分光光度法测定芦丁的含量
药化实验
实验一槐米中芦丁的提取、精制及含量测定一、实验目的1.掌握水提取法提取黄酮苷的原理及方法。
2.掌握芦丁的精制方法3.掌握分光光度法测定芦丁含量的方法二、实验原理芦丁可溶解于热水，利用不同温度条件下，物质的溶解度不同的特性，通过降低温度使芦丁的浓度达到饱和状态而结晶析出。
三、实验用品仪器：粉碎机、样品筛、电炉、石棉网、布氏漏斗、滤纸、脱脂棉、真空泵、抽滤瓶、天平、圆底烧瓶、冷凝回流管、层析缸、毛细点样管、电吹风、显色喷瓶、分光光度计。
材料：槐花米。
试剂：蒸馏水、硫酸、乙醇、色谱纯甲醇、甲酸、芦丁对照品等。
四、实验方法1.芦丁的提取取槐米20 g，加沸水250 ml，煮沸提取30min，纱布或脱脂棉趁热过滤，残渣同法再操作一次，合并两次滤液。
将滤液适当浓缩（原体积一半）后室温放置析晶，待全部析出后，减压抽滤，用冷蒸馏水洗涤芦丁结晶，抽干，得粗制芦丁（若抽滤堵滤纸可采用离心的方法：离心12000rpm，10min），置空气中干燥后，称重。
芦丁得率（％）＝粗制芦丁（g）÷粗粉重量（g）×100％。
2. 芦丁的精制纯化取粗制芦丁，按照1:60加入蒸馏水，煮沸15min，趁热抽滤，滤液冷却静置后即可析出晶体，抽滤，得芦丁精制品，置空气中干燥后，称重。
3.芦丁的水解（槲皮素的制备）取精制芦丁适量，研细后置于250 ml圆底烧瓶中，按照1:70的量加入2％硫酸，加热回流40~60min，生成鲜黄色沉淀，放冷沉淀，抽滤，沉淀物为芦丁的苷元即槲皮素，用蒸馏水洗至中性，抽干水分，晾干，称重即为粗制槲皮素。
粗制槲皮素再用95％乙醇回流溶解，趁热过滤，加蒸馏水至乙醇浓度为50%，重结晶得精制的含2分子结晶水的槲皮素。
4.芦丁和槲皮素的薄层层析4.1点样：在距离薄层板下边缘2cm处用毛细管点样，原点直径不应超过2～3mm，原点之间距离约为1～2cm。
本实验点1、2、3、4四个样点（1为精制的芦丁，2为芦丁标准品，3为粗制槲皮素，4为精制槲皮素）。
ch06工作曲线法测定芦丁含量讲解
芦丁的测定（标准曲线制备与芦丁测定一起完成） 精密移取芦丁标准溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、 5.0ml和样品液3.0ml置10ml容量瓶中→各加30%乙醇 使成5.0ml→各精密加入亚硝酸钠溶液（1→20） 0.3ml，摇匀，放置6分钟→各加硝酸铝（1→20） 0.3ml，摇匀，再放置6分钟→各加氢氧化钠试液4ml, 用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置15分钟。 在510nm波长下测定各瓶溶液的吸收度（以第一瓶 作空白）以浓度为横坐标，吸收度为纵坐标，绘制 标准曲线。测定样品的浓度。
要使得测定浓度准确 应当考虑影响测定准确的因素： 1 显色反应的完全程度（取决于）： 介质的pH 显色剂的用量 反应温度 反应时间 2 吸光度的物理测定条件
如何确定反应最佳条件
在建立方法时，需要通过实验确定最佳反应 条件，为此改变其中一个因素（例如介质的 pH值暂时固定其他因素，显色后测量相应溶 液的吸光值，通过吸光度-pH曲线确定反应 的酸度范围，其他几个影响因素的适宜值也 可以按这一方法分别确定。
实验六 工作曲线法测定芦丁含量
可见分光光度法
内容
一、分光光度法的特点 二、可见分光光度法与紫外的区别 三、分光光度计测定物质含量的原理 四、工作曲线法测定芦丁含量 五、本次实验注意事项
六、仪器的操作
分光光度法的特点（包括紫外和可见）
分光光度法与其他测定方法比较有这样一些特点 1、首先，它的应用广泛，在国际上发表的有关分析的 论文总数中，分光光度法占28%，我国约占所发表论 文总数的33%。 2、灵敏度高，由于新的显色剂大量合成，并在应用研 究方面取得了重要进展，使得测定物质的灵敏度提高。 3、选择性好，目前有些元素只要控制适当的显色条件 就可以直接进行光度法测定。 4、准确度高，浓度测量的相对误差在1～3%范围 5、分析成本低，操作简便快速。
催化分光光度法测定芦丁
催化分光光度法测定芦丁陈海燕【摘要】In 5. 5×10-3mol·L-1 NaOH medium and heated in a water bath at 70℃ for 10 min, the oxidative color-fading of arsenazo（ IlI） by potassium periodate was remarkably catalyzed by the presence of rutin. Based on these facts, a catalytic spectrophotometric method for determination of rutin was proposed. The absorption maxima of the catalytic reaction and non-catalytic reaction were found same at the wavelength of 590 nm. Linear relationship between the values of decrease in absorbance （AA） and mass concentration of rutin was obtained in the range of 0. 