第三章 食品微生物检验的常用是试剂及配制

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一、培养基的成分与种类

微生物细胞的化学组成

营养物质的确立依据:①组成细胞的化学成分②所需代谢产物的化学组成。

C、H、O、N、P、S占90%以上;Ca、Mg、Fe、Mn、Cu、Zn、Co、Zn、Mu

水、无机盐

主要形式

有机物:蛋白质、糖、脂肪、核酸、维生素、降解产物、代谢产物。

(一)培养基的成分

1、水:80%

微生物离开水不能进行生命活力。

游离水

结合水:不易蒸发,不结冰,不能渗透。

干重法测得的水分是游离水的含量。

2、碳源

凡是能供给微生物碳素营养的物质都称碳量源。

(1).CO2

(2).有机含碳化合物:糖、双糖、有机酸、醇、纤维素

(3).碳氢化合物:石油

(4.)发酵生产:废糖密、甘薯、玉米淀粉、其它植物淀粉。

3、氮源

凡是被微生物利用的含氮物质都称氮源。

(1).无机含氮化合物:N2、NH3、NO3-

(2). 有机含氮化合物:蛋白质、蛋白胨、氨基酸。

(3).发酵生产及实验室:玉米浆、豆饼、人工蛋白质、牛肉膏、硝酸钾、(NH4)2SO4

作用:(1)组成微生物细胞内蛋白质和核酸的重要元素。

(2)微生物生命活动中不可缺少的物质。

4、矿物营养

作用:(1)构成菌体的成分

(2)酶活动中心的组成部分维持酶的活力

(3)调节渗透压、PH、氧化还原电位。

(4)自氧菌的能源。

各种无机元素及作用见P54

5、生长因子:指某些微生物不能利用普通的碳源、氮源合成,而需另外加入少量的有机物才能满足机体生长的需要,这种有机物质叫生长素。

营养缺陷型――凡是不能合成生长所需要的生长素类物质的微生物称营养缺陷型。

生长素种类:维生素类物质、20多种:B族,B1、B2、…V H

(二)、培养基的分类

1.按培养基组分的来源分

(1)天然培养基:天然有机物质配制而成,营养成分完全,成分难以确定。

天然有机物质有:牛肉膏、酵母膏、麦芽汁、麦麸、蛋白胨、土壤浸汁、玉米粉、麸皮、牛奶、血清。

适合培养各类异养微生物,适于大规模的微生物培养。

(2)合成培养基:用已知的化学物配制的。

培养和跟精确:重复性好,适合再实验室使用,进行有关营养、代谢、分类、鉴定、、生物测定、选育菌种及遗传分析研究工作。

(3)半固体培养基:(软琼脂)加凝固剂为0.2~0.5%,为半流动状态,专为观察细菌运动、鉴定菌种。

3.按用途分

(1)基础培养基:共同成分作为基础配方,再根据特殊需要加所需物质。

(2)加富培养基:(增殖培养基)加入额外的营养物质,适合于某种微生物的生长繁殖而不适合其它微生物的生长,培养目的菌,淘汰杂菌。

(3)鉴别培养基:在培养基中加入某种指示剂,使不同的微生物经培养后,用于代谢物对指示剂的反应不同而呈现显著差别,便于快速鉴别某种微生物。

如:用伊红――美蓝培养基可鉴别出在此培养基上形成黑紫色、带金属光泽菌落的大肠杆菌。(4)选择培养基:在培养基中加入某些化学物质,以抑制不需要菌的生长,而促进目的菌的生长。

如:加链霉素抑制细菌生长,利于霉菌生长。

采用中性及偏碱性的培养基,有利于细菌和放线菌的生长,抑制真菌的生长。

4.按生产目的分

(1)种子培养基:获取优良菌种,营养丰富、完全,含氮高。

(2)发酵培养基:为人生产获取菌体或代谢产物,要求培养基来源广泛,且物美价廉。二、培养基的pH的测定与调整

测定方法:pH试纸

酸度计

调整:3%的氢氧化钠溶液

3%的盐酸溶液

三、常用培养基的制备技术

1、玻璃器皿的洗涤

2、培养及制备的基本方法和注意事项

(1)培养基配方的选定

(2)培养基的制备记录

(3)培养基成分的称取

(4)培养基成分的混合和溶化(5)培养基的pH的初步调整(6)培养基的过滤澄清

(7)培养基的分装

(8)培养基的灭菌

(9)培养基的质量测试

(10)培养记的保存

3、食品检验常用培养基的制备技术(1)基础培养基

(2)鉴别和选择性培养基

(3)增菌培养基

(4)生化培养基

(5)专用培养基

小结:

后记:

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