第5章 免疫凝集试验
免疫学实验-凝集试验
免疫学实验-凝集试验实验一凝集试验颗粒性抗原(细菌、螺旋体、红细胞等)与相应抗体结合后，在有适量电解质存在下，抗原颗粒可相互凝集成肉眼可见的凝集块，称为凝集反应(Agglutination reaction)或凝集试验。
参与凝集反应的抗原称为凝集原（Agglutinogen），抗体称为凝集素（Agglutinin）。
细菌或其它凝集原都带有相同的负电荷，在悬液中相互排斥而呈现均匀的分散状态。
抗原与相应抗体相遇后可以发生特异性结合，形成抗原抗体复合物，降低了抗原分子间的静电排斥力，此时已有凝集的趋向，在电解质（如生理盐水）参与下，由于离子的作用，中和了抗原抗体复合物外面的大部分电荷，使之失去了彼此间的静电排斥力，分子间相互吸引，凝集成大的絮片或颗粒，出现了肉眼可见的凝集反应。
根据是否出现凝集反应及其程度，对待测抗原或待测抗体进行定性、定量测定。
凝集反应包括直接凝集反应和间接凝集反应两大类，本实验主要介绍直接凝集反应。
[目的要求]1. 掌握平板凝集试验和试管凝集试验的操作方法。
2. 掌握凝集试验的结果判定及判定标准。
3. 熟悉平板凝集试验和试管凝集试验所需材料和试剂。
[材料与试剂]1. 玻板，载玻片，试管（1cm x 8cm），试管架，刻度吸管，滴管，微量可调加样器，滴头（tip头），牙签或火柴棒，记号笔。
2. 灭菌的生理盐水，灭菌的0.5%石炭酸生理盐水。
3. 布氏杆菌病试管凝集抗原，布氏杆菌病平板凝集抗原，布氏杆菌病虎红平板凝集抗原，布氏杆菌病阳性血清，布氏杆菌病阴性血清，被检血清（牛、羊或猪）。
4. 鸡白痢平板凝集抗原，鸡白痢阳性血清，鸡白痢阴性血清，被检鸡血清。
[实验内容及操作方法]（一）试管凝集试验以牛布氏杆菌病试管凝集试验为例。
1. 试管准备：每份血清用试管4支，另取3支试管作为对照，作好标记，置试管架上。
如被检血清有多份，对照只需做1份。
2. 被检血清稀释：第1管加入2.3ml 0.5% 石炭酸生理盐水，第2、3、4管加入0.5 ml 0.5% 石炭酸生理盐水；然后用加样器或刻度吸管吸取被检血清0.2 ml，加入第1管中，反复吹吸5次混匀，吸取1.5 ml弃之，再吸取0.5 ml加入第2管中，混匀后吸取0.5 ml加入第3管，依此类推至第4管，混匀后吸弃0.5 ml（见表1-1）。
临床免疫学和免疫检验第五章凝集反应讲义
临床免疫学和免疫检验第五章凝集反应讲义第五章凝集反应细菌、红细胞等颗粒抗原，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒后，它们与相应抗体（或抗原）在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象，称为凝集反应。
第一节凝集反应的特点凝集试验是一个定性的检测方法，即根据凝集现象的出现与否判定结果阴性或阳性；也可进行半定量检测，即将抗体作一系列稀释，与抗原结合产生凝集的最高稀释倍数作为其效价或滴度。
凝集反应分为两个阶段：①抗原抗体的特异性结合；②出现可见的颗粒凝聚。
第二节直接凝集反应一、原理细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原，在适当的电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集。
参加凝集反应的抗原称凝集原，抗体则称为凝集素。
二、方法有玻片法和试管法两类。
（一）玻片凝集试验主要用于抗原的定性分析，短时间便能观察结果。
一般用来鉴定菌种或分型；也用于人类ABO血型的测定。
（二）试管凝集试验是用定量抗原悬液与一系列梯度倍比稀释的待检血清混合，保温静置后，根据每管内颗粒凝集的程度，以判断待检血清中有无相应抗体及其效价。
可以用来协助临床诊断或流行病原调查研究。
例如肥达试验、外斐试验、输血时也常用于受体和供体两者间的交叉配血试验。
第三节间接凝集反应一、原理间接凝集反应是将可溶性抗原（或抗体）先吸附于适当大小的颗粒性载体表面，然后与相应抗体（或抗原）作用，在适宜电解质存在的条件下，出现特异性凝集现象。
二、间接凝集反应的类型（一）正向间接凝集反应可溶性抗原致敏载体，用以检测标本中待测抗体的凝集反应，称为正向间接凝集反应。
（二）反向间接凝集反应特异性抗体致敏载体，用以检测标本中待测抗原的凝集反应，称为反向间接凝集反应。
（三）间接凝集抑制反应先将可溶性抗原（或抗体）与相应的抗体（或抗原）混合，然后再加入抗原（或抗体）致敏的载体颗粒，则能抑制原先的凝集现象，称为正向（或反向）间接凝集抑制试验。
间接凝集抑制试验可用于检测抗体、自身抗体、变态反应性抗体，也可测定抗原。
第5章免疫凝集试验
第二节 直接免疫凝集试验
重点提示
直接免疫凝集试验的概念 玻片凝集试验 试管凝集试验
直接免疫凝集试验
直接免疫凝集试验（direct agglutination test）：细 菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原，在适当电解质参与下直接与 相应抗体结合出现肉眼可见的凝集现象
凝集原 agglutinogen 凝集素 agglutinin 玻片凝集试验：定性 试管凝集试验：半定量
原理图
混 合
SPA
IgG
SPA- IgG待测抗原 凝集颗粒
SPA- IgG 待测抗原
二、间接免疫血凝试验
间接免疫血凝试验：以红细胞作为载体的间接免 疫凝集试验。
用已知抗原或抗体致敏红细胞，检测标本中相应 的抗体或抗原。
根据红细胞凝集的程度判断阳性反应的强弱，以 出现明显凝集的孔为滴度终点。