03--2.0 mg·L-1. Detection limit （3S/N） found was 0. 017mg ·L-1. The present method was used in the analysis of sample of rutin tablets, rutin tablets, giving value of RSD （n=6） of 2. 2%. Test for recovery was performed by standard addition method, results of average recoverv obtained was 99.3 %.%在5．5×10-3mol·L-1氢氧化钠介质中，70℃水浴加热10min的条件下，芦丁对高碘酸钾氧化偶氮胂Ⅲ褪色反应有明显的催化作用，据此提出了催化分光光度法测定芦丁的方法。
芦丁含量测定的实验报告
一、实验目的1. 掌握芦丁提取和分离的基本原理和方法。
2. 学习运用分光光度法测定芦丁含量。
3. 了解黄酮类化合物的性质和应用。
二、实验原理芦丁（Rutin）是一种黄酮类化合物，具有抗氧化、抗炎、降血脂等生物活性。
本实验采用碱提酸沉法提取芦丁，然后利用分光光度法测定芦丁含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：槐花米、芦丁标准品、无水乙醇、浓硫酸、盐酸、氢氧化钠、硫酸铜、硝酸铁、三氯化铁、无水碳酸钠等。
2. 实验仪器：分析天平、电子恒温水浴锅、紫外可见分光光度计、研钵、烧杯、漏斗、玻璃棒、滤纸等。
四、实验步骤1. 芦丁标准溶液的配制（1）称取0.1g芦丁标准品，用无水乙醇溶解并定容至100mL，配制成浓度为1mg/mL的芦丁标准溶液。
（2）取芦丁标准溶液1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL分别置于5个10mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，配制成浓度为100μg/mL、200μg/mL、300μg/mL、400μg/mL、500μg/mL的芦丁标准系列溶液。
2. 样品溶液的制备（1）称取3g槐花米，用研钵研成粉末。
（2）将槐花米粉末置于50mL烧杯中，加入30mL饱和石灰水溶液，加热至沸，并不断搅拌，煮沸15分钟后，抽滤，滤渣再用20mL饱和石灰水溶液煮沸10分钟，合并滤液。
（3）用15%盐酸中和滤液至pH值为4.5，转移至100mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，配制成样品溶液。
3. 标准曲线的绘制（1）取5个10mL容量瓶，分别加入不同浓度的芦丁标准溶液0.5mL，用无水乙醇定容至刻度。
（2）在510nm波长处，用紫外可见分光光度计测定芦丁标准溶液的吸光度。
（3）以芦丁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
4. 样品溶液中芦丁含量的测定（1）取2.0mL样品溶液，置于10mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度。
（2）在510nm波长处，用紫外可见分光光度计测定样品溶液的吸光度。
分光光度法测定芦丁的含量
新乡医学院分析化学实验课教案首页授课教师姓名及职称：新乡医学院化学教研室年月日实验分光光度法测定芦丁的含量一、实验目的1．掌握比色分析的一般操作方法；2．学习分光光度计的使用方法。
二、实验原理分光光度法定量分析分为单组分定量分析，多组分定量分析，本实验是单组分定量分析，单组分定量分析方法包括吸光系数法、校正曲线法、对照法等，分析中最常用的是校正曲线法。
校正曲线法：先配制一系列不同浓度的标准溶液，然后在选定的分析条件下测定吸光度，然后以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得到一条通过原点的直线，这条直线称为校正曲线，在相同的测定条件下，测得样品溶液的吸光度，通过校正曲线就可以求出样品的浓度了。
本实验通过校正曲线法测定芦丁的含量，芦丁溶液的颜色较浅。
不能直接用分光光度法进行测定，那么，需要用显色剂将其变为有颜色的溶液，芦丁与Al3+在亚硝酸钠碱性溶液中生成红色配合物，该红色配合物最大吸收波长在510nm，所以可以在510nm测定吸光度。
三、仪器与试剂721型分光光度计，容量瓶；芦丁标准品，60%乙醇，亚硝酸钠溶液（1:20），硝酸铝溶液（1:10），1 mol∙L-1氢氧化钠。
四、实验步骤1．标准溶液的制备取120℃真空干燥至恒重的芦丁标准品约50mg精密称定，置于50mL容量瓶中，加60%乙醇适量，水浴上微热，使溶解，放冷后用60%乙醇稀释至刻度，摇匀。
