叶绿体中色素的提取和分离
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
A．色素提取液中色素已经分层 B．阳光的照射使不同色素彼此分开 C．乙醇有使色素溶解并彼此分离的特性 D．各种色素在滤纸上随层析液扩散的速度不同
• 加SiO2、加CaCO3的目的分别是 ： 研磨充分；保护叶绿素。
• 为什么滤液细线越细、越齐越好？
防止色素带之间部分重叠。
• 为什么层析液不能没及滤纸条的滤液细线？
Hale Waihona Puke Baidu
四、实验步骤
色素的提取和分离实验
分离叶绿体色素
❖ 制备滤纸条：将干燥的定性滤纸剪成长与宽略小于试管
长与宽的滤纸条，将其一端剪去两个角，并在距这一端 1cm处用铅笔划线。
❖ 画滤液细线：用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀
画出细线（细而齐）。待滤液干后，重复画线3-4次。
【注】
画滤液线时尽量画直、画细、画浓 每次画完，要等滤液干时再重复画，以防滤液扩散开使滤液线过
实验组号
叶绿素溶液（mL） 调 pH 至
处理时间（min） 溶液颜色
①
3.0
Y
10
绿色
②
3.0
7.0
10
绿色
③
3.0
6.0
10
黄绿色
④
3.0
5.0
10
黄褐色
注：叶绿素被破坏后变成黄褐色。
根据所学知识和实验结果，请回答：
（1）提取食用叶绿素的 X 应该为
，原因是
。
（2）表中 Y 应该为 ，原因是
。
（3）若用作食品色素，天然叶绿素色素不．适．用．于． 食品，否则 。 （4）小李想了解叶绿素产品中是否含有其他色素，请你提供监测方法并写出主要步骤。
❖ 研磨：向研钵中放入少量石英砂和碳酸钙（量约为药匙的1/3），
加入6ml无水乙醇，充分、迅速地研磨至匀浆状态。
❖ 过滤：在小烧杯上放上4层纱布，将研磨液倒入小烧杯，过
❖ 滤制备得到滤液。
【注】
加石英砂是为了使研磨充分 加碳酸钙是为了防止叶绿体色素被破坏 加入CaCO3和石英砂的量均很少，无水乙醇的量不应太少
29.（2011 广东理综）（16 分） 中国的饮食讲究“色香味”，颜色会影响消费。小李同学拟研发“绿色”食用
色素，他以生长很快的入侵植物水葫芦为材料进行如下实验。
I.提取叶绿素
X 绿色叶片 碳酸钙 提取液
过滤液
浓缩液
叶绿素粗产品
II.探究 pH 对叶绿素稳定性的影响 取一些叶绿素粗产品，配成一定浓度的溶液，于室温（约 25℃）下进行实验，方法 和结果如下表。
【实 验】
叶绿体中色素的提取和分离
主讲人： 段 娜 肖祖文 助 理：谷维佳 黄素芬 孙捷吉 马牧原 周枭楠
一、实验目的
色素的提取和分离实验
❖ 进行绿叶中色素的提取和分离 ❖ 探究绿叶中含有色素种类数目和颜色 ❖ 培养合作和严谨的科学精神
二、实验原理
色素的提取和分离实验
： ❖提取 叶绿体色素易溶于无水乙醇（酒精、汽油、苯、石
防止色素溶解在层析液中，影响实验结果。
聚焦高考
（2012上海理综17）图6表示叶绿体色素提取分离实验中 纸层析的结果，据图判断用作实验材料的叶片颜色
为（ B）
A．红色 B．黄色
C．绿色 D．紫色
聚焦高考
（2011江苏生物4）某研究组获得了水稻的叶黄素缺失突 变体。将其叶片进行了红光照射光吸收测定和色素 层析条带分B析（从上至下），与正常叶片相比，实 验结果是（ ） A.光吸收差异显著，色素带缺第2条 B.光吸收差异不显著，色素带缺第2条 C.光吸收差异显著，色素带缺第3条 D.光吸收差异不显著，色素带缺第3条
宽，影响结果
四、实验步骤
色素的提取和分离实验
分离叶绿体色素
❖固定装置：将3mL层析液倒入试管中，将画好线的滤
纸条插入层析液中，用棉塞塞紧试管口。
❖观察现象：10min后，将滤纸条取出，风干。观察色素
带及其颜色，作好记录。
【注】
放滤液条时，要避免滤液细线浸没到层析液。不要让滤纸条贴在层析管 壁上。
三、实验材料
