187 5552715015615136 66058101111165 DPS处理结果为温度:50℃;时间:7h;p H= 713;F∶A=3∶1;加酶量:6%DH=28148%。
验证实验结果:DH=28115%结果符合。
由以上实验结果可以看出,在相同的加酶量和酶解时间条件下,F+P组合酶所得的水解度最高,因此下面将进一步确定F+P组合酶的最适酶解时间和加酶量。
214 F+P组合酶的最适酶解时间和加酶量的确定根据酶解均匀试验中所确定的最佳酶解条件,保持温度、p H以及酶比不变,改变酶解时间和加酶量进行酶解试验,测定不同加酶量和酶解时间下的水解度,作出酶解时间、加酶量和水解度的关系图(见图2),确定最适的酶解时间和加酶量。
图2 F+P组合酶酶解时间、加酶量和水解度的关系图由图可见,随着加酶量和反应时间的增大,水解度(DH)呈增大趋势,以水解度的大小为参考依据,兼顾经济因素可得F+P的最适加酶量为4%,酶解时间为8h。
3 结论①以外肽酶和内肽酶组合对大豆蛋白的水解效果比用单一的内肽酶对大豆蛋白的水解效果好,可以得到更高的水解度。
而且酶解大豆蛋白往往会产生苦味,这是由于内肽酶作用于蛋白质分子内部肽键,生成小分子肽段而产生苦味,而通过外肽酶和内肽酶协和作用可以大大降低酶解液的苦味[10]。
②以水解度为依据兼顾经济因素,F+P组合酶酶解大豆蛋白的最佳条件为:温度:51℃;p H= 619;F∶P=3∶1;加酶量为4%;酶解时间为8h。