出口植物源性食品中多种拟除虫菊酯残留量

出口植物源性食品中多种拟除虫菊酯残留量

1 范围

本标准规定了出口植物源性食品中七氟菊酯、啶氧菊酯、苄呋菊酯、联苯菊酯、胺菊酯、甲氰菊酯、苯醚菊酯、氯氟氰菊酯、氟丙菊酯、顺式氯菊酯、反式氯菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氟氰戊菊酯、醚菊酯、氟硅菊酯、氰戊菊酯、高氰戊菊酯、氟胺氰菊酯和溴氰菊酯20种拟除虫菊酯残留量的气相色谱串联质谱/质谱的测定方法。

本标准适用于花菜、蘑菇、菠菜、番茄、胡萝卜、蚕豆、洋葱、苹果、柑橘、大米和茶叶中20种拟除虫菊酯残留量的测定和确证。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 方法提要

试样中残留的菊酯类农药用丙酮-正已烷提取，无水硫酸钠脱水后提取液经活性炭小柱和弗罗里硅土小柱净化及浓缩后，使用配有（EI）离子源的气相色谱串联质谱/质谱仪进行定量及确证检测，外标法定量。

4 试剂材料

除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。

4.1丙酮：色谱纯。

4.2正已烷：色谱纯。

4.3无水乙醚。

4.4 无水硫酸钠：于650℃下灼烧4小时，冷却后贮于密闭容器中备用。

4.5 丙酮-正已烷（1+1，体积比）溶液：量取500mL丙酮和500mL正己烷至1000mL试剂瓶中，混匀。

4.6 丙酮-正己烷（1+2，体积比）溶液：量取250mL丙酮和500mL正己烷至1000mL试剂瓶中，混匀。

4.7 乙醚-丙酮-正己烷（4+4+2，体积比）溶液：量取400mL乙醚、400mL丙酮和200mL正己烷至1000mL 试剂瓶中，混匀。

4.8 农药标准物质：20种拟除虫菊酯标准物质纯度均大于或等于90%。20种拟除虫菊酯农药的化学分子式等信息见附录A中表A.1。

4.9 标准储备液的配制：分别准确称取适量的标准物质，用丙酮溶解并配制成浓度为1.0 mg/mL的标准储备液，于-18℃避光保存。

4.10 混合标准中间溶液的配制：各移取上述的标准储备液1.0 mL至100 mL容量瓶中，用正己烷稀释并定容至刻度，配制成约10μg/mL的混合标准中间溶液，于0℃~ 4℃避光保存。

4.11 活性炭固相萃取小柱：ENVI-Carb SPE column，500mg，6 mL，或相当者。

4.12 弗罗里硅土固相萃取小柱：Florisil column，500mg，6 mL，或相当者。

4.13 有机相针式滤膜：0.22µm。

5 仪器与设备

5.1 气相色谱-质谱/质谱联用仪：配有（EI）离子源。

5.2 分析天平：感量分别为0.1mg和0.01g。

5.3 涡漩混匀器。

5.4 固相萃取装置。

5.5 旋转蒸发仪。

5.6 氮吹仪。

5.7 离心机：转速不低于4000rpm/min

5.8 组织搅拌机。

6 试样的制备与保存

6.1 试样制备

用组织搅拌机将样品全部打碎，混匀；均分成两份试样，装入洁净的容器内，密封，标明标记。

6.2 试样保存

试样于4℃以下保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

7 分析步骤

7.1 提取

7.1.1 粮谷、茶叶类

粮谷类和茶叶类试样均准确称取2g（精确至0.01g）分别加入10.0mL去离子水，浸泡30 min后，加入20.0 mL丙酮-正己烷（4.5）混合液，涡漩振荡10 min，将离心管在4000 rpm/min下离心5 min，吸取上清液经无水硫酸钠脱水后收集至梨形瓶中，样品再加入20.0 mL丙酮-正己烷（4.5）提取一次，合并经无水硫酸钠脱水的提取液于梨形瓶中，40℃旋转蒸发至约2 mL，待净化。

