梅毒螺旋体抗体颗粒凝集试验PPT课件
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RPR(+)、TP-ELISA(-)、TPPA(-)为假阳性或初期感染。 RPR(+)、TP-ELISA (+)、TPPA(+)为梅毒感染。 RPR(-)、TP-ELISA(+)、TPPA(+)为晚期梅毒或梅毒既往感染。
11
谢谢 thank you
12
梅毒螺旋体抗体颗粒凝集试验 (TPPA)简介
聂明明
1
梅毒概况
梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种慢性、系统性性传播疾病。人体 受感染后，螺旋体很快播散到全身，几乎可侵犯全身各组织与器 官，临床表现多种多样，且时显时隐，病程较长
≪中华人民共和国传染病防治法≫规定要管理的性病是爱滋病、 淋病和梅毒，应加以重点防治。卫生部≪性病防治管理办法≫则规定 除上述3种病以外，还有生殖器疱疹、尖锐湿疣、软下疳、非淋菌性 尿道炎（NGU）、性病淋巴肉芽肿均为监测性疾病
5
TPPA
➢ 原理：赛乐迪亚TP.PA是将梅毒Treponema Pallidum(Nichols株)的精制菌体成分包被在人工载体明胶 粒子上。这种致敏粒子和样品中的梅毒螺旋体Treponema Pallidum（TP）抗体进行反应发生凝集，产生粒子凝集反 应（Particle Agglutination Test;PA法），由此可以检测出血 清和血浆中的梅毒螺旋体Treponema Pallidum（TP）抗体, 并且可用来测定抗体效价。
1、性病研究实验室玻片试验（VDRL) ：由于试剂需现配 现用，故
而国内实验室很少采用。但VDRL是唯一可用于神经性梅毒诊断的血 清学方法
2、快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR)：在特制的纸片
上进行，加入一定量特制的炭粉，可使抗原抗体出现
凝集，用肉眼可观察结果。
3、甲苯胺红试验（TRUST)：在试剂中加入甲苯胺红代替炭粉 颗粒， 使结果更易于观察。
➢ 优点： 1、试剂稳定，批间差小
➢
2、结果判读更为清晰明确
➢
3、敏感性和特异性较TPHA进一步提高
➢
4、通过了国家的批批检
➢ 不足：结果判定主观，较难实现自动化
6
关于梅毒血清学试验程序的探讨（一）
先以非梅毒螺旋体抗原血清试验（RPR、TRUST等）进行初筛，再 以梅毒螺旋体抗原血清试验（TPPA、TPHA、ELISA等）进行确认
•血清样品即使钝化也不会影响检查结果。
9
TPPA操作中的注意事项
不要将生产批号不同的试剂混合在一起使用
试剂应2-8 ℃保存，不可冻结试剂
试剂在使用前应事先从冰箱中取出, 平衡至室温后再进行操作
试验应在FASTEC硬质微量反应U型板中进行, 该板洗涤后可重复使用, 但重复使用次数不宜超过三次
最好将反应板放置在一块白色湿布上进行加样、稀释过程，以防止静 电可能带来的影响
优点：非梅毒螺旋体抗原血清试验价格低廉，使梅 毒检测的成本可以保持在低水平
缺点：非梅毒螺旋体抗原血清试验的敏感性较差， 导致临床上易出现漏检的情况
同时进行梅毒螺旋体抗原血清试验和非梅毒螺旋体抗原血清试验 优点：这是从技术上而言的最佳方案
• 缺点：人力和试剂成本较高 • 先进行梅毒螺旋体抗原血清试验，阳性时再进行非梅毒螺旋体抗原血
在HIV感染者中，梅毒血清学反应有时会出现难于解释的 现象，因此对于临床怀疑梅毒感染而血清学试验又表现为 阴性者，建议考虑HIV检查
3
梅毒的血清学试验（一）
非梅毒螺旋体抗原血清试验：是以心磷脂、卵磷脂及胆固醇作为抗原
检查血清中的反应素，用于初筛试验及疗效观察。可以分为以下四种 试验，原理基本相同：
清试验
7
关于梅毒血清学试验程序的探讨（二）
梅毒螺旋体抗原血清试验（TPPA等）
（
（-）
+）
非梅毒螺旋体抗原血清试验（RPR
等）
（+）
（-
）
阴性报告
现症梅毒
询问梅毒既往感染和治疗
史 （有）
（无）
抗梅治疗，疗效观察 既往感染
随访或抗梅治疗
8
样本要求
• 样品中如果存在红细胞等其他有形成分，会给反 应带来不便，所以应在离心除去之后再进行检查。
