各种液体配制
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细胞培养试剂配制：（粗体字部分为我们需要配制的）
一．PBS（ph≈7.0）
a.称取：氯化钠8.0g
氯化钾0.2g
磷酸氢二钠1.56g或十二水磷酸氢二钠 2.9g(实验室所用)
磷酸二氢钾0.2g
b.超纯水定容1000m L→1000 mL分装→高压灭菌→4℃保存
注：需1000 m L烧杯一个、10个100m L试剂瓶、1000m L量筒一个
二．RPMI1640(PH7.52)
a.1640培养基粉一袋
碳酸氢钠2g
2mmoL谷氨酰胺C5H10N2O3：0.2923 g
10mmoL羟乙基呱嗪乙硫磺酸（HEPES）；2.383 g
P.S :100IU/mL
b. 超纯水定容1000mL→滤器过滤分装→-20℃保存
注：需留样观察
1000m L烧杯一个、12个100m L试剂瓶、滤器3个、6个10 m L试剂瓶50m L量筒一个
三．P.S:
a.青霉素（80万单位）
链霉素（100万单位）
b.超纯水（注：需高压灭菌）定容100mL→分装→－20℃保存
注：1个100m L试剂瓶10个10 m L试剂瓶
四．0.25﹪胰蛋白酶(TV)：(PH 7.37)
a.胰酶 2.5 g
EDTA 1g
1000 mL PBS称取：氯化钠8.0g
氯化钾0.2g
磷酸氢二钠1.56g或十二水磷酸氢二钠 3.49g
磷酸二氢钾0.2g
b.加入适量碳酸氢钠（约2.5g）→4℃过夜→滤器过滤分装→－20℃保存
注：留样观察
五．细胞冻存液100mL：
a. RPMI1640培养液60mL
小牛血清30mL
DMSO 10mL
b. －20℃保存
注：DMSO在使用前需高压灭菌
需2个100m L试剂瓶、
六．加血清P.S的RPMI1640100mL：
小牛血清15mL
P.S 1.5 mL
RPMI1640 83.5 mL（已配好85ml）
七1000mLDMEM(ph7.42)
a DMEM培养基粉一袋
碳酸氢钠：3.7g
2mmoL谷氨酰胺C5H10N2O3：0.2923 g
10mmoL羟乙基呱嗪乙硫磺酸（HEPES）；2.383 g
P.S :100IU/mL
b. 超纯水定容1000mL→滤器过滤分装→-20℃保存
注：需留样观察
八200mLMTT：
a PBS（p H≈7.0）
氯化钠：1.6g
氯化钾：0.04g
十二水磷酸氢二钠：0.698g
磷酸二氢钾：0.04g
MTT:1g
b 超纯水定容200mL→滤器过滤分装→-20℃保存
注：配制过程需避光，配制完成后避光保存。
九 50mg/mLG418（氨基糖苷类抗生素）：稳定转染最常用的抗性筛选试剂
G418：1g（含750mg）
超纯水：15mL
0.1mol/LHEPES:0.357g
(分子量：238.3g/mol)滤器分装
十细胞稀释计算方法
十一 1000D-MEM/F12(PH 7.0)
a D-MEM/F12培养基粉一袋
碳酸氢钠：3.7g
2mmoL谷氨酰胺C5H10N2O3：0.2923 g
P.S :100IU/mL
b. 超纯水定容1000mL→滤器过滤分装→-20℃保存
注：需留样观察
十二1000MLRPM1640(HP):
a.1640培养基粉一袋
碳酸氢钠1.5g
2mmoL谷氨酰胺C5H10N2O3：0.2923 g
10mmoL羟乙基呱嗪乙硫磺酸（HEPES）；2.383 g
P.S :100IU/mL
1mmol丙酮酸钠：0.11g
葡萄糖：4.5g