三、颗粒免疫凝集试验
玻片凝集试验：常作定性检测。用已知抗体检测未知的颗 粒性抗原，主要用于细菌菌种的鉴定及分型、ABO血型鉴定等 。
试管凝集试验：可作为半定量检测。多用于测定血清中某 种特异性抗体的效价，以协助临床诊断或供流行病学调查；在 用颗粒性抗原免疫动物后，可用该法测定免疫血清中特异性抗 体的效价，判定抗体生成情况。
二、间接免疫凝集试验的临床应用
抗原的检测： 用于病原体可溶性抗原的检测：如乙型肝炎病毒表面抗原 ，细菌、腺病毒及流感病毒等的抗原鉴定和细菌可溶性产物如 外毒素等。 用于检测各种蛋白质成分：如尿液绒毛膜促性腺激素、纤 维蛋白原等血浆蛋白成分等。
间接免疫凝集试验的临床应用
抗体的检测： 用于检测细菌、病毒、螺旋体、寄生虫等感染后产生的抗 体：如抗人类免疫缺陷病毒抗体、抗溶血素O、梅毒螺旋体抗 体等。 用于检测自身免疫性疾病的抗体：如类风湿因子、抗DNA 抗体和抗甲状腺蛋白抗体等。 用于超敏反应患者的抗体测定：如青霉素抗体、某些花粉 抗体等。
免疫凝集实验
生物检测作业免疫凝集试验免疫凝集试验颗粒性抗原与相应抗体特异性结合后，在适量电解质存在的条件下，可逐渐聚集，出现肉眼可见的凝集现象，成为凝集反应。
直接凝集试验病原菌（如细菌、螺旋体等）颗粒性抗原与相应抗体特异性混合后，在适量电解质存在的条件下，经过一定的反应时间后，出现肉眼可见的凝集现象，称为直接凝集反应。
试验中的抗原称为凝集原；抗体称为凝集素常用的实验方法有玻片法和试管法。
1、玻片法：——细菌薄片凝集试验将已知的抗体滴加于洁净的载玻片或凹玻片孔内，自加入待检病原体悬液混合均匀，同时做生理盐水或正常血清对照。
放置室温内数分钟后即可观察实验结果，出现颗粒状凝集者为阳性反应。
优点：其操作简便、迅速，适用于血型鉴定及微生物的菌种鉴定和分型等。
特别是诊断肠道传染病时用于鉴定病人标本中肠道杆菌的感染。
细菌薄片凝集试验：（1）实验目的：该试验用于菌种的鉴定及分型.（2）实验材料：待测菌培养物、已知菌培养物和已知诊断血清（3）实验过程:1.取洁净玻片一张，用蜡笔画为四格。
2.用接种环无菌去诊断血清各两环分别置于第1、3格中。
3.用接种环取生理盐水各两环分别放于第2、4格中。
4.用接种环取已知菌少许放入第2格生理盐水中混匀，随即转移1环于第1格中混匀。
5.同样用灭菌的接种环取待测菌少许放入第4格生理盐水中混匀，然后移一环菌液于第3格中混匀。
灼烧灭菌。
6.结果：已知菌在诊断血清中应出现颗粒状凝集，若待测菌在诊断血清中也出现颗粒状凝集，表明两种菌为同一种或属。
2、试管法：——肥达试验（试管凝集实验）将已知的抗原与系列等比稀释的待检血清在小试管内混合，39℃温育2~24h后观察结果。
生理盐水加抗原作为对照，应用非特异性自凝现象。
以出现明显的颗粒状或絮片状凝集现象的待检血清最高稀释度作为抗体的效价。
试管凝集实验为半定量试验，常用于某病原微生物感染的免疫学诊断，亦可用已知抗体鉴定未知的抗原。
（1）材料：病人血清、肥达实验诊断抗原、生理盐水、试管、吸管、试管架等。
第五章凝集反应
第五章凝集反应Agglutination Test第一部分目的要求和教学内容一、目的要求掌握：凝集反应的原理、类型及临床应用；熟悉：凝集反应的技术要点、实验影响因素、方法评价、间接凝集常用的载体；了解：凝集反应各阶段的特征。
二、教学内容1．凝集反应的特点与类型。
2．直接凝集反应：玻片凝集试验，试管凝集试验。
3．间接凝集反应：间接凝集反应的类型，间接血凝试验，胶乳凝集试验，间接凝集试验的临床应用。
4．自身红细胞凝集试验。
5．抗球蛋白试验。
第二部分测试题一、选择题(一)单项选择题(A型题)1_直接抗球蛋白实验用于检测A．血清中结合的抗体B．血清中游离的不完全抗体C．红细胞表面结合的不完全抗体D．红细胞表面结合的完全抗体E．血清中游离的完全抗体2．玻片凝集试验A．只能检测抗原，不能检测抗体B．既能检测抗原，又能检测抗体C．只能检测抗体，不能检测抗原D．为半定量实验E．不能用于ABO血型鉴定3．下列哪一项不属于玻片凝集试验A．菌种鉴定B．血清学分型C．人类ABO血型鉴定D．受检者未致敏红细胞E．受检者致敏红细胞4．试管凝集试验的效价判断标准是依据出现肉眼可见的如下凝集现象A．+ B． +或++C．++ D．+++E．++++5．间接抗球蛋白实验用于检测A．血清中结合的抗体B．血清中游离的不完全抗体C．红细胞表面结合的不完全抗体D．红细胞表面结合的完全抗体E．血清中游离的完全抗体6．协同凝集试验所用的载体是A．新鲜红细胞B．洗涤红细胞C．醛化红细胞D．聚苯乙烯颗粒E．金黄色葡萄球菌7．自身红细胞凝集试验红细胞是A．标准新鲜红细胞B．标准洗涤红细胞C．标准醛化红细胞D．受检者未致敏红细胞E．受检者致敏红细胞8．关于醛化红细胞，说法错误的是A．保存时间较长B．血凝反应效果较新鲜红细胞强C．可反复冻融不易破碎D．能耐60℃加热E．有较强的吸附蛋白质抗原或抗体的能力9．下列试验不属于凝集试验的是A．外斐试验B．肥达试验C．RPR D．TRUSTE．MHA-TA10．关于凝集反应，说法正确的是A．IgM 类抗体的作用比IgG 类抗体要强B．IgM 类抗体常出现不完全反应C．IgG 类抗体不易出现不完全反应D．反应的发生可分为四个阶段E．可进行定量检测11．在实验时为促使凝集现象的出现，下列措施无效的是A．离心B．增加电解质或蛋白质C．加入右旋糖苷或葡聚糖D．胰酶处理E．加入抗原12．关于正向间接凝集试验说法错误的是A．抗原致敏载体B．用于检测标本中抗体C．出现凝集为阴性D．敏感性高E．特异性强13．关于反向间接凝集试验说法错误的是A．