交叉配血(聚凝胺法、微柱凝胶法)
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LIM:降低 溶液的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云, 可促进抗体和红细胞膜血型抗原结合。
聚凝胺:高价阳离子,中和红细胞表面的负电荷,缩短细胞 间距,促进红细胞非特异性凝集。
重悬液:电荷中和 。
微柱凝胶卡交叉配血试验
原理:
将受血者、献血者的血清和红细胞,放置主侧 和次侧管的反应室中,放置37℃孵育器中孵育, 如果血清中存在针对红细胞抗原的血型抗体 (lgM型或IgG型)时,红细胞发生凝集,离心 后留在微柱的表面,为阳性;如果血清中不含有 针对红细胞膜上血型抗原的抗体,红细胞下沉到 微柱管的底部,为阴性。
操作步骤:
抽取受血者静脉血3~4ml,枸橼酸钠抗凝,以生理盐 水洗涤受血者红细胞3次,配成3% 红细胞悬液,同样 方法处理献血者样本; 取洁净小试管2支,1支标记为主侧管,另1支标为次侧 管; 主侧管内加受血者血清2滴、献血者红细胞悬液1滴; 次侧管加献血者血清2滴、受血者红细胞悬液1滴; 每管各加LIM溶液0.6ml,混匀,室温孵育1min; 每管各加2滴聚凝胺溶液,混合后静置15s; 1300g离心15s,倾去上清液; 轻轻摇动试管,目测细胞有无凝集,如无凝集,必须 重做; 加入2滴重新悬浮液,并轻轻转动试管混合,肉眼观察 结果,必要时用显微镜观察结果。
操作步骤:
按照试剂说明配制好献血者、受血者的红细胞悬液 以及分离血清。 主侧:25ul 受血者血清 + 50ul 1%献血者红细胞, 加入主侧管反应室内; 次侧: 25ul献血者血清+ 50ul 1%受血者红细胞, 加入到次侧管反应室内; 加样后的试剂卡放置专用孵育器37℃孵育15min; 取出试剂卡,放置专用离心机1000g离心9min; 取出试剂卡,肉眼观察结果。
结果判断:
主侧管和次侧管内红细胞凝集在1min散开, 则为聚凝胺引起的非特异性凝集,表示受血 者和献血者配血相容。 如果主侧管和/或次侧管内红细胞凝集不散开, 则表明两血不相容,献血者血液不可输注。
注意事项:
实验结果必须在3分钟内判读 在冬天气温较低时,某些病人血清中含有冷 凝集素而导致交叉配血假阳性;遇此现象可用 37℃-40℃生理盐水洗涤红细胞并置37℃水溶 中轻轻摇动,观察结果。
结果判断:
阴性结果:红细胞完全沉降于凝胶管底 部。 阳性结果:红细胞凝集块位于凝胶表面 或凝胶中,和(或)出现溶血。
交叉配血(聚凝胺法、微柱凝胶法)
临床血液教研室
交叉配血
交叉配血聚凝胺法:Βιβλιοθήκη Baidu
原理:
将红细胞和血清放置在低离 子介质中孵育,可促进抗体和 红细胞膜血型抗原结合,再加 入聚凝胺促进红细胞非特异性 凝集。离心后加入重悬液(电荷 中和 ),正常红细胞的凝集解散, 而抗体抗原结合引起的红细胞 凝集仍然存在。