霍乱弧菌实验室检测

2018/11/23
* 形态与染色
* 弧状或逗点状 * 革兰染色阴性 * 有一根单鞭毛，细菌运动非常活泼，呈鱼群穿梭样或流星状
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* 霍乱弧菌动力视频链接
http://v.youku.com/v_show/id_XNTg3MTczNTY4.html
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样本采集、送检和保存 标本的检验流程
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* 粪便：标本的采集以病人粪便为主，水样便采取1～3mL，
亦可用棉拭或采便管由肛门插入直肠内3～5cm处采取。急 性期病人取水样便标本在增菌培养的同时可取其粘液絮片或 用棉拭子直接接种于碱性琼脂、TCBS琼脂培养基。不能立即 检查的粪便标本，要放入碱性蛋白胨水中。
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霍乱弧菌检验流程图
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*谢谢！！
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* 抗原结构
霍乱弧菌有耐热的菌体（O）抗原和不耐热的鞭毛 （H）抗原。H抗原为霍乱弧菌属所共有；O抗原有群特异性 和型特异性两种抗原，是霍乱弧菌分群和分型的基础。
* WHO腹泻控制中心将霍乱弧菌分为三群。
一、01群霍乱弧菌：包括古典生物型霍乱弧菌（vibrio cholerde） 和埃尔托生物型（vibrio cholerde EL-Tor biotype）。01群的特 异抗原有A、B、C三种，其中A抗原为01群所共有， A抗原 与其他B与C抗原结合则可分为三型，即：原型——AC（稻叶， Inaba）、异型——AB（小川，Ogawa）和中间型——ABC（彦岛， Hikojima）。
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* 6.增菌培养6-8小时后，需要取胨水生长物再次观察动力，进行
6-8小时动力报告。并转种到庆大霉素平板并放入35℃孵箱中培 养。在进行6-8小时动力报告时，需要先取消之前的审核，在原 报告单上进行审核（1505970005）。
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二、非01群霍乱弧菌：本群弧菌鞭毛抗原与01群相同，而菌体 （0）抗原则不同，不被01群霍乱弧菌多价血清所凝集，依O抗 原之异，本群可分为137个血清型。以往认为本群仅引起散发的 胃肠炎性腹泻，一般此类弧菌感染不作霍乱处理，但1992年在 印度及孟加拉等地发生霍乱暴发流行，后证实流行菌不被01群 和137个非01群霍乱弧菌诊断血清所凝集。乃定为0139霍乱弧 菌，并认定为真正的霍乱弧菌。 三、不典型01群霍乱弧菌：可被多价01群血清所凝集，但该群菌 不产生肠毒素，因此无致病性
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* 血清制动试验包括4瓶血清。第1瓶为O1群多价，第2、3瓶为小
川、稻叶型单价。第4瓶为O139群抗血清。当观察到动力阳性， 首先进行O1群多价的制动试验。如为阴性，接着做O139群的制 动试验。两者均阴性，可初步排除霍乱弧菌病感染。如O1多价 制动试验阳性，则进一步进行第2、3瓶的制动试验，即进行小 川、稻叶型单价血清的制动试验
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* 霍乱是由01群和0139群霍乱弧菌（V．cholerae）引起的急性肠
道传染病，发病急、传播速度快、波及范围广、危害严重的甲 类传染病。
* 是国内交通检疫传染病之一。 * 也是当今三种国际检疫传染病中最严重的一种。
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*霍乱的病原学分类 *霍乱的病原学特征
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注意：门诊在上午11：00之前收到的大便弧培标本，需要将转种 好的胨水和患者化验单一起转运至微生物室，后续步骤由微生 物室来完成：门诊在上午11：00以后收到的标本，需将转种好 的胨水和患者化验单一起放置门诊35°C的培养箱中培养，门诊 拖班人员需跟当晚住院部夜班人员交班，夜班人员需在转种胨 水6-8h后看动力和转种庆大平板，记录并审核结果，第二天由师 傅将平板和化验单转运至微生物室，后续步骤由微生物室来完 成。
7.庆大平板培养18-24h后挑取可疑菌落进行动力观察，如动力 阴性，可进行最终阴性报告，如下图。
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* 注意： *1.动力试验阴性，无需进行血清制动试验。 *2.任何一次动力阳性，都需进行血清制动Biblioteka Baidu验并 在LIS上记录和审核试验结果。 *3.当动力和血清制动试验同为阳性时，为疑似霍 乱弧菌感染，要立即通知开单科室和医务处，对 病人采取相应的隔离治疗等必要措施。
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* 接收到大便动力弧菌培养标本，请先建单。方法如下
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* 5.取粪便标本在高倍镜暗视野下看动力，看完动力后，在“初步
动力”栏录入结果（阴性或阳性），并审核打印报告。同时粪 便标本转种到碱性胨水中并放入35℃孵箱中培养,在化验单上记 录转种时间。
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检验科
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* 1883年德国科学家Koch发现霍乱弧菌
* 1905年埃及埃儿托检疫站首次分离到ElTor弧菌，与霍乱弧菌甚
为相似，但经过多年的观察并不致病或仅引起轻度腹泻，直到 1937-1958年发生4次爆发后才逐渐认识到ElTor弧菌致病性
* 1992年10月印度马德拉斯发现了新菌型O139霍乱弧菌