抗体致敏载体B．用于检测标本中抗原C．现凝集为阴性D．感性高E．异性强14．关于正向间接凝集抑制试验说法错误的是A．检测标本中抗原B．出现凝集为阳性C．抗体为诊断试剂D．原致敏载体E．不出现凝集为阳性1５．关于反向间接凝集抑制试验说法错误的是A．抗体致敏载体B．抗原为诊断试剂C．检测抗体D．出现凝集为阳性E．不出现凝集为阳性16．关于SPA说法错误的是A．为金黄色葡萄球菌的细胞壁成分B．能与IgG的Fc 段结合C．能与IgG的F(abˊ)2 段结合D．不能与IgG3 结合E．与IgG 结合后不影响其活性17．关于间接血凝试验说法错误的是A．红细胞作为载体B．不能检测抗原C．可检测抗体D．可判断阳性反应的强弱E．应用广泛18．关于胶乳凝集试验，说法错误的是A．是一种间接凝集试验B．敏感性较血凝试验要高C．可进行定性检测D．可进行半定量检测E．可进行定量检测19．关于明胶凝集试验，说法错误的是A．抗原致敏载体检测抗体B．抗体致敏载体检测抗原C．是一种间接凝集试验D．凝集为阳性E．常常用于检测病毒20．间接凝集反应不能检测A．抗体B．AFP 抗原C．伤寒沙门菌菌体抗原D．类风湿因子E．HCG 抗原21．关于自身红细胞凝集试验，说法错误的是A．红细胞为致敏载体B．可检测抗体C．可检测抗原D．诊断试剂为抗O 型红细胞的单克隆抗体E．检测标本为全血22．关于直接Coombs试验，说法错误的是A．检测血清中游离的不完全抗体B．可定性检测C．可作半定量分析D．可用于新生儿溶血检测E．可用于自身免疫性溶血性贫血的检测23．关于间接Coombs试验，说法错误的是A．检测红细胞上的不完全抗体B．出现凝集为阳性C．抗原致敏红细胞D．用于检测母体Rh抗体E．可检测因红细胞不相容性输血而产生的血型24．抗球蛋白试验不能应用于A．配血试验B．立克次体的抗原检查C．诊断新生儿溶血性贫血性疾病D．细菌的不完全抗体的检测E．抗D 抗体25．关于协同凝集试验，说法错误的是A．致敏颗粒为金黄色葡萄球菌B．桥连物为SPAC．检测抗原D．是一种反向间接凝集试验E．抗体为IgM 类(二)多项选择题(x型题)1．实验中，促进凝集现象的措施有A．低温离心B．增加电解质或蛋白质C．加入右旋糖酐或葡聚糖D．用胰酶处理E．加入抗原2．利用试管凝集试验可辅助临床诊断的疾病A．痢疾B．伤寒和副伤寒C．恙虫病D．布鲁菌病E．霍乱弧菌3．间接凝集试验常用的载体A．人0型红细胞B．聚苯乙烯胶乳C．皂土D．明胶颗粒E．活性炭4．符合正向间接凝集试验的是A．抗原致敏载体B．用于检测标本中的抗体C．出现凝集为阴性D．敏感性很高E．特异性不强5．符合反向间接凝集试验的是A．抗体致敏载体B．用于检测标本中的抗原C．出现凝集为阴性D．敏感性很高E．特异性强6．符合正向间接凝集抑制试验的是A．检测标本中的抗原B．抗原致敏载体C．抗体为诊断试剂D．出现凝集为阳性E．不出现凝集为阳性7．符合反向问接凝集抑制试验的是A．抗体致敏载体B．抗原为诊断试剂C．检测标本中的抗体D．出现凝集为阳性E．不出现凝集为阳性8．关于SPA正确的是A．为金黄色葡萄球菌的细胞壁成分B．能与IgG的FC段结合C．能与IgG的F(ab’)：段结合D．不能与IgG3结合E．与IgG结合后不影响其活性9．符合间接血凝试验的是A．以红细胞为载体B．不能检测抗原C．可检测抗体D．可判断阳性反应的强弱E．应用广泛10．符合乳胶凝集试验的是A．是一种间接凝集试验B．敏感性较血凝试验高C．可进行定性检测D．可进行半定量检测E．可进行定量检测11．符合红细胞自身凝集试验的是A．红细胞为致敏载体B．可检测抗原C．可检测抗体D．诊断试剂为抗0型红细胞的单克隆抗体E．检测应为全血标本12．符合直接Coombs试验的是A．检测血清中游离的不完全抗体B．可用作定量分析C．可用于定性检测D．可用于新生儿溶血检测E．可用于自身免疫性溶血性贫血的检测13．符合间接Coombs试验的是A．检测红细胞膜上的不完全抗体B．出现凝集为阳性C．抗体致敏红细胞D．用于检测母体Rh抗体E．可检测因红细胞不相容性输血而产生的溶血14．抗球蛋白试验可用于A．配血试验B．抗D抗体检测C．诊断新生儿溶血性贫血疾病 D．检测伤寒0抗体E．检测立克次体抗原15．符合协同凝集试验的是A．致敏颗粒是金黄色葡萄球菌 B．连接物为SPAC．用于检测抗体．D．是一种反向间接凝集试验E．抗体为IgM类二、填空题1．凝集反应的类型分为( )和( )两种类型。
5章凝集反应 Microsoft PowerPoint 演示文稿
相应抗体
玻片法直接凝集反应示意图
(1)半定量试验-抗体效价测定。 (2)玻片凝集试验也可用试管法，如肥达外斐反应。 非特异性凝集可出现假阳性，必须做阴性对照(不加抗体， 只加抗原)。
1
2
3
4
5
6
6
7
1:2 1:4 1:8 1;16 1:32 1:64 1:64 1:128
临床检验中早期妊娠试验，现已被金标法替代。
三、间接血凝试验 间接血凝实验是以红细胞作为载体的间接凝集实验，用已 知的抗原或抗体致敏红细胞与标本中的抗体或抗原特异性结 合。常用绵羊、家兔等红细胞。
自身红细胞凝集试验 样本：患者全血(含有红细胞，血清中有待检的抗原或抗)。 试剂：抗红细胞单克隆抗体与已知抗体连接，检测未知抗 原。例如：乙型肝炎表面抗原(HBsAg)。
载体颗粒
抗原致敏颗粒
凝集
正向间接凝集反应原理
已知 抗原
无抗体
胶乳 颗粒
载体颗粒
抗原致敏颗粒
无凝集
无相应抗体存在时无凝集现象发生
2.反向间接凝集反应 用特异性抗体(已知)致敏载体检测未知抗原。
已知 抗体
待检 抗原
载体颗粒
抗体致敏颗粒
凝集
反向间接凝集反应原理
