还原糖的鉴定中的易错点

高中生物实验中的还原糖鉴定实验之易错点

河南师大附中吴彦军

斐林试剂和班氏试剂都是高中生物必修一中检验还原性糖的试剂，但其二者在成分和使用原理以及保存方法方面都有一定的区别。下面就从这两种试剂的使用原理、所含成分及使用方法等方面做一简单比较：

1、成分不同：

班氏试剂的配制方法：把CuSO4溶液倒入柠檬酸钠溶液-Na2CO3溶液中，边加边搅，滤去沉淀即可。

斐林试剂的配制方法：斐林试剂甲液为0.1 g/mLNaOH的溶液。乙液为0.05 g/mL CuSO4的溶液。使用时，将4～5滴乙液滴入2 mL甲液中，混合后立即使用。

2、使用原理不同：柠檬酸钠和碳酸钠都是强碱弱酸盐，在水中水解时均可产生OH-。柠檬酸钠-Na2CO3溶液和CuSO4溶液混合时，Cu2+和OH-结合，所生成的Cu(OH)2与葡萄糖中的醛基（-CHO）发生反应生成砖红色沉淀。而斐林试剂则是将CuSO4溶液与NaOH溶液发生反应生成Cu(OH)2。因此，无论是班氏试剂还是斐林试剂，归根结底都是Cu(OH)2与还原糖分子中的醛基（-CHO）在沸水浴加热条件下相互作用生成砖红色的Cu2O沉淀，两者反应现象是一样的，这是两种试剂在鉴定还原糖的结果上的相同之处。

3、保存方式不同：在班氏试剂的配方中，柠檬酸钠为-Na2CO3是一对缓冲物质，产生的OH-数量不大，与CuSO4溶液混合后产生的Cu(OH)2浓度相对较低，不易析出，因此该试剂可长期保存。正因为如此，医疗上一般使用班氏试剂鉴定尿糖；而斐林试剂甲和斐林试剂乙混合后可以产生较多地Cu(OH)2，很容易沉淀析出，因此斐林试剂一般为现用现配。

4、反应条件与现象：斐林试剂是新配制的Cu(OH)2溶液，它在加热条件下与醛基反应，被还原成砖红色的Cu2 O沉淀，可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）。班氏试剂亦如此。

该实验中还应掌握常见还原糖种类：单糖（葡萄糖、果糖、核糖、半乳糖）和部分二糖（乳糖和麦芽糖）

本实验最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官),而且组织的颜色较浅,或近于白色的,如苹果和梨的果实。

鉴定还原糖一般不宜选择叶片作为实验材料：

在双子叶植物中,光合作用的主要产物葡萄糖形成后合成为淀粉,暂时储藏在叶子内,因此最好不用双子叶植物的叶子作实验材料。

有些单子叶植物，如韭菜、鸢尾，叶内尽管含有大量的可溶性单糖，但是，由于叶片中叶绿素的颜色较深，对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用，导致实验现象不明显，因此，也不宜用单子叶植物的叶子作实验材料。