医学生实验设计大赛ppt模板
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医学实验设计课件
随机对照试验
随机对照试验是一种常用的医学 实验设计方法，其主要目的是比 较两种或多种干预措施之间的效
果差异。
在随机对照试验中，研究对象被 随机分配到不同的干预组，以避 免选择和混杂偏倚对实验结果的
影响。
随机对照试验的结果具有较高的 内部效度和外部效度，适用于评 价干预措施的有效性和安全性。
前瞻性队列研究
流行病学调查设计
总结词
流行病学调查是医学实验设计中重要的应用 之一，旨在研究疾病的分布和影响因素，为 预防和控制疾病提供科学依据。
详细描述
流行病学调查设计需要遵循科学、严谨的原 则，以确保调查结果的准确性和可靠性。在 流行病学调查中，需要采用随机抽样、分层 抽样等科学抽样方法，以减少抽样误差和偏 倚。同时，还需要对调查数据进行严格的分
样本含量估计
总结词
合理、精确、可行
VS
详细描述
样本含量估计是医学实验设计中非常重要 的环节，直接关系到实验结果的准确性和 可靠性。样本含量估计需要考虑多种因素 ，如研究目的、实验设计、误差率、样本 可获得性等。样本含量过小会导致结果不 稳定，过大则会导致浪费和伦理问题。因 此，样本含量估计需要合理、精确、可行 。
06
医学实验设计的挑战与展望
克服伦理与法律限制
01
02
03
遵循伦理原则
医学实验设计必须遵循伦 理原则，确保受试者的权 益和安全，避免任何形式 的虐待和滥用。
遵守法律法规
医学实验设计必须符合相 关法律法规的要求，确保 合法合规，避免引发法律 纠纷。
建立伦理审查机制
建立独立的伦理审查机制 ，对医学实验设计进行严 格的审查和监督，确保实 验的合理性和必要性。
案例一：某新药治疗高血压的疗效评价
医学科研设计--临床试验设计 ppt课件
ppt课件 2
我国SARS疫苗研究临床试验揭秘
ppt课件
3
（一）研究目的
评价疫苗的安全性 评价疫苗免疫原性
ppt课件
4
（二）研究对象
实行自愿报名、知情同意、遵从入选和 排除标准； 共筛选受试者36人，为21～40岁的健康 成人
ppt课件
5
（三）研究方法
随机对照双盲试验设计 36名受试者：12名受试者接种16SU试验疫苗， 12名受试者接种32SU试验疫苗，12名受试者 接种对照疫苗。受试者一共接种两针疫苗，
ppt课件
20
20
不同的研究目的
▐
▐ ▐ ▐ ▐
新药（设备）
不同的剂量
已有药物针对新的疾病类型
与“金标准”，“标准疗法”比较
两种药物或者设备的相互比较
ppt课件
21
21
1. 临床试验的设计的步骤
▐ ▐ ▐ ▐ ▐ ▐
明确实验研究目的 确定研究因素 选择研究对象 估计样本含量 确定实验结局和观察 主要评价指标
单侧检验所需样本 单双侧检验 量比双侧检验少 分组数量越多所需 设计类型 25 样本量越大
25
▐ ppt课件
1. 临床试验的设计步骤
▐
非连续变量样本大小的计算：所谓非连
续变量是指计数资料，如治愈率、有效
率、感染率、病死率等
Z N
2 P 1 P Z P1 1 P1 P2 1 P2
▐
ppt课件
13
13
临床试验（Clinic Trial）
▐
运用随机分配的原则将试验对象（患者）分 为试验组和对照组，给前者某种治疗措施， 不给后者这种措施或给以安慰剂或常规治疗， 经过一段时间后观察两组的临床过程及转归， 比较两组的治愈率、好转率、病死率等指标， 从而评价干预措施的效果 目的：评价临床治疗、预防措施的效果和病 因研究
我国SARS疫苗研究临床试验揭秘
ppt课件
3
（一）研究目的
评价疫苗的安全性 评价疫苗免疫原性
ppt课件
4
（二）研究对象
实行自愿报名、知情同意、遵从入选和 排除标准； 共筛选受试者36人，为21～40岁的健康 成人
ppt课件
5
（三）研究方法
随机对照双盲试验设计 36名受试者：12名受试者接种16SU试验疫苗， 12名受试者接种32SU试验疫苗，12名受试者 接种对照疫苗。受试者一共接种两针疫苗，
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不同的研究目的
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新药（设备）
不同的剂量
已有药物针对新的疾病类型
与“金标准”，“标准疗法”比较
两种药物或者设备的相互比较
ppt课件
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1. 临床试验的设计的步骤
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明确实验研究目的 确定研究因素 选择研究对象 估计样本含量 确定实验结局和观察 主要评价指标
单侧检验所需样本 单双侧检验 量比双侧检验少 分组数量越多所需 设计类型 25 样本量越大
25
▐ ppt课件
1. 临床试验的设计步骤
▐
非连续变量样本大小的计算：所谓非连
续变量是指计数资料，如治愈率、有效
率、感染率、病死率等
Z N
2 P 1 P Z P1 1 P1 P2 1 P2