色素的提取和分离实验
【实验材料】：新鲜菠菜绿叶
【实验药品】：层析液（汽油：石油醚：丙酮：苯=20:2：
2:1），无水乙 醇，石英砂，碳酸钙
【实验用具】：研钵，药匙，纱布，小烧杯，干燥滤纸，
剪刀，试管，毛细吸管，棉塞
四、实验步骤
色素的提取和分离实验
提取叶绿体色素
❖ 取材：取新鲜菠菜叶5g，撕去叶脉，尽量剪碎，放入研钵。
你做对了吗？
• （1）二氧化硅（SiO2） 使研磨更加充分 • （2）8.0 以1.0作为pH梯度进行实验 • （3） pH小于6.0 叶绿素会由于酸性pH值而被破
坏 • （4）纸层析法
主要步骤：
a. 制备滤纸条 b. 画色素液细线 c. 层析分离色素 d. 观察色素带
九、课后思考
“叶绿素的提取与分离”实验可在哪些方 面进行改进？
5、实验时保持通风，安全操作
6、实验注重团队合作，组员们共同完成实验。
六、实验结果
叶绿素的提取与分离
七、实验总结
最宽（最多）：叶绿素a 最窄（最少）：胡萝卜素 相邻距离最近：叶绿素a和叶绿素b
色素在滤纸上自上而下分布依次为：胡 萝卜素叶黄素叶绿素a 叶绿素b
八、课堂反馈
• 叶绿体中的色素能够在滤纸上彼此分离的原因是（D）
油醚等）等有机溶剂中，可以用无水乙醇提取绿叶中的叶绿体 色素。
❖分离：纸层析法
不同的叶绿体色素随层析液在滤纸上扩散速度不同。不 同的色素会在扩散过程中分离开来，形成条带。
（色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液 在滤纸条上的扩散速度快，溶解度低的色素分子随层析液在滤 纸条上的扩散速度慢，因而可用层析液将不同的色素分离。）
层析液中一些成分易挥发，要避免开放在空气中。
五、注意事项
色素的提取和分离实验
1、选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的菠菜叶片。
2、研磨要快，收集的滤液要用棉塞塞住，层析时要加盖， 尽量减少有机溶剂的挥发。（无水乙醇和层析液都易 挥发、易燃且有一定毒性）
3、每次点样前要把烧杯中的滤液摇匀。
4、尽量避免手上的杂质沾到滤纸条上。
• 加SiO2、加CaCO3的目的分别是 ： 研磨充分；保护叶绿素。
• 为什么滤液细线越细、越齐越好？
防止色素带之间部分重叠。
• 为什么层析液不能没及滤纸条的滤液细线？
Hale Waihona Puke Baidu
四、实验步骤
色素的提取和分离实验
分离叶绿体色素
❖ 制备滤纸条：将干燥的定性滤纸剪成长与宽略小于试管
长与宽的滤纸条，将其一端剪去两个角，并在距这一端 1cm处用铅笔划线。
❖ 画滤液细线：用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀
画出细线（细而齐）。待滤液干后，重复画线3-4次。
【注】
画滤液线时尽量画直、画细、画浓 每次画完，要等滤液干时再重复画，以防滤液扩散开使滤液线过
实验组号
叶绿素溶液（mL） 调 pH 至
处理时间（min） 溶液颜色
①
3.0
Y
10
绿色
②
3.0
7.0
10
绿色
③
3.0
6.0
10
黄绿色
④
3.0
5.0
10
黄褐色
注：叶绿素被破坏后变成黄褐色。
根据所学知识和实验结果，请回答：
（1）提取食用叶绿素的 X 应该为
，原因是
。
（2）表中 Y 应该为 ，原因是
。
（3）若用作食品色素，天然叶绿素色素不．适．用．于． 食品，否则 。 （4）小李想了解叶绿素产品中是否含有其他色素，请你提供监测方法并写出主要步骤。
❖ 研磨：向研钵中放入少量石英砂和碳酸钙（量约为药匙的1/3），
加入6ml无水乙醇，充分、迅速地研磨至匀浆状态。
❖ 过滤：在小烧杯上放上4层纱布，将研磨液倒入小烧杯，过
❖ 滤制备得到滤液。
【注】
加石英砂是为了使研磨充分 加碳酸钙是为了防止叶绿体色素被破坏 加入CaCO3和石英砂的量均很少，无水乙醇的量不应太少
