实验凝集反应-ELISA(双抗原夹心法) PPT
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
每孔加入终止液1滴，混匀 目测法：与阳性和阴性对照比较，观察颜色深浅判断结果
10
11
大家有疑问的，可以询问和交流
【 步 无菌采血，离心2000rpm,3min，取上清作为待测标本(见玻片凝集实验) 骤 】 反应板中各加入待测标本2滴，同时设阴性、阳性、空白对照孔(NS)
（反应板已用纯化HBsAg包被 ） 每孔加入酶标记抗原1滴，37℃孵育30min
手工洗板，弃液拍干，重复5次 每孔加入显色剂Biblioteka Baidu液、B液各1滴，置37℃孵育15分钟
实验凝集反应-ELISA(双抗原夹心法)
实验内容
1、ABO血型鉴定--玻片凝集反应（1份/1人） 2、乙型肝炎病毒表面抗体检测--ELISA法(1份/1人）
2
（一）玻片凝集反应
已知抗血清与未知颗粒性抗原置于 清洁玻片上，在一定的条件下，若两者 相对应，则会发生凝集。本方法主要用 于抗原的定性分析，如菌种鉴定、ABO 血型鉴定等。
5
ABO血型鉴定的判断
抗A型标准血清 抗B型标准血清 抗A型标准血清 抗B型标准血清
A
B
型
型
示意图
抗A型标准血清 抗B型标准血清 抗A型标准血清 抗B型标准血清
O
AB
型
型
注意事项
➢用牙签研磨时，注意防止将抗A血清带到抗 B血清中，反之亦然。
➢如果凝集现象不太明显时，可用显微镜观察。
7
乙型肝炎病毒表面抗体的检测 ——双抗原夹心ELISA法
3
ABO血型系统
4
ABO血型鉴定步骤
红细胞悬液的制备（用于血型鉴定及ELISA实验） 1. 取EP管1支，加入5滴生理盐水 2. 消毒耳垂或手指皮肤 3. 用采血针采1-2滴血，加入盛有生理盐水的EP管中混匀 4. 2000rpm，离心3min
取上清用于ELISA实验
5. 取红细胞悬液用于ABO血型鉴定 6. 取已加有抗A血清与抗B血清载玻 片1张，分别加入待测抗原各1滴， 并用牙签混匀。 7. 置室温5 分钟左右观察结果。
测定原理
采用纯化乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg） 包被反应板，加入待检标本，当标本中存在抗HBs时，该抗体与包被HBsAg结合，再加入辣根 过氧化物酶标记乙型肝炎病毒表面抗原 （ HBsAg –HRP），最后形成HBsAg-抗HBs-酶 标记抗原复合物，加入底物产生显色反应。
8
大家应该也有点累了，稍作休息
10
11
大家有疑问的，可以询问和交流
【 步 无菌采血，离心2000rpm,3min，取上清作为待测标本(见玻片凝集实验) 骤 】 反应板中各加入待测标本2滴，同时设阴性、阳性、空白对照孔(NS)
（反应板已用纯化HBsAg包被 ） 每孔加入酶标记抗原1滴，37℃孵育30min
手工洗板，弃液拍干，重复5次 每孔加入显色剂Biblioteka Baidu液、B液各1滴，置37℃孵育15分钟
实验凝集反应-ELISA(双抗原夹心法)
实验内容
1、ABO血型鉴定--玻片凝集反应（1份/1人） 2、乙型肝炎病毒表面抗体检测--ELISA法(1份/1人）
2
（一）玻片凝集反应
已知抗血清与未知颗粒性抗原置于 清洁玻片上，在一定的条件下，若两者 相对应，则会发生凝集。本方法主要用 于抗原的定性分析，如菌种鉴定、ABO 血型鉴定等。
5
ABO血型鉴定的判断
抗A型标准血清 抗B型标准血清 抗A型标准血清 抗B型标准血清
A
B
型
型
示意图
抗A型标准血清 抗B型标准血清 抗A型标准血清 抗B型标准血清
O
AB
型
型
注意事项
➢用牙签研磨时，注意防止将抗A血清带到抗 B血清中，反之亦然。
➢如果凝集现象不太明显时，可用显微镜观察。
7
乙型肝炎病毒表面抗体的检测 ——双抗原夹心ELISA法
3
ABO血型系统
4
ABO血型鉴定步骤
红细胞悬液的制备（用于血型鉴定及ELISA实验） 1. 取EP管1支，加入5滴生理盐水 2. 消毒耳垂或手指皮肤 3. 用采血针采1-2滴血，加入盛有生理盐水的EP管中混匀 4. 2000rpm，离心3min
取上清用于ELISA实验
5. 取红细胞悬液用于ABO血型鉴定 6. 取已加有抗A血清与抗B血清载玻 片1张，分别加入待测抗原各1滴， 并用牙签混匀。 7. 置室温5 分钟左右观察结果。
测定原理
采用纯化乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg） 包被反应板，加入待检标本，当标本中存在抗HBs时，该抗体与包被HBsAg结合，再加入辣根 过氧化物酶标记乙型肝炎病毒表面抗原 （ HBsAg –HRP），最后形成HBsAg-抗HBs-酶 标记抗原复合物，加入底物产生显色反应。
8
大家应该也有点累了，稍作休息