豇豆根腐病菌的生物学特性及室内杀菌剂毒力测定

豇豆根腐病菌的生物学特性及室内杀菌剂毒力测定

杨绍丽;吴仁锋;杨德枝

【摘要】对引起湖北武汉地区豇豆根腐病的病菌(茄类镰刀菌,Fusarium solani Schl.)进行了生物学特性及室内杀菌剂毒力研究.结果表明,病菌菌丝生长的适宜温度为25～35℃;适宜pH 6～9;光照有利于菌丝生长;病菌能够利用多种碳源和氮源,最适碳源是麦芽糖,最适氮源是硝酸钠;菌丝的致死温度为65℃(10min).室内杀菌剂毒力测定结果表明,70％甲基托布津超微可湿性粉剂对病菌菌丝抑制效果最好,其后依次为50％硫磺·多菌灵可湿性粉剂和40％福星乳油,这3种杀菌剂均可用于防治豇豆根腐病;80％多菌灵可湿性粉剂和10％苯醚甲环唑水分散粒剂的EC50也较低,也可作为防治豇豆根腐病的杀菌剂.

【期刊名称】《湖北农业科学》

【年(卷),期】2013(052)022

【总页数】4页(P5479-5481,5484)

【关键词】豇豆根腐病菌(Fusarium solani Schl.);生物学特性;杀菌剂;毒力测定【作者】杨绍丽;吴仁锋;杨德枝

【作者单位】武汉市农业科学技术研究院武汉市蔬菜科学研究所,武汉430065;武汉市农业科学技术研究院武汉市蔬菜科学研究所,武汉430065;武汉市农业科学技术研究院武汉市蔬菜科学研究所,武汉430065

【正文语种】中文

【中图分类】S432.4+4;S436.411

为进一步了解湖北武汉地区豇豆根腐病菌（茄类镰刀菌，Fusarium solani Schl.）的生物学特性，筛选出防治效果较好的药剂，本试验系统研究了该菌在不同光照、温度、pH、碳源、氮源条件下的生长特性及菌丝的致死温度，并测定了7种杀菌剂对该菌的抑制作用，以期为该病害的防治提供参考。

1 材料与方法

1.1 供试病菌

豇豆根腐病菌菌株JGF，由武汉市农业科学技术研究院武汉市蔬菜科学研究所于2009年9月从该所基地采集标样，经分离培养获得，并进行了致病性测定、形态学和分子生物学鉴定［1，2］。

1.2 不同光照对菌丝生长的影响

病原菌在PDA培养基上培养5 d后，用打孔器从菌落边缘取直径6 mm菌丝块，接种于PDA培养基平板上，每皿接种1个菌丝块。将接种后的平皿置于

HP250GS型智能人工气候培养箱培养，温度25℃。设置连续黑暗、连续光照、12 h／d光暗交替3个处理（光源为普通日光灯，18 W，距离22 cm），每个处理3个重复，4 d后用十字交叉法测量菌落直径。

1.3 不同温度对菌丝生长的影响

病原菌在PDA培养基上培养5 d后，用打孔器从菌落边缘取直径6 mm菌丝块接种于PDA培养基平板上，每皿接1个菌丝块。设置5、10、15、20、25、30、35、40℃共8个温度处理，将接好菌种的平皿分别置于不同温度的恒温培养箱培养，每个处理5个重复。7 d后用十字交叉法测量菌落直径。

1.4 不同pH对菌丝生长的影响

用 1 mol／L NaOH 和 1 mol／L HCl溶液调节PDA 培养基 pH，终值分别为3、4、5、6、7、8、9、10、11、12，然后在不同pH的平板中央接种直径6

mm的菌丝块，置于25℃恒温培养箱培养，每个处理3个重复，5 d后用十字交

叉法测量菌落的直径。

1.5 不同碳源、氮源对菌丝生长的影响

以Czapek培养基为基础培养基［3］，用含碳量相同的葡萄糖、麦芽糖、乳糖、木糖、果糖、可溶性淀粉代替其中的蔗糖，以不加碳源作对照。以Czapek培养基为基础培养基，用含氮量相同的尿素、硝酸钠、硝酸铵、氯化铵、精氨酸代替其中的硝酸钾，以不加氮源作对照。打取直径为6 mm的菌丝块接种在不同碳、氮源