已知 抗体
无抗原
载体颗粒
抗体致敏颗粒
无凝集
待检血清 (RH抗体)
不完全抗体 (RH抗体)
Rh抗原
凝集 现象
Rh＋O型红细胞
抗人球蛋白
间接接coombs试验原理示意图
直接与间接Coombs试验的区别
试验 检测目的
样本
直接 红细胞表面的
医学免疫学 免疫凝集实验
4
血细胞状沉 淀，边 缘凝集 呈颗粒 状
67
无凝集， 无凝集， 血细胞 血细胞 沉于管 沉于管 底呈圆 底呈圆 盘状 盘状
实验结果
试管号 1
2
3
4
5
67
现象
凝集强度 ？ ++++ ++++ +++ ++ — —
结果分析
以血清最高稀释度仍能出现“++”凝集 现象者，作为该免疫血清的效价（滴度） 本次实验中，第5管（1：640）呈“++” 凝集，第6管（1：1280）呈“+”凝集， 对照管为“-”，则该血清效价为1： 640
中央呈较小圆盘状沉淀 稍浑浊 ，边缘凝集呈颗粒状
血细胞呈较大的圆盘状 较浑浊 沉淀，边缘有少量凝集 颗粒
无凝集，血细胞沉于管 浑浊 底呈圆盘状
对1号试管是否凝集的判断——改良
试管号 1
2
3
4
5
6
7
现象
凝集强 度 管底血 细胞
上层液 体
++++
血细胞 呈厚膜 状铺于 管底， 边缘略 不平滑
澄清
++++
浑浊
对1号试管是否凝集的判断——改良
• 用新标准算得的血清效价与之前相 同，仍为1：640
影响因素讨论——前后带现象
前后带现象
凝集反应，是 抗原抗体结合 反应中的一种 。在抗原抗体 特异性反应时 ，生成结合物 的量与反应物 的浓度有关， 只有在抗原抗 体分子比例合 适时才出生现 最强的反应
.
影响因素讨论——前后带现象
免疫学凝集反应实验报告
免疫学凝集反应实验报告一、实验目的本实验旨在通过免疫学凝集反应实验，了解抗原-抗体反应的基本原理，掌握凝集反应的方法和技巧。
二、实验原理1. 抗原-抗体反应抗原是指能够诱导机体产生特异性免疫反应的物质，通常是蛋白质、多糖或脂质等大分子化合物。
当抗原进入机体后，会刺激机体产生相应的抗体，抗体与抗原结合形成复合物，从而发挥免疫作用。
2. 凝集反应凝集反应是指在特定条件下，由于抗原与抗体结合形成可见的凝集现象。
这种现象可以用于检测血清中是否存在某种特定的抗体或抗原。
三、实验步骤1. 制备试剂将所需试剂按比例配制好，并进行必要的消毒处理。
2. 样品处理将待测样品进行必要的处理，如离心、稀释等。
3. 加入试剂将样品加入已经配制好的试剂中，并混匀。
4. 观察结果观察混合液是否出现凝集现象，并记录结果。
四、实验注意事项1. 实验过程中应严格按照操作规程进行，避免操作失误。
2. 试剂的配制和消毒处理应注意卫生和安全。
3. 样品处理时应注意离心速度和时间，避免对样品造成损伤。
4. 操作时应注意洁净卫生，避免污染试剂和样品。
五、实验结果分析通过本次实验，我们成功地观察到了抗原-抗体反应产生的凝集现象。
根据观察结果，我们可以判断待测样品中是否存在特定的抗体或抗原。
此外，在实验过程中我们也掌握了凝集反应的方法和技巧，并了解了抗原-抗体反应的基本原理。
六、实验结论通过本次免疫学凝集反应实验，我们深入了解了抗原-抗体反应的基本原理，并掌握了凝集反应的方法和技巧。
这对于我们今后在医学、生物学等领域开展相关研究具有重要意义。
临床免疫学检验 课件 第5章 凝集反应
4.协同凝集试验 (coagglutination test )
载体 可溶性抗原
粒颗敏致
用特异性抗原致 敏载体，检测标 本中的相应抗体 的方法。
致敏
NS
待测抗体
结果判读：凝集，阳性(+)。 不凝集，阴性(-)。
粒颗集凝
粒颗集凝 粒颗敏致
载体
已知抗体
＋
致敏
用特异性抗体
致敏载体，检
NS
测标本中的相
? 结果判读： 已知Ab ＋ 未知Ag → 凝集，阳性 (+)。 不凝集，阴性 (-)。
? 方法评价： 特异性强; 简便、快速 ;敏感度低。 ? 应用：ABO 血型鉴定。
细菌的鉴别与分型 。
ABO血型的鉴定
1.已知抗体
抗A
抗B
2.未知抗原 (待检RBC)
3.结果：
凝集
不凝集
4.结论： 受检者血型为：A型
?致敏颗粒（sensitized particle) :吸附有已知抗 原或抗体的颗粒。
粒颗敏致
载体 可溶性抗原 致敏
NS
粒颗集凝
一、常用载体种类及其处理方法
?红细胞： 新鲜红细胞吸附蛋白质的能力差。一
般先醛化后应用。
?聚苯乙烯胶乳颗粒： 可物理吸附蛋白质；常制备带有化学
活性基团的颗粒。
?活性炭： ?SPA：
? 方法评价：
– 特异性易受影响； 敏感性不高。
? 应用：
– 多用以测定 抗体的含量 （效价、滴度 ）。 –肥达氏反应 、外斐氏反应 、交叉配血试验 。
0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 弃掉0.5
菌液 1
2 3 45 6 7
结 果
医学免疫学：第五章(2) 凝集反应
第五章（2）凝集反应Chapter 15 Agglutination Test第一部分教学内容和要求一、目的要求·掌握：凝集反应的原理、类型及临床应用；熟悉：凝集反应的技术要点、实验影响因素、方法评价、间接凝集常用的载体；了解：凝集反应各阶段的特征。
二、教学内容1。
凝集反应的特点与类型。
2。
直接凝集反应：玻片凝集试验，试管凝集试验。
3。
间接凝集反应：间接凝集反应的类型，间接血凝试验，胶乳凝集试验，间接凝集试验的临床应用。
4．自身红细胞凝集试验。
5．抗球蛋白试验。
