农产品品质分析

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（三）操作步骤
1、糖溶液的提取 2、还原糖的测定 3、标准曲线的绘制
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1、糖溶液的提取
（1）水提取法 （2）酒精提取法 （3）双糖(蔗糖)的水解
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（1）水提取法
新鲜样品称重后研磨或匀浆，洗入250毫升 容量瓶，约150ml时，加2—3滴甲基红指示 剂，如呈红色可用0.1mol/lNaOH中和至微 黄色。 风干样品称重后加少量水润湿后，洗入250 毫升容量瓶中，同上中和其酸性。然后放 入80℃水浴中保温30分钟，其间摇动数次， 使糖分完全转入溶液中。 含蛋白质多的样品，须加醋酸铅沉淀。 最后加水至刻度，摇匀后过滤。
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一、概述
水溶性糖是光合作用的初级产物，通过测定水溶性糖的含量， 水溶性糖是光合作用的初级产物，通过测定水溶性糖的含量， 可以了解光合作用的强度和效率。了解作物C、 代谢状况 代谢状况， 可以了解光合作用的强度和效率。了解作物 、N代谢状况， 还可以了解不同的生产技术条件下（如施肥、灌溉、气温等） 还可以了解不同的生产技术条件下（如施肥、灌溉、气温等） 对作物糖分含量的影响， 对作物糖分含量的影响，以便改进生产技术条件下达到作物高 产优质的需要。 产优质的需要。
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2、测定：
吸取待测糖液1—5毫升，移入25毫升容量瓶 中，加水定容。吸取2毫升此稀释糖溶液(糖 浓度在20—80ppm之间)放入具塞比色管中， 然后沿瓶壁缓缓注入葸酮试剂10毫升，立即 摇动半分钟，放入沸水浴中加热10分钟，取 出放入冷水中迅速冷却，10分钟后显色稳定 时进行光电比色，用1厘米光径的比色杯，波 长620纳米处读取吸收值。
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（二）试剂配制
1、索姆吉试剂：将25克无水Na2CO3和25 克酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)放入2升 烧杯中，加水约500毫升使溶解，不断搅拌， 并将直立漏斗插入液面以下，从漏斗加入 75毫升10％CuSO4·5H2O溶液。再加入20 克NaHCO3，使完全溶解后再加5克KI，然 后移入1升容量瓶中，加入250毫升 0.100mol/l KIO3，用水定容。用微孔玻璃 漏斗过滤，放置过夜后备用。
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（3）双糖(蔗糖)的水解
酸水解：吸取上述澄清的糖液50毫升，放入 100毫升容量瓶中，将容量瓶放入预热到 80—82℃水浴中，当温度上升至60℃后，加 入3毫升浓HCl于糖液中，继续保持8分钟取 出容量瓶，迅速冷却，以甲基红为指示剂， 用饱和Na2CO3中和至金黄色，加水至刻度， 此时蔗糖已水解为还原糖。
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（三）操作步骤
1、吸取5毫升约含0.5—2.5毫克还原糖的待 测液放入25×200毫米试管中，加5毫升索姆 吉试剂，摇动混匀。
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（三）操作步骤
2、试管口盖以玻璃球或漏斗，在沸水浴中加 热15分钟，小心将试管平稳地置于流动冷水 浴中4分钟，去盖，沿管壁加入2毫升KI— K2C2O4及3毫升1mol/lH2SO4(溶液为碱性时 不要摇动)，充分摇动混匀，使Cu2O完全溶 解，再于冷水浴中放5分钟，并摇动2次。
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3、标准曲线的绘制
称取干燥的葡萄糖0.20000克，加水溶解，定 容100毫升。此为2毫克／毫升标准葡萄糖溶 液。分别吸取此标准糖液1、3、5、7、9、 11毫升于小三角瓶中，加水补足至15毫升， 其余同上操作，最后用标准Na2S2O3滴定。 然后以空白标定与系列标准糖液消耗 Na2S2O3液毫升之差数为纵座标，系列葡萄 糖的毫克数为横座标，绘制标准曲线。
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（二）试剂配制
3、25％碘化钾溶液：125克碘化钾溶解于水 中，加3mol/lNaOH 1ml，加水至500毫升， 贮存于冷暗处。 4、3 mol/l硫酸溶液：将167毫升浓H2SO4缓 缓注入833毫升水中。 5、0.5％淀粉指示剂：淀粉1克加少量水拌匀， 缓缓倾入200毫升沸水中，搅拌成稀度透明液。
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3、标准曲线的绘制：
吸取系列标准葡萄糖溶液各2毫升，分别放入 6只具塞比色管中，按上述同百度文库操作步骤显色 后比色。以系列糖浓度为横座标，吸收值为 纵座标，绘制标准曲线。
