血清白蛋白测定
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【计算】
1、检验20次测定数据的离群值;如存在异常值时 应剔除。对小样标本来讲,Grubbs检验方法概率意 义明确,能给出严格的结果,是最合理的检验方法。
用Grubbs检验准则,检验离群值的统计学工式是:
Xd X G
S
式中Xd为离群值;X 为包括离群值在内的测定值 的均数;S为包括离群值在内的测定值的标准差。
2. 重复性试验的原理
在相同条件下(同方法、同试剂、同标准品、 同仪器、同实验室、同操作者),对同一 标本在一定时间内,进行m轮,每轮n次重 复测定,从而获得试验方法的批内精密度 数据
重复性试验根据一定时间间隔可分为:批内、 天内、天间三种重复性试验
2. 重复性试验的原理
批内:根据临床标本特点(正常、异常), 分别对低、中和高浓度在短时间内进行m轮, 每轮n次重复测定,分别求取三种浓度的精 密度数据
循环次数 显著性水平
0.05
0.01
18
2.504 2.821
19
2.531 2.853
20
2.557 2.884
6. 结果处理、分析(讨论)
采用EXCEL软件计算X、S和CV% 或且 采用SPSS13.0统计学软件计算X、S和CV%
分别计算低、中、高三种浓度的精密度,讨论 BCG法在这三种浓度间有何差别
【临床意义】
3、血清白蛋白浓度增高:常见于严重脱水所 致的血浆浓缩;
4、A/G 某些病人可同时出现白蛋白减少和 球蛋白升高的现象,严重者比值可<1。这种 情况称为A/G比值倒置。
5、文献报道还有极少见的因白蛋白合成障碍, 血清中几乎没有白蛋白的先天性白蛋白缺乏 症。
二、商品BCG试剂重复性能评价试验
天内:对低、中和高浓度,分别在上午、中 午、下午、晚上,进行m轮,每轮n次重复 测定,分别求取三种浓度的精密度数据
天间:对低、中和高浓度,每天测定1次,连 续监测20天以上,分别求取三种浓度的精 密度数据
3.实验材料
试剂:商品试剂盒 器材:试管、加样枪、722分光光度计
4.实验方法
5.实验结果
【思考题】
何为重复性试验以及其在方法学评 价中有何意义?
血清白蛋白在pH4.2的缓冲液中带正电荷, 在有非离子型表面活性剂Brij-35存在时,可 与带负电荷的染料溴甲酚绿(BCG)结合形成 蓝绿色复合物,在波长630nm处有强的吸收峰, 其颜色的深浅与待测白蛋白浓度成正比,与 同样处理的白蛋白标准比较,可求得血清白 蛋白含量。
【注意事项】
1、实验证明:BCG不但与白蛋白呈色,而且与血清 中多种蛋白结合呈色,其中以α球蛋白、转铁蛋白、 触球蛋白更为显著,其反应速度较白蛋白稍慢,但 实际上,血清与BCG混合即时“慢反应”已经发生, 同时也有实验证明“慢反应”持续1小时才完成。 故有人主张用定值参考血清作标准比较理想,并主 张读取一分钟吸光度计算结果。
2、当60g/L白蛋白标准与BCG结合后,溶液光径为 1cm,在630nm测定的吸光度应为0.811±0.035,如 达不到此值,表示灵敏度较差。
【临床意义】
1、血清白蛋白参考值:35-55g/L;
2、血清白蛋白浓度降低:在临床上比较重要 和常见,通常与总蛋白降低的原因(疾病) 大致相同。急性降低主要见于大出血和严重 的烧伤;慢性降低见于主要由于肝脏合成白 蛋白功能障碍、腹水形成时白蛋白的丢失和 肾病时尿液中的丢失等,严重时白蛋浓度可 低于10g/L;白蛋白浓度低于20g/L时,由于 胶性渗透压的下降,常见到水肿等现象。
计算时将20个测定值进行按小到大排列,离群值Xd 先取最小和最大值进行检验;如果离群继续往里取。
【计算】
如果计算的G值大于系数表5-5中相应显著水平的a和测定次 数n时的临界值Ga.n,则将Xd作为异常值弃舍,可按下述三 种情况来处理:
(1) 只有一个离群值的情况:设有n个测定数 (X1<X2<X3<X4……<Xn),其中X1为离群值,即可利用上述公 式,直接对X1进行检验。
血液清蛋白测定
与 重复性实验
血液清蛋白测定与重复性实验
一、BCG法测定血液清蛋白试验 二、商品BCG试剂重复性能评价试验
一、BCG法测定血液清蛋白试验
1.血液清蛋白测定的临床意义 2.BCG法测定血液Alb的实验原理 3.实验材料 4.实验方法 5.实验结果 6.结果处理、分析(讨论)
1.血液清蛋白测定的临床意义
(2) 如果离群值是两个或两个以上都分布在同一侧,X1、 X2都是离群值,则首先检验最内侧的一个数据(X2),即 通过检验G2来决定X2是否应该舍弃。如果X2应该舍弃,X1 自然应该舍弃。如果X2不应舍弃,则再检验X1,但在检验 X1时,测定次数不应该做为少了一次。
(3) 如果离群值有两个或两个以上,而且又分布于均数两 侧,例如X1和Xn都同属于离群值,则分别检验X1和Xn,是 否应该舍弃。如果有一个数据决定舍去,那么在检验另一 个数据时,测定次数应该作为减少一次来处理,而且此时 应该选择的99%置信水平。
2.BCG法测定Alb实验原理
3.实验材料
试剂:商品试剂盒 器材:试管、加样枪、72ห้องสมุดไป่ตู้分光光度计
4.实验方法
5.实验结果
5.1 自配BCG组检测结果
5.2 商品BCG组检测结果
6.结果处理、分析与讨论
6.1 以X±S表示所测得实验结果 6.2计算样本清蛋白含量。
【溴甲酚绿法测定原理】
1.重复性能评价试验的意义 2. 重复性试验的原理 3.实验材料 4.实验方法 5.实验结果 6. 结果处理、分析(讨论)
1.重复性能评价试验的意义
重复性试验的目的是评估实验方法出现偶然误差的 概率
由于导致偶然误差的因素非常多,包括仪器稳定性、 分析环境温度、试剂质量、标准品的稳定性、吸 量准确性、混匀的充分性以及反应时间的把握度 等,因此,做好重复性试验的前提是:排除上述 干扰因素!