微粒子酶促化学发光原理

微粒子酶促化学发光原理

微粒子酶促化学发光（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）是一种常用的生物分析技术，它基于酶促反应和化学发光原理，用于检测特定分子（如蛋白质、抗体、抗原等）的存在和浓度。

ELISA的原理包括以下几个关键步骤：

1. 固相吸附：首先，在试验板上涂覆含有特定抗原或抗体的微孔板，使其吸附在固相表面上。

2. 样品处理：将待测样品加入到微孔板中，使其中的目标分子与固相上的抗体或抗原发生特异性的结合。

3. 二次抗体结合：洗涤微孔板，以去除非特异性结合物。然后，添加与待测分子特异性结合的酶标记的二次抗体，使其与样品中的目标分子结合。

4. 酶促反应：再次洗涤微孔板，以去除未结合的二次抗体。然后，加入酶底物，它与酶标记的二次抗体结合，并形成可测量的产物。

5. 化学发光：酶底物与酶催化产生的产物具有发光性质，通过加入相应的底物来引发化学发光反应。

6. 检测和分析：使用荧光计或发光仪测量样品中的发光信号，该信号的强度与待测分子的浓度成正比。通过与已知浓度的标准曲线比较，可以确定待测样品中待测分子的浓度。

微粒子酶促化学发光技术具有高灵敏度、高选择性和广泛的应用范围。它在医学诊断、生物学研究和药物开发等领域发挥着重要作用。

1/ 1