培养基平板中央，每处理3个重复，置于25℃恒温培养箱中，5 d后采用十字交

叉法测量菌落直径。

1.6 菌丝致死温度测定

用6 mm打孔器在活化好的PDA培养基菌落边缘取菌丝块并置于无菌试管中，加入2 mL无菌水。分别在 35、40、45、50、55、60、65、70 ℃水浴锅中处理

10 min后取出迅速冷却，将菌丝块取出置于PDA平板上25℃恒温培养，5 d后

观察菌丝生长情况，每处理重复5次。

1.7 不同杀菌剂对豇豆根腐病菌的室内毒力测定

1.7.1 供试药剂 70%甲基托布津超微可湿性粉剂（西安美邦药业有限公司）、40%福星乳油（上海农乐生物制品股份有限公司）、80%多菌灵可湿性粉剂（美国农

友集团有限公司）、50%硫磺·多菌灵可湿性粉剂（河北冠龙农化有限公司）、75%百菌清可湿性粉剂（成都皇牌作物科学有限公司）、80%福·福锌可湿性粉剂（河

北冠龙农化有限公司）、10%苯醚甲环唑水分散粒剂（北京绿色农华植保科技有

限公司）。

1.7.2 含药平板制备根据预备试验结果，确定各个供试药剂的浓度梯度和配制时的系列剂量，70%甲基托布津超微可湿性粉剂、80%福·福锌可湿性粉剂、10%苯醚

甲环唑水分散粒剂浓度梯度为31.25、62.50、125.00、250.00、500.00 μg／mL；

80%多菌灵可湿性粉剂、50%硫磺·多菌灵可湿性粉剂、40%福星乳油浓度梯度为62.5、125.0、250.0、500.0、1 000.0 μg／mL；75%百菌清可湿性粉剂浓度梯

度为125、250、500、1 000、2 000 μg／mL。将供试药剂稀释成相应系列浓

度后，准确吸取一定量的药液加入到熔化的培养基中，以1 mL药液加入9 mL培养基为标准，3次重复。

1.7.3 测定方法采用抑制菌丝生长速率法测定［4］。在超净工作台上，将供试药

剂配成不同浓度的带药培养基，制成PDA培养基平板，每处理3皿，同时设加等量无菌水的培养基为空白对照，然后用打孔器在培养5 d的菌落边缘打取直径6 mm菌丝块，分别放在不同药剂培养基平板中央，菌丝面朝上，在25℃的恒温培养箱中倒置培养，5 d后用十字交叉法测量菌落的直径，计算杀菌剂对菌丝生长的（相对）抑制率，并用DPS数据分析软件求毒力回归方程、相关系数和EC50，

比较几种供试药剂的毒力大小。

抑制率＝（空白对照菌落直径－处理菌落直径）／（空白对照菌落直径－菌饼直径）×100%

2 结果与分析

2.1 光照对菌丝生长的影响

病原菌在PDA培养基平板上连续黑暗、连续光照、12 h／d光暗交替条件下培养

7 d，菌落平均直径分别为 45.20、52.15、48.15 mm。可见光照有利于菌丝的

生长（图1）。

图1 光照对菌丝生长的影响

2.2 温度对菌丝生长的影响

在PDA培养基平板上，菌丝在10～35℃温度范围均能生长，25～35℃为菌丝生长的适宜温度，30℃为最适生长温度；菌丝在5℃和40℃不生长（图2）。

2.3 pH对菌丝生长的影响