29.（2011 广东理综）（16 分） 中国的饮食讲究“色香味”，颜色会影响消费。小李同学拟研发“绿色”食用
色素，他以生长很快的入侵植物水葫芦为材料进行如下实验。
I.提取叶绿素
X 绿色叶片 碳酸钙 提取液
过滤液
浓缩液
叶绿素粗产品
II.探究 pH 对叶绿素稳定性的影响 取一些叶绿素粗产品，配成一定浓度的溶液，于室温（约 25℃）下进行实验，方法 和结果如下表。
【实 验】
叶绿体中色素的提取和分离
主讲人： 段 娜 肖祖文 助 理：谷维佳 黄素芬 孙捷吉 马牧原 周枭楠
一、实验目的
色素的提取和分离实验
❖ 进行绿叶中色素的提取和分离 ❖ 探究绿叶中含有色素种类数目和颜色 ❖ 培养合作和严谨的科学精神
二、实验原理
色素的提取和分离实验
： ❖提取 叶绿体色素易溶于无水乙醇（酒精、汽油、苯、石
防止色素溶解在层析液中，影响实验结果。
聚焦高考
（2012上海理综17）图6表示叶绿体色素提取分离实验中 纸层析的结果，据图判断用作实验材料的叶片颜色
为（ B）
A．红色 B．黄色
C．绿色 D．紫色
聚焦高考
（2011江苏生物4）某研究组获得了水稻的叶黄素缺失突 变体。将其叶片进行了红光照射光吸收测定和色素 层析条带分B析（从上至下），与正常叶片相比，实 验结果是（ ） A.光吸收差异显著，色素带缺第2条 B.光吸收差异不显著，色素带缺第2条 C.光吸收差异显著，色素带缺第3条 D.光吸收差异不显著，色素带缺第3条
宽，影响结果
四、实验步骤
色素的提取和分离实验
分离叶绿体色素
❖固定装置：将3mL层析液倒入试管中，将画好线的滤
纸条插入层析液中，用棉塞塞紧试管口。
❖观察现象：10min后，将滤纸条取出，风干。观察色素
带及其颜色，作好记录。
【注】
放滤液条时，要避免滤液细线浸没到层析液。不要让滤纸条贴在层析管 壁上。
三、实验材料
色素的提取和分离实验
【实验材料】：新鲜菠菜绿叶
【实验药品】：层析液（汽油：石油醚：丙酮：苯=20:2：
2:1），无水乙 醇，石英砂，碳酸钙
【实验用具】：研钵，药匙，纱布，小烧杯，干燥滤纸，
剪刀，试管，毛细吸管，棉塞
四、实验步骤
色素的提取和分离实验
提取叶绿体色素
❖ 取材：取新鲜菠菜叶5g，撕去叶脉，尽量剪碎，放入研钵。
你做对了吗？
• （1）二氧化硅（SiO2） 使研磨更加充分 • （2）8.0 以1.0作为pH梯度进行实验 • （3） pH小于6.0 叶绿素会由于酸性pH值而被破
坏 • （4）纸层析法
主要步骤：
a. 制备滤纸条 b. 画色素液细线 c. 层析分离色素 d. 观察色素带
九、课后思考
“叶绿素的提取与分离”实验可在哪些方 面进行改进？
5、实验时保持通风，安全操作
6、实验注重团队合作，组员们共同完成实验。
六、实验结果
叶绿素的提取与分离
七、实验总结
最宽（最多）：叶绿素a 最窄（最少）：胡萝卜素 相邻距离最近：叶绿素a和叶绿素b
色素在滤纸上自上而下分布依次为：胡 萝卜素叶黄素叶绿素a 叶绿素b
八、课堂反馈
• 叶绿体中的色素能够在滤纸上彼此分离的原因是（D）
油醚等）等有机溶剂中，可以用无水乙醇提取绿叶中的叶绿体 色素。
❖分离：纸层析法
不同的叶绿体色素随层析液在滤纸上扩散速度不同。不 同的色素会在扩散过程中分离开来，形成条带。
（色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液 在滤纸条上的扩散速度快，溶解度低的色素分子随层析液在滤 纸条上的扩散速度慢，因而可用层析液将不同的色素分离。）
层析液中一些成分易挥发，要避免开放在空气中。
五、注意事项
色素的提取和分离实验
1、选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的菠菜叶片。
2、研磨要快，收集的滤液要用棉塞塞住，层析时要加盖， 尽量减少有机溶剂的挥发。（无水乙醇和层析液都易 挥发、易燃且有一定毒性）
3、每次点样前要把烧杯中的滤液摇匀。
4、尽量避免手上的杂质沾到滤纸条上。