宜选用冰醋酸与醋酐混合溶剂

测定条件与影响因素
酸性染料的选择及 其浓度
B
水相最佳pH值 A
的选择
酸性染料比 色法的影响 因素
C 有机试剂的选择
酸性染料中 E
杂质的影响
D 水分的影响
水性最佳pH值：使得BH+和In-最多 酸性染料及其浓度：定量结合；对离子对的溶解 性好；有较高的吸收度；足够量即可 有机溶剂的选择：提取效率高，氯仿最理想 水分的影响：影响结果，脱水剂或滤纸除去水分 酸性染料中的有色杂质：有机溶剂萃取除去
加入三氯甲烷10ml的ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ液漏斗中，各加溴甲酚绿2.0ml，振摇提取
两分钟后，静止分层，分取澄清的三氯甲烷液，在420nm波长处分
别测定吸光度，计算，并将结果与1.027相乘，即得本品
（C17H23NO3）2·H2SO4·H2O相当标示量的百分含量。
百分标示量

Ax
AS
CS 501.027W m 标示量
B +H+ BH+ HIn H+ + In-
(BH+·In-)水相
(BH+·In-)有机相
UV
• 也可分离出有机相，然后用碱化试剂 碱化有机相，将离子对中的酸性染料释 放出来，用水提取In-，测定水中染料的 吸光度，间接计算出碱性药物的含量。
• 本法具有专属性强、准确度好、灵敏 度高、试样用量少等优点，适用于小剂 量生物碱类药物及其制剂以及生物体内 生物碱类药物的定量分析。《中国药典 》对硫酸阿托品、氢溴酸山莨菪碱的片 剂和注射剂的含量测定均采用此法。
应用示例
硫酸阿托品片的含量测定
精密量取对照品溶液和供试品溶液各2ml，分别置预先精 密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚绿溶液 4ml，振摇提取后，静置使分层；分取三氯甲烷液，照紫 外-可见分光光度法，在420nm波长处分别测定吸光度， 计算，即得。
• 测定法 精密量取对照品溶液和供试品溶液各2ml，分别置预先精密
(二)测定条件的选择
• 适用的范围及溶剂的选择
主要应用于pKb >8的有机碱性药物及其盐的含量
测定。条件选用适当的pKb为8~13的弱碱均可采
用。 对于碱性较弱的药物pKb为8~10时，宜选用冰醋 酸， pKb为10~12时，宜选用冰醋酸与醋酐混合溶 剂， pKb大于12时，就以醋酐为溶剂。
• 酸根的影响 在生物碱盐的滴定中，与之成盐的
含量测定 (Assay)
• 非水溶液滴定法
非水溶液滴定法是在非水溶剂中进行的酸碱滴定测定 法。主要用来测定有机碱及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸盐 以及有机酸碱金属盐类药物的含量。也用于测定某些有机 弱酸的含量。
一、非水溶液滴定法(弱碱性)
溶剂种类 （1）酸性溶剂：有机弱碱在酸性溶剂中可显著地增强 其相对碱度，最常用的酸性溶剂是冰醋酸。 （2）碱性溶剂：有机弱酸在碱性溶剂中可显著地增强 其相对酸度，最常用的碱性溶剂是二甲基甲酰胺。 （3）两性溶剂：兼有酸碱两种性能，最常用的是甲醇。 （4）惰性溶剂：溶剂没有酸碱性，如甲苯、三氯甲烷、 丙酮。
酸在冰醋酸中的酸性强弱对滴定能否顺利进行有 关。各种酸在冰醋酸中的酸性强弱顺序为:
高氯酸>氢溴酸>硫酸>盐酸>硝酸>磷酸>有机酸
由此可见，如被置换出的是氢卤酸，其在冰醋 酸中的酸性较强，对滴定终点有影响，需要进行 处理。一般处理方法为在滴定反应开始前，预先 在冰醋酸中加入醋酸汞的冰醋酸溶液，使氢卤酸 生成在冰醋酸中难解离的卤化汞而排除干扰，然 后再用高氯酸滴定液滴定。
• 1.离子对 2.染料空白（对照品平行测定，空白吸收可被扣除）3.阿托品（水溶 液在420nm附近无吸收）
三、色谱法
分离模式多样 选择和专属性强 重复性好
HPLC优点
适用范围广 检测手段多样灵敏 分离速度快
• 当醋酸汞的量加入不足时，滴定终点仍不 准确，会使测定结果偏低，一般加入量以 其理论量的1～3倍为宜。然而醋酸汞是剧 毒的化学物质，且严重污染环境，近年来 生物碱类药物氢卤酸盐的非水溶液滴定法 逐渐改用醋酐代替冰醋酸作溶剂，并以电 位法指示终点，以避免使用醋酸汞。
• 终点指示方法 一般指示终点的方法有电位 法和指示剂法。结晶紫由碱性区域到酸性区域的颜色变化为
100%
• 式浓2·H中度2SAmOxg、4/·mHAl2S；O分与m别（为为C样供17品H试2片3品N粉和O质3对）量照2·；H品2WS溶O为液4·平H的2均O吸的片光质重度量。；换1.C0算S2为7系为对数（照。C品17溶H2液3N的O3）
• Fig. 12-2 The UV-spectrum of atropine sulfate with BTB ions
紫、蓝紫、蓝绿、绿、黄。
• 滴定液的稳定性 本法的溶剂冰醋酸具有挥 发性，且膨胀系数较大，因此温度和贮存 条件等都影响滴定液的浓度。需校正
• 注意事项 ①水分②高浓度的高氯酸与醋酐 混合时容易引起爆炸，配制时应先将高氯 酸用冰醋酸稀释后再加入醋酐。
(三)应用实例
二、紫外-可见分光光度法
(二)酸性染料比色法 基本原理
• 式中BH+·A-表示生物碱盐类，HA表示被置换 出的弱酸。由于被置换出的HA酸性强弱不同， 对滴定反应的影响也不同，若置换出的HA酸性 较强，则反应不能定量的完成。因此在实际滴定 中，必需根据具体情况，采取相应的测定条件， 设法将HA除去或减少其产生，使反应顺利完成
方法 除另有规定外，精密称取供试品适量[ 约消耗高氯酸滴定液(0.1mol/L ) 8 ml ]，加冰 醋酸10～30ml使溶解。加各品种项下规定的 指示液1～2滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴 定。终点颜色以电位滴定时的突跃点为准， 并将滴定的结果用空自试验校正。
一、非水溶液酸碱滴定法
(一)原理与方法 原理 生物碱类药物一般具有弱碱性，在水 溶液中用酸滴定液进行直接滴定时没有明显 的滴定突跃，难于掌握终点，不能顺利的滴 定。而在酸性非水介质(冰醋酸、醋酐)中，生 物碱的碱性显著增强，滴定突跃增大，滴定 可顺利进行。
• 生物碱类药物绝大多数都以盐的形式供临床 使用，即供分析用的多为生物碱盐类。其盐的滴 定，实际上是一个置换反应，即用强酸滴定液置 换出与生物碱结合的较弱的酸。