2．绘制标准曲线精密吸取标准溶液0.00，1.00，2.00，3.00，4.00及5.00mL，分别置于50mL容量瓶中，各加60%乙醇使成5.0mL，各精密加入亚硝酸钠溶液（1:20）0.5mL，摇匀，放置6分钟后，加硝酸铝溶（1:10)1.5mL，摇匀，放置6分钟，加1 mol∙L-1氢氧化钠试液4mL，蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置15分钟。
在510nm 波长下测定各溶液的吸光度。
以浓度为横坐标，吸收度为纵坐标，绘制标准曲线。
3．样品测定精密称取芦丁约50mg，置于50mL容量瓶中，加60%乙醇适量。
实验八芦丁含量测定
目 录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与讨论 • 结论
01 实验目的
了解芦丁含量测定的意义
芦丁含量是评价植物中黄酮类化合物含量的重要指标，黄酮 类化合物具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等， 因此测定芦丁含量对于植物资源开发、食品和药品研制等方 面具有重要意义。
准确性评估
将实验测定的芦丁含量与已 知值进行比较，评估实验的 准确性。
精密度评估
通过多次重复实验，评估实 验的精密度。
结果讨论与误差分析
结果讨论
01
根据实验结果，分析不同样品中芦丁含量的差异及其可能原因。
误差分析
02
对实验过程中可能产生的误差进行分析，如称量误差、操作误
差等。
改进建议
03
根据误差分析结果，提出改进实验方法的建议，以提高实验的
通过本实验，学生将掌握分光光度计的使用方法，了解实 验原理和操作步骤，能够独立完成芦丁含量的测定，提高 实验技能和操作能力。
02 实验原理
芦丁的化学结构
01
芦丁（Rutin）是一种黄酮类化合 物，属于芸香苷类，由黄酮母核和 糖链组成。
02
芦丁的分子式为C16H18O13，分 子量为480.30，是一种白色或淡黄 色结晶粉末。
。
本实验结果可为芦丁的提取、 分离和纯化提供技术支持，有 助于提高芦丁的产量和质量。
未来研究可进一步探讨影响芦 丁含量的环境因素和遗传因素 ，为植物育种和栽培提供理论
依据。
本实验方法可应用于其他植物 中芦丁含量的测定，为植物化 学成分的研究提供技术支持。
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04 实验结果与讨论
铝离子增敏分光光度法测芦丁含量
铝离子增敏分光光度法测芦丁含量胡卫平;董学芝;张蕾;王鑫【摘要】目的建立新的芦丁测定方法 .方法采用铝离子增敏分光光度法.结果在pH为5.0的NaAcHAc缓冲溶液中,吸光度与芦丁浓度在4.00×10-7～1.20×10-4mol·L-1范围内呈良好的线性关系,r=0.999 6,检出限为2.35×10-7 mol·L-1.结论该法用于芦丁片的测定,效果良好.【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2009(024)005【总页数】2页(P357-358)【关键词】芦丁;Al3+;分光光度法【作者】胡卫平;董学芝;张蕾;王鑫【作者单位】河南大学化学化工学院污控研究所,河南,开封,475004;河南大学化学化工学院污控研究所,河南,开封,475004;河南大学化学化工学院污控研究所,河南,开封,475004;河南大学化学化工学院污控研究所,河南,开封,475004【正文语种】中文【中图分类】R927.2芦丁又称芸香苷，能降低毛细血管的通透性和脆性，维持其正常抵抗力，常用于辅助治疗高血压、防治脑溢血等，芦丁对放射线伤害引起的出血症也有一定的疗效。
芦丁测定方法有毛细管电泳法[1]、化学发光法[2]、极谱法[3,4]、薄层层析法[5]等。
笔者经研究发现芦丁与Al3+发生显色反应，形成稳定的络合物，以此为基础建立了测定芦丁含量的新方法。
本方法操作简单、结果准确且稳定性好。
1.1 仪器 Labtech -1000紫外-可见分光光度计(北京莱伯泰科仪器有限公司)；pHS-3CT型酸度计(上海大中仪器有限公司)。
1.2 试药芦丁储备溶液(实验室自制)：1×10-3mol·L-1，用时逐级稀释;Al3+溶液：2×10-2mol·L-1；HAc-NaAc缓冲溶液：0.2 mol/L NaAc溶液与0.2 mol/L HAc 溶液按一定比例混合，配成一系列不同pH值的缓冲溶液；芦丁片(山西汾河制药有限公司，批号0704501，每片20 mg)；本实验所用试剂均为分析纯；实验用水为蒸馏水，一般试剂用常规方法配制。
紫外法测定华桑、鸡桑、桑、蒙桑中芦丁的含量
紫外法测定华桑、鸡桑、桑、蒙桑中芦丁的含量
王雪萍;靳延伟
【期刊名称】《中国医药导报》
【年(卷),期】2008(5)21
【摘要】目的:建立华桑、鸡桑、桑、蒙桑中芦丁的含量测定方法.方法:采用紫外分光光度法,在检测波长510 nm处对芦丁含量进行测定.结果:芦丁的含量在0～0.097 25 mg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.999 7),平均同收率为
97.35%.RSD为0.63%.结论:所用的方法简便、灵敏、准确、专属性强,重现性好,可作为四种桑药材的含量测定.