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第二节 糖料作物中蔗糖的测定（旋光法）
一、方法原理 二、试剂配制 三、操作步骤
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一、方法原理
旋光法测糖的原理是基于糖类分子具有不对 称碳原子，可使通过的光的偏振面旋转。各 种糖类都有其特定的比旋，例如蔗糖水溶液 的比旋是+66.5，葡萄糖是+52.8，果糖是— 92.0，麦芽糖是+118等。
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（三）操作步骤
3、用0.005 mol/l 1/2Na2S2O3滴定，以淀 粉为指示剂。 4、同时以5毫升水代替糖液作空白标定试 验。 5、查得相当的还原糖毫克数。
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四、还原糖测定（蒽酮比色法）
（一）方法原理 （二）试剂配制 （三）操作步骤
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（一）方法原理
单糖类遇浓硫酸脱水成为羟醛类，再变成呋 喃衍生物，后者可与葸酮缩合成蓝绿色化合 物，其颜色深浅与糖分含量成正相关，故可 由蓝绿色的强度求得糖分的含量。
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三、还原糖测定（索姆吉微量法）
（一）方法原理 （二）试剂配制 （三）操作步骤
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（一）方法原理
先使还原糖与索姆吉试剂(与斐林试剂相似，但还 有KI和KIO3存在)反应生成Cu2O沉淀。然后用 H2SO4酸化，Cu2O溶解成Cu+，同时KIO3与KI在 酸性条件下生成I2： KIO3+5KI+3 H2SO4 3K2SO4+3H2O+3 I2 生成的I2与Cu+离子产生氧化还原作用，消耗部分 I2，溶液中剩余的I2用标准Na2S2O3滴定。同时做 空白标定。由空白标定试验滴定时所用Na2S2O3 毫升数，减去糖液作用后所用Na2S2O3毫升数， 即为与糖液相当的Cu2O作用的I2量，查表可得糖 液中还原糖的毫克数。
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一、方法原理
比旋是指100毫升溶液中含有100克旋光性物 质，通过液层厚度(即管长) 1分米，温度20℃ 时，钠光源(波长589.3纳米)所旋转的角度。 因此当液层厚度为1分米，浓度为每100毫升 中C克时，偏振光光面的旋转角度可用以下 式表示： C 偏振光光面的旋转角度＝比旋×L× 100
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（三）操作步骤
1、可溶性糖的提取： 2、测定： 3、标准曲线的绘制：
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1、可溶性糖的提取：
称取细碎样品0.100克放入15毫升离心管中， 加80％酒精10毫升，管口松塞一小塞子，于 80—85℃水浴中保温30分钟。取出离心，将 上层清液移入一个50毫升烧杯中。用此法对 残渣重复提取两次，使可溶性糖提取完全。 然后将上述酒精溶液置于80—85℃水浴上蒸 发，直至剩下约3毫升为止。然后用水定容25 毫升，作为糖的待测液。
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一、方法原理
因此，当管长一定时， 100 C＝ ×偏振光光面的旋转角度 比旋×L ＝K×偏振光光面的旋转角度 式中K为常数，随旋光物质的种类和管长不同而 改变。 蔗糖的比旋＝+66．5，如将L固定为2分米，则K＝ 0.75，故C＝0.75×偏振光光面的旋转角度。
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（二）试剂配制
6、0.05mol/l 1/2硫代硫酸钠溶液：先配制 1mol/l 1/2Na2S2O3溶液，即将124克 Na2S2O3·5H2O溶于1000毫升煮沸后已冷却 的水中，另加无水碳酸钠2克。取1mol/l 1/2Na2S2O3液250毫升，用煮沸后已冷却的 水稀释成5升(每升加HgI10毫克防腐)，溶液 贮于棕色瓶中放暗处。
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（二）试剂配制
1、斐林A溶液：硫酸铜CuSO4·5H2O 50克， 加水溶解，过滤，加0.5毫升浓H2SO4，定容 于1000毫升容量瓶。 2、斐林B溶液：氢氧化钠150克，酒石酸钾 钠KNaC4H4O6·4H2O 200克，溶解后定容于 1000升容量瓶。使用前也可将斐林A、B两液 等体积混合成斐林试剂。
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（一）方法原理
