霉菌的检测

三、霉菌的检测内容
（1）采样 （2）表面除菌 （3）接种与培养 （4）计数 （5）镜检与初分离 （6）常见产毒霉菌的鉴定
（1）采样：采取有代表性的样品250-500g, 尽快检验。 （2）表面除菌：无菌水反复冲洗。 （3）接种与培养：粮粒均匀插到高渗察氏培 养基中，5-10粒/皿。共100粒。 （4）计数：选择10-150间的数字进行计数。 （5）镜检与初分离： （6）常见产毒霉菌的鉴定：
• 曲霉属：分生孢子头；
• 青霉属：帚状枝；
• 镰刀菌属：镰刀状地大分生孢子。
四、实验结果
1、描述平板上观测到的菌落形态特征。 2、画出镜检下菌落的形态特征。
霉菌的检测
一、实验目的及意义 1.了解粮食中真菌检测的卫生学意义和基本 过程。 2.掌握分离培养和鉴定霉菌的方法及特点。 3.掌握常见产毒霉菌的镜下鉴别特征。
二、仪器设备和试剂 1.器材 温箱（25～28℃）、振荡器、天平、 显微镜、玻塞三角瓶（300ml）、试管 （15mm×150mm）、平皿（直径9cm）、 吸管（1ml和10ml）、酒精灯、载物玻璃、 盖玻片、广口瓶、牛皮纸袋（121℃灭菌 20min、试管架、接种针、橡皮乳头、金属 勺、刀等。
镜检观察方法
一 直接检查 不染色标本的直接检查：
直接采取标本制片、显微镜下直接观察，若发 现真菌菌丝或孢子存在时，即可初步判定为真 菌污染。
二 染色标本检查 1）革兰氏染色：
各种真菌均为革兰氏阳性，为深蓝色。 2）乳酸酚棉蓝染色Baidu Nhomakorabea或是乳酸苯酚液）： 直接滴加到载玻片上，再加入真菌涂开进行观察。
粮食中常见污染的真菌形态特征
初分离
培养基的选择： （1）察氏琼脂培养基：用于青霉和曲霉的分 离培养鉴定。 （2）PDA培养基：镰刀菌和其他霉菌的的分 离鉴定。 （3）孟加拉红培养基：分离霉菌及酵母菌。 接种：三点接种法。 培养：25-28℃3-5天。
平板上菌落形态特征判断依据
• • • • • • 菌落生长速度： 菌落的颜色： 菌落的质地： 菌落的表面： 渗出物： 气味等：
• 常见产毒霉菌的鉴定特征 （1）寄生曲霉：生长较快，深绿色至暗绿色，绒 状。 （2）黄曲霉：生长较快，开始黄色，后变成黄绿 色，绒状。 （3）棕曲霉：生长较快，暗土黄色，绒状，背面 黄褐色至紫褐色。 （4）构巢曲霉：生长较快，暗绿色，生闭囊壳部 分呈黄褐色，绒状，背面呈紫褐色。 （5）黄绿青霉：绒状，表面突起或凹陷，淡黄灰 绿色，有浅黄色渗出液，背面亮黄色。 （6）橘青霉：艾绿色，表面有放射状沟纹，黄色 渗出液，背面黄色。 （7）岛青霉：生长局限，致密丛生或绳状，橙色、 红色、暗绿色的胡合体，背面褐色。
2.培养基 （1）PDA培养基：由于该培养基含有天然成 分，霉菌、酵母发育良好。 （2）孟加拉红培养基：培养基中加入氯霉素 和孟加拉红，能联合抑制细菌，对样品中 的霉菌和酵母的选择性好，且孟加拉红能 限制霉菌菌丝的扩展生长，使菌落局限， 便于计数，已在国际上广泛应用。 （3）高盐察氏培养基：专门用于粮食等水分 含量较低样品的霉菌计数，由于含盐量高， 酵母、细菌都生长不良，因而不必添加抗 生素。