案例三阿司匹林原料药及片剂的检验在研究阿司匹林片的检验方法

案例三阿司匹林原料药及片剂的检验

在研究阿司匹林片的检验方法前，首先对其结构及理化性质进行分析，以找到检验方法的依据。

一、阿司匹林结构及理化性质

1．结构

OCOCH3

COOH

2．理化性质

阿司匹林为固体，具有一定的熔点。在水中微溶或几乎不溶，而能溶于乙醇、乙醚、三氯甲烷等有机溶剂中，根据溶解行为的差异可作为供试品溶液

的配制或含量测定时滴定介质选择的依据。

（1）酸性：阿司匹林的结构中具有羧基，pKa=3.49水溶液显酸性，并能

与碱发生中和反应。

（2）具有酚羟基：阿司匹林结构中都具有潜在的酚羟基，可与铁盐试液

作用显色。可用于鉴别试验。

（3）具有酯结构：阿司匹林结构中具有酯结构，在碱性条件下可水解产

生酚羟基和羧酸盐。

二、阿司匹林原料药及片剂的检验方法

（一）鉴别

1．与铁盐的反应

此反应为芳环上酚性羟基的反应。水杨酸及其盐在中性或弱酸性条件下（pH＝4～6），与三氯化铁试液反应，生成紫堇色配位化合物。但在强酸性

溶液中配位化合物分解。

2．水解反应

阿司匹林与碳酸钠试液加热发生水解反应，生成水杨酸钠及醋酸钠，加入

过量的稀硫酸酸化后，析出白色水杨酸沉淀，并发生醋酸的臭气。水杨酸沉

淀物于100～105℃干燥后测定其熔点为156～161℃。

COOH

OCOCH3

+Na2CO3+CH3COONa+CO2

COONa

OH

+H 2SO 4+Na 2SO 4

22CH 3COONa+H 2SO 42CH 3COOH+Na 2SO 4

COOH

OH 6+4FeCl 3 Fe Fe+12HCl --2

3

)本反应极为灵敏，只需取稀溶液进行试验；若样品量大，产生颜色过深时，可加水稀释后观察。阿司匹林可在加热水解后与三氯化铁试液反应，呈紫堇色。

3．红外吸收光谱法

红外吸收光谱是由分子振动、转动能级的跃迁所产生的，它比紫外吸收光谱的专属性强。《中国药典》对有机药物原料多采用红外吸收光谱鉴别。测得供试品的红外光谱应应与标准对照品的红外光谱一致。

（二）特殊杂质检查

1

．阿司匹林的合成工艺：

ONa

COOH OH

COOH

OH COOH OCOCH 3+(CH 3CO)2O +CH 3

COOH + 2．检查

除了“炽灼残渣”和“重金属”的检查外，有以下特殊杂质的检查

项目。①溶液的澄清度检查碳酸钠试液中不溶物。不溶物杂质有未完全反应的酚类，或水杨酸精制时由于温度过高，产生脱羧副反应的苯酚，以及合成工艺过程中由副反应生成的醋酸苯酯、水杨酸苯酯和乙酰水杨酸苯酚等。这些杂质均不溶于碳酸钠试液，而阿司匹林可溶解。利用溶解行为的差异，由一定量阿司匹林在碳酸钠试液中溶解应澄清来加以控制。

②游离水杨酸生产过程中乙酰化不完全或贮藏过程中水解产生的水杨酸对人体有毒性，而且分子中酚羟基在空气中逐渐被氧化成一系列醌型有色

物质，如淡黄、红棕甚至深棕色，使阿司匹林成品变色。检查的原理是利用阿司匹林结构中无酚羟基，不能与高铁盐作用，而水杨酸则可与高铁盐作用呈紫堇色，与一定量水杨酸对照液生成的色泽比较，从而控制游离水杨酸的限量。该方法灵敏，可检出1μg水杨酸。

检查方法取本品0.10g，加乙醇1mL溶解后，加冷水适量使成50mL，立即加新制的稀硫酸铁铵溶液［取盐酸溶液（9→100）1mL，加硫酸铁铵指示液2mL后，再加水适量使成100mL］1mL，摇匀；30s内如显色，与对照液（精密称取水杨酸0.10g，加水溶解后加冰醋酸lmL，摇匀，再加水使成1000mL，摇匀；精密量取lmL，加乙醇1mL，水48mL，与上述新制的稀硫酸铁铵溶液1mL，摇匀）比较，不得更深。其限量为0.1％。

③易炭化物检查被硫酸炭化呈色的低分子有机杂质。炭化后如显色，与对照液（比色用氯化钴试液0.25mL，比色用重铬酸钾试液0.25mL,比色用硫酸铜试液0.40mL加水使成5mL）比较，不得更深。

（三）含量测定

1．直接滴定法阿司匹林中具羧基，在一定条件下与氢氧化钠反应。测定阿司匹林含量的反应式如下：

COOH COONa

OCOCH3+NaOH OCOCH3+H2O 《中国药典》（2005年版）阿司匹林的含量测定方法为：取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20mL溶解后,加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠标准滴定溶液（0.lmol/L）滴定。每1mL的氢氧化钠标准滴定溶液（0.1moL/L）相当于18.02mg的阿司匹林（C9H8O4）。

含量测定结果计算公式为：

式中V—样品消耗的氢氧化钠滴定溶液的体积，mL；

T—滴定度，mg／mL；

F—氢氧化钠滴定溶液的浓度校正因子；

W—待测药物的称样量，g。

2．返滴定法阿司匹林片和阿司匹林肠溶片中除了加入少量酒石酸或枸

橼酸稳定剂外，制剂工艺过程中也可能有水解产物（如水杨酸、醋酸）产生，

因此不能采用直接滴定法，而采用先中和与供试品共存的酸，再将阿司匹林

在碱性条件下水解后测定，由于测定分两步进行，故称为两步滴定法。

取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（含阿司匹林约0.3g），

置于锥形瓶中，加入中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20mL，振摇,使阿司匹

林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠标准滴定溶液（0.1mol/L）至溶液

显粉红色。于上述溶液中，再精密加氢氧化钠标准滴定溶液（0.1mol/L）40mL，

置于水浴上加热15min并不断振摇，迅速放冷到室温，用硫酸标准滴定溶液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL的氢氧化钠标

准滴定溶液（0.1mol/L）相当于18.02mg的阿司匹林。反应为：

COONa

OCOCH3+NaOH+CH3COONa

2NaOH+H2SO4Na

SO4+2H2O

2

式中V0—空白试验试验消耗硫酸滴定溶液的体积，mL；

V—回滴消耗硫酸滴定溶液的体积，mL；

T—硫酸滴定溶液的滴定度，mg／mL；

W—待测药物的称样量，g。

三、总结

通过上述分析发现，阿司匹林原料药与其片剂的检验方法是不同的，比如，鉴别实验中，需要将制剂时引入的辅料等干扰因素除去，然后再按照原料药的检查方法进行检查。含量测定时，两者采用了不同的方法，原料采用的是直接酸碱滴定法，片剂采用的是二步酸碱滴定法，原因是在片剂制剂中引入的辅料不允许采用直接酸碱滴定法，会干扰实验结果。由此可以看出，在进行原料药及其制剂的分析时，原料测定方法要求选择具有较高的准确度的方法，而制剂的测定方法要求侧重于具有较高的专属性。