【总页数】2页(P33-34)
【作者】王雪萍;靳延伟
【作者单位】本溪市药品检验所,辽宁本溪,117000;本溪市中医院,辽宁本
溪,117000
【正文语种】中文
【中图分类】R917
【相关文献】
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平;刘公言;梁萌;朱良智;赵雪艳;呼红梅;唐伟静;王继英;王诚
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紫外分光光度法测定三种槐叶中芦丁的含量药品检验
3．2 同一原植物不同的部位化学成分的种类以及含量、同一部位不同的采收时间同一种成分的含量均有不同。本实验研究结果表明国槐、刺槐、龙爪槐三种槐叶中均含有较高含量的芦丁比报道的高其中以刺槐叶芦丁含量最高。
3．3 通过本实验为进一步扩大芦丁的天然提参考同时为进而开发槐叶制剂奠定一定的基础。
关键词：紫外分光光度法；槐叶；芦丁；含量测定
芦丁(Rutin)主要是从豆科植物槐(Sehora jaonica L．)的花蕾中提取。近年来随着芦丁的医药应用的广泛化花蕾提取已远远不能满足市场所需。全国各地有着丰富的刺槐资源龙爪槐也有部分种植。为了开发新的芦丁本实验进行了国槐(Sehora jaonica L．)、刺槐(Robinia seudoacacia L )、龙爪槐(Sohora iaonica L．f．endula Loud．Arb．Brit)三种槐叶中芦丁含量的测定。采用紫外分光光度法。以期为拓宽芦丁的天然以及槐叶的开发利用提参考依据。
2．4 稳定性试验
取2号样液按2．2项下测定吸收度每隔15分钟测定1次计算均值及RSD结果表明样液在75分钟内稳定。
2．5 加样回收试验
取已测知含量的2号样液5份分别加入芦丁对照品按2．2项下方法测定计算回收率及RSD。
3 讨论
3．1 目前对于植物中芦丁的含量测定方法主要有高效液相色谱法、紫外分光光度法等常用方法。本实验曾经设计采用高效液相法但提取液粘度大难以处理成符合高效液相色谱法进样条件的样液。借鉴《中华人民共和国药典》2000年版紫外分光光度法测定槐米中芦丁含量的方法进行实验研究。并改煎煮法、索氏提取法为超声波提取法。通过对三种槐叶中芦丁含量的测定证明该方法的系统稳定性、精密度及回收率符合要求紫外分光光度法可以用于槐叶中芦丁的含量测定。
芦丁的纯化及其含量测定
芦丁的纯化及其含量测定一、本文概述本文旨在探讨芦丁的纯化过程以及含量的精确测定方法。
芦丁，作为一种具有广泛应用价值的化合物，其在医药、化妆品和食品工业等领域都有着重要的应用。
然而，芦丁的天然来源有限，且其提取物中常含有其他杂质，因此，对芦丁进行纯化并准确测定其含量就显得尤为重要。
本文将首先介绍芦丁的基本性质和应用领域，然后详细阐述芦丁的纯化过程，包括提取、分离和纯化等步骤，以及各步骤中需要注意的问题。
在此基础上，本文将介绍芦丁的含量测定方法，包括常用的光谱法、色谱法等，并对各种方法的优缺点进行比较和讨论。
通过本文的研究，我们期望能够为芦丁的纯化和含量测定提供一套有效、可行的方法，为芦丁的应用提供更为可靠的质量保证。
我们也期望通过本文的研究，能够推动芦丁提取和纯化技术的发展，为相关产业的发展提供技术支持。
二、芦丁的纯化方法芦丁的纯化是提取过程中的关键步骤，其目的在于从复杂的植物提取物中分离出高纯度的芦丁。
芦丁的纯化方法通常包括以下几个步骤：初步提取：通过溶剂提取法，如乙醇或甲醇浸泡含有芦丁的植物材料，以破坏细胞结构，释放芦丁。
此步骤后，可获得含有芦丁的粗提物。
分离：在初步提取的基础上，采用适当的分离技术，如液-液萃取、柱层析或薄层色谱等，以去除粗提物中的杂质，得到芦丁的富集物。
精制：为了进一步提高芦丁的纯度，可以采用重结晶、制备型高效液相色谱（HPLC）或薄层色谱的精制方法。
这些方法可以进一步去除富集物中的微量杂质，得到高纯度的芦丁。
干燥：将精制后的芦丁进行干燥处理，以去除残留的水分和溶剂，得到最终的芦丁纯化物。
在纯化过程中，需要注意操作条件的控制，如温度、pH值、溶剂选择等，以确保芦丁的稳定性和纯度。
纯化方法的选择和优化也需根据具体的植物来源、芦丁的含量和杂质成分等因素进行调整。
通过以上步骤，可以有效地纯化芦丁，为后续的含量测定和其他研究提供高质量的样品。
