网织红细胞及相关参数

平均网织红细胞体积和平均球形细胞体积
新亚甲蓝染色的红细胞经一种酸性、低渗的脱蛋白溶液处理后形成脱蛋白的球 形红细胞。VCS 技术将球形红细胞分成成熟红细胞和网织红细胞。所有被分类成网 织红细胞的平均体积为平均网织红细胞体积（MRV）。所有红细胞（包括成熟红细 胞和网织红细胞）的平均体积为平均球形细胞体积（MSCV）。
提高贫血的分类、诊断和治疗 大卫等人的研究表明将 IRF 与网织红细胞计数结合进行成熟度分析可提高贫 血的分类。下表总结了不同临床疾病中 IRF 与网织红细胞计数的相互关系。
临床疾病 骨髓移植 溶血性贫血 缺铁性贫血 B12 或叶酸缺乏 近期出血 地中海贫血 髓障综合征 增生低下性贫血 再障危象 髓样-淋巴瘤 再生障碍性贫血
0.09-1.81
参考范围 Fourcade
0.5-2.0
106 个 细 胞 / 0.00-0.08 μL
比值
0.155-0.338
0.02-0.10 0.20-0.40
FL
97.4-119.3
100-125
所有红细胞的均值
FL
84-104
@ HLR%
网织红细胞（3-10） % 所有红细胞
0.07-0.71
监测慢性肾衰竭病人的 EPO 治疗情况 并非所有慢性肾衰竭的病人都能做肾移植，已经获得输血的替代法---人类重组 促红细胞生成素（R-HuEPO）,减少了持续输血带来的危险。 R-HuEPO 能够补偿肾脏促红细胞生成素的缺乏和维持血红蛋白水平，因此能够有 效地治疗慢性肾衰竭病人出现的贫血。已经证明 R-HuEPO 能够有效地治疗 EPO 反应不足引起的贫血。EPO 反应不足可能与获得性免疫缺陷综合征、癌症、早产 或拒绝输血的病人有关。 随着慢性肾衰竭病人治疗费用的不断上升，监测 R-HuEPO 的作用花费有望降低。 IRF 可能是评价病人对 EPO 治疗反应的一个重要的敏感参数。
MRV @ MSCV
计算方法
所有网织红细胞 -----------------------
所有红细胞 RET% × CBC 红细胞数 -----------------------
100 网织红细胞（3-10） ---------------------所有网织红细胞
所有网织红细胞的均值
单位 %
参考范围 贝克曼-库尔特
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利用复杂的默认值，位置参数与其他细胞群的统计学结合起来保证结果的完整 性并引发网织红细胞报警。某些临床疾病会导致数据图与已知的成熟红细胞和网 织红细胞群不符。这些不典型的细胞群引发出确认网织红细胞或异常网织红细胞 群信号来提示实验室需要进一步查看。文后列出了所有网织红细胞的报警、代码 和信号。
异常网织红细胞群信号 在以柔变轮廓分析红细胞的过程中，可观察到一个有强光散射的细胞亚群的体 积均值比网织红细胞更接近于成熟红细胞。这群细胞与地中海贫血中常见的未完 全溶血（淡影）的红细胞的强光散射特性一致。因疾病的异源性和病人的状况不 同这个细胞群可能不明显或非常显著。 红细胞形状和大小多变的镰状细胞标本中的网织红细胞和成熟红细胞的体积 均值和标准差均升高。因疾病的异源性和病人的状况不同这个细胞群可能不明显 或非常显著。 在数据图的绘制过程中，可观察到一个大体积的细胞亚群之光散射均值比网织 红细胞更接近白细胞。已经发现这群细胞是小体积白细胞群的延续，可能是碎片 或破碎的白细胞。
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源自文库
下表列出了库尔特 GEN• S 血液分析系统可给出的网织红细胞参数。值得注 意的是采用不同的技术进行网织红细胞分析时其参考范围会差别很大。尽管所有 制造商的目标都是确定网织红细胞和未成熟网织红细胞亚群，但是方法学和默认 值有很大差异。建议每个实验室建立自己的参考范围。
参数 RET% RET# IRF
库尔特 GEN• STM 网织红细胞及相关参数
自动化计数网织红细胞
网织红细胞计数是用作红细胞产生或红细胞生成的指标，是诊断或监测贫血治 疗最常用的临床指标。流式细胞术测量网织红细胞不但大大提高了网织红细胞计 数的准确性和精确性，还能提供一些反映网织红细胞成熟度和大小的非传统参数。 临床研究已经开始将这些非传统参数应用于许多贫血性疾病的诊断和治疗。