致敏粒子和未致敏粒子在滴加前应充分摇匀。加样、稀释完毕后应轻 轻拍打反应板边缘以进行混匀，注意勿使液体溅入邻近的孔中，不要 使用旋涡混匀器
反应应在室温下静置2小时以上，不要使用水浴箱或恒温箱，结果观 察完毕前不要振摇反应板
10
临床意义
• RPR可用作临床筛查,TP-ELISA可作定量,用于疗 效观察;TPPA试验特异性高,主要用于确认试验。
4、不加热血清反应素试验（USR)
4
Biblioteka Baidu
梅毒的血清学试验（二）
梅毒螺旋体抗原血清试验：用梅毒螺旋体作为抗原检
测血清中的抗螺旋体IgM和/或IgG抗体，其敏感性和特异 性均较高。常用的有以下五种方法：
1、荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS) 2、梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA） 3、梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA) 4、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA） 5、梅毒螺旋体快速诊断试验（TP-RT）
梅毒早期主要侵犯皮肤及粘膜，晚期除侵犯皮肤、粘膜外，还可侵犯 心脏血管系统及中枢神经系统；另一方面，梅毒又可多年无症状呈潜 伏状态
梅毒主要通过性接触传染，也可因其它方式密切接触或输入患者的血 液而传染。梅毒孕妇可通过胎盘使胎儿在宫内受感染或出生时接触母 亲有病损的产道受染
2
梅毒与HIV感染
梅毒和一些其他性病均与艾滋病密切相关，从社会学角度 来看，凡人群中梅毒发病率高，意味着人群中性乱现象严 重，提供了艾滋病流行的条件；从医学角度来说，患有梅 毒的人，因有局部溃疡，可明显增加带有CD4受体信息的 目标细胞，故对HIV感染的易感性增加2-10倍。同样， HIV感染者伴有梅毒，其生殖道排出的HIV的量要比仅有 HIV感染者排出的量大得多
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梅毒螺旋体抗体颗粒凝集试验 (TPPA)简介
聂明明
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梅毒概况
梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种慢性、系统性性传播疾病。人体 受感染后，螺旋体很快播散到全身，几乎可侵犯全身各组织与器 官，临床表现多种多样，且时显时隐，病程较长
≪中华人民共和国传染病防治法≫规定要管理的性病是爱滋病、 淋病和梅毒，应加以重点防治。卫生部≪性病防治管理办法≫则规定 除上述3种病以外，还有生殖器疱疹、尖锐湿疣、软下疳、非淋菌性 尿道炎（NGU）、性病淋巴肉芽肿均为监测性疾病
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TPPA
➢ 原理：赛乐迪亚TP.PA是将梅毒Treponema Pallidum(Nichols株)的精制菌体成分包被在人工载体明胶 粒子上。这种致敏粒子和样品中的梅毒螺旋体Treponema Pallidum（TP）抗体进行反应发生凝集，产生粒子凝集反 应（Particle Agglutination Test;PA法），由此可以检测出血 清和血浆中的梅毒螺旋体Treponema Pallidum（TP）抗体, 并且可用来测定抗体效价。
1、性病研究实验室玻片试验（VDRL) ：由于试剂需现配 现用，故
而国内实验室很少采用。但VDRL是唯一可用于神经性梅毒诊断的血 清学方法
2、快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR)：在特制的纸片
上进行，加入一定量特制的炭粉，可使抗原抗体出现
凝集，用肉眼可观察结果。
3、甲苯胺红试验（TRUST)：在试剂中加入甲苯胺红代替炭粉 颗粒， 使结果更易于观察。
➢ 优点： 1、试剂稳定，批间差小
➢
2、结果判读更为清晰明确
➢
3、敏感性和特异性较TPHA进一步提高
➢
4、通过了国家的批批检
➢ 不足：结果判定主观，较难实现自动化
