线粒体超活染色

结 果：在高倍镜下，先观察根尖部分的生长点的 细胞，可见细胞质中散在很多大小不等的染成玫瑰
红色的圆形小泡，这是初生的幼小液泡；然后，由
生长点向延长区观察，在一些已分化长大的细胞内,
液泡的染色较浅，体积增大,数目变少；在成熟区
细胞中，一般只有一个淡红色的巨大液泡，占据细
胞的绝大部分，将细胞核挤到细胞一侧贴近细胞壁
清洁载玻片放在37℃恒温水浴锅的金属板上 ↓
滴2滴1/5000詹纳斯绿B染液
↓ 用牙签口腔颊粘膜处稍用力刮取上皮细胞
↓
刮下的粘液状物放到载玻片的染液滴中 ↓ 染色10~l5min（注意不可使染液干燥，必要时可再加滴染液） ↓ 盖上盖玻片，显微镜下观察
２、洋葱鳞茎内表皮细胞线粒体的
超活染色与观察
载玻片于37℃恒温水浴： 1/5000詹纳斯绿Ｂ溶液 洋葱鳞茎内表皮

（1）保证所取材料的活性。通过控制温度和加入缓冲
液实现。 （2）保证染色剂的状态。可以通过现用现配和棕色试 剂瓶保存来保证染色剂的化学性质不发生变化；用浓度 较低的染色剂来保证对细胞无毒或伤害较小。

实验六 线粒体和液泡系的超活染色与观察
一、实验目的
１、观察动植物活细胞内线粒体、液泡系 的形态数量与分布； ２、学习一些细胞器的超活染色技术。
二、实验原理
细胞的各项活动所需要的能量，主要通过线粒
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体呼吸作用来提供。
活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实
地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生 命活动的一种染色方法。
三、实 验 用 品

1、器材
显微镜、恒温水浴锅、剪刀、镊子、刀片、 载玻片、
盖玻片、吸管、牙签、吸水纸.
2、试剂
（1）Ringer溶液
（2）10%，1/3000中性红溶液
（3）1%，1/5000詹纳斯绿B溶液
四、实验材料
人口腔上皮细胞
洋葱鳞茎内表皮 绿豆幼根根尖
五、实 验 步骤

1、人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色与观察
处。
作

业
1. 绘口腔上皮细胞示线粒体的形态与分布，并简要分析
2. 绘示绿豆根尖液泡系的形态与分布

3、什么是活体染色？要想获得体外活体染色成功，我们应 注意哪些问题？

活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着色但又无
毒害的一种染色方法，其目的是显示生活细胞内的某些 结构，而不影响细胞的生命活动和产生任何理化变化以 致引起细胞死亡。 要想获得体外活体染色成功，我们应注意：
詹纳斯绿
B是线粒体的专一性活体染色剂，
线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状 态（即有色状态）呈蓝绿色，而在周围的细 胞质中染料被还原，成为无色状态。
中性红为弱碱性染料，3-氨基-6甲氨基-2-甲
基吩嗪盐酸盐。对液泡系（即高尔基体）的 染色有专一性，只将活细胞中的液泡系染成 红色，细胞核与细胞质完全不着色，这可能 是与液泡中某些蛋白质有关。
１滴 镊子撕取
染色10－15min，吸去染液，加Ringer溶液１
滴，盖上盖玻片，显微镜下观察。
染过色但没有染上的细胞
染色的细胞
线粒体
未染色细胞
洋葱鳞茎细胞线粒体
死亡的染色细 胞
3、植物细胞液泡系的超活染色与观察

取豆芽的根尖
↓用刀片纵切根尖
放入中性红染液滴中，染色5~10min
↓
吸去染液，滴一滴Ringer液 ↓ 盖上盖玻片进行镜检（镊子轻轻地下压盖玻片，使 根尖压扁利于观察）