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细胞生成应激作用，使促红细胞生成素水平升高，红细胞生成增加，网织红细胞 从骨髓释放到循环中。由于肾脏是 EPO 的主要来源，肾衰竭会导致因促红细胞生 成素产生和释放缺乏而引起的贫血。尽管传统的治疗方法通过输血可维持血红蛋 白水平，但是肾移植治疗慢性肾衰竭引起的贫血最有效。
莫里等人对 74 例肾移植病人的如下参数进行了测量：血清促红细胞生成素、 血细胞压积、网织红细胞和血肌酐。肾移植后 IRF 比移植前高 25%，平均比网织 红细胞绝对计数早 7 天。莫里的结论是肾移植后 IRF 是一个比网织红细胞绝对计 数更敏感的早期指标。
文献表明，IRF 结合网织红细胞计数可提高贫血分类，监测骨髓恢复及贫血 治疗情况。
IRF 在其他方面的临床应用包括： 监测骨髓移植后干细胞再生情况 监测强度化疗后骨髓再生情况 监测铁、维生素 B12 和叶酸治疗 监测毒性药物对骨髓的影响 通过促红细胞生成监测肾脏移植 对贫血进行分类和评价 监测新生儿输血 检测再障危象
MSCV 的临床应用
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作为仪器评价的一部分，Chiron 等人评价了 286 份标本 CBC 中的平均红细胞 体积（MCV）和 MSCV 的相关性。由于红细胞的双凹圆饼结构，总的相关性显示出 一个 MSCV 的正向偏差。然而 48 例 MSCV 小于 MCV 的标本有一群不明的细胞亚群。 这一亚群包括来自遗传性球形红细胞增多（HS）的 31 份病人标本。
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有两个：红细胞内的血红蛋白漏出和红细胞肿胀成球形但不胀破。 不规则形的成熟红细胞和网织红细胞受到 0 度到 90 度角的激光照射时会产生
无法预料的光散射。球形红细胞能够产生可重复的光散射，这是确定标本中网织 红细胞的基础。因此，脱蛋白溶液还具有固定特性使得红细胞肿胀后保持球形。 必需清除球形红细胞内的血红蛋白，因为血红蛋白减少后可提高网织素的确定， 进而提高网织红细胞的确定。
VCS 技术 细胞经染色和脱蛋白后，VCS 技术采用一种独特的流式细胞术计数细胞并将网 织红细胞分类，即同时采用体积、传导性和光散射三维分析来确定细胞并将其分 类。 直流电测量的体积确定细胞的大小。网织红细胞分析高度依赖细胞的大小信 息，根据定义，未成熟的红细胞大于成熟的红细胞。数据图的 y 轴为体积。 传导性或射频测量提供细胞的内部特性信息。数据图的 z 轴为传导性，它只能 在旋转的三维图中才可看到。 细胞通过氦-氖激光束测得的光散射提供细胞表面特性和细胞颗粒特性的信 息。网织红细胞分析高度依赖光散射信息因为含有残余 RNA 的红细胞的光散射强 于成熟红细胞的光散射。数据图的 x 轴为光散射。 数据图和柔变轮廓分析 从体积、传导性和光散射收集的原始资料绘在三维数据图上。 用曲线分离细胞群后，血小板和白细胞被分离出去，只留下成熟红细胞和网织 红细胞作进一步分析。柔变轮廓分析以一种非线性的方式将网织红细胞从成熟红 细胞中分离开来，这种非线性方式是沿着细胞群的曲线而不是直线。 网织红细胞报警
@ HLR#
HLR% ×CBC 红细胞数 100
106 个 细 胞 / μL
0.003-0.050
未成熟网织红细胞指数 未成熟网织红细胞指数（IRF）定义为幼稚的或未成熟的网织红细胞与总的网 织红细胞的比值。未成熟的网织红细胞较大，按照光散射分类就是那些有最强光 散射特性，即最多 RNA 的网织红细胞。
贝克曼-库尔特网织红细胞检测技术
试剂 贝克曼-库尔特网织红细胞分析采用一种非荧光染料---新亚甲蓝来沉淀网织 红细胞内的 RNA。网织红细胞染色是为了把网织红细胞与成熟红细胞区分开来。 血液与新亚甲蓝混匀孵育一段时间后，加入一种酸性、低渗的脱蛋白溶液，这 种溶液能将网织红细胞内的血红蛋白除去，而保留着色的 RNA。脱蛋白溶液的作用
IRF 升高 升高 升高 升高 升高 正常到升高 正常到升高 正常到升高 正常到降低 降低 降低