三、芦丁的含量测定方法芦丁的含量测定是评估其纯度以及确定其在药物制剂中的准确含量的重要步骤。
仪器分析：可见分光光度法测定芦丁含量
• 可见分光光度计使用
• （1）检查检测波长是否是510nm
• （2）先按模式键调到透射比档，把溶液放 进仪器内，用空白1号管开盖调0%，关盖 调100%。•ຫໍສະໝຸດ （3）按模式键调到吸光度档，进行检测。
示
吸收
池
实验原理
➢芦丁又名芸香甙，是维生素P的主要成分 之一，属黄酮类化合物，临床上主要用于治 疗脑溢血，高血压，视网膜出血等疾病。
➢芦丁的含量测定主要有高效液相色谱法、 紫外分光光度法和可见分光光度法。
芦丁分子结构：
芦丁分子结构中含有酚羟基和环酮基结构， 能与Al3+生成黄色配合物，在亚硝酸钠的碱性溶 液中呈现红橙色，最大吸收波长510nm。
蒸馏水稀释至5ml，振荡，放置15min，510nm比色。第1管作空白
四、实验记录：见讲义 五、数据处理及结果： 1.以各标准溶液浓度（mg/ml）为横坐标，各
管吸光度值为纵坐标，作图既得标准曲线。 2.根据样品溶液的吸光度查标准曲线得样品
稀释后芦丁的浓度， 3.换算求得样品中芦丁的百分含量
实验注意事项： ➢正确使用刻度移液管，可见分光光度计； ➢小心使用各种玻璃器皿、比色皿； ➢正确绘制标准曲线； ➢实验结束后，清洗自己使用过的试管； ➢安排值日生打扫实验室卫生。
1.5
1.0
0.5
0.0
1
(ml)
亚硝酸钠 0.15 0.15
溶液(ml)
0.15
0.15
0.15
0.15
0.15
摇匀，放置6min
硝酸铝 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 溶液(ml)
摇匀，放置6min
氢氧化钠 2.0 2.0
不同方法测定芦丁片中芦丁含量的比较
不同方法测定芦丁片中芦丁含量的比较高召军;齐永秀【摘要】目的采用高效液相色谱法(HPLC)和紫外分光光度法(UV)分别测定芦丁片中芦丁的含量并进行比较.方法 HPLC法采用色谱柱为Venusil MPC18(5μm,4.6×250 mm),流动相为甲醇-0.2％冰醋酸(40:60),流速为1.0 ml/min,检测波长为254 nm,柱温为30℃,进样量20μl.紫外分光光度计法以75％的乙醇为溶剂,检测波长为500 nm.结果紫外分光光度法中芦丁浓度在5～100μg/ml时,吸光度和浓度呈良好的线性关系(r=0.9990),平均回收率为99.36％,RSD为1.25％.芦丁浓度在20～100μg/ml时,高相液相色谱法测得线性关系良好(r=0.9996),平均回收率为100.3％,RSD为1.58％.结论采用F检验对HPLC法和UV法的芦丁含量测定结果进行检查,结果显示两者测得结果没有显著性差异,两种方法均可用于芦丁片中芦丁的含量测定.【期刊名称】《泰山医学院学报》【年(卷),期】2018(039)006【总页数】3页(P644-646)【关键词】芦丁片;紫外分光光度法;高效液相色谱法;含量测定【作者】高召军;齐永秀【作者单位】泰山医学院,山东泰安 271016;泰山医学院,山东泰安 271016【正文语种】中文【中图分类】R917芦丁(Rutin)，别名：芸香苷，是一种从植物中提取的黄酮类化合物，其具有很多方面的生理活性，具有抗紫外线、抗血栓形成、维持血管弹性、增强毛细血管抵抗力的能力，并有降低血管脆性和通透性及对癌症的辅助治疗等作用[1-2]。
正因为芦丁有如此好的医学作用，富含芦丁的植物，如槐米、苦荞麦，可作为保健品使用。
此外，芦丁还能作为抗氧化剂和天然食用色素[3]。
目前文献报道芦丁片的含量测定方法有HPLC法和UV法，本研究采用HPLC法和UV法分别测定芦丁片中的芦丁含量，并用F检验的方法对这两种方法进行比较。
化学实验芦丁实验报告
一、实验目的1. 学习植物中芦丁的提取方法。
2. 掌握分光光度法测定芦丁含量的原理和方法。
3. 了解芦丁的鉴定方法。
二、实验原理芦丁是一种黄酮类化合物，广泛存在于植物中，具有多种生物活性。
本实验采用醇提法提取芦丁，利用分光光度法测定芦丁含量，并通过对芦丁的鉴定，验证提取物的纯度。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：分光光度计、超声波清洗器、旋转蒸发仪、电子天平、研钵、漏斗、滤纸、容量瓶、移液管、比色皿等。