7.1.2 蔬菜类、水果类

称取均质好的试样10 g（精确至0.01g），置于50 mL离心管中，在离心管中加入20.0 mL丙酮-正己烷（4.5）混合液，涡漩振荡10 min，将离心管在4000 rpm/min下离心5 min，吸取上清液经无水硫酸钠脱水后收集至梨形瓶中，样品再加入20.0 mL丙酮-正己烷（4.5）提取一次，合并经无水硫酸钠脱水的提取液于梨形瓶中，40℃旋转蒸发至约2 mL，待净化。

7.2 净化

7.2.1 活性炭柱净化

将活性炭小柱安装于固相萃取装置上，先后用5mL丙酮、5 mL正己烷预淋洗活性炭小柱，全程流速为2 滴/s。柱子活化好后，在SPE对应位置放好15mL玻璃试管，将7.1中的待净化液转移至活性炭

固相萃取小柱中，收集流出液，再用丙酮-正己烷（4.5）洗涤梨形瓶，洗涤液过活性炭小柱，收集流出液，继用8 mL丙酮-正己烷（4.6）洗脱，继续收集全部流出液，负压抽干，取出15mL玻璃试管，用氮吹浓缩至约2 mL，待弗罗里硅土固相萃取小柱净化。

7.2.2 弗罗里硅土柱净化

弗罗里硅土固相萃取小柱用5 mL正己烷预淋洗，弃去流出液，上样，继而用10 mL乙醚-丙酮-正己烷（4.7）溶液以2 滴/s的速度洗脱，洗脱液收集于15 mL玻璃试管中，于40 ℃下氮气吹干后，准确加入1.00 mL的正己烷定容，涡旋混合1min，经0.22µm有机微孔滤膜过滤后，供气相色谱-质谱/质谱仪测定。

7.3 测定

7.3.1 质谱/质谱参考条件

a）色谱柱：DB-5MS毛细管柱，30 m × 0.25 mm（内径）× 0.25 μm（膜厚）或相当者；

b）柱温：初始温度60 ℃，保持1 min，以40 ℃/min升温至240 ℃，再以3 ℃/min升温至253 ℃，保持2 min，最后以10 ℃/min升温至285 ℃；

c）进样口温度：280 ℃；

d）气相色谱-质谱/质谱接口温度：290 ℃；

e）载气：氦气，纯度大于等于99.999%；恒流模式；流速：1.0 mL/ min；

f）进样量：1.0 μL；

g）进样方式：不分流进样；

h）离子化源：电子轰击离子源（EI源）；

i）电离能量：70 eV；

j）溶剂延迟时间：4.5 min；

k）扫描方式：多反应离子监测模式（MRM），离子对条件详见附录B中表B.1。

7.3.2 气相色谱-质谱/质谱测定及确证

7.3.3.1标准曲线：采用空白基质液配制标准曲线，分别配置成（0.005、0.05、0.10、0.50、1.0 μg/mL）标准溶液，直接进气相色谱-质谱/质谱仪进行测定，峰面积对浓度作线性回归曲线，计算相关系数。7.3.3.2 根据样液中被测组分含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液，标准工作液和样液中待测物的响应值均应在仪器检测的线性范围内，如果含量超过标准曲线范围，应用正己烷稀释到合适浓度后再进行分析。对标准工作溶液与样液均按照7.3规定的条件进行等体积参插进样测定，以色谱峰面积按外标法定量。在上述色谱条件下，七氟菊酯、啶氧菊酯、苄呋菊酯、联苯菊酯、胺菊酯、甲氰菊酯、苯醚菊酯、氯氟氰菊酯、氟丙菊酯、顺式氯菊酯、反式氯菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氟氰戊菊酯、醚菊酯、氟硅菊酯、氰戊菊酯、高氰戊菊酯、氟胺氰菊酯和溴氰菊酯参考保留时间见附录B中表B.1，标准品的多反应监测色谱图见附录C中图C.1，标准品的总离子流色谱图见附录D中图D.1。

在相同实验条件下，试样中待测物质的保留时间与标准工作溶液中对应的保留时间偏差在±2.5%之内；并且被测样品与标准品的质谱图相似，所选择的全部监测离子均出现且丰度比也相一致，其允许偏差不超过表1规定的范围时，则可确定为样品中存在这种药物残留。

表1 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差