网织红细胞计数 降低 升高
正常到降低 正常到降低 正常到升高
升高 正常到降低
降低 降低 正常 降低
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监测骨髓移植后骨髓恢复情况 骨髓移植常用来治疗某些血液病和实体肿瘤。骨髓移植前病人接受大剂量的化 疗和放疗来刺激骨髓。这一过程导致病人不产生或只产生少量的红细胞、白细胞 和血小板，因此需要进行广泛的监测来确定使用预防性抗生素和血产品的量和时 间。 骨髓移植后，CBC，分类和网织红细胞计数是监测病人骨髓恢复情况的早期指标。 现已将中性粒细胞绝对计数作为骨髓髓细胞生成和骨髓移植成功的主要指标。骨 髓移植后中性粒细胞或未成熟髓细胞达到或高于 0.5×109/L，表明髓系移植成功。 尽管血小板计数是巨核细胞生成的有用指标，却很少监测血小板。因为病人需要 频繁地输血小板，血小板增加可能是因输血引起，不能反映真正的移植情况。 网织红细胞的百分比上升大于 1%或网织红细胞的绝对值大于或等于 50×109/L 时 是红系移植成功的指标。尽管网织红细胞计数增加代表骨髓再生情况，但它不敏 感且迟于中性粒细胞出现。大卫对 12 例骨髓移植病人进行研究表明，同中性粒细 胞绝对计数值的反应相比网织红细胞的反应要落后一到七周。 大卫等人还评价了 IRF 在骨髓移植病人中的作用。他们发现同网织红细胞计 数相比，IRF 通常先于中性粒细胞计数对骨髓活性情况出现反应。IRF 的优点在于 它不象中性粒细胞绝对计数那样受临床或亚临床感染影响。骨髓移植后 IRF 升高 到 20%以上时表示红系移植成功。 大卫等人研究表明 IRF 比网织红细胞计数早一半的时间提示移植成功。大卫 得出的结论是 IRF 是骨髓移植成功最敏感的指标，因为 IRF 升高是当前实验室方 法可测得的最早的反应指标。 监测肾移植后红细胞生成情况 促红细胞生成素（EPO）是一种调节骨髓产生红细胞的激素。贫血会产生促红
传统的手工计数网织红细胞的方法因其固有的不精确性，当用做监测实验时有 一定的局限性，尤其是用在计数范围的低限或高限时。涂片厚薄，染色深浅，有 限的细胞计数以及技师间的差异均会导致结果的变异系数为 25%到 50%。
近年来，许多中、高档常规血液分析仪都配有自动的网织红细胞分析功能。网 织红细胞测定已经从上机前需要预处理的方法发展到第二代血液分析仪，即自动 吸样、处理和分析网织红细胞。网织红细胞分析过程的全自动化消除了手工涂片、 染色和不同技师引起的偏差，可使实验更标准化。此外，同手工方法计数 1000 个 细胞比，自动的网织红细胞分析法分析 30000 个细胞，大大提高了精确性和重复 性。
IRF 的临床应用 未成熟网织红细胞，也称移动或张力细胞，正常情况下不足网织红细胞总数的 5%。未成熟网织红细胞在大量的促红细胞生成的刺激下会释放到外周血中，如出 血，某些贫血或对刺激骨髓造血治疗的反映。IRF 类似于中性粒细胞的核左移，
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能够提供额外的红细胞信息，这些信息可以缩短疾病从诊断到治疗或单纯的治疗 时间。
HS 是一种常见的红细胞蛋白结构缺陷的疾病。HS 的红细胞因缺乏双凹圆饼结 构，表面积与体积比下降，导致渗透脆性增加。根据测试，Chiron 计论了 HS 红细 胞达到渗透体积膨胀然后破碎的关键值，它低于预想的 MSCV。当只用 MSCV<MCV 这个临界值时，Chiron 得出的 HS 的敏感性为 100%，特异性为 93.3%。评价的结论 是网织红细胞 MSCV 与 CBC-MCV 的关系是遗传性球形红细胞增多症的一个高度有效 的指标。
网织红细胞的相关参数
贝克曼-库尔特通过自动的网织红细胞分析和流式细胞术测量光散射为网织红 细胞群提供了更多的细节。网织红细胞群可进一步被分成 10 个成熟度。含有最多 RNA 的网织红细胞位于最强光散射区，三到十区。
此外，VCS 技术测量网织红细胞还可得出以下参数：网织红细胞百分比（RET%） 和网织红细胞绝对值（RET#），未成熟网织红细胞指数（IRF），平均网织红细胞体 积（ MRV），平均球形细胞体积（ MSCV），和强光散射网织红细胞参数（ HLR%和#）。