▐
ppt课件
13
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临床试验（Clinic Trial）
▐
运用随机分配的原则将试验对象（患者）分 为试验组和对照组，给前者某种治疗措施， 不给后者这种措施或给以安慰剂或常规治疗， 经过一段时间后观察两组的临床过程及转归， 比较两组的治愈率、好转率、病死率等指标， 从而评价干预措施的效果 目的：评价临床治疗、预防措施的效果和病 因研究
医学实验设计 教学PPT课件
• 重复原则的作用在于它有利于使随机变量的统计规律性 充分地显露出来
– 重复的三种情形
• 重复实验 • 重复取样 • 重复测量
2021/7/11
23
重复原则
– 临床研究实施重复原则的常用措施
• 严格按照研究目的规定研究对象的性质与范围 • 保证临床研究足够的样本含量（sample size）
2021/7/11
– 随机分组 指保证样本中的每一个个体都有同等 的机会被分配到实验组或对照组。
2021/7/11
21
随机原则
– 随机化的方法
• 简单随机化（simple randomization）
– 可通过抛掷硬币、抽签、摸球、查随机数字表或 应用操作计算器的随机数字健来完成
• 区组随机化（block randomization）
2021/7/11
1
第一节 实验设计的特点和类型
• 实验设计的基本概念
– 实验研究（experimental study）
• 是指研究者根据研究目的人为地对受试对象（包括 人或动物）施加处理因素，控制混杂因素，观察、 总结处理因素的效应的一种研究方法。
– 实验设计（experimental design）
2021/7/11
32
偏倚及其控制
• 混杂偏倚（confounding bias）
– 指暴露因素与疾病发生的相关（关联）程度受到混杂 因素的歪曲或干扰，导致产生的偏倚
– 混杂偏倚控制是在设计阶段通过配比、随机化分配或 限制进入（选择混杂因素的某个层的对象）等方法来 控制。在统计分析阶段可采用标准化率分析、分层分 析和多变量分析等来控制。
• 水平（level）
– 是指同一处理因素在数量上或强度上的不同程度。 （不同的药物种类或药物剂量）
– 重复的三种情形
• 重复实验 • 重复取样 • 重复测量
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重复原则
– 临床研究实施重复原则的常用措施
• 严格按照研究目的规定研究对象的性质与范围 • 保证临床研究足够的样本含量（sample size）
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– 随机分组 指保证样本中的每一个个体都有同等 的机会被分配到实验组或对照组。
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随机原则
– 随机化的方法
• 简单随机化（simple randomization）
– 可通过抛掷硬币、抽签、摸球、查随机数字表或 应用操作计算器的随机数字健来完成
• 区组随机化（block randomization）
2021/7/11
1
第一节 实验设计的特点和类型
• 实验设计的基本概念
– 实验研究（experimental study）
• 是指研究者根据研究目的人为地对受试对象（包括 人或动物）施加处理因素，控制混杂因素，观察、 总结处理因素的效应的一种研究方法。
– 实验设计（experimental design）
2021/7/11
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偏倚及其控制
• 混杂偏倚（confounding bias）
– 指暴露因素与疾病发生的相关（关联）程度受到混杂 因素的歪曲或干扰，导致产生的偏倚
– 混杂偏倚控制是在设计阶段通过配比、随机化分配或 限制进入（选择混杂因素的某个层的对象）等方法来 控制。在统计分析阶段可采用标准化率分析、分层分 析和多变量分析等来控制。
• 水平（level）
– 是指同一处理因素在数量上或强度上的不同程度。 （不同的药物种类或药物剂量）
基础医学科研设计幻灯片
animal）：为国际标准级，所有科研 四级，无菌动物（germfree animal）：特殊课题
实验动物管理条例（国家科委，1988）
第四章 实验动物的应用 第十九条 应用实验动物应当根据不同的实验目的， 选用相应的合格实验动物。申报科研课题和鉴定科研 成果，应当把应用合格实验动物作为基本条件。应用 不合格实验动物取得的检定或者安全评价结果无效， 所生产的制品不得使用。 第二十条 供应用的实验动物应当具备下列完整的 资料： （一）品种、品系及亚系的确切名称； （二）遗传背景或其来源； （三）微生物检测状况； （四）合格证书； （五）饲育单位负责人签名。
3.演绎推理----由一般到特殊
由已知规律推论未知事物
根据DNA碱基序列推出蛋白质的一级结构 从蛋白质的一级结构预测蛋白质的高级结构 从蛋白质的高级结构预测它的细胞定位和功能
4.类比推理----从Байду номын сангаас殊推向特殊
根据两个或两类对象有部分属性相同，从而推出它们的其 他属性也相同
EDRF与NO生物学作用的相似性 半衰期短 被Hb和超氧阴离子灭活 舒张血管作用伴随cGMP的增高
推测：EDRF本质可能是NO
建立假说的原则
解释性原则 * 有事实依据 * 解释已有事实 能解释旧理论能解释的事实 能解释旧理论不能解释的事实
相容性原则 不应与已有的基本理论相矛盾 如 休克的微循环学说 休克的细胞因子学说
简单性原则
可检验性原则
假说上升为理论的条件
能解释旧理论能解释的事实 能解释旧理论不能解释的事实 能够正确预见尚未观察到的自然现象
3.受试对象的纯化 所用受试对象力求一致，尽力减少个体差异，
降低非被试因素对效应的影响
（1） 表现典型的确诊病例 （2） 病情轻重一致，先从病情中等的病例开始 （3） 使用统一、公认的诊断和分型分级标准
实验动物管理条例（国家科委，1988）
第四章 实验动物的应用 第十九条 应用实验动物应当根据不同的实验目的， 选用相应的合格实验动物。申报科研课题和鉴定科研 成果，应当把应用合格实验动物作为基本条件。应用 不合格实验动物取得的检定或者安全评价结果无效， 所生产的制品不得使用。 第二十条 供应用的实验动物应当具备下列完整的 资料： （一）品种、品系及亚系的确切名称； （二）遗传背景或其来源； （三）微生物检测状况； （四）合格证书； （五）饲育单位负责人签名。
3.演绎推理----由一般到特殊
由已知规律推论未知事物
根据DNA碱基序列推出蛋白质的一级结构 从蛋白质的一级结构预测蛋白质的高级结构 从蛋白质的高级结构预测它的细胞定位和功能
4.类比推理----从Байду номын сангаас殊推向特殊
根据两个或两类对象有部分属性相同，从而推出它们的其 他属性也相同
EDRF与NO生物学作用的相似性 半衰期短 被Hb和超氧阴离子灭活 舒张血管作用伴随cGMP的增高
推测：EDRF本质可能是NO
建立假说的原则
解释性原则 * 有事实依据 * 解释已有事实 能解释旧理论能解释的事实 能解释旧理论不能解释的事实
相容性原则 不应与已有的基本理论相矛盾 如 休克的微循环学说 休克的细胞因子学说
简单性原则
可检验性原则
假说上升为理论的条件
能解释旧理论能解释的事实 能解释旧理论不能解释的事实 能够正确预见尚未观察到的自然现象
3.受试对象的纯化 所用受试对象力求一致，尽力减少个体差异，
降低非被试因素对效应的影响
（1） 表现典型的确诊病例 （2） 病情轻重一致，先从病情中等的病例开始 （3） 使用统一、公认的诊断和分型分级标准
医学实验设计与调查设计PPT课件(51张)
②试验顺序的差别；
③Ⅰ和Ⅱ阶段之间差别。
注意事项：
①试验先后的A与B不能相互影响；
②盲法观察效应；
③不适用于病程短的疾病研究。
10.08.2020
流行病与卫生统计学系 王静
23
4. 析因设计
将多个实验因素的各水平进行组合，对 各种可能的组合都进行实验。
10.08.2020
流行病与卫生统计学系 王静
（1）完全随机化 直接对受试对象进行随机化分组。 例：将30只小白鼠完全随机地分成2组。 步骤： ①先编号，0、1、2、…、29； ②采用随机数字表，抄录30个两位数的随机数
字于对应的编号之下；
③规定奇数进A组、偶数进B组。
10.08.2020
流行病与卫生统计学系 王静
13
若将30只小白鼠完全随机地分成3组。 步骤：
10.08.2020
流行病与卫生统计学系 王静
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四、调查误差的控制
抽样误差在设计时可加以控制，
非抽样误差的控制贯穿于设计、资料搜集、 整理、分析全过程。
10.08.2020
流行病与卫生统计学系 王静
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四种基本抽样方法
单纯随机抽样 系统抽样 分层抽样 整群抽样
10.08.2020
流行病与卫生统计学系 王静
三个基本要素： 受试对象 处理因素 实验效应
10.08.2020
流行病与卫生统计学系 王静
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（一）受试对象
1、种类：
动物 ————————动物实验
人 病人—————临床试验
健康人 ————社区干预试验
2、要求：
1）对处理因素敏感，反应稳定；
2）明确纳入标准和排除标准。
10.08.2020
临床试验设计医学PPT课件
交叉设计试验即在试验过程中将研究对象随 机分为两组，在第一阶段，一组人群给予治 疗措施，另一组则为对照组，治疗措施结束 后，两组对换进行第二阶段试验。 此类设计仍需要在两阶段试验中设立一定时 间长度的洗脱期 主要用于评价慢性易复发疾病，如哮喘。
13
临床试验设计步骤及其基本原则
在开始实施一项临床试验前，应该制定周密 合理的试验方案，其内容应包括试验背景、 试验方案、组织和实施程序、结果评价指标 和方法等。一般在临床试验开始后，没有特 殊情况不能对试验方案做任何改动，尤其是 在新药的临床试验中。
安慰剂效应 是指某些疾病的患者由 于依赖医药而表现的一种正向心理效应。 因此，当以主观症状改善作为疗效评价 指标时，其“效应”中可能就包含安慰 剂效应，这需要合适的对照组来比较以 得出科学、客观的评价。
30
临床试验设计
设立对照的主要方式有以下几种： 1）标准疗法对照 2）安慰剂对照 安慰剂通常用乳糖、淀粉、生理盐 水等成分制成，不加任何有效成分，但外形、颜 色、大小、味道与试验药物极为相似，仅凭肉眼 不能区分。 3）自身对照 4）随机对照 5）交叉对照
P1 IE 100 % P2
P1、P2分别为对照组发病率和试验组发病率
37
临床试验的实施
预试验 培训 结束实验 所谓破盲是指任何非规定情况下的盲底 泄漏
38
临床试验的资料处理与分析
首先将研究资料进行核对、整理，然后 对资料的基本情况进行描述和分析，特 别需要注意的是试验组和对照组均衡性 与可比性的比较。
1）不能预知的结局（unpredicable outcome）
2）向均数回归（regression to the mean） 3）霍桑效应（Hawthorne effect） 4）安慰剂效应（placebo effect） 除此之外，还有各种各样的潜在的未知因素可能影响 所研究的措施的效应
【设计方案】医学院实验设计方案PPT(45页)
将受试对象按某些特征或条件配成对子，然后 分别把每对中的两个受试对象随机分配到试验组 和对照组，再给予每对中的个体以不同处理，连 续试验若干对，观察对子间的差别有无意义。
整理课件ppt
12
配对设计(paired design)—概念
配对的特征或条件： 动物实验：常以种属、品系、性别相同，年龄、 体重相近的两只动物配成对子； 临床疗效观察常将病种、病型、族别、性别相 同，年龄相差不超过2—3岁，生活习惯、工作环 境等相似的病人配成对子；
本量可相等，也可不相等。样本相等时统计分 析效率较高。
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3
完全随机设计—随机分组
例1 将12头动物随机分配到A、B两组。 1、先将12头动物编号为1、2……12号。然后 在随机数字表内任意确定一个起始点和方向 连续取12个随机数字，并依次抄录于动物编 号下。
2、本例从随机数字表第6行第19、20列起向下 读取12个随机数字，取两位随机数字。
3、将随机数字从小到大顺序排列后得序号R， 并规定R=1～6者为A组，R=7～12者为B组。
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4
完样全本随均机数设与计总—体均随数机（分或组配对）比较
12 动物完全随机分两组结果（采用随机数字表）
动物编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
随机数字 35 92 28 65 27 09 52 66 51 07 47 70 序号（R） 5 12 4 9 3 2 8 10 7 1 6 11 处理级别 A B A B A A B B B A A B
整理课件ppt
5
完全随机设计—随机分组
例2 将15头动物随机分成三组。 将动物编号如1、2……15号，然后在随机数
字表内从某行某列起向某方向读取15个随机 数字，取两位随机数字，依次抄录于动物编 号下。
医学实验设计课件
生物医学研究设计
总结词
生物医学研究设计是医学研究的重要领域，通过科学合理的设计，能够提高研究 的可靠性和可重复性。
详细描述
生物医学研究设计需要考虑生物学因素、环境因素、社会因素等多种因素，并根 据研究目的和要求选择合适的研究设计方法，如队列研究、病例对照研究、动物 实验等。
行为与社会科学研究设计
式减少其影响的设计。
实验设计的基本流程
问题提出
明确研究目的和问题，提出研究假设。
文献回顾
查阅相关文献，了解已有研究成果和不足，明确研究思 路和方法。
研究设计
根据研究目的和问题，制定实验方案，包括实验对象、 方法、指标等方面。
数据采集与分析
按照实验方案采集数据，并对数据进行清洗、整理、统 计分析等处理。
实验设计的伦理与法规
医学实验设计的伦理原则
尊重人的生命和健康
医学实验设计必须以保障人的生命和健康为首要原则，不得危 害受试者的生命和健康。
遵守知情同意原则
实验前需向受试者详细说明实验目的、过程、风险、预期收益 等信息，并获得受试者的知情同意。
保护受试者的隐私
实验过程中需严格保护受试者的个人信息和实验数据，避免泄 露受试者的隐私。
盲法原则
在实验过程中尽量避免主观因素的 干扰，以提高研究的客观性和准确 性。
02
实验设计的基础知识
实验设计的要素
实验对象
指接受实验并作为观察、测量、 记录对象的生物体或生物群体， 应具有代表性，同时应关注其种 属、年龄、性别、体重、健康状 况等因素。
实验因素
指实验过程中可以变化的因素， 包括自变量、因变量和无关变量 。
结果解释与结论
根据数据分析结果，对研究假设进行验证或拒绝，并解 释结果的含义和可能的原因。
生物医学实验设计PPT幻灯片
对照及分组情况
按随机区组设计如下：假手术组、HI组、川芎嗪Ⅰ组 和川芎嗪Ⅱ组共四组，每窝4只鼠为一区组，共10窝，每窝 随机分配至各处理组。
分组
假手术组 HI组 川芎嗪Ⅰ组 川芎嗪Ⅱ组
假手术组
为对照组。只切开皮肤游离左颈总动脉，不 进行缺氧处理。于缺氧前30分钟腹腔注射等量生 理盐水。
HI组
结扎左颈总动脉，并缺氧2小时。于缺氧 前30分钟腹腔注射等量生理盐水。
选择性偏倚
由于纳入观察对象的方法不正确而产生的偏倚。
防止措施
正确拟定观察对象的纳入和排除标准 采用分层抽样的方法 正确设立对照组 贯彻随机化原则
测量性偏倚的概念
测量性偏倚
在实验过程中对研究对象进行观察 或测量而造成的偏倚。
导致测量性偏倚常见因素
沾染(contamination) ：使差异缩小
干扰（co-intervention)：使差异扩大
川芎嗪Ⅰ组：
结扎左颈总动脉，并缺氧2小时。于缺氧前 30分钟腹腔注射川芎嗪注射液100mg/Kg。
川芎嗪Ⅱ组
于HI后即刻腹腔注射川芎嗪注射液100mg/Kg。
统计分析方法
采用随机区组实验设计方差分析及X2检验
第四节 误差和偏倚
误 差(error)
误差的概念及分类
误差(error) 泛指实测值与真值之差
2、处理因素
• 处理因素或受试因素：根据研究目确定 的欲施加或欲观察的、并能引起受试对 象直接或间接效应的因素，简称处理或 因素(factor)。是根据研究目的确定的主 要因素，处理因素在整个实验中应始终 要保持不变
• 非处理因素：与处理因素可能同时存在 的能使受试对象产生效应的非研究因素。 非处理因素干扰效应与所研究因素间关 系的观察与分析，常常又称混杂因素 (confounder)。
常用医学实验设计 ppt课件
ppt课件 19
方法二、随机数字表法分组
对象 编号 随机 数字 除以3 的余 数 组别 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
对象 编号 随机 数字 除以 3的 余数 组别
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
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28
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ppt课件
20
ppt课件
21
方法二、随机数字表法分组
7 15 18 19 20 25 28 30
12 13 17 23 24
组间调整：
1. 从随机数字表中接着查一随机数字，77，除以12，余5; ， 则将A组中的第5只“11号”分至C组；
ppt课件 23
ppt课件
24
组间调整1
组 别 动物号
A
B C
2
1 6
4
3 9
8
5
10
7
14 16 21 22 26 27 29
16
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30
84
26
34
91
64
84
42
17
53
31
57
24
55
06
88
0 A
2 C
1 B
1 B
1 B
0 A
0 A
2 C
2 C
1 B
0 A
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1 B
0 A
1 B
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方法二、随机数字表法分组
对象 编号 随机 数字 除以3 的余 数 组别 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
对象 编号 随机 数字 除以 3的 余数 组别
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方法二、随机数字表法分组
7 15 18 19 20 25 28 30
12 13 17 23 24
组间调整：
1. 从随机数字表中接着查一随机数字，77，除以12，余5; ， 则将A组中的第5只“11号”分至C组；
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组间调整1
组 别 动物号
A
B C
2
1 6
4
3 9
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14 16 21 22 26 27 29
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0 A
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图A-B：潜伏实验和探索实验统计图； n=5；*p<0.05 vs.I/R组；#p<0.05 vs.GPC 组. 图C-D：潜伏实验和探索实验大鼠游泳路 程轨迹图
小结5
点击此处输入标题
GPC能有效的改善大鼠缺血后的空间学习 和记忆能力。
点击此处输入标题
GPC能有效的改善大鼠缺血后的空间学习 和记忆能力。
小结3
A
C
B 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 .8 .6 .4 .2 0.0
I/R GPC
**
*
Sh R30m R6h R1d R3d
图5 A-C GPC促进大鼠海马CA1 区Nrf2蛋白表达；
图A：再灌注不同时间点核内Nrf2蛋 白表达；图B：再灌注不同时间点核 内Nrf2蛋白表达统计图，n=4， *p<0.05 vs. I/R组；图C：再灌注3d 各实验组Nrf2 蛋白的表达及统计图； *p<0.001 vs. I/R组， #p<0.001 vs.Vehicle2 组。
02
主要实验仪器和试剂
大鼠脑立体定位仪 大鼠脑微量注射泵
冰冻切片机 激光扫描共聚焦显微镜
酶标仪 电泳设备
摇床 Morris水迷宫 超低温冰箱等
01 02
组织裂解液 BCA蛋白浓度测定试剂盒 eNOS、p-eNOS、 Nrf2、HO-
1一抗及其相应的二抗 NBT/BCIP显色液 NeuN、4-HNE、8-OHdG一抗
研究的背景及意义
01
研究的背景及意义
01
对缺血性脑中风发病机制及防治的研究已成 为医学界关注的重点。
02
缺血大脑迅速获得血液供应是阻止缺血性神经元损伤的 首要措施，然而，大量的血液迅速再灌注又进一步加重
缺血组织的损伤--即缺血再灌注损伤。
03
氧化应激和炎症是缺血再灌注损伤病理生理机制的重要组成部分。脑缺血再 灌注早期即有大量活性氧产生，并迅速启动损伤级联，加剧了初始损害最终 导致神经元不可逆的损伤。因此，再灌注早期阻断氧化应激损伤是有效降低
TUNEL positive cell
100
50
*
0
Sham I/R GPC L-NAME
元数量统计图; *P<0.05 vs. I/R 组， #P<0.05 vs. GPC 组， n=5; 40×, bar = 50μm
小结1
v
Genistein后处理是否诱导eNOS激活
（磷酸化）?
Genistein后处理对缺血性神经元损伤 具有保护作用，eNOS激酶抑制剂LNAME减弱了该作用，说明eNOS可能 参与了此保护作用。
元的氧化应激损伤呢?
4-HNE是脂质过氧化的最 终产物，被公认为氧化应
激最稳定的标记物 8OHdG，是DNA氧化损伤
的特异产物
小结2
I/R GPC
B
I/R GPC
图4 全脑缺血再灌注3 d，各实验组大鼠海马CA1区 4-HNE及8-OHdG免疫荧光染色 图A：绿色: NeuN； 红色: 4-HNE； 图B：红色: DAPI； 绿色: 8-OHdG；
经元损伤。
海马是学习和记忆的重要部位，而 海马CA1区是缺血最敏感的区域。 那么，GPC是否能改善大鼠缺血后
空间学习记忆能力?
Quadrant Occupancy(sec)
小结4
B
70 60 50 40 30 20 10
0
*
#
Sham I/R GPC L-NAME
9d Probe trial
图7 GPC对大鼠缺血后空间学习和记忆 能力的影响
I10m 30m
I10m
I10m
缺血 0.9%NaCl
尾静脉注射Genistein 1mg/kg 0.1%DMSO
技术路线图
实验方法及检测指标
A
再灌注5d检测 海马CA1区神经元
的凋亡及存活
TUNEL染色 及NeuN染色
C
再灌注30min, 6h,1d,3d 观察 p-eNOS, Nrf2, HO-1蛋白表达
4
总结
5
不足与展望
6
致谢
版权声明
感谢您下载觅知网平台上提供的PPT作品，为了您和觅知网以及原创作者的利益，请勿复制、传播、销 售，否则将承担法律责任！觅知网将对作品进行维权，按照传播下载次数进行十倍的索取赔偿！
1.在觅知网出售的PPT模板是免版税类（RF：Royalty-Free）正版受《中国人民共和国著作法》和《世
迟发性神经元死亡的关键。
06
05
eNOS活性的升高对脑中风具有有益作用。另研究发 现，Genistein能够诱导eNOS活性并激活核因子NFE2相关因子(Nrf2)，进而诱导抗氧化酶表达、减少心 血管疾病的发生。
04
Genistein作为酪氨酸激酶抑制剂可有效减弱短暂全脑缺血造成 的神经元的延迟性死亡；一个单纯的氧诱导的脑缺血小鼠模型显 示Genistein具有抗氧化活性。
2018
Graduation thesis of medicine
医学生实验设计大赛ppt模板
Genistein后处理介导大鼠海马CA1区 eNOS/Nrf2/HO-1信号通路及其神经保护作用 研 究 生：**** 导 师：****教授
目录 CONTENTS
1
研究的背景及意义
2
材料与方法
3
实验结果与讨论
GPC能有效改善大鼠短暂全脑缺 血后的认知功能。
GPC可通过诱导eNOS磷酸化水平 并上调Nrf2/HO-1信号通路，从而 降低脑缺血诱导的氧化应激损伤。
小结1
A
B
图2 GPC对大鼠海马CA1区 神经元eNOS、p-eNOS 蛋白表达的影响
图A：再灌注不同时间点p-eNOS、eNOS蛋白的表达；Sh：Sham组；R：再灌注； －： I/R组；＋： GPC组；GPC: Genistein后处理；图B： p-eNOS蛋白表达统计
图： n=4； *p<0.05 vs. I/R组
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GPC能有效的改善大鼠缺血后的空间学习 和记忆能力。
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此处输入标题
右键点击图片选择设置图片格式可直接替换 图片，在此录入上述图表的综合描述说明，
小结4
01
02
03
GPC可显著增加海马CA1区神经元 胞核中Nrf2蛋白的表达并引起下游 靶基因HO-1的表达，而L-NAME阻
断了此作用。
此结果进一步揭示GPC通过eNOS 诱导了Nrf2/HO-1抗氧化信号通路， 从而阻断了缺血再灌注后迟发性神
界版权公约》的保护，作品的所有权、版权和著作权归觅知网所有，您下载的是PPT模板素材的使用权。
2.不得将觅知网的PPT模板、PPT素材，本身用于再出售，或者出租、出借、转让、分销、发布或者作
为礼物供他人使用，不得转授权、出卖、转让本协议或者本协议中的权利。
The experimental results and discussion
Genistein具有酪氨酸激酶抑制剂活性和抗氧化作用。
研究的背景及意义
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实验结果与讨论
03
实验结果与讨论
图1 NeuN及TUNEL免疫荧光染色观察再灌注5d大鼠海
A
B 300
马CA1区神经元的存活及凋亡
250
*
200
NeuN positive cell
150
100
#
50
0
Sham I/R GPC L-NAME
C 250
200
#
150
图A：NeuN (红色) 染色 ：生存的神经元；TUNEL (绿色)染色： 凋亡样神经元；图B：海马CA1区1mm 长度内NeuN 阳性神经 元数量统计图；图C：海马CA1区1mm长度内 TUNEL阳性神经
小结1
A
B
图3 L-NAME对再灌注3d大鼠 海马CA1区神经元eNOS磷酸化 水平的影响
•图A：各实验组再灌注3 d peNOS蛋白表达；图B：各实验组 再灌注3 d •p-eNOS蛋白表达统计图，n=5， *p<0.05 VS. I/R 组；#p<0.05 VS. Vehicle2 组
小结2
此处输入标题
右键点击图片选择设置图片格式可直接替换 图片，在此录入上述图表的综合描述说明，
图A-B：HO-1蛋白表达及其统计图；图C：HO1与Nrf2蛋白的共定位，*p<0.05 VS. I/R 组； #p<0.05 VS. vehicle2组；绿色：Nrf2； 红色： HO-1；蓝色：DAPI ；合成图为三者的共定位； 40×； n=4-5； bar = 50μm；
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The research background and significance
小结5
点击此处输入标题
GPC能有效的改善大鼠缺血后的空间学习 和记忆能力。
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GPC能有效的改善大鼠缺血后的空间学习 和记忆能力。
小结3
A
C
B 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 .8 .6 .4 .2 0.0
I/R GPC
**
*
Sh R30m R6h R1d R3d
图5 A-C GPC促进大鼠海马CA1 区Nrf2蛋白表达；
图A：再灌注不同时间点核内Nrf2蛋 白表达；图B：再灌注不同时间点核 内Nrf2蛋白表达统计图，n=4， *p<0.05 vs. I/R组；图C：再灌注3d 各实验组Nrf2 蛋白的表达及统计图； *p<0.001 vs. I/R组， #p<0.001 vs.Vehicle2 组。
02
主要实验仪器和试剂
大鼠脑立体定位仪 大鼠脑微量注射泵
冰冻切片机 激光扫描共聚焦显微镜
酶标仪 电泳设备
摇床 Morris水迷宫 超低温冰箱等
01 02
组织裂解液 BCA蛋白浓度测定试剂盒 eNOS、p-eNOS、 Nrf2、HO-
1一抗及其相应的二抗 NBT/BCIP显色液 NeuN、4-HNE、8-OHdG一抗
研究的背景及意义
01
研究的背景及意义
01
对缺血性脑中风发病机制及防治的研究已成 为医学界关注的重点。
02
缺血大脑迅速获得血液供应是阻止缺血性神经元损伤的 首要措施，然而，大量的血液迅速再灌注又进一步加重
缺血组织的损伤--即缺血再灌注损伤。
03
氧化应激和炎症是缺血再灌注损伤病理生理机制的重要组成部分。脑缺血再 灌注早期即有大量活性氧产生，并迅速启动损伤级联，加剧了初始损害最终 导致神经元不可逆的损伤。因此，再灌注早期阻断氧化应激损伤是有效降低
TUNEL positive cell
100
50
*
0
Sham I/R GPC L-NAME
元数量统计图; *P<0.05 vs. I/R 组， #P<0.05 vs. GPC 组， n=5; 40×, bar = 50μm
小结1
v
Genistein后处理是否诱导eNOS激活
（磷酸化）?
Genistein后处理对缺血性神经元损伤 具有保护作用，eNOS激酶抑制剂LNAME减弱了该作用，说明eNOS可能 参与了此保护作用。
元的氧化应激损伤呢?
4-HNE是脂质过氧化的最 终产物，被公认为氧化应
激最稳定的标记物 8OHdG，是DNA氧化损伤
的特异产物
小结2
I/R GPC
B
I/R GPC
图4 全脑缺血再灌注3 d，各实验组大鼠海马CA1区 4-HNE及8-OHdG免疫荧光染色 图A：绿色: NeuN； 红色: 4-HNE； 图B：红色: DAPI； 绿色: 8-OHdG；
经元损伤。
海马是学习和记忆的重要部位，而 海马CA1区是缺血最敏感的区域。 那么，GPC是否能改善大鼠缺血后
空间学习记忆能力?
Quadrant Occupancy(sec)
小结4
B
70 60 50 40 30 20 10
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#
Sham I/R GPC L-NAME
9d Probe trial
图7 GPC对大鼠缺血后空间学习和记忆 能力的影响
I10m 30m
I10m
I10m
缺血 0.9%NaCl
尾静脉注射Genistein 1mg/kg 0.1%DMSO
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A
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的凋亡及存活
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C
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eNOS活性的升高对脑中风具有有益作用。另研究发 现，Genistein能够诱导eNOS活性并激活核因子NFE2相关因子(Nrf2)，进而诱导抗氧化酶表达、减少心 血管疾病的发生。
04
Genistein作为酪氨酸激酶抑制剂可有效减弱短暂全脑缺血造成 的神经元的延迟性死亡；一个单纯的氧诱导的脑缺血小鼠模型显 示Genistein具有抗氧化活性。
2018
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Genistein后处理介导大鼠海马CA1区 eNOS/Nrf2/HO-1信号通路及其神经保护作用 研 究 生：**** 导 师：****教授
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1
研究的背景及意义
2
材料与方法
3
实验结果与讨论
GPC能有效改善大鼠短暂全脑缺 血后的认知功能。
GPC可通过诱导eNOS磷酸化水平 并上调Nrf2/HO-1信号通路，从而 降低脑缺血诱导的氧化应激损伤。
小结1
A
B
图2 GPC对大鼠海马CA1区 神经元eNOS、p-eNOS 蛋白表达的影响
图A：再灌注不同时间点p-eNOS、eNOS蛋白的表达；Sh：Sham组；R：再灌注； －： I/R组；＋： GPC组；GPC: Genistein后处理；图B： p-eNOS蛋白表达统计
图： n=4； *p<0.05 vs. I/R组
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断了此作用。
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03
实验结果与讨论
图1 NeuN及TUNEL免疫荧光染色观察再灌注5d大鼠海
A
B 300
马CA1区神经元的存活及凋亡
250
*
200
NeuN positive cell
150
100
#
50
0
Sham I/R GPC L-NAME
C 250
200
#
150
图A：NeuN (红色) 染色 ：生存的神经元；TUNEL (绿色)染色： 凋亡样神经元；图B：海马CA1区1mm 长度内NeuN 阳性神经 元数量统计图；图C：海马CA1区1mm长度内 TUNEL阳性神经
小结1
A
B
图3 L-NAME对再灌注3d大鼠 海马CA1区神经元eNOS磷酸化 水平的影响
•图A：各实验组再灌注3 d peNOS蛋白表达；图B：各实验组 再灌注3 d •p-eNOS蛋白表达统计图，n=5， *p<0.05 VS. I/R 组；#p<0.05 VS. Vehicle2 组
小结2
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图A-B：HO-1蛋白表达及其统计图；图C：HO1与Nrf2蛋白的共定位，*p<0.05 VS. I/R 组； #p<0.05 VS. vehicle2组；绿色：Nrf2； 红色： HO-1；蓝色：DAPI ；合成图为三者的共定位； 40×； n=4-5； bar = 50μm；
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