第二部分测试题一、选择题（一）单项选择题（A型题）1．直接抗球蛋白实验用于检测A．血清中结合的抗体B．血清中游离的不完全抗体C．红细胞表面结合的不完全抗体D．红细胞表面结合的完全抗体E．血清中游离的完全抗体2．玻片凝集实验A．只能检测抗原，不能检测抗体B．既能检测抗原，又能检测抗体C．只能检测抗体，不能检测抗原D．为半定量实验E．不能用于ABO血型鉴定3。
下列哪一项不属于玻片凝集试验A。
菌种鉴定 B。
血清学分型 C。
人类ABO血型鉴定D．定量检测前筛选试验 E。
血清抗体效价测定4.试管凝集试验的效价判断标准是依据出现肉眼可见的如下凝集现象A．“+”B．“+或++”C．“++”D．“+++”E．“++++”5．间接抗球蛋白实验用于检测A．血清中结合的抗体B．血清中游离的不完全抗体C．红细胞表面结合的不完全抗体D．红细胞表面结合的完全抗体E．血清中游离的完全抗体6．协同凝集试验所用的载体是A．新鲜红细胞B．洗涤红细胞C．醛化红细胞D．聚苯乙烯颗粒E．金黄色葡萄球菌7．自身红细胞凝集试验红细胞是A．标准新鲜红细胞B．标准洗涤红细胞C．标准醛化红细胞D．受检者未致敏红细胞E．受检者致敏红细胞（二）多项选择题（X型题）1．实验中,促进凝集现象的措施有A．低温离心 B．增加电解质或蛋白质 C．加入右旋糖酐或葡聚糖D．用胰酶处理 E．加入抗原2。
临床免疫学检验-第五章凝集反应和沉淀反应
Radial Immunodiffusion (RID)
Two methodologies of RID
Fahey method A linear relationship
exists between the log of the protein concentration and the diameter of the precipitin ring prior to equivalence (or completion)
FIGURE 6-5 Diagrammatic representation of radial & double immunodiffusion. : precipitation reactions in gels yield visible precipitin lines; no visible
Ability of a test to correctly identify individuals who HAVE a given disease/condition
How likely is the test to detect the presence of a characteristic in someone with the characteristic?
简单易行 特异性好 灵敏度低(10µg/ml) 时间长
免疫电泳技术
免疫电泳技术（immunoelectrophoresis technique）是可溶性抗原和抗体在直流电场 的作用下，在凝胶内加速定向运动，彼此相 遇结合，在比例合适处形成可见的沉淀物。
免疫电泳技术
免疫凝集实验
免疫凝集实验一、凝集试验的一般原理当颗粒性抗原与其相应抗血清混合时，在有一定浓度的电解质环境中，抗原凝集成大小不等的凝集块，叫做凝集反应。
通常，细菌和红细胞等颗粒性抗原在悬液中带弱负电荷,周围吸引一层与之牢固结合的正离子，外面又排列一层松散的负离子层，构成一个双离子层，使颗粒相互排斥。
当特异抗体与相应抗原颗粒互补结合时，抗体的交联作用克服了抗原颗粒表面的电位，而使颗粒聚集在一起二、凝集试验的发生分两阶段1、抗原抗体的特异结合；2、在电解质的参与下，出现可见的凝集颗粒三、凝集试验的分类1、直接凝集试验细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原，在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集。
（1）玻片凝集反应（为定性实验方法）材料：1．诊断血清：1：10稀释的伤寒杆菌诊断血清2．菌种：伤寒杆菌、痢疾杆菌24小时琼脂斜面培养物3．生理盐水、载玻片、毛细吸管方法：1．取清洁玻片一张，用蜡笔划为三格，并注明号码。
无菌操作下，用接种环于1、2格内加1：10稀释伤寒杆菌诊断血清1-2滴，第三格加1-2滴生理盐水。
2．无菌操作下，用接种环取伤寒杆菌培养物少许，混于第三格中，再混于第一格中（不能先混第一格再混第三格，因为这样将使诊断血清混入盐水而影响对照结果），将细菌与盐水或血清混合均匀使呈乳状液。
此时取菌量不可过多，使悬液呈轻度乳浊即可。
3．同法取枯草杆菌培养物少许，于第二格内混匀。
4．轻轻摇动玻片，经1-2分钟后肉眼观察，出现乳白色凝集块者，即为阳性反应；仍为平等的乳浊液者，即为阴性反应。
如结果不够清晰，可将玻片放于低倍显微镜下观察。
应用：此法简便、快速，适用于：细菌分离株的鉴定与分型；红细胞ABO血型的鉴定。
（2）试管凝集反应（为定量实验方法）为一种定量试验，用已知抗原检查血清中有无特异抗体，并测定其相对含量。
材料：1．诊断血清1：10稀释伤寒杆菌“H”血清，1：10稀释伤寒杆菌“O”血清。
2．菌液：伤寒杆菌“H”菌液，伤寒杆菌“O”菌液。
免疫学凝集反应实验报告详解
免疫学凝集反应实验报告详解标题：免疫学凝集反应实验报告详解摘要：免疫学凝集反应实验是一种常用的实验方法，用于检测体内特定抗原与抗体的相互作用。
本实验报告将详细解释免疫学凝集反应的原理、操作步骤和结果分析，并重点讨论其在医学诊断和研究中的应用。
引言：免疫学凝集反应是基于抗原与抗体之间的特异性结合发生凝集现象的原理的实验方法。
这种反应在许多领域具有重要的应用，特别是在免疫学研究和临床诊断中。
本篇实验报告将对免疫学凝集反应进行详细讲解，以便读者对其原理和应用有更深入的理解。
1. 原理：1.1 抗原与抗体结合的基本原理1.2 凝集反应的产生机制2. 实验操作步骤：2.1 实验所需材料和试剂2.2 准备工作2.3 操作步骤的详细说明2.4 容器和条件的选择2.5 实验控制组的设置2.6 实验操作的注意事项3. 结果分析：3.1 凝集反应的结果观察和记录3.2 凝集度的评价和解读3.3 实验结果的统计分析4. 免疫学凝集反应的应用：4.1 医学诊断中的应用4.2 免疫学研究中的应用4.3 其他领域的应用概述5. 总结和回顾：5.1 免疫学凝集反应的优点和局限性5.2 实验操作中需注意的问题5.3 前景和发展方向观点和理解：在本实验报告中，我对免疫学凝集反应原理和应用有了更深入的理解。
凝集反应是免疫学研究中一种重要的实验方法，通过观察抗原与抗体结合的凝集现象，可以对某些疾病的诊断和治疗提供有力的支持。
在实验操作中，我们需要注意实验步骤的正确性和实验条件的控制，以确保实验结果的可靠性。
免疫学凝集反应的应用非常广泛，涉及医学、兽医学、食品安全等多个领域，其未来的发展势必会更加广阔。
结论：本实验报告详细探讨了免疫学凝集反应的原理、操作步骤和结果分析，并强调了其在医学诊断和研究中的重要性。
通过深入理解免疫学凝集反应的原理和应用，我们可以更好地利用这一实验方法来服务于生物医学领域的发展和进步。
（字数：416）。
最新初级检验技师临床免疫学和免疫检验(讲义)第五章凝集反应资料
第五章凝集反应细菌、红细胞等颗粒抗原，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒后，它们与相应抗体（或抗原）在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象，称为凝集反应。
第一节凝集反应的特点凝集试验是一个定性的检测方法，即根据凝集现象的出现与否判定结果阴性或阳性；也可进行半定量检测，即将抗体作一系列稀释，与抗原结合产生凝集的最高稀释倍数作为其效价或滴度。
凝集反应分为两个阶段：①抗原抗体的特异性结合；②出现可见的颗粒凝聚。
第二节直接凝集反应一、原理细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原，在适当的电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集。
参加凝集反应的抗原称凝集原，抗体则称为凝集素。
二、方法有玻片法和试管法两类。
（一）玻片凝集试验主要用于抗原的定性分析，短时间便能观察结果。
一般用来鉴定菌种或分型；也用于人类ABO血型的测定。
（二）试管凝集试验是用定量抗原悬液与一系列梯度倍比稀释的待检血清混合，保温静置后，根据每管内颗粒凝集的程度，以判断待检血清中有无相应抗体及其效价。
可以用来协助临床诊断或流行病原调查研究。
例如肥达试验、外斐试验、输血时也常用于受体和供体两者间的交叉配血试验。
第三节间接凝集反应一、原理间接凝集反应是将可溶性抗原（或抗体）先吸附于适当大小的颗粒性载体表面，然后与相应抗体（或抗原）作用，在适宜电解质存在的条件下，出现特异性凝集现象。
二、间接凝集反应的类型（一）正向间接凝集反应可溶性抗原致敏载体，用以检测标本中待测抗体的凝集反应，称为正向间接凝集反应。
（二）反向间接凝集反应特异性抗体致敏载体，用以检测标本中待测抗原的凝集反应，称为反向间接凝集反应。
（三）间接凝集抑制反应先将可溶性抗原（或抗体）与相应的抗体（或抗原）混合，然后再加入抗原（或抗体）致敏的载体颗粒，则能抑制原先的凝集现象，称为正向（或反向）间接凝集抑制试验。
间接凝集抑制试验可用于检测抗体、自身抗体、变态反应性抗体，也可测定抗原。
（四）协同凝集反应协同凝集反应与间接凝集反应的原理相类似，但所用载体为金黄色葡萄球菌A蛋白（SPA）。
免疫05 第五章 免疫凝集试验
本章小结
免疫凝集试验是指颗粒性抗原或覆盖了可溶性抗原（或 抗体）的致敏载体颗粒与相应抗体（或抗原）结合后，在适 宜的电解质条件下出现肉眼可见的凝集现象。包括直接免疫 凝集试验、间接免疫凝集试验等。
根据载体不同有多种试验类型，如协同免疫凝集试验、 间接免疫血凝试验、胶乳颗粒凝集试验、明胶颗粒凝集试验 、炭颗粒凝集试验、甲苯胺红颗粒凝集试验等。Coombs试验 也是临床常用的免疫凝集试验之一。
二、间接免疫凝集试验的临床应用
抗原的检测： 用于原体可溶性抗原的检测：如乙型肝炎病毒表面 抗原，细菌、腺病毒及流感病毒等的抗原鉴定和细菌可溶 性产物如外毒素等。 用于检测各种蛋白质成分：如尿液绒毛膜促性腺激素、纤 维蛋白原等血浆蛋白成分等。
间接免疫凝集试验的临床应用
抗体的检测： 用于检测细菌、病毒、螺旋体、寄生虫等感染后产生 的抗体：如抗人类免疫缺陷病毒抗体、抗溶血素O、梅毒螺 旋体抗体等。 用于检测自身免疫性疾病的抗体：如类风湿因子、抗 DNA抗体和抗甲状腺蛋白抗体等。 用于超敏反应患者的抗体测定：如青霉素抗体、某些 花粉抗体等。
（一）正向间接免疫凝集试验：测抗体
间接免疫凝集试验的类型
（二）反向间接免疫凝集试验：测抗原
间接免疫凝集试验的类型
（三）间接免疫凝集抑制试验：可测抗原，也可测抗体
间接免疫凝集试验的类型
（四）协同免疫凝集试验：测抗原，原理与反 向间接免疫凝集试验相似。
所用载体是细胞壁含有A蛋白（SPA）的金黄色 葡萄球菌，SPA具有与IgG（IgG3除外）的Fc段结合 的特性。
免疫凝集试验可作定性检测，也可进行半定量检测。 适当的室内质量控制措施可保证检测方法的有效性和检 测结果的可靠性。
Thank you !
