第三章 食品微生物检验的常用是试剂及配制
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一、培养基的成分与种类
微生物细胞的化学组成
营养物质的确立依据:①组成细胞的化学成分②所需代谢产物的化学组成。
C、H、O、N、P、S占90%以上;Ca、Mg、Fe、Mn、Cu、Zn、Co、Zn、Mu
水、无机盐
主要形式
有机物:蛋白质、糖、脂肪、核酸、维生素、降解产物、代谢产物。
(一)培养基的成分
1、水:80%
微生物离开水不能进行生命活力。
游离水
结合水:不易蒸发,不结冰,不能渗透。
干重法测得的水分是游离水的含量。
2、碳源
凡是能供给微生物碳素营养的物质都称碳量源。
(1).CO2
(2).有机含碳化合物:糖、双糖、有机酸、醇、纤维素
(3).碳氢化合物:石油
(4.)发酵生产:废糖密、甘薯、玉米淀粉、其它植物淀粉。
3、氮源
凡是被微生物利用的含氮物质都称氮源。
(1).无机含氮化合物:N2、NH3、NO3-
(2). 有机含氮化合物:蛋白质、蛋白胨、氨基酸。
(3).发酵生产及实验室:玉米浆、豆饼、人工蛋白质、牛肉膏、硝酸钾、(NH4)2SO4
作用:(1)组成微生物细胞内蛋白质和核酸的重要元素。
(2)微生物生命活动中不可缺少的物质。
4、矿物营养
作用:(1)构成菌体的成分
(2)酶活动中心的组成部分维持酶的活力
(3)调节渗透压、PH、氧化还原电位。
(4)自氧菌的能源。
各种无机元素及作用见P54
5、生长因子:指某些微生物不能利用普通的碳源、氮源合成,而需另外加入少量的有机物才能满足机体生长的需要,这种有机物质叫生长素。
营养缺陷型――凡是不能合成生长所需要的生长素类物质的微生物称营养缺陷型。
生长素种类:维生素类物质、20多种:B族,B1、B2、…V H
(二)、培养基的分类
1.按培养基组分的来源分
(1)天然培养基:天然有机物质配制而成,营养成分完全,成分难以确定。
天然有机物质有:牛肉膏、酵母膏、麦芽汁、麦麸、蛋白胨、土壤浸汁、玉米粉、麸皮、牛奶、血清。
适合培养各类异养微生物,适于大规模的微生物培养。
(2)合成培养基:用已知的化学物配制的。
培养和跟精确:重复性好,适合再实验室使用,进行有关营养、代谢、分类、鉴定、、生物测定、选育菌种及遗传分析研究工作。
(3)半固体培养基:(软琼脂)加凝固剂为0.2~0.5%,为半流动状态,专为观察细菌运动、鉴定菌种。
3.按用途分
(1)基础培养基:共同成分作为基础配方,再根据特殊需要加所需物质。
(2)加富培养基:(增殖培养基)加入额外的营养物质,适合于某种微生物的生长繁殖而不适合其它微生物的生长,培养目的菌,淘汰杂菌。
(3)鉴别培养基:在培养基中加入某种指示剂,使不同的微生物经培养后,用于代谢物对指示剂的反应不同而呈现显著差别,便于快速鉴别某种微生物。
如:用伊红――美蓝培养基可鉴别出在此培养基上形成黑紫色、带金属光泽菌落的大肠杆菌。(4)选择培养基:在培养基中加入某些化学物质,以抑制不需要菌的生长,而促进目的菌的生长。
如:加链霉素抑制细菌生长,利于霉菌生长。
采用中性及偏碱性的培养基,有利于细菌和放线菌的生长,抑制真菌的生长。
4.按生产目的分
(1)种子培养基:获取优良菌种,营养丰富、完全,含氮高。
(2)发酵培养基:为人生产获取菌体或代谢产物,要求培养基来源广泛,且物美价廉。二、培养基的pH的测定与调整
测定方法:pH试纸
酸度计
调整:3%的氢氧化钠溶液
3%的盐酸溶液
三、常用培养基的制备技术
1、玻璃器皿的洗涤
2、培养及制备的基本方法和注意事项
(1)培养基配方的选定
(2)培养基的制备记录
(3)培养基成分的称取
(4)培养基成分的混合和溶化(5)培养基的pH的初步调整(6)培养基的过滤澄清
(7)培养基的分装
(8)培养基的灭菌
(9)培养基的质量测试
(10)培养记的保存
3、食品检验常用培养基的制备技术(1)基础培养基
(2)鉴别和选择性培养基
(3)增菌培养基
(4)生化培养基
(5)专用培养基
小结:
后记: