生物技术及应用类毕业论文——β-内酰胺类抗生素的鉴别、特殊杂质检查和含量测定

毕业论文（顶岗实习作业文件）2009 /2010学年（二）学期题目β-内酰胺类抗生素的鉴别、特殊杂质检查和含量测定专业生物技术及应用班级姓名指导教师20**年05月25日杭州职业技术学院顶岗实习技能训练任务书专业班级学生姓名专业指导教师实习单位温州市瓯海第三人民医院岗位指导教师陈月眉岗位（工作分工）质量检测技能训练选题β-内酰胺类抗生素的含量测定和鉴别顶岗实习技能训练依据：证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物，含量测定和鉴别是保证产品的品质的重要依据。

技能训练内容、技能要求和训练目标：1.内容：β-内酰胺类抗生素的含量测定和鉴别2.技能训练要求：能严格按照规定完成实验，熟练掌握相应的操作规程3.训练目标：1能熟练按照操作规程检测及其相应的不合单的处理和异常的处理等2熟悉掌握整个工作流程任务书发给日期20**年2月28 日顶岗实习时间20** 年 3 月 1 日至20**年 5 月25 日专业负责人意见（签名）：同意田晖系部主任意见（签名）：实习单位概况单位名称温州市瓯海第三人民医院单位地址温州市瓯海区梧埏镇月落羊医院文化和管理理念（基本情况）医院树立“信誉第一、患者至上、优质高效、文明行医”的服务宗旨，让患者对合理的收费放心，疾病的诊断放心，医疗的方案放心，整体的护理放心，职业的医德放心为服务承诺，以创新竞争的医疗经营理念和开发形象这一第四资源为经营策略，创人民满意的信用医院，做群众喜爱的文明使者。

医院的主要优惠措施医院向社会推出各项优惠措施，凡持有《老人优待证》、《温州市瓯海区农村独生子女优惠证》、《温州市瓯海区农村两女户优惠证》、《温州市计生会员证》、《温州市瓯海区最低生活保障救助证》、《瓯海区农村合作医疗证》者，免收挂号费、优惠各项检查费和住院费。

国内外该行业现状及技术现状、发展趋势医院实行电脑网络化管理，科室设置齐全，设有爱婴医院、预防保健中心、社区卫生服务中心、感管中心、康复中心、手外中心、慈善门诊等。

医院拥有美国GE双排CT、彩超、全自动生化分析仪、电子胃镜等一系列国外先进医疗设备。

病房配有电视、直拨电话、饮水机、沙发、卫生间、淋浴器等。

病区清洁、安静、舒适、为病员提供良好的修养环境。

引出实习岗位与本次实习的目的与意义结合理论与实际进一步使全院职工在思想上树立医疗质量第一的意识，真真正正把提高医疗服务质量放在医疗工作的首位，把医疗质量作为开展一切工作的出发点和立足点，形成全院人人、处处、时时抓医疗质量的良好局面。

进一步加强医疗质量、医疗安全的各项规章制度，各级人员职责、各种技术操作规程，逐步使各项工作制度化、职责明确化、技术规范化、并建立起长效机制，确保了我院医疗质量再上一个新台阶《β-内酰胺类抗生素的鉴别、特殊杂质检查和含量测定》-----开题报告生物技术及应用 XXXXXX一、本课题研究的理由通过各项任务的有效实施，采取切实可行的管理手段，完善各种规章制度与质量控制体系，建立起一支高素质的优秀人才梯队；充分发挥院内外专家的资源优势；进一步完善特色专科；逐年引进新技术、新项目；尽快购置与现代化医院相适应的医疗设备，促进临床各项工作的开展，使医院整体业务水平上一个新台阶，达到省内二级先进行列，逐渐形成具有一定规模的，集医疗、科研、教学为一体的，同时富有专科特色的现代化医院。

β-内酰胺类抗生素是临床上常用的药物之一,同时也是较易发生不良反应的药物之一,在临床上最常见的不良反应是速发型过敏反应。

有资料报道引发β-内酰胺类抗生素速发型过敏反应的过敏原并不是β-内酰胺类抗生素本身,而是其中存在的高分子聚合物。

抗生素是指“在低微浓度下即可对某次哦生物的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称”。

抗生素又分为β-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类。

而β-内酰胺类抗生素的含量测定和鉴别，证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物，含量测定和鉴别是保证产品的品质的重要依据。

二、产品简介β-内酰胺类抗生素分为青霉素族和头孢菌素族，他们的分子结构中均含有β-内酰胺环，因此统称为β-内酰胺类抗生素。

利用本类药物中的特殊结构与试剂反应显色进行鉴别。

三、实习的主要内容[1]羟肟酸铁反应（碱性溶液）青霉素及头孢菌素在碱性中与羟胺作用，β-内酰胺环破裂生成羟肟酸；在稀酸中与高铁离子呈色。

[2]类似肽键的反应此类药物具有-CONH-结构，一些取代基有α-氨基酸结构，可显双缩脲和茚三酮反应。

如头孢氨苄，头孢羟氨苄，头孢拉定，头孢克洛侧链均为氨苄基，中国药典采用TLC鉴别、检查时，以茚三酮为显色剂。

1995年版中国药典对阿莫西林、氨苄西林钠等采用碱性酒石酸铜反应(紫红色)进行鉴别。

[3]其他呈色反应侧链含有-C6H5-OH基团时，能与重氮苯磺酸试液产生偶合反应而呈色，如头孢哌酮与重氮苯磺酸试液作用，呈橙黄色。

此外，本类药物还可与变色酸-硫酸、硫酸-硝酸、铜盐等试剂而呈色。

BP采用硫酸-甲醛试验，如氨苄西林的鉴别试验：去本品约2mg，置试管中，加0.05ml水湿润，加2ml 硫酸-甲醛试液，混合，溶液无色，将试管置水浴中加热1min，呈暗黄色。

同样的方法，青霉素甲和青霉素钠呈红棕色。

四、论文所需工作量和时间安排20**年3月学习β-内酰胺类抗生素的鉴别20**年4月学习β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查20**年5月学习β-内酰胺类抗生素的含量测定20**年5月查阅文献、资料，论文的撰写五、主要参考文献[1]胡昌勤编著.抗生素质控分析中HPLC分析方法的理论与实践. 北京：气象出版社2001[2].安登魁主编.药物分析.济南：济南出版社，1992[3].中国药典注释编委会.中国药典1990年版二部注释.北京：化学工业出版社.1988[4].谭力等。

高效液相色谱法测定人血浆中阿莫西林浓度及药代动力学.药学学报，1997，[5].中国药典注释编委会.药品红外光谱集.北京:化学工业出版社，1995[6].De BS et al. Quantitative analysis of amovycillin and its major metabolistes in animal tissues iby liquid chromatography vombined with electrospray ionization tadem mass spectrometry. Anal Chem,2002[7]李军等. 用HPLC法测定头孢曲松钠、头孢噻肟钠、头孢哌酮钠聚合物.中国药品标准，2002目录摘要 (7)岗位名称：β-内酰胺类抗生素的鉴别 (9)岗位名称：β-内酰胺类抗生素中特殊杂质的检查 (11)岗位名称：β-内酰胺类抗生素的含量测定 (18)附录： (23)顶岗实习技能训练总结 (24)参考文献： (25)致谢 (26)摘要抗生素是指“在低微浓度下即可对某种生物的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称”。

抗生素又分为β-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类。

而β-内酰胺类抗生素的含量测定和鉴别，证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物，含量测定和鉴别是保证产品的品质的重要依据本论文在查阅文献及顶岗实习的基础上，引入指导老师的指导加以完成。

通过翻阅公司标准操作规程及其他相关文献资料，并在岗位上身体力行，从而阐述β-内酰胺类抗生素鉴别和含量测定的相关操作，并在实际检测中加强自己的实际操作能力，也在检测中学会怎么处理的异常情况。

关键词：β-内酰胺类抗生素，鉴别，含量测定，取样顶岗实习概要写此论文的目的，是向在临床一线工作的医师介绍β-内酰胺类抗生素本身的药代动力学特点，以及国内外β-内酰胺类抗生素应用相关研究的轨迹和进展。

这些研究内容总的来说可分成两大部分：一部分是将β-内酰胺类抗生素作为一种常规的工具药，用以观察各种β-内酰胺类抗生素药代动力学参数的一些基本特点；另一部分是各种β-内酰胺类抗生素用于疾病的治疗。

书中对这种用药的具体方案（如用法、用量）尽可能详细地描述，以便为临床医师β-内酰胺类抗生素提供参考。

由于国内这方面的研究工作刚刚起步，所以主要参考的是国外的相关研究文献。

随着人们对β-内酰胺类抗生素PK/PD特性这一特殊价值认识的不断深入，应该有越来越多的学者关注和从事这方面的研究，这必然会对节约抗生素资源和科学合理地使用β-内酰胺类抗生素有所裨益，这也比期待更多和更新的抗生素问世要现实得多。

表1—A 本岗位阶段性技能训练实施一览表岗位名称：β-内酰胺类抗生素的鉴别顶岗实习时间安排： 20**年3月1日—20**年3月31日一、具体要求：学习常见β-内酰胺类抗生素的鉴别方法了解β-内酰胺类抗生素鉴别反应的基本原理了解鉴别反应技术掌握鉴别反应的方法和操作规程二、操作过程：[1]羟肟酸铁反应（碱性溶液）青霉素及头孢菌素在碱性中与羟胺作用，β-内酰胺环破裂生成羟肟酸；在稀酸中与高铁离子呈色。

[2] 类似肽键的反应贝类药物具有-CONH-结构，一些取代基有α-氨基酸结构，可显双缩脲和茚三酮反应。

如头孢氨苄，头孢羟氨苄，头孢拉定，头孢克洛侧链均为氨苄基，中国药典采用TLC鉴别、检查时，以茚三酮为显色剂。

1995年版中国药典对阿莫西林、氨苄西林钠等采用碱性酒石酸铜反应(紫红色)进行鉴别。

[3] 其他呈色反应侧链含有-C6H5-OH基团时，能与重氮苯磺酸试液产生偶合反应而呈色，如头孢哌酮与重氮苯磺酸试液作用，呈橙黄色。

此外，本类药物还可与变色酸-硫酸、硫酸-硝酸、铜盐等试剂而呈色。

BP采用硫酸-甲醛试验，如氨苄西林的鉴别试验：去本品约2mg，置试管中，加0.05ml水湿润，加2ml 硫酸-甲醛试液，混合，溶液无色，将试管置水浴中加热1min，呈暗黄色。

同样的方法，青霉素甲和青霉素钠呈红棕色。

三、自主性学习：β内酰胺类抗生素简介种类介绍1、碳氢霉烯类：硫霉素2、单环β-内酰胺类抗生素：氨曲南、诺卡霉素3、β-内酰胺酶抑制剂：（1）氧青霉素类：克拉维酸；（2）青霉烷砜酸类：舒巴坦。

4、β-内酰胺酶抑制剂的复合物：奥格门丁（克拉维酸+阿莫西林）、亚胺培南+西司他丁β-内酰胺类抗生素。

作用机制通过抑制细菌细胞壁粘肽合成酶的活性而阻碍细胞壁粘肽的合成，使细菌胞壁缺损，菌体膨胀裂解。

由于哺乳动物无细胞壁，不受β-内酰胺类抗生素的影响，故对机体的毒性小。

研究证实，细菌细胞壁粘肽合成酶即是位于细菌胞浆膜上的特殊蛋白，称青霉素结合蛋白(PBPs)，此是β-内酰胺类抗生素的作用靶点。

各种细菌细胞膜上的PBPs数目、分子量不同，而对β-内酰胺类抗生素的敏感性也不同作用类型Ⅰ类：青霉素G及口服青霉素V容易透过G+菌粘肽层，但不能透过G-菌的脂蛋白外膜，属仅对G+菌有效的窄谱抗生素。

Ⅱ类：氨苄西林、羧苄西林、阿洛西林、美洛西林、亚胺培南及若干头孢菌素，能适度透过G+菌粘肽层，对G-菌的脂蛋白外膜穿透性则很好，因而是广谱抗生素。