上述反应完成后，将溶液酸化并加入KI，由剩余 斐林试剂所得的Cu2+即与I—作用析出I2和Cu2I2淡 黄色沉淀： 2Cu2++4I———>Cu2I2+I2 生成的I2可用标准Na2S2O3液滴定 ： I2+2S2O3 2— S4O6 2—+2I— 最后，由试剂空白标定与样品测定时所用 Na2S2O3溶液毫升之差，查系列标准葡萄糖毫克 数与Na2S2O3毫克数绘制的标准曲线即可求得还 原糖的量。
农产品品质分析
第七章 农产品品质分析
第一节 植物中可溶性糖的测定 第二节 糖料作物中蔗糖的测定 第三节 植物中淀粉的测定 第四节 植物中蛋白质测定 第五节 植物中脂肪测定 第六节 植物中粗纤维测定
第一节 植物中可溶性糖的测定
一、概述 二、还原糖测定（斐林－碘量法） 三、还原糖测定（索姆吉微量法） 四、还原糖测定（蒽酮比色法）
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（二）试剂配制
2、KI—K2C2O4溶液：溶解2.5克KI及2.5克 K2C2O4于100毫升水中，每周晚配制现用。 3、 0.005 mol/l 1/2 Na2S2O3溶液：配制与上 法同，同时稀释。 4、淀粉指示剂：同上法。
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（二）试剂配制
（6）0.05mol/l 1/2硫代硫酸钠溶液：先配制 1mol/l 1/2Na2S2O3溶液，即将260克 Na2S2O3·5H2O溶于100毫升煮沸后已冷却的 水中，另加无水碳酸钠2克。取1mol/l 1/2Na2S2O3液250毫升，用煮沸后已冷却的 水稀释成5升(每升加HgI10毫克防腐)，溶液 贮于棕色瓶中放暗处。
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（四）注意事项
1、滴定时必须先加KI，后加H2SO4，如果 次序颠倒，则测得的含糖量显着下降．滴 定时必须保持足够的酸性，否则终点不清。 2、淀粉指示剂不能过早加入，因为形成大 量淀粉吸附物，达到终点时仍不易褪色而 造成误差。 3、滴定至终点后，放置较久，又可呈现蓝 色，这是因为过量的KI在酸性条件下，能被 空气氧化而析I2的缘故，滴定溶液中还有 Cu2I2浅黄色沉淀生成。
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（二）试剂配制
1、葡萄糖系列标准溶液：称取1.0000克葡萄 糖于1升容量瓶中，此为1000ppm母液。从中 吸取1、2、4、6、8、10毫升注入100毫升容 量瓶中，用水定容，即为含10、20、40、60、 80、100ppm糖溶液的标准系列。 2、葸酮溶液：称取0.100克葸酮溶解于100毫 升72％的硫酸中(每100毫升0.1％葸酮溶液中 的硫酸含量为比重1.84的浓H2SO474毫升)。 此试剂须现用现配制。
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二、还原糖测定（斐林－碘量法）
（一）方法原理 （二）试剂配制 （三）操作步骤 （四）注意事项
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（一）方法原理
在严格规定的条件下，待测液中的还原糖与 已知量的、过量的氧化剂斐林试剂完成氧化 还原反应后，用碘量法测定剩余氧化剂的量， 由净消耗的氧化剂的量来求得还原糖的含量。 还原糖与斐林溶液的氧化还原作用，须在沸 热的条件下进行。此时斐林试剂使还原糖氧 化和降解(脱羧)，生成葡萄糖一酸和CO32—， 同时二价铜还原为氧化亚铜沉淀。
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（2）酒精提取法
对含有大量淀粉或菊糖的样品，用水提取 会使部分糊精或菊糖进入溶液而影响分析 结果，同时过滤也困难，为此，最好采用 酒精提取法：将研磨成糊状的样品加80％ 酒精100毫升，安装上回流冷凝管，在水浴 上80℃保温提取三次，第一次30分钟，后 两次各15分钟，合并三次溶液，在85℃水 浴上蒸发酒精提取液，一直到酒精溶液只 剩下大约3—5毫升时，用水洗入250毫升容 量瓶中定容，即为糖的提取液(酒精提取液 不必除蛋白质，因蛋白质不会溶解出来)。
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2、还原糖的测定
吸取待测糖液5—15毫升（含糖在2—20毫克 范围）于小三角瓶中，准确加斐林试剂10毫 升 ，加水使总体积大约25毫升，煮沸3分钟， 冷却，加入25％KI5毫升和3 mol/l H2SO46m1， 立即用0.05 mol/l 1/2Na2S2O3滴定至淡黄色， 加淀粉指示剂2毫升，继续滴定至蓝色消褪为 终点。同时进行试验空白标定
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一、概述
植物体中的可溶性糖，通常指葡萄糖、果糖(单糖) 及蔗糖(双糖)三种。它们都溶于水(故亦有称水溶 性糖的)，也易溶于酒精中。 植物体中糖分的含量依作物种类、品种特性及生 育时期变化很大。外界环境条件例如气温、光照、 雨水、施肥等许多因素，也影响糖分的含量。 作物在贮藏过程中，糖分不断变化：开始时由于 多糖的水解而糖分含量增加，而后期又因呼吸作 用而消耗了糖分。 因此，可溶性糖分的测定，对于鉴定作物品质， 以及对于改进栽培技术和选择合适的贮藏方法都 具有很大意义。