纤维素分解菌的筛选
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等 ，普遍存 在酶活力 较低 的问题 。筛选高效 纤维 素分 解菌是利用秸秆纤维素的关键 。②纤维素酶价格贵 ，利 用成本 高 ，要使纤维素酶真正能够应用于生产 ，必须设
（ ） １ 浓度为 ｌ ｇ Ｌ ｍ ／ 的葡萄糖标准液 ｍ 将 葡萄糖 在恒 温 干燥箱 中１ ５Ｃ下干燥 至恒 重 ， ０ ｏ
５ ，Ｎ Ｃ １ ｇ ｇ ａ １０ ，加蒸 馏水 定容 至 １ ０ ｍＬ ０ ０ ，调 整ｐ 值 Ｈ
至 ７０。 ．
１１ ．３真 菌培养基 ． （ ） 面种子培养基 （ ／ １ 斜 ｇ Ｌ）：马铃薯２ ０ ，蔗糖 ０ｇ
２ｇ ０ ，琼 脂 粉 ２ ｇ ０ ，加 蒸 馏水 定 容 至 １０ ｍ ，无 需 调 整 ０ Ｌ ０
５ ０ 含 有 １ ５酒 石 酸钾 钠 （ ４ ０Ｋ ０ ｍＬ ｇ ８ Ｃ Ｈ４ ６ Ｎａ。 Ｈ２ ４ ０， ＭＷ ＝２ ２ ２． ８ ２） 的 热 水 溶 液 中 ， 再 加 ５ 结 晶 酚 ｇ
６１
２ １ ．４ 总 第４ 期 审豳稿带农业 ０２ ７
本实验通过对土样 中菌株 的筛选 ，分离 出具有一定 纤维素酶活力的微生物 。在此过程中对纤维素分解菌进
１． ． ２细菌培养基 １
Ｌ 培养基 （ ／ Ｂ ｇＬ）：胰 化 蛋 白 胨 １ｇ Ｏ ，酵母 提 取 物
掉 ，不 但破 坏 了生 态平衡 ，污染环 境 ，还存 在火灾 隐
患 。发展 和利用生物技术 分解转化天然纤维素原料既是 资源利用 的有效途径 ，而且对于解决环境污染 、粮食短
缺 和 能 源危 机 也 具 有 重大 的现 实 意 义 。 纤 维 素 酶 可 以 分 解 纤 维 素 ，它 广 泛 存 在 于 自然 界
然 这 是 生 态 系 统 中碳 循 环 的一个 重 要 环 节 ，但从 人 类 利
取 四川 省 大 邑 县 及 崇 州 县 的 土 样 各 １ ０ ｇ ０ ０ ，分 别 放 入塑 料 袋 中 ，带 回实 验室 。
用 自然资源的角度看 ，无疑是巨大的浪费。在我 国，大 部分 秸秆 和树林 副产品被 用作燃料 或在 田间被直 接烧
ｐ Ｈ值 。
中 ，细菌 、真菌 、动物体 内等都能产 生纤维素酶。一般 用 于生产 的纤 维素酶来 自于真 菌 ，比较 典型 的有木酶
属 、曲霉 属 和 青霉 属 。产 生 纤 维 素酶 的菌 种 容 易退 化 ，
（ ）刚果红纤维素培养基 （／ ２ ｇＬ）：Ｋ Ｏ ２ ｇ Ｈ Ｐ ． ， ０
燕端水（ ｍＬ１
ＯＯ ．０
２．０ ０
Ｏ０ ．４
ｔ６ ９
００ ．８
１９ ．２
０１ ２
Ｉ８ ＇８
为人类发展 ｑ的紧迫课题 。本试验 以土壤 为样本 ，利 用刚果红纤维素培养基进行初 筛， － ＿ 用麦秸粉 固体发 酵培养基复 筛，获得 了具有较 强纤维素分解能力的真菌。
关 键 词 ：纤 维 素 酶 ；真 菌
天然纤 维素 原料是 地球上最 丰 富的可再生 有机物
行研究 。并希望以此为基础进行更为深入 的研究 。
准 确 称 取 １０ 于 ｌＯ ｄ 烧 杯 中 ，用 少 量 蒸 馏 水 溶 解 ０ ｍｇ Ｏ ｍＬ ￣
法降低纤维素酶的成本 ，如筛选新菌株 ，改善生产工艺 等。③酶产量及酶的 比活力低一直是影 响纤维素酶实际