免疫凝集反应实验报告
免疫凝集反应实验报告免疫凝集反应实验报告免疫凝集反应是一种常用的实验方法，用于检测特定抗原和抗体之间的相互作用。
通过观察凝集反应的形成与否，可以判断样品中是否存在目标物质，从而进行疾病的诊断和治疗。
在本次实验中，我们选择了血清中的抗体作为检测目标。
首先，我们需要制备一系列稀释的抗原溶液，以便与待测抗体发生反应。
这些抗原溶液可以是细菌、病毒、细胞膜蛋白等。
在实验中，我们选择了一种常见的病原体，即流感病毒。
接下来，我们需要将待测抗体与抗原溶液混合。
在混合过程中，抗体与抗原之间会发生特异性结合，形成免疫复合物。
当抗原与抗体的浓度适当时，免疫复合物会发生凝集反应，即形成可见的沉淀物。
为了观察凝集反应的结果，我们采用了显微镜进行观察。
将混合液滴在载玻片上，然后放置在显微镜下进行观察。
如果出现了凝集反应，我们可以看到显微镜下形成的沉淀物。
沉淀物的形状和大小可以提供有关抗原与抗体结合程度的信息。
在实验过程中，我们发现了一些有趣的现象。
首先，我们发现凝集反应的程度与抗原与抗体的浓度有关。
当抗原或抗体的浓度过高或过低时，凝集反应的程度都会减弱。
这是因为在过高或过低的浓度下，抗原与抗体的结合机会减少，从而减少了凝集反应的可能性。
其次，我们还观察到了凝集反应的时间和温度对实验结果的影响。
在适宜的温度下，凝集反应的速度会加快，形成的凝集物也更为明显。
然而，过高或过低的温度都会影响凝集反应的进行，甚至完全阻止凝集的形成。
因此，在进行免疫凝集反应实验时，选择适宜的温度非常重要。
最后，我们还进行了一些控制实验，以确保实验结果的准确性。
例如，我们在反应中添加了阴性对照组，即不含抗原的溶液。
通过与阴性对照组进行比较，我们可以排除非特异性凝集的可能性。
此外，我们还进行了阳性对照实验，即添加已知含有抗原的溶液。
阳性对照实验的结果可以验证我们实验的可靠性和准确性。
总结起来，免疫凝集反应是一种简单而有效的实验方法，用于检测特定抗原和抗体之间的相互作用。
临床检验免疫主管 (5)
临床检验免疫主管 (5)临床医学检验主管技师考试辅导《临床免疫学和免疫检验》第五章凝集反应第一节凝集反应的特点细菌.红细胞等颗粒抗原，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒后，它们与相应抗体（或抗原）在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象，称为凝集反应。
可以进行半定量检测，即将抗体作一系列稀释，与抗原结合产生凝集的最高稀释倍数作为其效价或滴度。
凝集试验是一个定性的检测方法，即根据凝集现象的出现与否判定结果阴性或阳性。
凝集反应分为两个阶段：①抗原抗体的特异性结合；②出现可见的颗粒凝聚。
第二节直接凝集反应直接凝集反应的原理是细菌.螺旋体和红细胞等颗粒性抗原，在适当的电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集。
参加凝集反应的抗原称凝集原，抗体则称为凝集素。
（一）玻片凝集试验主要用于抗原的定性分析，短时间便能观察结果，一般用来鉴定菌种或分型；也用于人类AB0血型的测定。
（二）试管凝集试验用定量抗原悬液与一系列梯度倍比稀释的待检血清混合，保温静置后，根据每管内颗粒凝集的程度，以判断待检血清中有无相应抗体及其效价，可以用来协助临床诊断或流行病原调查研究。
例如肥达试验.外斐试验.输血时也常用于受体和供体两者间的交叉配血试验。
第三节间接凝集反应间接凝集反应是将可溶性抗原（或抗体）先吸附于适当大小的颗粒性载体表面，然后与相应抗体（或抗原）作用，在适宜电解质存在的条件下，出现特异性凝集现象。
一.间接凝集反应的类型（一）正向间接凝集反应红细胞包被抗原，用以检测抗体的血凝反应，称为正向间接血凝反应（PHA）。
（二）反向间接凝集反应红细胞包被抗体，用以检测抗原的血凝反应，称为反向间接血凝反应（RPHA）。
（三）间接凝集抑制反应先将可溶性抗原（或抗体）与相应的抗体（或抗原）混合，然后再加入抗原（或抗体）致敏的红细胞，则能抑制原先的血凝现象，称为正向（或反向）间接血凝抑制试验。
间接血凝抑制试验可用于检测抗体.自身抗体.变态反应性抗体，也可测定抗原。
免疫凝集试验
第三节 间接免疫凝集试验
间接免疫凝集试验(indirect agglutination) 将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表
面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解 质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。
一、间接免疫凝集试验的类型
正向间接免疫凝集试验 反向间接免疫凝集试验 间接免疫凝集抑制试验 协同免疫凝集试验
免疫凝集试验
教学目的
掌握：直接凝集反应和间接凝集反应的试 验原理、类型；抗球蛋白参与的试验原理
熟悉：凝集反应的特点、应用
第一节 免疫凝集试验的基本原理
凝集反应(agglutination reaction)
是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表 面包被可溶性抗原（或抗体）的颗粒性载 体与相应抗体（或抗原）发生特异性结合 后，在适当电解质存在下，出现肉眼可见 的凝集现象。
抗体
抗原
载体颗粒 抗体致敏颗粒
（三）间接免疫凝集抑制试验 用抗原致敏载体--检测抗原
（三）间接免疫凝集抑制试验
+ 说明标本中不存在相应抗原
— 说明标本中含有相应抗原
抗原
抗原致敏颗粒
A 抗体
无抗原 B 抗体
抗原抗体 复合物 抗原致敏颗粒
游离抗体
不凝集 凝集
结果判定
试验结果+(凝集)--(不凝集)
第一节 免疫凝集试验的基本原理
分两个阶段： ①抗原抗体的特异性结合阶段 ②出现肉眼可见的凝集现象
可见反应形成
第二节 直接免疫凝集试验
直接凝集反应(direct agglutination)细菌、 螺旋体、红细胞等颗粒性抗原，在适当电 解质参与下直接与相应抗体结合出现肉眼 可见的凝集现象。
一、玻片凝集试验
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
的凝集现象。
第一节 免疫凝集试验的基本原理
分两个阶段： ①抗原抗体的特异性结合阶段 ②出现肉眼可见的凝集现象
可见反应形成
第二节 直接免疫凝集试验
直接凝集反应(direct agglutination)细菌、 螺旋体、红细胞等颗粒性抗原，在适当电
