胶体金免疫层析技术

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◊ 无需设备 一根检测条就能完成检测
◊ 准确、灵敏 灵敏度可以达到10-9数量级
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胶体金免疫层析技术的发展
◊ 应用范围不断扩大
疾病诊断,食品安全,药物检测,DNA检测
◊ 特HCG异检性测 ,灵灵敏敏度度不断特提异性高
早期HCG检测条 2000mIU
与LH等交叉
现在HCG检测条
孔径(μM) 0.2 0.45 0.8
流速(S/4cm) 180 135 75
◊ 蛋白吸附能力: ◊ 样本过滤:
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硝酸纤维素膜的应用
◊ 滤膜 ◊ 分子杂交 ◊ 核酸、蛋白转印 ◊ 免疫层析
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免疫学的定义
是机体识别“自身”与“非己”抗原,对 自身抗原形成天然免疫耐受,对“非己” 抗原产生排斥作用的一种生理功能。正常 情况下,这种生理功能对机体有益,可产 生抗感染、抗肿瘤等维持机体生理平衡和 稳定的免疫保护作用
近现代: 19世纪50年代由Michael Faraday第一次人工合成纯胶体
金 1971年胶体金被 第一次用于电镜免疫胶体金染色法(IGS)
观察沙门氏菌 1974年Romano将胶体金标记在第二抗体(马抗人IgG)上, 建立了间接免疫胶体金染色法
1978年geoghega发现了胶体金标记物在光镜水平的应用
抗体能够特异性的结合 抗原的活性位点。
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基因工程—人造蛋白的诞生及意义
基因工程指按人们意愿设计,通过改造基因 或基因组而改变生物的遗传特性,从而获 得新的品种货或产品。
意义:可以稳定的获得人类所要的蛋白。
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胶体金免疫层析技术的诞生和发展
20mIU 特异性检测HCG
样本 尿液 尿液,血清,全血
◊ 半定量,定量检测:
银染色胶体金免疫层析技术; 免疫荧光技术;
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The END
谢谢
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什么叫胶体金免疫层析技术
胶体金免疫层析技术就是以胶体金 为显色媒介,利用免疫学中抗原抗 体能够特异性结合原理,在层析过 程中完成这一反应,从而达到检测 的目的。
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胶体金免疫层析中的三大技术
+ 胶体金技术: 为诊断提供肉眼可见的显色媒介
+ 膜技术 原料的固化载体,层析的动力来源
+ 免疫学技术 特异性的检测样本中需要检测物质
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胶体金技术
什么叫胶体金: 胶体金是一群以
胶体状态,粒径在 微米级以下的悬浮 于水溶液中的金的 颗粒。
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胶体金发展历史
古代: 用于提炼长生不老药物; 玻璃染色。
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膜技术
什么叫硝酸纤维素膜? 以硝酸纤维素为基质,经过匀浆,滚筒铺膜,
烘制成型从而制的一定孔径的硝酸纤维素 膜。
匀浆配方决定硝酸纤维素膜的性质。
烘制速度决定硝酸纤维素Hale Waihona Puke Baidu的孔径。
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硝酸纤维素膜的结构和性质
硝酸纤维素膜的性质:
◊ 微孔性:层析动力的来源 ◊ 多孔性:样本流动性
◊ 20世纪90年代初,第一个免疫层析产品诞 生——用于人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测 定。
◊ 在其后的20年中,免疫层析产品得到了快 速的发展:
项目 早孕检测 毒品检测 疾病检测
所占百分比 90%以上 80-90% 30-40%
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胶体金免疫层析技术的特点
◊ 快速,定性 10分钟以内就可得到检测结果。
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免疫学的发展
◊ 经验免疫学时期 ◊经典免疫学时期 ◊近代免疫学时期 ◊现代免疫学时期
在实践中创造性地发明了人痘苗 由人体现象的观察进入了科学实验时期
出现了全新的免疫学理论 从分子水平对免疫系统进行研究
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抗原抗体的结合
抗原抗体——钥匙和锁的 关系
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胶体金的结构:
+ 胶体金结构:
胶体金颗粒由一个基础金核 (原子金Au)及包围在外的双 离子层构成,紧连在金核表面 的是内层负离子(AuC12-), 外层离子层H+则分散在胶体间 溶液中,以维持胶体金游离于 溶胶间的悬液状态。
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胶体金的性质
∆染色—不同粒径,不同颜色
粒径 2~5nm 10~20nm 30~80nm
颜色 橙色的 酒红色 紫红色
∆ 胶体的特性—充分的溶解性,良好的流动性
∆吸附能力—在不改变蛋白性质的情况下,稳 定迅速的吸附蛋白
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胶体金的应用
+ 胶体金在电镜水平的应用 + 胶体金在光镜水平的应用 + 胶体金在流式细胞仪中的应用 + 免疫印迹技术
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