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关于梅毒血清学试验程序的探讨（一）
先以非梅毒螺旋体抗原血清试验（RPR、TRUST等）进行初筛，再 以梅毒螺旋体抗原血清试验（TPPA、TPHA、ELISA等）进行确认
•血清样品即使钝化也不会影响检查结果。
9
TPPA操作中的注意事项
不要将生产批号不同的试剂混合在一起使用
试剂应2-8 ℃保存，不可冻结试剂
试剂在使用前应事先从冰箱中取出, 平衡至室温后再进行操作
试验应在FASTEC硬质微量反应U型板中进行, 该板洗涤后可重复使用, 但重复使用次数不宜超过三次
最好将反应板放置在一块白色湿布上进行加样、稀释过程，以防止静 电可能带来的影响
优点：非梅毒螺旋体抗原血清试验价格低廉，使梅 毒检测的成本可以保持在低水平
缺点：非梅毒螺旋体抗原血清试验的敏感性较差， 导致临床上易出现漏检的情况
同时进行梅毒螺旋体抗原血清试验和非梅毒螺旋体抗原血清试验 优点：这是从技术上而言的最佳方案
• 缺点：人力和试剂成本较高 • 先进行梅毒螺旋体抗原血清试验，阳性时再进行非梅毒螺旋体抗原血
在HIV感染者中，梅毒血清学反应有时会出现难于解释的 现象，因此对于临床怀疑梅毒感染而血清学试验又表现为 阴性者，建议考虑HIV检查
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梅毒的血清学试验（一）
非梅毒螺旋体抗原血清试验：是以心磷脂、卵磷脂及胆固醇作为抗原
检查血清中的反应素，用于初筛试验及疗效观察。可以分为以下四种 试验，原理基本相同：
清试验
7
关于梅毒血清学试验程序的探讨（二）
梅毒螺旋体抗原血清试验（TPPA等）
（
（-）
+）
非梅毒螺旋体抗原血清试验（RPR
等）
（+）
（-
）
阴性报告
现症梅毒
询问梅毒既往感染和治疗
史 （有）
（无）
抗梅治疗，疗效观察 既往感染
随访或抗梅治疗
8
样本要求
• 样品中如果存在红细胞等其他有形成分，会给反 应带来不便，所以应在离心除去之后再进行检查。
致敏粒子和未致敏粒子在滴加前应充分摇匀。加样、稀释完毕后应轻 轻拍打反应板边缘以进行混匀，注意勿使液体溅入邻近的孔中，不要 使用旋涡混匀器
反应应在室温下静置2小时以上，不要使用水浴箱或恒温箱，结果观 察完毕前不要振摇反应板
10
临床意义
• RPR可用作临床筛查,TP-ELISA可作定量,用于疗 效观察;TPPA试验特异性高,主要用于确认试验。
4、不加热血清反应素试验（USR)
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梅毒的血清学试验（二）
梅毒螺旋体抗原血清试验：用梅毒螺旋体作为抗原检
测血清中的抗螺旋体IgM和/或IgG抗体，其敏感性和特异 性均较高。常用的有以下五种方法：
1、荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS) 2、梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA） 3、梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA) 4、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA） 5、梅毒螺旋体快速诊断试验（TP-RT）
梅毒早期主要侵犯皮肤及粘膜，晚期除侵犯皮肤、粘膜外，还可侵犯 心脏血管系统及中枢神经系统；另一方面，梅毒又可多年无症状呈潜 伏状态
梅毒主要通过性接触传染，也可因其它方式密切接触或输入患者的血 液而传染。梅毒孕妇可通过胎盘使胎儿在宫内受感染或出生时接触母 亲有病损的产道受染
2
梅毒与HIV感染
梅毒和一些其他性病均与艾滋病密切相关，从社会学角度 来看，凡人群中梅毒发病率高，意味着人群中性乱现象严 重，提供了艾滋病流行的条件；从医学角度来说，患有梅 毒的人，因有局部溃疡，可明显增加带有CD4受体信息的 目标细胞，故对HIV感染的易感性增加2-10倍。同样， HIV感染者伴有梅毒，其生殖道排出的HIV的量要比仅有 HIV感染者排出的量大得多