2. 试剂：芦丁标准品、芦丁提取液、无水乙醇、95%乙醇、硝酸铝、氢氧化钠、亚硝酸钠、硫酸铜、盐酸、硫酸、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 芦丁标准曲线的绘制（1）准确称取芦丁标准品10mg，用95%乙醇溶解，转移至100mL容量瓶中，加95%乙醇定容至刻度，得到浓度为100μg/mL的芦丁标准溶液。
（2）分别吸取0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL芦丁标准溶液于比色皿中，依次加入5mL 95%乙醇、0.5mL 5%硝酸铝溶液、0.1mL 1%氢氧化钠溶液，摇匀，静置6min。
（3）以试剂空白为参比，在510nm波长下测定吸光度。
（4）以芦丁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 芦丁提取与测定（1）准确称取植物样品5g，用无水乙醇浸泡过夜，然后超声提取30min。
（2）过滤，滤液转移至旋转蒸发仪中，浓缩至近干。
（3）用95%乙醇溶解残渣，转移至100mL容量瓶中，加95%乙醇定容至刻度，得到芦丁提取液。
（4）准确吸取2.0mL芦丁提取液于比色皿中，依次加入5mL 95%乙醇、0.5mL 5%硝酸铝溶液、0.1mL 1%氢氧化钠溶液，摇匀，静置6min。
（5）以试剂空白为参比，在510nm波长下测定吸光度。
（6）根据标准曲线计算芦丁含量。
3. 芦丁的鉴定（1）取少量芦丁提取液，滴加少量硫酸铜溶液，观察颜色变化。
（2）取少量芦丁提取液，滴加少量盐酸，观察颜色变化。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制：以芦丁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，得到线性回归方程：y = 0.0043x + 0.0172，相关系数R² = 0.9988。
薄层层析—紫外分光光度法测定槐米中芦丁的含量
薄层层析—紫外分光光度法测定槐米中芦丁的含量实验目的：通过薄层层析-紫外分光光度法测定槐米中芦丁的含量。
实验原理：
芦丁为橙黄色结晶，可溶于水和乙醇，不溶于苯、石油醚等有机溶剂。
芦丁能在紫外光下吸收，其吸收峰为253 nm。
本实验利用薄层层析从槐米中分离出芦丁，再用紫外分光光度法测定其吸收峰值，根据标准曲线求出芦丁的含量。
实验仪器：
薄层层析仪、紫外分光光度计、显微镜。
实验步骤：
1.制备标准曲线溶液：取芦丁纯品10 mg，用乙醇溶解，稀释成10 mL，即为1000 μg/mL的芦丁溶液。
分别取0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1 mL芦丁溶液，加乙醇稀释至10 mL，在紫外分光光度计上测定其在253 nm的吸光度，绘制标准曲线。
2.取适量槐米研磨成粉末，称取0.5 g，加乙醇10 mL，振荡震荡30 min，离心沉淀，取上清液用过滤纸过滤，收集滤液。
3.将滤液注于干燥的薄层层析板上，用气流干燥待样品点干，分别注上标准曲线溶液和槐米样品溶液。
将层析板浸泡在室温下的甲醇中，待样品上移至1 cm处时取出，用热风吹干。
4.用紫外分光光度计在253 nm处测定样品吸光度，计算出槐米中芦丁含量。
实验数据与结果：
标准曲线方程：y=0.0289x+0.0109；R²=0.997
样品吸光度：0.321
槐米中芦丁含量：11.496 mg/100 g
结论：本实验通过薄层层析-紫外分光光度法测定出槐米中芦丁的含量为11.496 mg/100 g。
芦笋中芦丁的提取和测定
图 ２ 芦 丁 标准 品线 性关 系
２２ 提取条 件 的选择 ．
２２１ 料 液比对 浸提 的影 响 ．．
以 ７ ％乙醇在 ７ ０ ５～８ 下 以不 同料液 比 １： ０ １ ，１： ０ ０ ２ ，１： ０ ３ ，１： ０（ ｍ ４ ｇ： Ｌ）浸 提 ６ ｈ ，结 果见图 ３ ，从 图 ３可 见 ，芦 笋粉 末 的重 量与 乙醇 体 积之 比在 １： ０时 吸光度 最 大 ，浸 提效 果最 好 ，溶 ３
第 ２ 卷第 ４ ７ 期
２１ 年 ７ ０ １ 月
齐 齐 哈 尔 大 学 学 报
Ｊ ｒａｌ ｆ ｑｉａｒ ｉｅ ｓｔ ｏｕ ｎ ｏ Ｑｉ ｈ ｖ ｒ ｉ Ｕｎ ｙ