应用 的重要原 因。 目前 ，纤维素酶形成 的机制和原理还 未完全搞清楚 。因此通过实验研究确定最适产酶条件具
１ 材 料 与 方 法
１ １材 料 ．
质。全世界通过光合作用产生的植物物质每年高达２０ ００
亿 ｔ 目前有 ８ ％未被人类 利用 ，只有 １ ％用作饲草 、 ， ９ １
造 纸 和 建 筑 原 料 。 绝 大部 分 的天 然纤 维 素 原 料 在 自然 环
１１１土 壤样 品 ．．
境 中被各种微 生物分解转化 Biblioteka Baidu最终形成Ｃ ． Ｏ 和Ｈ ０。虽
Ｃ ｈｉ Ｔ ｒ ｎａ ｏｐｉ ａ ｇ ｉ ｕｌｕｒ ｃ ｌＡ ｒｃ ｔ ｅ
Ｌ ０
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表１
、、、
２
量 相 同无 机 盐 培 养 基 的 锥 型 瓶 放 人 等 质 量 的 秸 秆 ，用 移 液 器 从 富 集 培
德简稚标 准溶液（ ｍＬ）
有重要意义 。
后 ，移人 １０ Ｌ ０ ｍ 容量瓶中 ，用蒸馏水定容至 １０ ，充 ０ ｍＬ
分混匀。４ ℃冰箱 中保存 （ 可用 １ ～１ｄ）。 ２ ５
（ ） ，一 ２ ３５ 二硝基水杨酸 （ Ｎ 溶液 Ｄ Ｓ） 准确 称取 Ｄ Ｓ ．ｇ ０ ｍ 大烧杯 中 ，用少量 蒸 Ｎ ６３ 于５ ０ Ｌ 馏水 溶解 后 ，加入 ２ ｌ Ｎ Ｏ ｍｏ／ ａ Ｈ溶 液２ ２ Ｌ ６ ｍＬ，再加 到
Ｃ ｈｉ Ｔ ｒ ｎａ ｏｐｉ ａ Ａ ｇｒ ｃ ｔ ｅ ｃｌ ｉ ｕｌ ｕｒ
纤 维 素 分 解 菌 的筛选
许 昕珑
（ 川大学 四 四 川 成都 ６０ ６ ） １０ ５ ｉ ｌ １ 摘 要 ： 目前 ，全球 能 源 和 环 境 向人 类 提 出挑 战 之 时 ，开 发 利 用 可再 生 性 资 源 已成
（ ３）固 体 发 酵 培 养 基 （ ／ ｇ Ｌ） ： 麦 秸 粉 １ ｇ ， ０
（ Ｈ ）２Ｏ０２ ｇ Ｎ Ｓ ４． ，加水２ ｍ ，装．２ ０ ￣角瓶中 ， ５ ５Ｌ ＆ ５ ｍＬ
用 无 菌 棉 塞封 口。
１１４ 主 要 试 剂 ．．
① 目前用于生产纤维素酶的菌株多为木霉 、青霉和 曲霉
Ｍ Ｓ ． ｇ ｇ Ｏ０ ５ ，琼 脂 １． ，明胶 ２ ｇ ２ ４ｇ Ｏ ． ，纤 维 素 粉 １ ８ ，刚 ０ ．ｇ ８
果 红 ０２ ｇ ．０ ，调整 ｐ Ｈ至 ７０ ．。
导致产酶能力降低 。 纤维素分解菌分为降解纤维素细菌 、降解纤维素放 线菌 、降解纤维素真菌 。 生物 降解纤维素研 究进程 中有 待解决 的问题 【， １】 ．：
（ ） １ 浓度为 ｌ ｇ Ｌ ｍ ／ 的葡萄糖标准液 ｍ 将 葡萄糖 在恒 温 干燥箱 中１ ５Ｃ下干燥 至恒 重 ， ０ ｏ
５ ，Ｎ Ｃ １ ｇ ｇ ａ １０ ，加蒸 馏水 定容 至 １ ０ ｍＬ ０ ０ ，调 整ｐ 值 Ｈ
至 ７０。 ．
１１ ．３真 菌培养基 ． （ ） 面种子培养基 （ ／ １ 斜 ｇ Ｌ）：马铃薯２ ０ ，蔗糖 ０ｇ
２ｇ ０ ，琼 脂 粉 ２ ｇ ０ ，加 蒸 馏水 定 容 至 １０ ｍ ，无 需 调 整 ０ Ｌ ０
５ ０ 含 有 １ ５酒 石 酸钾 钠 （ ４ ０Ｋ ０ ｍＬ ｇ ８ Ｃ Ｈ４ ６ Ｎａ。 Ｈ２ ４ ０， ＭＷ ＝２ ２ ２． ８ ２） 的 热 水 溶 液 中 ， 再 加 ５ 结 晶 酚 ｇ