应用：检测HbsAg、AFP等。 特点：本方法快速、敏感性高、特异性强。 抗体 抗原
载体颗粒 抗体致敏颗粒
（三）间接免疫凝集抑制试验 用抗原致敏载体--检测抗原
（三）间接免疫凝集抑制试验
+ 说明标本中不存在相应抗原
— 说明标本中含有相应抗原
抗原 A 抗体
抗原致敏颗粒
抗原抗体 复合物 抗原致敏颗粒
一、直接Coombs试验
检测红细胞上抗体
不完全抗体
一、直接Coombs试验
抗球蛋白抗体
抗膜抗原的抗体
凝集
结合在红细胞表面
可用玻片法定性，也可用试管法 半定量分析。
临床应用：
新生儿溶血症、特发性自身免疫 性贫血、自身免疫性溶血症、和医源 性溶血性疾病等的检测。
检测血清中的抗红细胞抗体
二、间接Coombs试验
无抗原
不凝集
B 抗体
游离抗体
凝集
结果判定
试验结果+(凝集)--(不凝集)
检测结果 --
+
（四）协同免疫凝集试验
SPA:SPA-IgG Fc; SPA抗体致敏---测抗原 反向间接凝集反应
（四）协同免疫凝集试验
载体：金黄色葡萄球菌。
优点：特异、灵敏、简便、快速。
应用：可用于细菌、病毒、毒素及各种可
（一）正向间接免疫凝集试验
抗原致敏载体--检测抗体
（一）正向间接免疫凝集试验
特点：简便快速，敏感性和特异性均高， 成本低廉。 应用：伤寒沙门菌的多糖抗原致敏绵羊红 细胞测伤寒抗体。 抗原 抗 体 载体颗粒 抗原致敏颗粒
（二）反向间接免疫凝集试验
用抗体致敏载体----检测抗原
（二）反向间接免疫凝集试验
溶性抗原的快 速检测。
协同凝集试验
13
载体种类：
常用的载体有动物或人红细胞、 聚苯乙烯胶乳颗粒、明胶颗粒和 活性炭等。
二、间接免疫血凝试验
二、间接免疫血凝试验
（一）载体： 是以红细胞作为载体的间接免
疫凝集试验。
常用的载体有：绵羊、家兔、鸡红细胞和O型人 红细胞 。
（二）致敏
蛋白质致敏红细胞的方法有：
第六节 免疫凝集试验的临床应用 一、直接免疫凝集试验的临床应用 1、玻片凝集试验:定性检测，如细菌菌 种鉴定及分型、ABO血型鉴定等 2、试管凝集试验:半定量检测，如辅助 诊断伤寒、副伤寒的肥达试验等。
第六节 免疫凝集试验的临床应用
二、间接免疫凝集试验的临床应用 （一）抗原的检测
病原体可溶性抗原、各种蛋白质检测
第五章 免疫凝集试验
医学技术学院免疫教研室
教学目的
掌握：直接凝集反应和间接凝集反应的试
验原理、类型；抗球蛋白参与的试验原理
熟悉：凝集反应的特点、应用
第一节 免疫凝集试验的基本原理
凝集反应(agglutination reaction)
是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表
面包被可溶性抗原（或抗体）的颗粒性载
（二）抗体的检测 检测细菌、病毒等产生的抗体、自身
免疫病抗体、超敏反应抗体等
第七节 临床常用免疫凝集试验试剂方法特点 一、诊断菌液 二、载体颗粒 红细胞、胶乳、炭粉粒子 三、其他
第八节 影响免疫凝集试验的主要因素
一、抗原因素 二、抗血清因素 三、致敏颗粒试剂 四、血清标本 五、试验条件
小 结
凝集反应常用的实验方法：
直接法和间接法。
（三）血凝试验 微量滴定板或试管
标本倍比稀释（1：64）1滴
+
0.5%致敏红细胞悬液1滴
充分混匀 室温12h
血凝反应强度示意图
二、间接免疫血凝试验
载体：红细胞
优点：红细胞来源广，价格低。 该试验为最经典的抗原抗体反
应之一。 应用：常用于测定抗核抗体、类风湿
因子等。
三、颗粒免疫凝集试验 （一）胶乳颗粒凝集试验
解质参与下直接与相应抗体结合出现肉眼
可见的凝集现象。
一、玻片凝集试验
(slide agglutination test)
+
红细胞血型鉴定
红细胞悬液
B A
方法评价: 定性试验 简便和快速 敏感度低
临床应用: 菌种鉴定 血清学分型 血型鉴定
二、试管凝集试验
在试管内颗粒性抗原直接与抗体 结合，在电解质的作用下，出现肉 眼可见的凝集现象。
1、玻片法:定性检测 2、试管法:半定量检测
直接凝 集反应
类型
正向间接凝集 反向间接凝集 间接凝集 间接凝集抑制试验 间接凝 间接血凝 协同凝集试验 集反应 胶乳凝集试验 明胶凝集试验 特殊凝 自身红细胞凝集试验 集反应 抗球蛋白试验
玻片凝集 试管凝集
思考题
名词:
直接凝集反应
间接凝集反应 Coombs试验 简答:凝集反应的反应原理及影响因素？
试管凝集试验
免疫血清 1 1：10
2
3
10 阴性对照
………
血清稀释度 1:20 1:40 1:80 步骤：1）加生理盐水 0.5ml 2）依次倍比稀释免疫血清 3）加相同浓度的细菌悬液0.5ml
方法评价： 临床应用：
半定量试验
简便、快速 敏感度低 可有假阳性
Weaction Wright test:布鲁菌病 交叉配血试验
（一）胶乳颗粒凝集试验 载体：聚苯乙烯胶乳 优点：性能稳定，均一性好。
缺点：敏感度不及血凝试验。
应用：临床常用于检测抗溶血素0
和类风湿因子等。
（二）明胶颗粒凝集试验
（三）炭颗粒凝集试验
（四）甲苯胺红颗粒凝集试验
第四节 抗球蛋白红细胞免疫凝集试验
(antiglobulin test)
抗球蛋白试验 又称Coombs试 验
第三节 间接免疫凝集试验
间接免疫凝集试验(indirect agglutination) 将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表
面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解
质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。
一、间接免疫凝集试验的类型
正向间接免疫凝集试验 反向间接免疫凝集试验 间接免疫凝集抑制试验
协同免疫凝集试验
二、间接Coombs试验
检测血清中游离的不完全抗体 标本中 不完全抗体 抗球蛋白抗体 具有特异抗原的红细胞 凝集
临床应用：
1.检测母体Rh(D)抗体，以便尽早 发现和避免新生儿溶血症发生。 2.输血前交叉配血或不相容输血后
抗体检测。
第五节 自身红细胞凝集试验
与一般间接免疫血凝试验不同之处 在于反应中的红细胞是未经致敏的 受检者新鲜红细胞。
1 下列有关正向间接凝集抑制反应叙述正确的是 A.用抗体致敏载体 C.出现凝集为阳性 E.以上都不对 2 关于反向间接凝集试验说法错误的是 A.抗体致敏载体 B.用于检测标本中抗原 E.特异性强 B.主要用于抗体检测 D.不出现凝集说明标本中有待测抗原
C.出现凝集为阴性 D.敏感性高