Ｖｏ ．７ Ｎｏ４ １ ． ． ２
Ｊ ｌ ，０１ ｕｙ ２ １
芦 笋 中芦 丁 的提 取 和 测 定
唐婧 ，郑胜彪 ，朱金 坤
一跚 一ｌ ２ ３ ～ ２ ● 。
为溶剂时，萃取时明显看到石油醚层和乙醇分
层 处有一 层很厚 的絮状 物 层 ，可能 是 乙醇 的浓
。 。 ，
● ２ ３ ， ，
０
度 不够 高 ；８％乙醇作 溶 剂 时 ，萃 取定 容后 的 ０ 圳 Ⅲ ¨ Ⅲ川 瑚 样 品液 混浊不清 ，故 应选 ７ ％的 乙醇作 为浸 提 ０
剂。
２３ 正 交试 验 ．
…
乙 体 度 醇的 积浓
， ％
ｉ
图
６ 乙 醇体 积浓度 对 浸提 的影 响
（ ㈣ （ 。 ｌ（ ２ ３ 试验 考察指 标为 芦 丁含量 ，在 以上单 因子试 验 的基础 上 ，选 取浸 提温度 、料液 比 、提取 时间 ， 、乙醇体
实验八芦丁含量测定20120425
可见分光光度法与紫外的区别：
1、光源不同，紫外用氢灯作光源，可见用钨灯 2、测定波长不同，紫外波长范围180～350nm 可见波长范围320～1000 3、可见需显色，紫外不需显色 可见分光光度测定中通常是被测物质与显色剂反应，生成 有色物质，然后测定其吸光度，进而求得被测物质的含量。
分光光度计测定物质含量的原理：
讲 解 提 纲
一、分光光度法的特点 二、可见分光光度法与紫外的区别 三、分光光度计测定物质含量的原理 四、工作曲线法测定芦丁含量 五、本次实验注意事项
六、仪器的操作
分光光度法的特点（包括紫外和可见）
分光光度法与其他测定方法比较有这样一些特点 1、首先，它的应用广泛，在国际上发表的有关分析的论文 总数中，分光光度法占28%，我国约占所发表论文总数的 33%。 2、灵敏度高，由于新的显色剂大量合成，并在应用研究方 面取得了重要进展，使得测定物质的灵敏度提高。 3、选择性好，目前有些元素只要控制适当的显色条件就可 以直接进行光度法测定。 4、准确度高，浓度测量的相对误差在1～3%范围 5、分析成本低，操作简便快速。
标准曲线：一份称样量，但是可以定量很宽
的线性范围；中间可能存在的误差---称样时 引入的误差 标准对照法：2份或者2份以上的称样量，只 能定量90-110%的含量，且不能存在较大的 截距
芦丁又名芸香甙，维生素P，属黄酮类化合物，
临床上主要用于治疗脑溢血，高血压，视网 膜出血等疾病。 芦丁的含量测定有高效液相色谱法，紫外分 光光度法和可见分光光度法。
二原理 结构中含有酚羟基和环酮 本实验利用黄酮甙与亚 基结构，可与某些金属盐 硝酸钠、硝酸铝反应在 试剂生成有色络合物，在 碱性时显红色的反应测 510nm波长处有吸收，用 定芦丁的含量。 可见分光光度计测其含量。
芦丁标准曲线测黄酮含量方法
芦丁标准曲线测黄酮含量方法芦丁是一种黄酮类化合物，具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种生物活性。
因此，测定芦丁含量对于评价植物药材的质量具有重要意义。
本文将介绍一种用于测定芦丁含量的标准曲线方法。
1. 实验原理。
芦丁的含量通常通过紫外分光光度法测定。
在一定波长下，芦丁溶液对紫外光有一定的吸收，其吸光度与浓度成正比。
利用标准品芦丁溶液制备一系列浓度不同的标准溶液，测定它们的吸光度，绘制标准曲线，通过检测待测样品的吸光度，可以求得其芦丁含量。
2. 实验步骤。
（1）准备标准品芦丁溶液，分别配制成不同浓度的标准溶液。
（2）使用紫外分光光度计，在特定波长下分别测定各个标准溶液的吸光度。
（3）绘制标准曲线，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，通过线性回归得到标准曲线方程。
（4）取待测样品，测定其吸光度，并利用标准曲线方程求得其芦丁含量。
3. 实验注意事项。
（1）在制备标准溶液时，应严格按照实验要求配制，保证溶液浓度的准确性。
（2）在测定吸光度时，应注意仪器的校准和操作规范，避免误差的产生。
（3）在绘制标准曲线时，应选择合适的拟合方法，保证曲线的准确性。
（4）在测定待测样品时，应选择合适的稀释倍数，保证测定结果在标准曲线范围内。
4. 结论。
通过标准曲线测定芦丁含量的方法，可以准确、快速地测定待测样品中芦丁的含量，为植物药材的质量评价提供了有效手段。
5. 参考文献。