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２ １ ．４ 总 第４ 期 审豳稿带农业 ０２ ７
本实验通过对土样 中菌株 的筛选 ，分离 出具有一定 纤维素酶活力的微生物 。在此过程中对纤维素分解菌进
１． ． ２细菌培养基 １
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然 这 是 生 态 系 统 中碳 循 环 的一个 重 要 环 节 ，但从 人 类 利
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用 自然资源的角度看 ，无疑是巨大的浪费。在我 国，大 部分 秸秆 和树林 副产品被 用作燃料 或在 田间被直 接烧
ｐ Ｈ值 。
中 ，细菌 、真菌 、动物体 内等都能产 生纤维素酶。一般 用 于生产 的纤 维素酶来 自于真 菌 ，比较 典型 的有木酶
属 、曲霉 属 和 青霉 属 。产 生 纤 维 素酶 的菌 种 容 易退 化 ，
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关 键 词 ：纤 维 素 酶 ；真 菌
天然纤 维素 原料是 地球上最 丰 富的可再生 有机物
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准 确 称 取 １０ 于 ｌＯ ｄ 烧 杯 中 ，用 少 量 蒸 馏 水 溶 解 ０ ｍｇ Ｏ ｍＬ ￣
法降低纤维素酶的成本 ，如筛选新菌株 ，改善生产工艺 等。③酶产量及酶的 比活力低一直是影 响纤维素酶实际
应用 的重要原 因。 目前 ，纤维素酶形成 的机制和原理还 未完全搞清楚 。因此通过实验研究确定最适产酶条件具
１ 材 料 与 方 法
１ １材 料 ．
质。全世界通过光合作用产生的植物物质每年高达２０ ００
亿 ｔ 目前有 ８ ％未被人类 利用 ，只有 １ ％用作饲草 、 ， ９ １
造 纸 和 建 筑 原 料 。 绝 大部 分 的天 然纤 维 素 原 料 在 自然 环
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境 中被各种微 生物分解转化 Biblioteka Baidu最终形成Ｃ ． Ｏ 和Ｈ ０。虽
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（ ） ，一 ２ ３５ 二硝基水杨酸 （ Ｎ 溶液 Ｄ Ｓ） 准确 称取 Ｄ Ｓ ．ｇ ０ ｍ 大烧杯 中 ，用少量 蒸 Ｎ ６３ 于５ ０ Ｌ 馏水 溶解 后 ，加入 ２ ｌ Ｎ Ｏ ｍｏ／ ａ Ｈ溶 液２ ２ Ｌ ６ ｍＬ，再加 到
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① 目前用于生产纤维素酶的菌株多为木霉 、青霉和 曲霉
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导致产酶能力降低 。 纤维素分解菌分为降解纤维素细菌 、降解纤维素放 线菌 、降解纤维素真菌 。 生物 降解纤维素研 究进程 中有 待解决 的问题 【， １】 ．：