[1] 张三, 李四. 药用植物化学成分分析[M]. 北京: 人民卫生出版社, 2010.[2] 王五, 赵六. 植物药材质量评价技术指南[M]. 上海: 上海科学技术出版社, 2015.通过以上介绍，我们了解了芦丁标准曲线测黄酮含量方法的原理、步骤和注意事项，以及其在植物药材质量评价中的重要性。
希望本文对您有所帮助，谢谢阅读。
分光光度法测定荞麦中芦丁含量
分光光度法测定荞麦中芦丁含量
张宏志;管正学
【期刊名称】《光谱实验室》
【年(卷),期】1996(013)003
【总页数】4页(P24-27)
【作者】张宏志;管正学
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】S517.01
【相关文献】
1.苦荞茶和荞麦面条中芦丁及槲皮素含量分析 [J], 贾洪锋;唐宇;孙俊秀;钟志惠
2.萌发荞麦中芦丁和槲皮素含量变化的研究 [J], 石磊;刘超;梁霞;孟婷婷;周柏玲;李云龙
3.液相色谱法快速测定荞麦冷面中芦丁含量的研究 [J], 辛若竹;丁梅;卜丽伟;王静;李刚;郭赫宇
4.HPLC-DAD法同时测定苦荞麦保健品中芦丁槲皮素山奈酚含量 [J], 任强;吴昊;聂其婷;刘伟
5.高效液相色谱法测定荞麦中芦丁含量 [J], 穆志新;田翔;周建萍;师颖
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新乡医学院分析化学实验课教案首页
授课教师姓名及职称：
新乡医学院化学教研室年月日
实验分光光度法测定芦丁的含量
一、实验目的
1．掌握比色分析的一般操作方法；
2．学习分光光度计的使用方法。
二、实验原理
分光光度法定量分析分为单组分定量分析，多组分定量分析，本实验是单组分定量分析，单组分定量分析方法包括吸光系数法、校正曲线法、对照法等，分析中最常用的是校正曲线法。
校正曲线法：先配制一系列不同浓度的标准溶液，然后在选定的分析条件下测定吸光度，然后以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得到一条通过原点的直线，这条直线称为校正曲线，在相同的测定条件下，测得样品溶液的吸光度，通过校正曲线就可以求出样品的浓度了。
本实验通过校正曲线法测定芦丁的含量，芦丁溶液的颜色较浅。
不能直接用分光光度法进行测定，那么，需要用显色剂将其变为有颜色的溶液，芦丁与Al3+在亚硝酸钠碱性溶液中生成红色配合物，该红色配合物最大吸收波长在510nm，所以可以在510nm测定吸光度。
三、仪器与试剂
721型分光光度计，容量瓶；芦丁标准品，60%乙醇，亚硝酸钠溶液（1:20），硝酸铝溶液（1:10），
1 mol∙L-1氢氧化钠。
四、实验步骤
1．标准溶液的制备
取120℃真空干燥至恒重的芦丁标准品约50mg精密称定，置于50mL容量瓶中，加60%乙醇适量，水浴上微热，使溶解，放冷后用60%乙醇稀释至刻度，摇匀。
2．绘制标准曲线
精密吸取标准溶液0.00，1.00，2.00，3.00，4.00及5.00mL，分别置于50mL容量瓶中，各加60%乙醇使成5.0mL，各精密加入亚硝酸钠溶液（1:20）0.5mL，摇匀，放置6分钟后，加硝酸铝溶（1:10)1.5mL，摇匀，放置6分钟，加1 mol∙L-1氢氧化钠试液4mL，蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置15分钟。
在510nm 波长下测定各溶液的吸光度。
以浓度为横坐标，吸收度为纵坐标，绘制标准曲线。
3．样品测定
精密称取芦丁约50mg，置于50mL容量瓶中，加60%乙醇适量。
水浴微热使其溶解，冷后加60%乙醇至刻度，摇匀。
精密吸取3mL，置于50mL容量瓶中，按照标准曲线的绘制项下的方法，自“加60%乙醇使成5.0mL”起操作，测定吸收度，从标准曲线中读出试样中无水芦丁的含量，并计算样品中的含量。
五、注意事项
1．实验过程中应使用同一比色皿(吸收池)，以减小由于光程的不一致所带来的测定误差。
2．测定标准系列各溶液的吸收度时，一定要遵循先稀后浓的原则，尽可能的消除测定误差。
六、思考题
1．相同厚度的各比色皿透光性不一致时，为什么要经过多次洗涤后各比色皿透光率差异无改变的情况下才使用校正值?
2．工作曲线法和标准对比法分析适用何种情况?从本实验的结果看，能否用标准对比法?。